楊 寧，郭中帥，王正麗

( 青島農(nóng)業(yè)大學 海洋科學與工程學院，山東 青島 266109 )

飼料中添加滸苔對仿刺參幼參生長、消化酶活性和免疫力的影響

楊 寧，郭中帥，王正麗

( 青島農(nóng)業(yè)大學 海洋科學與工程學院，山東 青島 266109 )

在水溫17～18 ℃和鹽度30條件下，將初始體質(zhì)量為(4.09±0.26) g的仿刺參飼養(yǎng)在15個循環(huán)水玻璃缸(容積100 L)中，投喂在基礎飼料中添加0%、3%、6%、9%和12%滸苔的飼料,于投喂后第7、14、28 d和42 d分別檢測仿刺參的生長指標、消化酶(蛋白酶、淀粉酶、纖維素酶和褐藻酸酶)和體腔液免疫酶(溶菌酶、酸性磷酸酶、堿性磷酸酶和超氧化物歧化酶)的活性。試驗結(jié)果表明，投喂試驗飼料后第14、28 d和42 d：(1)飼料中添加6%和9%滸苔組仿刺參的特定生長率顯著增加(P<0.05)，在不同取樣時間其他添加組仿刺參的的特定生長率與對照組差異不顯著(P>0.05);(2)飼料中滸苔添加量為6%和9%試驗組仿刺參的4種消化酶比活力顯著高于對照組(P<0.05)，其中6%組仿刺參的消化酶比活力最高;(3)飼料中滸苔添加量為6%時，仿刺參溶菌酶活力顯著高于對照組及其他試驗組(P<0.05)；飼料中滸苔添加量為6%和9%時，仿刺參堿性磷酸酶活力和超氧化物歧化酶活力顯著高于對照組及其他試驗組(P<0.05)；添加滸苔可以顯著提高酸性磷酸酶活力，至第42 d，試驗組酸性磷酸酶活力高于對照組(P<0.05)，且滸苔添加量為6%時活力最高。在本試驗條件下，飼料中添加滸苔可以提高仿刺參的特定生長率、消化酶活力及免疫力，滸苔的最適添加量為6%～9%。

仿刺參；飼料；滸苔；生長；消化酶；免疫力

仿刺參(Apostichopusjaponicus)具有較高的營養(yǎng)和藥用價值，目前已成為我國北方地區(qū)重要的海水養(yǎng)殖對象[1-2]。隨著仿刺參養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展，人工配合飼料的開發(fā)越來越引起人們的重視。大型海藻是生產(chǎn)仿刺參人工配合飼料的主要原料之一，因此，隨著仿刺參養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展，馬尾藻(Sargassum)、鼠尾藻(S.thunbergii)等大型海藻的需求量不斷增加，其自然資源逐漸供不應求。因此尋求合適的替代原料成為仿刺參飼料研究中亟待解決的關鍵問題之一[3-4]。

滸苔(Enteromorphaprolifera)含有豐富的蛋白質(zhì)、脂肪酸、氨基酸及礦物質(zhì)等多種營養(yǎng)物質(zhì)，是一種重要的經(jīng)濟海藻，目前已作為新的飼料資源受到廣泛關注[5-7]。有效開發(fā)利用滸苔資源，將其轉(zhuǎn)化為有開發(fā)價值的經(jīng)濟藻類具有重要意義。

滸苔作仿刺參飼料的可行性已有研究[8-12]，然而未給出適宜的添加量。本試驗以青島地區(qū)加工后的滸苔為原料，部分替代仿刺參飼料中的鼠尾藻，研究其對仿刺參生長、消化酶活力及免疫力的影響，確定滸苔在仿刺參飼料中的適宜添加量，為滸苔在仿刺參飼料中的合理開發(fā)和利用提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料

試驗用滸苔采自青島附近海域，洗凈瀝干烘干、粉碎成粉狀，其粗蛋白含量約11.2%，粗纖維含量約6.7%，粗脂肪含量約1.5%,鈣1.55%，總氨基酸含量9.58%，必需氨基酸種類齊全，占總氨基酸的43%，呈味氨基酸占總量的56%以上[13]。

試驗用仿刺參來自日照某養(yǎng)殖場，體質(zhì)量為(4.09±0.26) g，在室內(nèi)暫養(yǎng)7 d后，隨機分配到室內(nèi)海水循環(huán)系統(tǒng)中的15個玻璃缸(容積100 L)中。

試驗用基礎飼料以俄羅斯白魚粉為主要蛋白源，魚油、豆油和大豆卵磷脂為主要脂肪源，總蛋白含量約為19.6%，脂肪含量約為4.7%。試驗設計5種等氮等能的飼料，滸苔添加量分別為0%、3%、6%、9%和12%，其組成和營養(yǎng)成分見表1。原料經(jīng)粉碎后過150目篩，按比例逐級混勻，最后按1∶5與海泥混合。

表1 試驗飼料組成 %

1.2 試驗設計與飼養(yǎng)管理

試驗共設置5個處理，每個處理設3個重復，每缸放30個仿刺參。試驗用海水符合中華人民共和國漁業(yè)水質(zhì)標準(GB 11607—89)，水溫17～18 ℃，pH 8.2±0.2，鹽度30。養(yǎng)殖試驗持續(xù)50 d，初始投飼量為仿刺參體質(zhì)量的5%，根據(jù)仿刺參攝食情況飽食投喂，每日早晚各投喂1次，每日上午定時吸污，每3 d更換一次海水，換水量約50%。

1.3 樣品采集與測定

試驗開始后分別在第7、14、28 d和42 d測定各組仿刺參的生長，取樣測定消化酶活力及免疫酶活力。取樣前仿刺參饑餓24 h，每個試驗組隨機選取5頭仿刺參進行體質(zhì)量測定及粗酶液制備。

1.3.1 體質(zhì)量測定

用撈網(wǎng)瀝凈仿刺參水分，在干濾紙上放置30 s后快速稱量。為減少操作誤差，測定過程中由同一固定人員完成。計算特定生長率：

特定生長率/%·d-1=(lnmt-lnm0)/t×100%

式中，mt為仿刺參終末平均體質(zhì)量(g)，m0為仿刺參初始平均體質(zhì)量(g)，t為試驗時間(d)。

1.3.2 免疫酶

仿刺參取出后，于腹部切口，用1 mL無菌注射器收集體腔液，3000 r/min離心5 min(4 ℃)，取上清液于4 ℃保存?zhèn)溆茫?4 h內(nèi)測定完畢。

溶菌酶、酸性磷酸酶、堿性磷酸酶和超氧化物歧化酶的活性均使用南京建成生物科技有限公司生產(chǎn)的試劑盒進行測定。

溶菌酶活性用溶菌酶含量來表示(μg/mL)；酸性磷酸酶活性單位定義為：100 mL體腔液在37 ℃每克蛋白30 min 產(chǎn)生1 mg酚為1 個酶活性單位(U)；堿性磷酸酶活性單位定義為：100 mL體腔液在37 ℃與基質(zhì)作用15 min產(chǎn)生1 mg酚為1 個活力單位(U)；超氧化物歧化酶活性單位定義為：每毫升反應液中超氧化物歧化酶抑制率達到50%時所對應的超氧化物歧化酶量為一個超氧化物歧化酶活力單位(U)。

1.3.3 消化酶

剖開仿刺參腹部，取出消化道，剔除腸系膜上的脂肪組織，用預冷的磷酸鹽緩沖液(pH 7.5)沖洗干凈，-20 ℃保存?zhèn)溆?。?0條腸，按腸質(zhì)量的10倍加入預冷的磷酸鹽緩沖液，0 ℃勻漿。將勻漿液于4 ℃，10 000 r/min，離心30 min，所得上清液即為粗酶液, 4 ℃保存?zhèn)溆茫?4 h內(nèi)測定完畢。

蛋白酶活力采用酪蛋白為底物的福林—酚法測定，40 ℃，每分鐘水解酪蛋白產(chǎn)生1 μg酪氨酸定義為一個酶活力單位(U)。

淀粉酶活力采用以可溶性淀粉為底物的3，5-二硝基水楊酸顯色法測定，40 ℃，每分鐘催化淀粉產(chǎn)生1 mg麥芽糖定義為一個酶活力單位(U)。

纖維素酶活力采用以羧甲基纖維素鈉為底物的3,5-二硝基水楊酸顯色法測定，40 ℃，每分鐘催化纖維素產(chǎn)生1 mg葡萄糖定義為一個酶活力單位(U)。

褐藻酸酶活力采用以褐藻酸鈉為底物的3，5-二硝基水楊酸顯色法測定，40 ℃，每分鐘催化褐藻酸酶產(chǎn)生1 mg葡萄糖定義為一個酶活力單位(U)。

1.4 數(shù)據(jù)分析

所有數(shù)據(jù)使用SPSS 18.0進行單因素方差分析，并進行Duncan多重比較，P<0.05為差異顯著。

2 結(jié) 果

2.1 滸苔添加量對仿刺參生長的影響

經(jīng)過6周的養(yǎng)殖試驗，各飼料組仿刺參在不同時間的特定生長率見圖1。結(jié)果顯示，除投喂試驗飼料7 d外，飼料中添加滸苔均顯著影響仿刺參的特定生長率(P<0.05)。第14 d時，滸苔添加量為6%組仿刺參的特定生長率顯著高于其他各組(P<0.05)。隨著養(yǎng)殖時間的增加，第28 d和42 d時，滸苔添加量為6%和9%組仿刺參的特定生長率均顯著高于其他各組(P<0.05)，其他組間差異不顯著(P>0.05)，其中滸苔添加量為6%組的特定生長率顯著高于9%組(P<0.05)。

圖1 滸苔添加量對仿刺參特定生長率的影響

2.2 滸苔添加量對仿刺參消化道消化酶活力的影響

2.2.1 滸苔添加量對仿刺參淀粉酶比活力的影響

隨著養(yǎng)殖時間的增加(第14、28、42 d)，飼料中滸苔添加量對淀粉酶比活力影響顯著(P<0.05)(圖2)，其中6%添加組淀粉酶比活力最高，9%添加組次之，在第28 d和42 d時均顯著高于對照組(P<0.05)； 其他添加組與對照組間差異不顯著(P>0.05)。

圖2 滸苔添加量對仿刺參消化道淀粉酶比活力的影響

2.2.2 滸苔添加量對仿刺參蛋白酶比活力的影響

隨著養(yǎng)殖時間的增加(第14、28、42 d)，飼料中滸苔添加量顯著影響仿刺參消化道蛋白酶比活力(P<0.05)(圖3)；6%和9%添加組的仿刺參蛋白酶比活力顯著高于其他各組(P<0.05)，添加量為6%組仿刺參的蛋白酶比活力最高。

圖3 滸苔添加量對仿刺參蛋白酶比活力的影響

2.2.3 滸苔添加量對仿刺參纖維素酶比活力的影響

第14 d，添加6%滸苔組仿刺參消化道纖維素酶比活力顯著高于其他添加組(P<0.05)(圖4)；第28 d和42 d，滸苔6%和9%添加組仿刺參的纖維素酶比活力顯著高于其他各組(P<0.05)，滸苔添加量為6%組仿刺參的蛋白酶比活力最高。

圖4 滸苔添加量對仿刺參纖維素酶比活力的影響

2.2.4 滸苔添加量對仿刺參褐藻酸酶比活力的影響

第14、28、42 d，飼料中添加6%、9%和12%的滸苔，顯著增加仿刺參褐藻酸酶比活力(P<0.05)，添加量為6%組仿刺參的褐藻酸酶比活力最高(P>0.05)(圖5)。

圖5 滸苔添加量對仿刺參褐藻酸酶比活力的影響

2.3 滸苔添加量對仿刺參免疫酶活力的影響

2.3.1 滸苔添加量對仿刺參溶菌酶活力的影響

在第14、28、42 d，滸苔添加量這6%組仿刺參溶菌酶活力顯著高于對照組及其他組(P<0.05)(圖6)，第14 d活力最強；添加滸苔9%組在第14 d顯著高于對照組(P<0.05)，至第42 d與其他各組及對照組差異不顯著(P>0.05)。

圖6 滸苔添加量對仿刺參體腔液溶菌酶活力的影響

2.3.2 滸苔添加量對仿刺參酸性磷酸酶活力的影響

在第14 d，飼料中添加6%和9%滸苔組仿刺參酸性磷酸酶活力顯著增加(P<0.05)(圖7)；在第28 d和42 d，對照組的酸性磷酸酶活力顯著低于添加6%、9%和12%滸苔組(P<0.05)。

圖7 滸苔添加量對仿刺參體腔液酸性磷酸酶活力的影響

2.3.3 滸苔添加量對仿刺參堿性磷酸酶活力的影響

在第14、28、42 d，添加6%和9%組仿刺參堿性磷酸酶活力均顯著高于對照組和其他添加組(P<0.05)(圖8)。

圖8 滸苔添加量對仿刺參體腔液堿性磷酸酶活力的影響

2.3.4 滸苔添加量對仿刺參超氧化物歧化酶活力的影響

在第14 d和第28 d時， 飼料中添加6%、9%和12%滸苔組仿刺參體腔液超氧化物歧化酶活力顯著增加(P<0.05, 圖9)，其中添加6%組超氧化物歧化酶活力最高，第42 d時，添加12%滸苔組的超氧化物歧化酶活力與對照組差異不顯著(P<0.05)。

圖9 滸苔添加量對仿刺參體腔液超氧化物歧化酶活力的影響

3 討 論

3.1 滸苔對仿刺參生長的影響

滸苔是高蛋白、高膳食纖維、低脂肪、低能量，富含礦物質(zhì)和維生素的天然理想營養(yǎng)食品原料[17]，作為飼料加工原料，已廣泛受到關注?，F(xiàn)有研究表明，適量添加滸苔能提高蛋雞的產(chǎn)蛋率、產(chǎn)蛋性能，降低蛋黃中膽固醇含量[18-22]；提高肉雞平均日增加質(zhì)量及免疫力等[23-24]；亦有顯著增進豬、兔、奶牛生長的作用[25-27]。滸苔作為飼料原料，可以提高大菱鲆(Scophthalmusmaximus)、大黃魚(Pseudosciaenacrocea)、黃斑藍子魚(Siganusoramin)的特定生長率[28-31]。而現(xiàn)有研究顯示，滸苔含有大量的營養(yǎng)成分，可以替代或部分替代鼠尾藻等作為仿刺參的飼料原料[8-11]。朱建新等[12]用蛋白酶處理滸苔后能夠顯著提高仿刺參的生長率，認為用適當?shù)姆椒庸ず鬂G苔可以作為仿刺參的良好飼料。而本試驗以滸苔部分替代鼠尾藻作仿刺參的餌料，不會降低仿刺參的特定生長率，這與之前的研究結(jié)果一致，因此滸苔可以作為仿刺參的良好飼料源，且滸苔添加量為6%～9%時，可以顯著提高仿刺參的特定生長率。

3.2 滸苔對仿刺參消化道消化酶活力的影響

消化酶活性的高低直接影響動物對營養(yǎng)物質(zhì)的吸收，與水產(chǎn)動物的生長和發(fā)育緊密相關[32-33]。常用消化酶的種類和活力來判斷動物的攝食活力、食物來源以及動物對這種食物的適應性等[34-35]。蛋白酶、淀粉酶、纖維素酶、褐藻酸酶等是仿刺參的主要消化酶[36]。不同發(fā)育階段和季節(jié)仿刺參消化酶活力不同[37-38]，不同食物來源和不同營養(yǎng)物質(zhì)也可影響消化酶的分泌。仿刺參的生長速率越快，其腸道消化酶的活性越高[39]。滸苔中富含多種生物活性物質(zhì)，氨基酸組成合理，具有獨特的芳香氣味，可作為水產(chǎn)動物的誘食劑[17]。本研究測定了仿刺參重要的消化酶——蛋白酶、淀粉酶、纖維素酶和褐藻酸酶，顯示添加6%～9%滸苔量可以顯著提高各消化酶的比活力，其他添加組與對照組相比無顯著差異，這一結(jié)果與特定生長率結(jié)果一致。

3.3 滸苔對仿刺參體腔液免疫酶活力的影響

滸苔無毒無害，含有豐富的蛋白質(zhì)、多糖及其復合物，有關滸苔及其提取物對脊椎動物及無脊椎動物動物免疫力的影響已有研究，結(jié)果顯示，滸苔及其提取物可以增強機體的免疫力和抗氧化功能[40-42]。

非特異性免疫在仿刺參免疫防御中具有重要的作用，而各種免疫酶類是非特異性免疫的重要組成部分。溶菌酶、超氧化物歧化酶、酸性磷酸酶和堿性磷酸酶是近年來評價仿刺參機體免疫力的常用指標[43-44]?，F(xiàn)有研究表明，這些酶類在識別異物、增強吞噬細胞的吞噬能力、消除異物、促進新陳代謝、提高免疫力和抗氧化能力等方面起重要作用[43-45]。本試驗中，添加6%和9%滸苔時，仿刺參各免疫酶活力顯著提高，免疫力增強；而其他滸苔添加組各免疫酶活力與對照組差異不顯著，即對免疫能力無明顯的促進作用，這與唐薇等[46]的研究結(jié)果一致。唐薇等[46]在飼料中添加30%滸苔粉后，仿刺參的免疫能力無顯著提高，成活率與對照組相比并無提高。由此，筆者認為，滸苔的適宜添加量為6%～9%。

[1] 廖玉麟．我國的海參[J]．生物學通報，2001，35(9)：1-3.

[2] 袁秀堂，楊紅生，周毅，等．鹽度對刺參(Apostichopusjaponicus)呼吸和排泄的影響[J]．海洋與湖沼，2006，37(4)：348-354．

[3] 袁成玉．海參飼料研究的現(xiàn)狀與發(fā)展方向[J]．水產(chǎn)科學，2005，24(12)：54-56．

[4] 唐黎，王吉橋，程駿馳，等．海參飼料使用和發(fā)展方向[J]．飼料工業(yè)，2007, 28(22)：22-23．

[5] 徐大倫，黃曉春，楊文鴿，等． 滸苔營養(yǎng)成分分析[J]．浙江海洋學院學報，2003, 22(4)：318-320．

[6] 孫文，張國琛，李秀辰，等．滸苔資源利用的研究進展及應用前景[J]．水產(chǎn)科學，2011，30(9)：588-590．

[7] 羅佳捷，肖淑華，張彬，等． 滸苔的研究進展及其在動物生產(chǎn)中的應用[J]．資源開發(fā)，2014(2)：31-34．

[8] 廖梅杰，郝志凱，尚德榮，等． 滸苔營養(yǎng)成分分析與投喂刺參試驗[J]． 漁業(yè)現(xiàn)代化，2011，38(4)：32-36．

[9] 郭娜，董雙林，劉慧． 幾種飼料原料對刺參幼參生長和體成分的影響[J]．漁業(yè)科學進展，2011，32(1)：122-128．

[10] 劉天紅，吳志宏，王穎，等．滸苔作為仿刺參幼參植物飼料源的可行性研究[J]．水產(chǎn)科學，2013，32(10)：597-600．

[11] 李曉，王穎，吳志宏，等．滸苔對刺參幼參影響的初步研究[J]．中國水產(chǎn)科學，2013，20(5)：1092-1099．

[12] 朱建新，曲克明，李健，等．不同處理方法對滸苔飼喂稚幼刺參效果的影響[J]．漁業(yè)科學進展，2009，30(5)：108-112．

[13] 林英庭，朱風華，徐坤，等． 青島海域滸苔營養(yǎng)成分分析與評價[J]．飼料工業(yè)，2009，30(3)：46-49．

[14] 潘魯青，王克行．中國對蝦幼體消化酶活力的實驗研究[J]．水產(chǎn)學報，1997，21(1)：26-31．

[15] 史峰．生物化學實驗[M]．杭州：浙江大學出版社，2002:11-113．

[16] 趙亞華．生物化學實驗技術教程[M]．廣州：華南理工大學出版社，2000：144-159．

[17] 林文庭．淺談滸苔的開發(fā)與利用[J]．中國食物與營養(yǎng)，2007(9)：23-25．

[18] 王述柏，賈玉輝，王利華，等．滸苔添加水平對蛋雞產(chǎn)蛋性能、蛋品質(zhì)、免疫功能及糞便微生物區(qū)系的影響[J]．動物營養(yǎng)學報，2013，25(6)：1346-1352．

[19] 趙軍，林英庭，孫建鳳，等．飼糧中不同水平滸苔對蛋雞蛋黃品質(zhì)、抗氧化能力和血清生化指標的影響[J]．動物營養(yǎng)學報，2011，23(3)：452-458．

[20] 張威，蘇秀榕，鄧亮亮，等．滸苔和江蘺對仙居雞產(chǎn)蛋性能的影響[J]．畜牧與獸醫(yī)，2009，41(7)：46-48．

[21] 蘇秀榕，張威，李妍妍，等．滸苔和江蘺增強仙居雞抗性的研究[J].家畜生態(tài)學報，2010，31(3)：27-29．

[22] 位孟聰，王衛(wèi)，戰(zhàn)新強，等．青島海域野生滸苔對蛋雞生產(chǎn)性能影響的試驗研究[J]．中國畜牧雜志，2013，49(16)：58-60．

[23] 孫建鳳，趙軍，祁茹，等．日糧中滸苔添加水平對肉雞免疫功能和血清生化指標的影響[J]．動物營養(yǎng)學報，2010，22(3)：682-688．

[24] 王述柏，史雪萍，周傳鳳，等．滸苔添加水平對肉雞生產(chǎn)性能、胴體品質(zhì)及小腸消化酶活性的影響[J]．動物營養(yǎng)學報，2013，25(6)：1332-1337．

[25] 林英庭，宋春陽，薛強，等．滸苔對豬生長性能的影響及養(yǎng)分消化率的測定[J]．飼料研究，2009(3)：47-49．

[26] 孫國強，胡昌軍，李國興，等．滸苔粉對奶牛產(chǎn)奶性能及糞便微生物菌群的影響[J]．畜牧與獸醫(yī)，2010，42(6)：54-56．

[27] 周蔚，徐小明，嵇珍，等．滸苔用作肉兔飼料的研究[J]．江蘇農(nóng)業(yè)科學，2001(6)：68-69．

[28] 周勝強，游翠紅，王樹啟，等．飼料中添加滸苔對黃斑藍子魚生長性能與生理生化指標的影響[J]．中國水產(chǎn)科學，2013，20(6)：1257-1265．

[29] 梁萌青，姚健，常青，等．以綠藻滸苔作為大菱鲆誘食劑的制備方法：中國，200810249651．9[P]2009-06-17．

[30] Asino H, Ai Q H, Mai K S. Evaluation ofEnteromorphaproliferaas a feed component in large yellow croaker (Pseudosciaenacrocea, Richardson, 1846) diets[J]. Aqu Res, 2011,42(4):525-533.

[31] Yousif O M, Osman M F, Anawhi A R, et al. Growth response and carcass composition of rabbitfishSiganuscanaliculatus(Park) fed diet supplemented with dried seaweed,Enteromorphasp[J]. Emir J Agric Sci, 2004(16):18-26.

[32] 聶琴，楊凡，萬龍飛，等．飼料中添加酵母對刺參腸道消化酶活性和超導微生物的影響[J]．中國飼料，2014(17)：42-44．

[33] 倪小英，張永普，賈守菊，等．pH和溫度對小莢蟶淀粉酶和纖維素酶活性的影響[J]．海洋湖沼通報，2009，31(1)：151-154．

[34] Harris R P, Samain J F, Martin-Jézéquel V, et al. Effects of algal diet enzyme activity inCalanushelgolandicus[J]. Mar Biol, 1986(90):353-361.

[35] Hirche H. Spatial distribution of digestive enzyme activities ofCalanusfinmarchicusandC.hyperboreusin Farm/Greenland sea[J]. J Plankton Research, 1989, 11(3):431-443.

[36] 王羽，孫永欣，汪婷婷，等．海參消化酶的研究進展[J]．中國飼料，2008(13):38-41.

[37] 唐黎，王吉橋，許重，等．不同發(fā)育期的幼體和不同規(guī)格刺參消化道中4種消化酶的活性[J]．水產(chǎn)科學，2007，26(5)：275-277．

[38] 王吉橋，唐黎，許重，等．仿刺參消化道的組織學及其4種消化酶活力的周年變化[J]．水產(chǎn)科學，2007，26(9)：481-484．

[39] 張洪彩，朱江艷，陳政強，等．不同規(guī)格刺參消化酶活性差異性研究[J]．泉州師范學院學報，2014，32(2)：27-30．

[40] 王懷禹．海藻在畜禽養(yǎng)殖業(yè)中的應用[J]． 養(yǎng)殖與飼料，2009(4)：23-25．

[41] 徐大倫，黃曉春，歐昌榮，等．滸苔多糖對非特異性免疫功能的體外實驗研究[J]．食品科學，2005,26(10)：233-235．

[42] 徐大倫，黃曉春，歐昌榮，等．滸苔多糖對華貴櫛孔扇貝血淋巴中SOD酶和溶菌酶活性的影響[J]．水產(chǎn)科學，2006，25(2)：72-74．

[43] 孫永欣，王吉橋，汪婷婷，等．海參防御機制的研究進展[J]．水產(chǎn)科學，2007，26(6)：358-361．

[44] 常杰，?；溃瑥埼谋虆⒚庖呦到y(tǒng)及其免疫增強劑評價指標的研究進展[J]．中國飼料，2011(6)：8-12．

[45] Zhang R Q, Chen Q X, Zheng W Z, et al. Inhibition kinetics of green crab (Scyllaserrata) alkaline phosphatase activity by dithiothreitol or 2-mercaptoethanol[J]. Int J Biochem Cell Biol, 2000,32(8):865-872.

[46] 唐薇，王慶吉，張蕾，等．不同藻粉對刺參組織免疫性能和體壁成分的影響[J]．資源開發(fā)與市場，2014，30(8)：905-908．

EffectsofDietaryGreenLaverEnteromorphaproliferaonGrowth,ActivityofDigestiveEnzymesandImmunityinSeaCucumberApostichopusjaponicus

YANG Ning, GUO Zhongshuai, WANG Zhengli

( College of Marine Science and Engineering, Qingdao Agricultural University, Qingdao 266109, China )

A 6-week feeding experiment was conducted to evaluate the effects of dietary green laverEnteromophaproliferaon growth, activities of digestive enzymes and immunity in sea cucumberApostichopusjaponicuswith initial body weight of (4.09±0.26) g. The sea cucumber juveniles were reared in 15 tanks of each 100 L in volume with recycling water and fed the diets containing 0%, 3%, 6%, 9% and 12% of green laver powder at water temperature of 17—18 ℃ and a salinity of 30. The specific growth rate, and activities of digestive enzymes including protease, amylase, cellulase, and alginase and immune enzymes including lysozyme, acid phosphatase, alkaline phosphatase and superoxide dismutase were analyzed 7, 14, 28 and 42 days after the sea cucumber were fed different diets. The results showed that there were significantly increase in specific growth rate in the sea cucumber fed the diets supplemented with 6% and 9% green laver on the days 14, 28 and 42 (P<0.05), without significant differences among other groups compared with control group (P>0.05). Compared with the control group, there were significantly higher activities of the digestive enzymes in the sea cucumber fed the diets containing 6% and 9% of green laver (P<0.05), the maximum in the sea cucumber fed the diets containing 6% of green laver (P<0.05). The sea cucumber fed the diet supplemented with 6% of green laver had significantly higher activities of lysozyme, acid phosphatase and superoxide dismutase than the juveniles in other groups (P<0.05). It is concluded that dietary green laver leads to significant increase in specific growth, activities of digestive enzymes and immunity of sea cucumber, with the optimal supplementation of 6%—9% under the present experimental conditions.

Apostichopusjaponicus; diet;Enteromorphaprolifera; growth; digestive enzyme; immunity

10.16378/j.cnki.1003-1111.2016.05.007

S968.9

A

1003-1111(2016)05-0498-06

2015-05-08；

2016-04-29.

青島市關鍵技術攻關計劃項目(12-6-1-7-hy).

楊寧(1977—)，女，講師；研究方向：水產(chǎn)動物免疫學.E-mail:yangning04@163.com.通訊作者：王正麗(1977—)，女，教授，碩士生導師；研究方向：水產(chǎn)動物營養(yǎng)與飼料.E-mail: zhengliwang2004@163.com.