文超越 李 勇 邢偉剛 李 彪 劉 佳

馬向東5 張宇喆1 李鳳娜1,6*

(1.中國科學院亞熱帶農(nóng)業(yè)生態(tài)研究所，中國科學院亞熱帶農(nóng)業(yè)生態(tài)過程重點實驗室，長沙410125；2.湖南師范大學生命科學學院，動物營養(yǎng)與人類健康實驗室，長沙410006；3.新希望六和股份有限公司，北京100102；4.安琪酵母股份有限公司，宜昌443003；5.青島蔚藍生物股份有限公司，青島266001；6.湖南畜禽安全生產(chǎn)協(xié)同創(chuàng)新中心，長沙410128)

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酵母水解物與復合酶制劑或微生態(tài)制劑組合替代血漿蛋白粉對保育豬生長性能和血清生化指標的影響

文超越1,2李 勇3邢偉剛3李 彪4劉 佳3

馬向東5張宇喆1李鳳娜1,6*

(1.中國科學院亞熱帶農(nóng)業(yè)生態(tài)研究所，中國科學院亞熱帶農(nóng)業(yè)生態(tài)過程重點實驗室，長沙410125；2.湖南師范大學生命科學學院，動物營養(yǎng)與人類健康實驗室，長沙410006；3.新希望六和股份有限公司，北京100102；4.安琪酵母股份有限公司，宜昌443003；5.青島蔚藍生物股份有限公司，青島266001；6.湖南畜禽安全生產(chǎn)協(xié)同創(chuàng)新中心，長沙410128)

本試驗旨在研究酵母水解物與復合酶制劑或微生態(tài)制劑聯(lián)合應用對斷奶仔豬生長性能和血清生化指標的影響。選用體況良好、體重接近的“杜×長×大”三元雜交35日齡保育豬480頭，隨機分成5組，每組8個重復，每個重復12頭豬，公母各占1/2。采用單因子試驗設計，對照組飼喂基礎飼糧，試驗組分別在基礎飼糧中添加2%血漿蛋白粉(組1)、0.5%酵母水解物(組2)、0.5%酵母水解物+0.02%復合酶制劑(組3)和0.5%酵母水解物+0.03%微生態(tài)制劑(組4)。試驗預試期3 d；正試期25 d，分為Ⅰ期(1～14 d)和Ⅱ期(15～25 d)2個階段。結(jié)果表明：1)試驗Ⅰ期，各試驗組保育豬平均日增重(ADG)和平均日采食量(ADFI)均比對照組顯著增加(P<0.05)，組3料重比(F/G)顯著低于對照組(P<0.05)，其余各組數(shù)值介于兩者之間；試驗Ⅱ期，ADG和F/G各組之間差異不顯著(P>0.05)，但與對照組相比，組1保育豬的ADFI顯著提高(P<0.05)，且組1、組2和組4的腹瀉率顯著低于對照組與組3(P<0.05)；試驗全期，與對照組相比，組1保育豬ADG、ADFI均顯著提高(P<0.05)，其余各組數(shù)值介于兩者之間。2)與組2相比，組3保育豬血清中甘油三酯含量顯著降低(P<0.05)，其余血清生化指標各組之間差異不顯著(P>0.05)。由此可知，血漿蛋白粉和酵母水解物能不同程度地改善保育豬的生長性能，酵母水解物具有替代保育豬飼糧中血漿蛋白粉的潛能，但酵母水解物與微生態(tài)制劑或復合酶制劑的聯(lián)合應用并未產(chǎn)生協(xié)同效應。

酵母水解物；復合酶制劑；微生態(tài)制劑；生長性能；血清生化指標；保育豬

血漿蛋白粉因其豐富的營養(yǎng)價值被廣泛用于乳仔豬飼糧中，然而其生物安全性備受質(zhì)疑，尋找血漿蛋白粉的替代品變得愈發(fā)重要。酵母水解物含有豐富的氨基酸、核苷酸、小肽、甘露寡糖[1]，能夠提高斷奶仔豬的生長性能、促進腸道發(fā)育[2]、減少腹瀉的發(fā)生[3]；復合酶制劑可補充內(nèi)源消化酶分泌不足，減少因為消化不良引起的仔豬腹瀉，提高營養(yǎng)物質(zhì)的消化率，從而提高生長性能[4-5]；微生態(tài)制劑因其能調(diào)控腸道微生態(tài)環(huán)境，減少腹瀉的發(fā)生，從而促進仔豬生長[6]。可見，三者均可促進仔豬生長，且發(fā)揮作用的機制不盡相同。加之，酵母水解物與復合酶制劑或微生態(tài)制劑聯(lián)合應用能否替代血漿蛋白粉，且是否具有協(xié)同作用未見報道。因此，本試驗以保育豬為試驗對象，對比不同營養(yǎng)干預的飼喂效果，并對其生長性能和血清生化指標進行初步考察。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

酵母水解物(安琪酵母NA100)，粗蛋白質(zhì)(CP)含量>35%；復合酶制劑(青島蔚藍)，主要含蛋白酶、非淀粉多糖酶、木聚糖酶和β-葡聚糖酶；微生態(tài)制劑(青島蔚藍)主要含枯草芽孢桿菌、屎腸球菌等，有效活菌數(shù)2×1010CFU/g。

1.2 動物與分組

試驗選用體況良好、初始體重為(11.71±0.93) kg的35日齡三元雜交(杜×長×大)保育豬480頭。采用單因子試驗設計，按體重及遺傳背景基本一致的原則隨機分為5個組，每組8個重復，每個重復12頭豬，公母各占1/2。每組試驗豬隨機飼喂其中1種試驗飼糧。試驗預試期3 d；正試期25 d，分為Ⅰ期(1～14 d)和Ⅱ期(15～25 d)2個階段。

1.3 飼糧及飼養(yǎng)管理

參照NRC(2012)推薦的豬營養(yǎng)需要量并結(jié)合豬理想氨基酸模型，應用標準回腸可消化氨基酸體系，設計5個飼糧組成。試驗分組見表1，飼糧組成及營養(yǎng)水平見表2。試驗采用全封閉式保育豬舍，舍內(nèi)溫度恒定為26 ℃，相對濕度為65%～75%，漏縫塑料地板，不銹鋼可調(diào)式料槽，鴨嘴式飲水器。每天清洗代謝籠及地面，豬舍每周噴霧消毒1次。其他按常規(guī)管理程序進行驅(qū)蟲和免疫，每天觀察并記錄豬只的健康狀況。

表1 試驗分組

表2 飼糧組成及其營養(yǎng)水平(風干基礎)

續(xù)表2項目Items組別Groups對照Control1234血漿蛋白粉Plasmaproteinpowder(78%CP)2.00食鹽NaCl0.300.230.300.300.30酵母水解物Yeasthydrolysate0.500.500.50乳清粉(80%乳糖)Driedwhey(80%lactose)3.003.003.003.003.00葡萄糖Glucose2.002.002.002.002.00蔗糖Sucrose2.002.002.002.002.00氧化鋅ZnO0.300.300.300.300.30賴氨酸Lys(98%)0.600.530.590.590.59氯化膽堿Cholinechloride(50%)0.100.100.100.100.10預混料Premix1)2.502.502.502.502.50合計Total100.00100.00100.00100.00100.00營養(yǎng)水平Nutrientlevels2)消化能DE/(MJ/kg)14.6014.6014.6014.6014.60粗蛋白質(zhì)CP18.4218.8218.4918.4118.46標準回腸可消化氨基酸Standardilealdigestibleaminoacids賴氨酸Lys1.231.231.231.231.23蛋氨酸Met0.450.410.450.450.45胱氨酸Cys0.230.270.230.230.23蛋氨酸+半胱氨酸Met+Cys0.680.680.680.680.68蘇氨酸Thr0.730.730.730.730.73色氨酸Try0.200.200.200.200.20纈氨酸Val0.720.760.720.720.72

1)預混料為每千克飼糧提供The premix provides the following per kg of diets:VA 5 400 IU,VB12 mg,VB215 mg,VB1230 μg,VD3110 IU,VE 18 IU,VK 5 mg,氯化膽堿 choline chloride 80 mg,Cu (as copper sulfate pentahydrate) 19.8 mg,Fe (as ferrous sulfate) 400 mg,Mn (as manganese sulfate hydrate) 10.2 mg,Zn (as zinc sulfate heptahydrate) 359 mg,I (as potassium iodide) 0.20 mg,Se (as sodium selenite) 0.56 mg,復合酶制劑(組3) multi-enzyme preparations (group 3) 20 mg,微生態(tài)制劑(組4) probiotics (group 4) 30 mg。

2)計算值 Calculated values。

1.4 測定指標及方法

1.4.1 生長性能的測定

分別于正式試驗的開始、第15和25天08：00空腹稱重，記錄每組每天的給料量、損失料量、剩余料量，計算平均日增重(average daily gain,ADG)、平均日采食量(average daily feed intake, ADFI)和料重比(feed/gain,F/G)。統(tǒng)計仔豬腹瀉頭次數(shù)，并計算腹瀉率。

1.4.2 血清生化指標的測定

在飼喂Ⅱ期的最后1天，從每組隨機選取6頭豬，08：00空腹前腔靜脈采血5 mL，傾斜放置，血清析出后經(jīng)3 000 r/min離心15 min，收集血清并分裝于EP管中，-20 ℃低溫冷藏。使用深圳邁瑞B(yǎng)S-190全自動生化分析儀測定血清生化指標，試劑盒均購自南京建成生物工程研究所。

1.5 統(tǒng)計分析

試驗數(shù)據(jù)采用SPSS 22.0統(tǒng)計軟件中的單因素方差(one-way ANOVA)模塊進行分析，采用Duncan氏法進行多重比較，結(jié)果以平均值和標準誤表示。P<0.05為差異顯著，P>0.05為差異不顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 酵母水解物與復合酶制劑或微生態(tài)制劑聯(lián)合應用對保育豬生長性能和腹瀉率的影響

如表3所示，試驗Ⅰ期，所有試驗組ADG和ADFI均比對照組顯著增加(P<0.05)；與對照組相比，酵母水解物與復合酶制劑聯(lián)合應用(組3)能顯著降低保育豬的F/G(P<0.05)，其余各組數(shù)值介于兩者之間。試驗Ⅱ期，各組ADG與F/G差異不顯著(P>0.05)，但與對照組相比，2%血漿蛋白粉組(組1)能顯著提高保育豬的ADFI(P<0.05)。試驗全期，與對照組相比，2%血漿蛋白粉組ADG和ADFI均顯著提高(P<0.05)，其余各組數(shù)值介于兩者之間；與對照組相比，各組F/G差異不顯著(P>0.05)。

表3 酵母水解物與復合酶制劑或微生態(tài)制劑聯(lián)合應用對保育豬生長性能的影響

同行數(shù)據(jù)肩標無字母或相同字母表示差異不顯著(P>0.05)，不同小寫字母表示差異顯著(P< 0.05)，下表同。

In the same row, values with no letter or the same letter superscripts mean no significant difference (P>0.05), while with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05). The same as below.

如表4所示，試驗Ⅰ期，各組腹瀉率差異不顯著(P>0.05)；試驗Ⅱ期，對照組、酵母水解物與復合酶制劑聯(lián)合應用組與其他組相比，腹瀉率顯著升高(P<0.05)；試驗全期，各組之間腹瀉率差異不顯著(P>0.05)。

表4 酵母水解物與復合酶制劑或微生態(tài)制劑聯(lián)合應用對保育豬腹瀉率的影響

2.2 酵母水解物與復合酶制劑或微生態(tài)制劑聯(lián)合應用對保育豬血清生化指標的影響

如表5所示，與酵母水解物組(組2)相比，酵母水解物與復合酶制劑聯(lián)合應用顯著降低血清中甘油三酯含量(P<0.05)，其余血清生化指標各組之間差異不顯著(P>0.05)。

表5 酵母水解物與復合酶制劑或微生態(tài)制劑聯(lián)合應用對保育豬血清生化指標的影響

3 討 論

3.1 酵母水解物對保育豬生長性能的影響

對早期斷奶仔豬而言，添加3%的酵母水解物與3%的血漿蛋白粉，在ADG、ADFI上差異不顯著[7]，這與本試驗在保育豬的應用結(jié)果一致。以往研究表明，酵母水解物組ADG、ADFI顯著高于血漿蛋白粉組，可能與保育期Ⅰ、Ⅱ期添加量較高且添加量不同(5.0%、2.5%)有關(guān)[8]，這也提示我們可以根據(jù)動物的不同生理階段，調(diào)整酵母水解物的添加比例。本試驗中，0.5%的酵母水解物能夠通過提高ADFI、ADG從而改善保育豬的生長性能，且與2%血漿蛋白粉組無顯著性差異，可見酵母水解物具有替代保育豬飼糧中血漿蛋白粉的潛能。

酵母水解物含有8種必需氨基酸，其主要限制性氨基酸賴氨酸(Lys)∶蛋氨酸(Met)∶色氨酸(Try)∶蘇氨酸(Thr)=100∶21∶19∶64，接近NRC(1998)[9]的推薦值，有效能值較高，能提供更多的能量[10]。酵母水解物中天門冬氨酸和谷氨酸屬于鮮味氨基酸，能夠增強酵母自溶粉的誘食性，這也是本試驗中酵母水解物組ADFI顯著增加的原因之一。

酵母水解物中核苷酸的含量約為8%，在促進小腸的生長、發(fā)育、改善腸道微生物區(qū)系方面發(fā)揮作用。以往研究發(fā)現(xiàn)，在哺乳期間飼糧中添加0.1%的酵母水解物核苷酸能夠顯著提高仔豬的斷奶應激適應性，提高生長性能[11]，極顯著降低腹瀉的發(fā)生[3]，這與本試驗的結(jié)果基本一致。仔豬斷奶后，空腸的形態(tài)學參數(shù)受到極顯著影響，而核苷酸能夠調(diào)節(jié)回腸微生態(tài)的改變，維護其穩(wěn)定的微生態(tài)群[12]。飼喂0.05%的核苷酸極顯著增加了絨毛高度和隱窩深度，降低了絨毛高度和隱窩深度比值；另外還極顯著增加了有絲分裂黏膜細胞(M)，減少了凋亡黏膜細胞(A)，降低了A/M指數(shù)，促進腸道發(fā)育，對回腸黏膜的形態(tài)學特征有積極的影響[13]。小腸吸收面積增大，利于養(yǎng)分吸收，推測這是本試驗ADG顯著增加的原因之一。

3.2 酵母水解物與復合酶制劑聯(lián)合應用對保育豬生長性能的影響

斷奶仔豬消化系統(tǒng)發(fā)育不健全，易發(fā)生斷奶應激，影響后續(xù)保育階段的生長性能，在飼糧中添加外源性蛋白酶，則能補充內(nèi)源酶的不足。以纖維素酶、半乳聚糖酶、甘露聚糖酶和果膠酶的復合酶組合顯著提高仔豬ADG，降低F/G，極顯著增加總腸道消化率，并顯著降低磷的排泄[14]，在成本和環(huán)境友好方面都有出色的表現(xiàn)[15]。研究表明，酶制劑可降低由非淀粉性多糖造成的黏度，增加氨基酸、能量和磷的利用度[16]，顯著減少胃內(nèi)細菌代謝物[17]以及腹瀉的發(fā)生[18]。本試驗中，與其他組相比，酵母水解物與復合酶制劑組合卻使保育豬Ⅱ期的腹瀉率增加，可能與Ⅱ期仔豬自身分泌消化酶的能力未得到更好鍛煉、脂肪累積過剩而導致腹瀉有關(guān)，所以血清中甘油三酯的含量隨之降低。

3.3 酵母水解物與微生態(tài)制劑聯(lián)合應用對保育豬生長性能的影響

在仔豬飼糧中添加微生態(tài)制劑可提高ADG，降低F/G，并降低腹瀉發(fā)生率[19]，且與抗生素組相比，生長性能差異不顯著，可作為抗生素的替代品[20]。據(jù)報道，復合微生態(tài)制劑能夠有效降低血清尿素氮濃度，增加氮在體內(nèi)的沉積，顯著降低斷奶仔豬的F/G[21]。此外，雙歧桿菌等益生菌產(chǎn)酸，可降低腸道pH，破壞致病菌的生存環(huán)境，降低糞便中大腸埃希菌數(shù)量[22]，使腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)更加完整[23]，并可顯著降低腹瀉率，有效緩解應激引起的仔豬免疫下降[24-25]，且液體全酵工藝的應用效果在改善豬的生長性能、有益腸道微生物區(qū)系，減少有害腸道微生物區(qū)系方面優(yōu)于固體培養(yǎng)基發(fā)酵[26]。但隨著添加量的增加，生長性能降低[6]，這可能與影響腸道菌群的平衡有關(guān)。酵母甘露寡糖不能在單胃動物消化分解，易富集到結(jié)腸，而定植于腸道的微生態(tài)制劑(雙歧桿菌、乳酸菌)均含有分解甘露寡糖的酶，可以將甘露寡糖作為能量來源加以利用，促進益生菌生長。本試驗中，酵母水解物與微生態(tài)制劑聯(lián)合應用，與單獨應用酵母水解物相比，腹瀉率差異不顯著，可能與酵母水解物具有良好的腸道菌群調(diào)節(jié)作用有關(guān)。

4 結(jié) 論

① 飼糧添加2%血漿蛋白粉或者0.5%酵母水解物能通過提高ADG、ADFI改善保育豬的生長性能，酵母水解物具有替代血漿蛋白粉的潛能。

② 0.5%酵母水解物與0.03%微生態(tài)制劑或0.02%復合酶制劑的聯(lián)合應用未對保育豬的生長性能產(chǎn)生協(xié)同效應。

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*Corresponding author, associate professor, E-mail: lifengna@isa.ac.cn

(責任編輯 田艷明)

Effects of Combined Application of Yeast Hydrolysate and Multi-Enzyme Preparations or Probiotics and Substitute for Plasma Protein Powder on Growth Performance and Serum Biochemical Indices of Nursery Piglets

WEN Chaoyue1,2LI Yong3XING Weigang3LI Biao4LIU Jia3MA Xiangdong5ZHANG Yuzhe1LI Fengna1,6*

(1.KeyLaboratoryofAgro-EcologicalProcessesinSubtropicalRegion,InstituteofSubtropicalAgriculture,ChineseAcademyofScience,Changsha410125,China; 2.LaboratoryofAnimalNutritionandHumanHealth,SchoolofLifeSciences,HunanNormalUniversity,Changsha410006,China; 3.NewHopeLiuheCompanyLimited,Beijing100102,China; 4.AngleYeastCompanyLimited,Yichang443003,China; 5.QingdaoVlandBiotechIncorporated,Qingdao266001,China; 6.HunanCo-InnovationCenterofAnimalProductionSafety,Changsha410128,China)

The experiment was conducted to explore the effects of combined application of yeast hydrolysate and multi-enzyme preparations or probiotics on the growth performance and serum biochemical indices of nursery piglets. Four hundred and eighty 35-day-old healthy crossed-bred (Duroc×Landrace×Yorkshine) piglets with similar body weight were randomly assigned 5 groups with 8 replicates in each group and 12 piglets in each pen balanced for gender. Using single factor experiment design, the piglets in the control group were fed a basic diet, and the others were fed the basic diet supplemented with 2% plasma protein powder (group 1), 0.5% yeast hydrolysate (group 2), 0.5% yeast hydrolysate+0.02% multi-enzyme preparations (group 3), and 0.5% yeast hydrolysate+0.03% probiotics (group 4), respectively. After 3 days of adaptive phase, the feeding trial was lasted for 25 days, including stage Ⅰ (1 to 14 days) and stage Ⅱ (15 to 25 days). The results showed as follows: 1) in stage Ⅰ, compared with the control group, the average daily gain (ADG) and average daily feed intake (ADFI) of the nursery pigs in test groups were improved significantly (P<0.05), also for the ratio of feed to gain (F/G) in group 3 (P<0.05), while F/G in the other groups was between them; in stage Ⅱ, the ADG and F/G in groups had no significant differences (P>0.05), however, compared with the control group, the ADFI of the pigs in group 1 was increased significantly (P<0.05), and the incidences of diarrhea in groups 1, 2, 4 were significantly lower than that in the control group and group 3 (P<0.05); in the whole stage, compared with the control group, the ADG and ADFI of the nursery pigs in group 1 were increased significantly (P<0.05), and the data of those in the other three groups were between them. 2) The serum triglyceride content in the group 3 was significantly decreased compared with the group 2 (P<0.05), and no significant difference was observed in the other serum biochemical indices among groups (P>0.05). In conclusion, plasma protein powder and yeast hydrolysate can improve the growth performance of nursery piglets in varying degrees, and yeast hydrolysate has a potential to replace plasma protein powder in pig diet. The combined application of yeast hydrolysate and probiotics or multi-enzyme preparations do not show a synergistic effect on pigs.[ChineseJournalofAnimalNutrition, 2016, 28(12)：3988-3995]

yeast hydrolysate; multi-enzyme preparation; probiotics; growth performance; serum biochemical index; nursery piglet

10.3969/j.issn.1006-267x.2016.12.033

2016-06-28

湖南省自然科學基金面上項目(S2014J504I)；中科院創(chuàng)新促進會項目(2016326)

文超越(1992—)，男，四川遂寧人，碩士研究生，從事分子營養(yǎng)與肉品質(zhì)調(diào)控研究。E-mail: 18390973474@163.com

*通信作者：李鳳娜，副研究員，E-mail: lifengna@isa.ac.cn

S816.7

A

1006-267X(2016)12-3988-08