孫偉麗 趙海平 王曉旭 樊燕燕 鮑 坤 王艷梅 李光玉*

(1.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院特產(chǎn)研究所，吉林省特種經(jīng)濟(jì)動(dòng)物分子生物學(xué)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，長春130112；2.長春科技學(xué)院，長春130600)

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不同鈣、磷水平飼糧對12～15月齡梅花鹿生長性能、營養(yǎng)物質(zhì)消化率及鈣、磷代謝的影響

孫偉麗1趙海平1王曉旭1樊燕燕1鮑 坤1王艷梅2李光玉1*

(1.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院特產(chǎn)研究所，吉林省特種經(jīng)濟(jì)動(dòng)物分子生物學(xué)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，長春130112；2.長春科技學(xué)院，長春130600)

本試驗(yàn)旨在通過研究不同鈣、磷水平飼糧對12～15月齡梅花鹿生長性能、營養(yǎng)物質(zhì)消化率及鈣、磷代謝的影響，確定該時(shí)期適宜的飼糧鈣、磷水平。選取16頭健康、遺傳特性相近的12月齡雄性梅花鹿，隨機(jī)分為4組(每組4個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)1頭)，組間體重?zé)o顯著差異(P>0.05)。4組飼糧鈣、磷水平分別為0.49%、0.33%(Ⅰ組)，0.82%、0.56%(Ⅱ組)，1.16%、0.80%(Ⅲ組)和1.61%、1.12%(Ⅳ組)。試驗(yàn)從2015年5月15日開始，至2015年8月7日結(jié)束。結(jié)果表明：1)各組12～15月齡梅花鹿各時(shí)期體重、平均日增重、平均日采食量和料重比的差異均不顯著(P>0.05)。從整個(gè)試驗(yàn)期看，以Ⅳ組的生長性能較優(yōu)。2)除第30天時(shí)Ⅲ組血清鈣水平顯著低于Ⅰ組和Ⅳ組(P<0.05)外，其他時(shí)間點(diǎn)(第1天、第60天、第83天)各組之間差異不顯著(P>0.05)。Ⅰ組、Ⅱ組、Ⅲ組血清鈣水平隨試驗(yàn)時(shí)間的延長均沒有產(chǎn)生顯著變化(P>0.05)，而Ⅳ組則隨試驗(yàn)時(shí)間的延長呈現(xiàn)逐漸升高趨勢，在第83天時(shí)表現(xiàn)最高，為2.415 nmol/L，顯著高于第1天的2.280 nmol/L(P<0.05)。血清磷水平在同一時(shí)間點(diǎn)不同組別之間無顯著差異(P>0.05)，同一組不同時(shí)間點(diǎn)之間也沒有顯著差異(P>0.05)。試驗(yàn)第1天，Ⅰ組血清鎂水平顯著高于Ⅲ組和Ⅳ組(P<0.05)；試驗(yàn)第30天，Ⅰ組血清鎂水平顯著高于Ⅲ組(P<0.05)。隨試驗(yàn)時(shí)間的延長，Ⅰ組、Ⅱ組和Ⅲ組血清鎂水平無顯著變化(P>0.05)，但Ⅳ組血清鎂水平則表現(xiàn)為先升高后降低的趨勢，第30天和第60天時(shí)顯著高于第1天和第83天時(shí)(P<0.05)。3)各組間血清睪酮和雌二醇水平均無顯著變化(P>0.05)；血清甲狀旁腺素、骨鈣素水平及堿性磷酸酶活性隨著飼糧鈣、磷水平的升高無顯著變化(P>0.05)。4)從整個(gè)試驗(yàn)期看，12～15月齡梅花鹿粗蛋白質(zhì)和粗脂肪消化率以Ⅲ組最高，鈣、磷消化率也以Ⅲ組最高，Ⅲ組鈣消化率達(dá)到51.08%、磷消化率達(dá)到67.71%。由此得出，飼糧鈣、磷水平對12～15月齡梅花鹿血清性激素及鈣、磷、鎂水平無顯著影響，但營養(yǎng)物質(zhì)消化率以Ⅲ組最高，因此推薦此時(shí)期飼糧鈣、磷水平分別為1.16%和0.80%。

梅花鹿；鈣；磷；生長性能；血清生化指標(biāo)；消化率

我國飼養(yǎng)的梅花鹿品種以茸用為主，鹿茸每年隨季節(jié)周期性循環(huán)再生。鹿茸再生及生長的影響因素有很多，其與睪酮等體內(nèi)激素調(diào)節(jié)相關(guān)，與光照周期、營養(yǎng)供給的關(guān)系也很密切。動(dòng)物機(jī)體生長時(shí)期需要的鈣、磷等礦物質(zhì)元素由飼料提供，鹿茸生長期還需調(diào)動(dòng)鹿骨骼中的部分元素來滿足其快速生長的需求[1]。在骨化的鹿角中礦物質(zhì)含量高達(dá)50%，而其中45%為鈣，19%為磷。飼糧提供的鈣有25%～40%用于鹿茸骨化生長，鈣、磷在鹿茸骨化過程中起著其他元素不可替代的作用[2]。12～15月齡梅花鹿正處在身體生長、骨骼發(fā)育的重要階段，研究本時(shí)期鈣、磷代謝規(guī)律及飼糧中適宜的鈣、磷需要量，為飼糧配制提供依據(jù)，同時(shí)揭示梅花鹿鈣磷代謝調(diào)節(jié)規(guī)律。鈣、磷是動(dòng)物機(jī)體特別是維持骨骼正常代謝所必需的常量元素。攝入的鈣、磷經(jīng)腸道吸收，進(jìn)入血液循環(huán)，而后到達(dá)骨表面，形成經(jīng)基磷灰石結(jié)晶。這種結(jié)晶為骨組織與細(xì)胞外液的鈣離子交換提供了廣大的交換面積，同時(shí)也為骨本身無數(shù)的骨小梁和哈弗骨板提供了極大的物質(zhì)交換面積[3]。初漢平[4]研究了不同生長階段對奶牛鈣、磷表觀消化率的影響，結(jié)果表明奶牛18月齡時(shí)鈣表觀消化率低于12和24月齡，并分析認(rèn)為是由于12月齡時(shí)奶牛骨骼未發(fā)育完全，還需要大量鈣用于骨骼生長，而24月齡時(shí)奶牛處于妊娠期需要大量的鈣滿足胎兒需求。Muir等[5]對白尾鹿、Muir等[6-7]對赤鹿的飼糧鈣、磷需要量分別進(jìn)行了研究，得出結(jié)論認(rèn)為鹿科動(dòng)物需要大量的鈣、磷用以支持鹿茸的生長。針對斷乳仔鹿對飼糧中磷的需要量的研究發(fā)現(xiàn)，斷乳仔鹿血清中無機(jī)磷的含量隨著飼糧中磷水平的升高而增加，差異顯著[5,7]；飼糧中含有約0.3%的磷時(shí)(以干重計(jì))，就能滿足1歲公仔鹿的生理需求[6]。王峰等[8]研究建議3歲梅花鹿生茸期飼糧中適宜的鈣、磷水平分別為0.89%和0.52%。郜玉鋼等[9-10]研究認(rèn)為6歲梅花鹿飼糧適宜鈣水平為0.74%，鈣磷比為1.54。12～15月齡梅花鹿對鈣、磷的需要量尚不明確，本研究通過給12～15月齡的梅花鹿喂食不同鈣、磷水平的飼糧，通過比對各組動(dòng)物的生長性能、血清中睪酮和雌二醇等性激素水平，血清礦物質(zhì)鈣、磷、鎂含量以及降鈣素、甲狀旁腺素等與鈣代謝相關(guān)的激素水平，分析飼糧鈣、磷水平對12～15月齡梅花鹿生長性能的影響，解析骨代謝相關(guān)激素水平的變化規(guī)律；此外，本研究同時(shí)關(guān)注了梅花鹿生茸期各營養(yǎng)物質(zhì)消化率的變化規(guī)律，分析對比5～8月份期間12～15月齡梅花鹿血液骨代謝指標(biāo)變化規(guī)律，對比不同鈣、磷攝入組和不同生理時(shí)期變化規(guī)律，進(jìn)一步揭示梅花鹿鈣、磷代謝以及骨代謝變化機(jī)制，從而確定12～15月齡梅花鹿適宜的飼糧鈣、磷水平，并為研究梅花鹿鈣質(zhì)調(diào)控規(guī)律和骨質(zhì)可逆調(diào)節(jié)提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)和試驗(yàn)動(dòng)物

選取12月齡健康的雄性梅花鹿16頭，隨機(jī)分為4個(gè)組(Ⅰ～Ⅳ組)，每組4個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)1頭，各組間梅花鹿出生時(shí)間相近、體重差異不顯著(P>0.05)，定量飼喂4種不同鈣、磷水平的飼糧，4種飼糧的鈣磷比基本保持一致，在1.44～1.46之間，粗蛋白質(zhì)、粗脂肪含量等營養(yǎng)水平保持一致。Ⅰ～Ⅳ組飼糧鈣、磷水平分別為0.49%、0.33%，0.82%、0.56%，1.16%、0.80%和1.61%、1.12%。試驗(yàn)期為83 d。

1.2 試驗(yàn)飼糧和飼養(yǎng)管理

按照試驗(yàn)設(shè)計(jì)的鈣、磷水平，以玉米、豆粕、干全酒糟及其可溶物(DDGS)、玉米胚芽、苜蓿草粉、糖蜜、食鹽、預(yù)混料等按不同比例制成直徑為0.4 cm、長度為1.2～1.5 cm的顆粒型全混合日糧(TMR)。TMR組成及營養(yǎng)水平見表1。飼養(yǎng)試驗(yàn)在中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院特產(chǎn)研究所茸鹿試驗(yàn)基地進(jìn)行，試驗(yàn)從2015年5月15日開始，至2015年8月7日結(jié)束，試驗(yàn)期間每日07:00和15:00分組定量飼喂，日飼喂量按該時(shí)期梅花鹿的飼糧需求量而定，以無明顯剩料為準(zhǔn)，隨著體重的增長，每14 d調(diào)整1次飼喂量，自由飲水。

1.3 樣品采集

1.3.1 血液樣本采集

試驗(yàn)第30天、第60天和第83天早晨飼喂前對試驗(yàn)鹿進(jìn)行麻醉，空腹稱重，然后頸靜脈采血10 mL，放置至血清析出，4 000 r/min離心10 min，收集血清于1.5 mL EP管中，-20 ℃低溫保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3.2 糞便樣本采集

試驗(yàn)期內(nèi)總計(jì)收集糞便3次，每28 d設(shè)為1個(gè)小周期，每個(gè)周期最后3 d在鹿圈內(nèi)定點(diǎn)收集糞便，每個(gè)鹿圈定點(diǎn)3個(gè)，09:00—10:00每個(gè)定點(diǎn)采集糞樣150～200 g，根據(jù)酸不溶灰分測定法的要求，盡量去除雜質(zhì)。

1.4 指標(biāo)測定及方法

1.4.1 生長性能測定

試驗(yàn)第30天、第60天及第83天在早晨飼喂前對試驗(yàn)鹿進(jìn)行麻醉，使用上海英展牌電子秤(量程為100 kg，精度為0.01 kg)空腹稱重(精確到0.01 kg)，記錄體重(BW)，準(zhǔn)確計(jì)算不同階段的平均日增重(ADG)。記錄每天的采食量(FI)，計(jì)算不同階段的平均日采食量(ADFI)與料重比(F/G)。

1.4.2 飼糧及糞樣營養(yǎng)成分測定

干物質(zhì)含量采用105 ℃烘干法測定，參照GB/T 6435—2006；粗蛋白質(zhì)含量采用凱氏定氮法測定，參照GB/T 6432—1994；粗脂肪含量采用索氏抽提法測定，參照GB/T 6433—1994；粗灰分含量采用550 ℃灼燒法測定，參照GB/T 6438—1992；鈣含量采用乙二胺四乙酸(EDTA)絡(luò)合滴定法測定，參照GB/T 6436—1992；磷含量采用釩鉬酸銨比色法測定，參照GB/T 6437—1992；酸性洗滌纖維(ADF)和中性洗滌纖維(NDF)含量采用范氏(Van Soest)的洗滌纖維分析法測定，參照GB/T 20806—2006。營養(yǎng)物質(zhì)消化率采用2 mol/L鹽酸不溶灰分(acid insoluble ash，AIA)法測定。參考文獻(xiàn)[11]的計(jì)算公式計(jì)算營養(yǎng)物質(zhì)消化率：

營養(yǎng)物質(zhì)消化率(%)=100-100×[飼糧中AIA含量(%)/糞樣中AIA含量(%)]×

[糞樣中營養(yǎng)物質(zhì)含量(%)/飼糧中營養(yǎng)物質(zhì)含量(%)]。

1.4.3 血清激素及骨代謝相關(guān)指標(biāo)測定

血清睪酮(T)、雌二醇(E2)水平采用電化學(xué)發(fā)光法測定。血清甲狀旁腺素(PTH)、骨鈣素(OST)水平采用電化學(xué)發(fā)光法測定。血清堿性磷酸酶(ALP)活性采用購自中生北控有限公司生產(chǎn)的試劑盒，按照試劑盒說明書使用VITALIB-E全自動(dòng)生化分析儀測定。

1.4.4 血清礦物質(zhì)指標(biāo)測定

血清鈣、鎂、磷水平采用原子吸收光譜儀測定。

1.5 統(tǒng)計(jì)方法

數(shù)據(jù)采用SAS 9.3軟件的ANOVA進(jìn)程統(tǒng)計(jì)分析，先進(jìn)行單因素方差分析，若存在顯著差異，再采用Duncan氏法進(jìn)行多重比較，P<0.05為差異顯著，P<0.01為差異極顯著。

表1 全混合日糧組成及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

1)每千克預(yù)混料含有One kilogram of premix contained the following：MgSO416.7 g，CuSO42.7 g，MnSO4·H2O 6.3 g，ZnSO4·H2O 6.3 g，F(xiàn)eSO4·H2O 8.0 g，NaSeO33.4 g，多維vitamins 5.3 g(VA 2 484 IU，VD3496.8 IU，VE 0.828 IU，VK30.23 mg，VB10.092 mg，VB20.69 mg，VB120.001 38 mg，葉酸 folic acid 0.023 mg，煙酰胺 nicotinamide 0.001 62 g)。

2)代謝能為計(jì)算值，其余為實(shí)測值。ME was a calculated value, while the others were measured values.

2 結(jié)果與分析

2.1 不同鈣、磷水平飼糧對12～15月齡梅花鹿生長性能的影響

統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果顯示，飼喂不同鈣、磷水平飼糧的各組12～15月齡梅花鹿的各時(shí)期體重(BW)、ADG、ADFI和F/G的差異均不顯著(P>0.05)。由表2可以看出，試驗(yàn)第1階段，即試驗(yàn)第1～30天(2015年5月15日至2015年6月15日)，Ⅳ組ADG最高，為314.17 g/d，比Ⅰ組和Ⅱ組高88 g/d，但是標(biāo)準(zhǔn)差值較大。試驗(yàn)第2個(gè)階段，即試驗(yàn)第31～60天(2015年6月16日至2015年7月15日)，ADG仍以Ⅳ組最高，為208.33 g/d，高于Ⅲ組107.05 g/d，整體生長速度低于第1階段。試驗(yàn)第3階段，即試驗(yàn)第61～83天(2015年7月16日至2015年8月7日)，ADG以Ⅰ組最高，為242.28 g/d，其次為Ⅳ組，為198.04 g/d。整個(gè)試驗(yàn)期內(nèi)ADG仍以Ⅳ組最高，為243.73 g/d，Ⅲ組最低，為171.42 g/d。

表2 不同鈣、磷水平飼糧對12～15月齡梅花鹿生長性能的影響

同列數(shù)據(jù)肩標(biāo)不同大寫字母表示同組不同時(shí)間點(diǎn)間差異顯著(P<0.05)，相同或無字母表示差異不顯著(P>0.05)；同行數(shù)據(jù)肩標(biāo)不同小寫字母表示同一時(shí)間點(diǎn)不同組別間差異顯著(P<0.05)，相同或無字母表示差異不顯著(P>0.05)。表3、表4同。

Values in the same column with different capital letter superscripts mean significant difference among different time points in the same group (P<0.05), while with no or the same letter superscripts mean no significant difference (P>0.05); values in the same row with different small letter superscripts mean significant difference among different groups in the same time points (P<0.05), while with no or the same letter superscripts mean no significant difference (P>0.05). The same as Table 3 and Table 4.

2.2 不同鈣、磷水平飼糧對12～15月齡梅花鹿血清鈣、磷、鎂水平的影響

由表3可以看出，血清鈣水平相對恒定，除第30天時(shí)Ⅲ組顯著低于Ⅰ組和Ⅳ組(P<0.05)外，其他時(shí)間點(diǎn)(第1天、第60天、第83天)各組之間差異不顯著(P>0.05)。針對同一組試驗(yàn)動(dòng)物在不同時(shí)間點(diǎn)血清鈣水平對比發(fā)現(xiàn)，Ⅰ組、Ⅱ組、Ⅲ組從試驗(yàn)開始至結(jié)束，各時(shí)間點(diǎn)血清鈣水平均沒有顯著差異(P>0.05)，唯獨(dú)Ⅳ組隨試驗(yàn)時(shí)間的延長呈現(xiàn)逐漸升高趨勢，在試驗(yàn)?zāi)┢?第83天)時(shí)表現(xiàn)最高，為2.415 nmol/L，顯著高于試驗(yàn)初期(第1天)的2.280 nmol/L(P<0.05)，與第30天和第60天時(shí)差異不顯著(P>0.05)。對血清水平進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn)，某一時(shí)間點(diǎn)不同組別之間無顯著差異(P>0.05)，針對某一組的不同時(shí)間點(diǎn)之間也沒有顯著差異(P>0.05)。試驗(yàn)第1天，血清鎂水平有隨著鈣、磷水平上升而降低的趨勢，Ⅰ組顯著高于Ⅲ組和Ⅳ組(P<0.05)；試驗(yàn)第30天，血清鎂水平有隨著鈣、磷水平上升先降低后升高的趨勢，Ⅰ組顯著高于Ⅲ組(P<0.05)；試驗(yàn)第60天和第83天，血清鎂水平在各組間均沒有顯著差異(P>0.05)。針對同一組試驗(yàn)動(dòng)物在不同時(shí)間血清鎂水平對比發(fā)現(xiàn)，Ⅰ組、Ⅱ組和Ⅲ組在不同時(shí)間點(diǎn)的血清鎂水平無顯著變化(P>0.05)，但Ⅳ組血清鎂水平則表現(xiàn)為先升高后降低的趨勢，且第30天和第60天時(shí)顯著高于試驗(yàn)初期和試驗(yàn)?zāi)┢?P<0.05)。

表3 不同鈣、磷水平飼糧對12～15月齡梅花鹿血清鈣、磷、鎂水平的影響

2.3 不同鈣、磷水平飼糧對12～15月齡梅花鹿血清睪酮和雌二醇水平的影響

由表4可以看出，飼喂不同鈣、磷水平飼糧的各組以及飼喂相同鈣、磷水平飼糧組的不同發(fā)育時(shí)期對比，12～15月齡梅花鹿血清睪酮和雌二醇水平均沒有顯著變化(P>0.05)。

表4 不同鈣、磷水平飼糧對12～15月齡梅花鹿血清睪酮和雌二醇水平的影響

2.4 不同鈣、磷水平飼糧對12～15月齡梅花鹿血清骨代謝相關(guān)指標(biāo)的影響

統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果顯示，表5中3個(gè)指標(biāo)同一時(shí)間點(diǎn)各組之間無不顯著差異(P>0.05)，即血清甲狀旁腺素、骨鈣素水平及堿性磷酸酶活性隨著鈣、磷水平的上升無顯著變化(P>0.05)。由表5可以看出，隨著季節(jié)性變化，血清甲狀旁腺素水平從5月份至8月份逐漸降低，隨著季節(jié)性變化，Ⅰ組、Ⅱ組和Ⅲ組血清甲狀旁腺素水平呈現(xiàn)差異極顯著的變化規(guī)律，Ⅰ組表現(xiàn)為第1天極顯著高于第60天和第83天(P<0.01)，Ⅱ組表現(xiàn)為第1天和第30天極顯著高于第60天和第83天(P<0.01)且第60天極顯著高于第83天(P<0.01)，Ⅲ組表現(xiàn)為第1天極顯著高于第30天、第60天和第83天(P<0.01)；Ⅳ組變化規(guī)律略有不同，降低的幅度小于前3組，表現(xiàn)為第1天顯著高于第60天和第83天 (P<0.05)。血清堿性磷酸酶活性和骨鈣素水平在同一時(shí)間點(diǎn)不同組別之間以及同一組的不同時(shí)間點(diǎn)之間均沒有顯著差異(P>0.05)。

表5 不同鈣、磷水平飼糧對12～15月齡梅花鹿血清骨代謝相關(guān)指標(biāo)的影響

同列同一項(xiàng)目數(shù)據(jù)肩標(biāo)不同小寫字母表示同組不同時(shí)間點(diǎn)間差異顯著(P<0.05)，不同大寫字母表示差異極顯著(P<0.01)，相同或無字母表示差異不顯著(P>0.05)。

Values of the same item in the same column with different small letter superscripts mean significant difference among different time points in the same group (P<0.01), and with different capital letter superscripts mean extremely significant difference (P<0.05), while with no or the same letter superscripts mean no significant difference (P>0.05).

2.5 不同鈣、磷水平飼糧對12～15月齡梅花鹿?fàn)I養(yǎng)物質(zhì)消化率的影響

由表6可知，12～15月齡梅花鹿各個(gè)生長時(shí)期，粗蛋白質(zhì)和粗脂肪消化率以Ⅲ組最高，但與其他幾組差異不大。整個(gè)試驗(yàn)期Ⅲ組鈣消化率達(dá)到51.08%，明顯高于其他3組，Ⅱ組最低，僅為30.61%，Ⅲ組高出Ⅱ組20.47%；整個(gè)試驗(yàn)期Ⅲ組磷消化率為67.71%，高于其他幾組，Ⅱ組磷消化率最低，僅為50.77%，Ⅲ組高出Ⅱ組16.94%。整個(gè)試驗(yàn)期，鈣消化率從高到低變化趨勢是Ⅲ組、Ⅳ組、Ⅰ組和Ⅱ組，磷消化率從高到低變化趨勢是Ⅲ組、Ⅰ組、Ⅳ組和Ⅱ組。

3 討 論

3.1 不同鈣、磷水平飼糧對12～15月齡梅花鹿生長性能的影響

郜玉剛等[10]以生茸盛期6歲梅花鹿為試驗(yàn)對象，通過研究不同鈣水平和鈣磷比對產(chǎn)茸性能如茸重、茸的飼料轉(zhuǎn)化率等的影響，發(fā)現(xiàn)飼糧鈣水平為0.74%，鈣磷比為1.54時(shí)梅花鹿的產(chǎn)茸性能最佳，但和其他組差異不顯著。已有研究認(rèn)為，飼糧中含有約0.3%的磷時(shí)(以干重計(jì))，能滿足1歲公仔鹿的生理需求[6]。本試驗(yàn)中，整個(gè)試驗(yàn)期內(nèi)，12～15月齡梅花鹿的平均日增重以Ⅳ組最高，達(dá)到243.73 g/d，與其他組差異不顯著；料重比以Ⅲ組最高，為13.53，與其他組差異不顯著。由本試驗(yàn)結(jié)果推斷，12～15月齡梅花鹿處于毛桃茸發(fā)育階段，還沒達(dá)到鹿茸快速生長階段，機(jī)體對于鈣、磷的需求量取決于機(jī)體骨骼發(fā)育及維持其他礦物質(zhì)元素代謝的需求量，推薦此時(shí)期鈣水平為0.82%～1.16%，磷水平為0.56%～0.80%。

表6 不同鈣、磷水平飼糧對12～15月齡梅花鹿?fàn)I養(yǎng)物質(zhì)消化率的影響

3.2 不同鈣、磷水平飼糧對12～15月齡梅花鹿血清鈣、磷和鎂水平的影響

鈣、磷在骨中沉積和吸收是骨代謝的重要物質(zhì)交換過程，血液中恒定的鈣、磷水平是骨代謝機(jī)制最為重要的條件，是通過調(diào)節(jié)體液中鈣和骨中的鈣交換來實(shí)現(xiàn)的。血漿鈣水平保持恒定的一種機(jī)制是通過骨中鈣與血漿中鈣交換，另一種機(jī)制是在甲狀旁腺素的作用下，把骨鹽晶體中的鈣動(dòng)員出來，使得血漿鈣達(dá)到正常水平[12]。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，12～15月齡梅花鹿血清磷水平非常穩(wěn)定，各個(gè)組之間隨著飼喂時(shí)間的變化均沒有發(fā)生顯著變化。通過血清鈣和骨鈣沉積調(diào)節(jié)機(jī)制，本試驗(yàn)中前3組血清鈣水平穩(wěn)定，唯獨(dú)Ⅳ組血清鈣水平呈現(xiàn)逐漸升高趨勢，在第83天時(shí)最高，可能是由于在動(dòng)物持續(xù)采食狀態(tài)下，攝入高鈣飼糧的12～15月齡梅花鹿的骨鈣吸收和沉積能力不強(qiáng)，超出了其調(diào)節(jié)能力范圍，因此從這個(gè)角度表明飼糧鈣水平不宜超過1.61%。

3.3 不同鈣、磷水平飼糧對12～15月齡梅花鹿血清睪酮和雌二醇水平的影響

鹿茸作為雄性梅花鹿的第2性征，其再生、生長與發(fā)育受到性激素睪酮和雌二醇的調(diào)控。青春期是角柄開始發(fā)育的特定時(shí)期，角柄發(fā)育起始信號的激活需要滿足2個(gè)條件[13]：一是進(jìn)入青春期，血漿睪酮水平上升[14-17]；二是雄性仔鹿的體重需達(dá)到特定的體重閾值[18-19]。

雄性梅花鹿全年外周血漿中睪酮和雌二醇的水平都出現(xiàn)明顯的變化規(guī)律。根據(jù)成年公鹿的年齡不同，激素的變化明顯程度有所差異。每年3～4月份的某段時(shí)間睪酮和雌二醇幾乎同時(shí)出現(xiàn)不同的峰值然后下降，且年齡越大，這2種性激素出現(xiàn)峰值后下降幅度越明顯。每年4～7月份，血漿中雌二醇始終維持在較高的水平，而睪酮?jiǎng)t處于低穩(wěn)的水平，8月份以后，雌二醇和睪酮的水平同時(shí)上升，并達(dá)到最高峰，10月份以后又陸續(xù)下降，當(dāng)下降到一定水平時(shí)又呈現(xiàn)平穩(wěn)的態(tài)勢[20]。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，在12～15月齡梅花鹿的生長階段，體內(nèi)性激素睪酮和雌二醇水平并沒有發(fā)生顯著變化，不同鈣、磷水平的飼糧也未對2種性激素水平的變化產(chǎn)生顯著影響。這說明，12～15月齡梅花鹿還未達(dá)到性成熟階段，體內(nèi)性激素尚未達(dá)到調(diào)節(jié)鹿茸發(fā)育的能力。

3.4 不同鈣、磷水平飼糧對12～15月齡梅花鹿血清骨代謝相關(guān)指標(biāo)的影響

甲狀旁腺素與降鈣素協(xié)同作用維持著血漿鈣水平的平衡，甲狀旁腺素通過活化維生素D3間接使腸道吸收的鈣離子(Ca2+)增加，可使腸道細(xì)胞的Ca2+轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)機(jī)能增強(qiáng)，因而促進(jìn)腸道對Ca2+的吸收。甲狀旁腺素的分泌主要受血漿Ca2+水平的調(diào)節(jié)。血漿Ca2+水平升高，甲狀旁腺素的分泌即受到抑制；血漿Ca2+水平降低，則刺激甲狀旁腺素的分泌。低血漿鈣水平不僅促進(jìn)甲狀旁腺素的合成和分泌，還刺激甲狀旁腺組織的增生。本試驗(yàn)中，血清甲狀旁腺素水平在各組中均隨著毛桃茸的生長逐漸降低，表明隨著毛桃茸生長所需礦物質(zhì)增加，血清鈣水平的提高抑制了甲狀旁腺素的分泌。從表3可以看出，各組梅花鹿生長時(shí)期血清鈣水平保持恒定，分析正是血漿Ca2+水平升高抑制甲狀旁腺素分泌的結(jié)果。堿性磷酸酶在鹿茸骨化中的作用可能是促進(jìn)鈣、磷沉積形成骨鹽[21]。本試驗(yàn)中，12～15月齡梅花鹿毛血清堿性磷酸酶活性尾發(fā)生顯著變化。血清骨鈣素是由成骨細(xì)胞分泌的一種活性多肽，在調(diào)節(jié)骨代謝中起重要作用，其水平反映成骨細(xì)胞活性。測定血清骨鈣素是診斷骨質(zhì)疏松綜合征、佝僂病、代謝性骨病、甲狀腺功能亢進(jìn)或減退癥等疾病的參考指標(biāo)，也可作為老年骨代謝的重要指標(biāo)之一。骨質(zhì)合成時(shí)，可見骨鈣素水平升高。本試驗(yàn)中，12～15月齡梅花鹿毛桃茸生長期間未見血清骨鈣素水平發(fā)生顯著變化，說明尚未達(dá)到大量動(dòng)員運(yùn)輸?shù)V物質(zhì)元素階段。

3.5 不同鈣、磷水平飼糧對12～15月齡梅花鹿?fàn)I養(yǎng)物質(zhì)消化率的影響

由于機(jī)體對礦物質(zhì)消化吸收的能力有限，生茸期鹿科動(dòng)物從飼糧吸收的鈣和磷無法滿足鹿茸骨化所需，因而必須動(dòng)員骨骼中的鈣、磷，從骨骼重吸收。雄性北美馴鹿從骨骼中重吸收的鈣、磷量分別為不少于25和12 g/d。由于雌性北美馴鹿也能生相對較小的鹿茸，其從飼糧中吸收的鈣能夠滿足生茸要求，然而從飼糧中吸收的磷卻不足，還必須從骨骼中重吸收。鹿骨骼中25%的鈣和50%的磷能夠被重吸收[22]。在鹿茸的快速生長期，骨骼的鈣磷比超出了其他動(dòng)物正常的生理極限，從正常的2.0升高到3.3[23]，說明鈣和磷的重吸收并不是按2∶1的比例進(jìn)行，而是高于這個(gè)比值。骨骼中磷的重吸收比例比鈣高，是因?yàn)轱暭Z中磷不足造成的，同時(shí)也暗示了鹿茸發(fā)育對磷的需求可能更為重要[23]。

本試驗(yàn)中，飼糧鈣、磷水平分別為1.16%和0.80%時(shí)，鈣、磷消化率最高，鈣消化率從26.68%(鈣、磷水平分別為0.82%、0.56%時(shí))升高至47.89%，磷消化率從52.84%(鈣、磷水平分別為0.82%、0.56%時(shí))升高至68.05%。郜玉剛等[9]研究表明，6歲梅花鹿飼糧鈣水平從0.74%升到1.27%時(shí)，鈣消化率從37.72%降到27.76%，鈣代謝率從34.54%降到24.78%。王峰等[8]研究認(rèn)為，3歲梅花鹿生茸期飼糧中適宜的鈣、磷水平分別為0.89%和0.52%，與郜玉剛等[27]的研究結(jié)果相符。此外，郜玉剛等[9]研究認(rèn)為，飼糧鈣、磷水平對鋸茸時(shí)鹿茸血清鈣水平有影響，而對血清磷水平的影響不大。本試驗(yàn)與郜玉剛等[9]所得試驗(yàn)結(jié)果不相符，分析原因可能是梅花鹿所處的生理年齡不同，本試驗(yàn)所用梅花鹿處于體格快速生

4 結(jié) 論

① 飼糧鈣、磷水平對12～15月齡梅花鹿血清性激素及鈣、磷、鎂水平無顯著影響。

② 飼糧中鈣水平為1.16%、磷水平為0.80%、鈣磷比為1.45時(shí)，12～15月齡梅花鹿的粗蛋白質(zhì)、粗脂肪、鈣、磷消化率最高，因此推薦此時(shí)期飼糧鈣、磷水平分別為1.16%和0.80%。

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*Corresponding author, professor, E-mail: tcslgy@126.com

(責(zé)任編輯 菅景穎)

Effects of Diets with Different Calcium and Phosphorus Levels on Growth Performance, Nutrient Digestibility, Calcium and Phosphorus Metabolism of 12 to 15 Months Old Sika Deer

SUN Weili1ZHAO Haiping1WANG Xiaoxu1FAN Yanyan1BAO Kun1WANG Yanmei2LI Guangyu1*

(1.JilinProvincialKeyLaboratoryforMolecularBiologyofSpecialEconomicAnimals,InstituteofSpecialAnimalandPlantSciences,ChineseAcademyofAgricultureSciences,Changchun130112,China; 2.ChangchunSci-TechUniversity,Changchun130600,China)

This experiment aimed to study the effects of diets with different calcium and phosphorus levels on growth performance, nutrient digestibility, calcium and phosphorus metabolism of 12 to 15 months old sika deer, in order to confirm the appropriate calcium and phosphorus levels for 12 to 15 months old sika deer. Sixteen healthy male sika deer of similar hereditary were randomly divided into four groups, and the difference in body weight was not significant among groups (P>0.05). Each group contained four replicates and each replicate had one deer. The levels of calcium and phosphorus in the four groups were 0.49% and 0.33% (group Ⅰ), 0.82% and 0.56% (group Ⅱ), 1.16% and 0.80% (group Ⅲ), 1.61% and 1.12% (group Ⅳ), respectively. The experimental period was from May 15th, 2015 to August 7th, 2015. The results showed as follows: 1) there were no significant differences in body weight, average daily gain (ADG), average daily feed intake (ADFI) and feed weight ratio (F/G) of 12 to 15 months old sika deer in different time among four groups (P>0.05). From the whole experimental period, the growth performance of group Ⅳ was better than other three groups. 2) Serum calcium level in group Ⅲ was significantly lower than that in groups Ⅰ and Ⅳ on the 30th day (P<0.05), but there was no significant difference among four groups on the other time points (the 1st day, the 60th day and the 83rd day) (P>0.05). As the extension of experimental time, serum calcium level in groups Ⅰ, Ⅱ and Ⅲ had no significant change (P>0.05), but the group Ⅳ showed a gradually upward trend, and obtained the highest value of 2.415 nmol/L on the 83rd day which significantly higher than the value of 2.280 nmol/L on the 1st day (P<0.05). There was no significant difference in serum phosphorus level among different groups on the same time point (P>0.05), and the serum phosphorus level in each group had no significant change on different time points (P>0.05). Serum magnesium level in group Ⅰ was significantly higher than that in groups Ⅲ and Ⅳ on the 1st day (P<0.05), and significantly higher than that in group Ⅲ on the 30th day (P<0.05). As the extension of experimental time, serum magnesium level in groups Ⅰ, Ⅱ and Ⅲ had no significant change (P>0.05), but the group Ⅳ showed a trend of first increasing and then decreasing and it on the 30th day and the 60th day was significantly higher than that on the 1st day and the 83rd day (P<0.05). 3) Serum testosterone and estradiol levels showed no significant changes in each group (P>0.05), and serum parathyroid hormone, osteocalcin levels and alkaline phosphatase activity also showed no significant changes with the calcium and phosphorus levels increasing (P> 0.05). 4) During the whole experimental period, the digestibility of crude protein, crude fat, calcium and phosphorus in the group Ⅲ was the highest, and the digestibility of calcium and phosphorus was 51.08% and 67.71%, respectively. In conclusion, dietary calcium and phosphate levels have no significant effects on the serum sex hormone, calcium, magnesium and phosphate levels of 12 to 15 months old sika deer, but the nutrient digestibility is the highest in group Ⅲ, so it is recommended that diet with 1.16% calcium and 0.80% phosphorus is suitable for 12 to 15 months old sika deer.[ChineseJournalofAnimalNutrition, 2016, 28(12)：3952-3961]

sika deer; calcium; phosphorus; growth performance; serum biochemical indices; digestibility

10.3969/j.issn.1006-267x.2016.12.029

2016-05-16

吉林省重大科技攻關(guān)專項(xiàng)(20140203018NY)；吉林省科技發(fā)展計(jì)劃項(xiàng)目(20150204071NY)

孫偉麗(1982—)，女，黑龍江牡丹江人，博士研究生，從事特種經(jīng)濟(jì)動(dòng)物營養(yǎng)與飼養(yǎng)的研究。E-mail： tcsswl@163.com

*通信作者：李光玉，研究員，博士生導(dǎo)師，E-mail： tcslgy@126.com

S816

A

1006-267X(2016)12-3952-10