胡茂志，李文華，趙維芯，高 巍，嚴(yán)秋香，李紅英，崔桂友

(1.揚(yáng)州大學(xué)測試中心，江蘇揚(yáng)州 225009；2.揚(yáng)州大學(xué)旅游烹飪學(xué)院，江蘇揚(yáng)州 225009；3.揚(yáng)州大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院，江蘇揚(yáng)州 225009)

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小鼠感染豬源鼠傷寒沙門菌分離株的檢測

胡茂志1，李文華2，趙維芯2，高 巍3，嚴(yán)秋香1，李紅英1，崔桂友2

(1.揚(yáng)州大學(xué)測試中心，江蘇揚(yáng)州 225009；2.揚(yáng)州大學(xué)旅游烹飪學(xué)院，江蘇揚(yáng)州 225009；3.揚(yáng)州大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院，江蘇揚(yáng)州 225009)

小鼠對鼠傷寒沙門菌感染的檢測分析有助于沙門菌致病機(jī)理的研究。從揚(yáng)州市某屠宰場豬胴體表面采樣分離出了一株沙門菌，通過生化鑒定及血清型分析，判斷該菌株為鼠傷寒沙門菌。藥物敏感性分析表明，該菌株對氨芐青霉素高度耐藥，而對頭孢類等藥物敏感。動物試驗結(jié)果表明，腹腔注射5×105CFU/只的劑量即可致死小鼠，1×104CFU/只的劑量感染后，雖然不能致死小鼠，但能引起小鼠肝臟和脾臟的病理損傷和炎癥反應(yīng)，臟器系數(shù)升高，肝臟抗氧化系統(tǒng)紊亂；細(xì)菌在小鼠體內(nèi)的定殖能力較強(qiáng)，4周以后肝臟和脾臟中仍能分離到；感染小鼠血清生化指標(biāo)(ALT、AST、ALP、TP、ALB)異常，部分細(xì)胞因子(IFN-γ和TNF)升高。說明該菌株能誘導(dǎo)脾臟中T淋巴細(xì)胞的活化。通過以上分析，對該分離菌株的生物學(xué)特性有了初步的了解。

鼠傷寒沙門菌；分離鑒定；生物學(xué)特性

沙門菌(Salmonella)是人和動物最主要的食源性病原菌之一[1]。目前已鑒定出2500多種血清型。據(jù)統(tǒng)計，在世界各國的細(xì)菌性食物中毒中，沙門菌常列榜首。在我國，根據(jù)國家衛(wèi)生計生委辦公廳公布的2013年-2014年全國食物中毒事件通報顯示，沙門菌所致細(xì)菌性食物中毒位居食物中毒首位。世界衛(wèi)生組織(WHO)將沙門菌列入具有嚴(yán)重危害和中等危害的食物傳播性病原菌。

帶菌食品動物和污染蛋類是引起人類沙門菌病的主要原因[2]，肉用動物屠宰、加工等環(huán)節(jié)是引起食品帶菌的主要原因之一。歐洲食品安全局(European food safety authority,EFSA)就2011年歐盟95548人沙門菌病例的來源和趨勢研究發(fā)現(xiàn)，豬肉和豬肉制品中沙門菌污染僅次于雞肉和火雞肉[3]。我國不同地區(qū)的超市和農(nóng)貿(mào)市場豬肉中沙門菌污染率也較高[4-5]。因此，了解豬肉中沙門菌的污染情況，有助于沙門菌疾病的早期控制和預(yù)防。鼠傷寒沙門菌宿主范圍廣，可感染人、嚙齒類動物和禽類等，小鼠是其研究的常用模型。在長期的進(jìn)化過程中，沙門菌逐步演化出了適合自身的逃逸機(jī)制，從而在機(jī)體內(nèi)定殖并引起致病[6]。本研究針對揚(yáng)州市某屠宰場豬胴體進(jìn)行樣品采集，分離出一株鼠傷寒沙門菌菌株，并對其生化特性、藥物敏感性和對小鼠的致病性等進(jìn)行了分析。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實驗動物 6周齡～7周齡C57BL/6小鼠，購自揚(yáng)州大學(xué)比較醫(yī)學(xué)中心。

1.1.2 主要試劑 緩沖蛋白胨水(Buffered peptone water,BPW)干粉、XLT4培養(yǎng)基干粉、XLT4瓊脂添加劑、RV(Rappaport vassiliadis)肉湯培養(yǎng)基干粉為美國Becton Dickinson 公司產(chǎn)品；酵母提取物、胰蛋白胨為英國OXOID公司產(chǎn)品；API 20E生化鑒定試劑盒為法國梅里埃公司產(chǎn)品；沙門菌屬60種診斷血清為寧波天潤生物藥業(yè)有限公司產(chǎn)品；丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)測定試劑盒為南京建成生物工程研究所產(chǎn)品；熒光素標(biāo)記的抗小鼠CD 分子單抗CD4-PE、CD69-FITC、CD3-FITC、CD8a-APC，Mouse inflammation kit 為美國Becton Dickinson公司產(chǎn)品；NH4Cl(10×)紅細(xì)胞裂解液為自己配置。

1.1.2 主要儀器 VITEK 2Compact全自動細(xì)菌鑒定藥敏分析儀為法國Biomerieux(生物梅里埃)公司產(chǎn)品；7170A型全自動生化分析儀為日本日立公司產(chǎn)品；5417R型臺式冷凍離心機(jī)為德國Eppendorf公司產(chǎn)品；Cary 5000紫外-可見-近紅外吸收光譜儀為美國Varian公司產(chǎn)品。

1.2 方法

1.2.1 細(xì)菌分離與鑒定 從揚(yáng)州市某屠宰場豬胴體表面采集樣品，沙門菌的分離鑒定參照文獻(xiàn)[7-8]方法進(jìn)行。用API 20E生化鑒定試劑盒對LB平板上生長的菌落進(jìn)行生化鑒定，具體方法參考說明書進(jìn)行，所得出的7位數(shù)字代碼，查詢數(shù)據(jù)庫。確認(rèn)為沙門菌屬后進(jìn)行血清型鑒定，具體方法參考國家標(biāo)準(zhǔn)(GB4789.4-2010)進(jìn)行。

1.2.2 藥物敏感性試驗 用VITEK-2Compact AST-GN13藥敏卡檢測超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(extended-spectrum beta-lactamase,ESBLs)和藥物敏感性，具體方法參照說明書進(jìn)行。

1.2.3 分離菌的小鼠感染試驗

1.2.3.1 小鼠的致死性試驗 挑取沙門菌單個菌落接種LB液體培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜。用滅菌PBS洗滌細(xì)菌沉淀，2730r/min離心5min。洗滌3次后，用適量的滅菌PBS稀釋沉淀。調(diào)整菌液濃度。分別按照5×104、5×105、5×106、5×107CFU/只的劑量，腹腔注射6周齡C57BL/6小鼠，觀察小鼠的死亡情況。對照組腹腔注射等體積的滅菌PBS。

1.2.3.2 供病變觀察的小鼠感染試驗 6周齡C57BL/6雌性小鼠48只，隨機(jī)分為2組。試驗組腹腔注射1×105CFU/mL的沙門菌分離株(100μL/只)。對照組腹腔注射等體積的滅菌PBS。

1.2.3.3 小鼠組織病理切片觀察 在感染3周后，采集肝臟和脾臟，進(jìn)行組織病理切片和蘇木素-伊紅(hematoxylin-eosin,HE)染色觀察。

1.2.3.4 血清學(xué)分析 將小鼠摘除眼球取血，全血置于37℃水浴10min，3500r/min離心10min，取上清液置于離心管中，置-20℃冰箱保存?zhèn)溆谩Ｑ逯泄缺D(zhuǎn)氨酶(alanine transaminase,ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(aspartate transaminase,AST)、堿性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、總蛋白(total protein,TP)和白蛋白(albumin,ALB)含量采用全自動生化分析儀檢測。血清中白細(xì)胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、IL-10、單核細(xì)胞趨化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein,MCP-1)、干擾素-γ(interferon-γ,IFN-γ)、腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor,TNF)和IL-12P70用流式細(xì)胞儀檢測。

1.2.3.5 肝臟中氧化指標(biāo)分析 MDA和SOD分別采用巴比妥酸法(thibabituric acid,TBA)和黃嘌呤

氧化酶法(羥胺法)測定，具體參照說明書進(jìn)行，用紫外-可見-近紅外吸收光譜儀檢測。

1.2.3.6 沙門菌的定殖分析 每組各取6只小鼠，無菌取其脾臟、肝臟，稱重，加入1mL無菌的PBS徹底研磨，取100μL研磨液進(jìn)行10倍稀釋，選取3個合適的稀釋度，每個稀釋度取100μL涂布LB平板，每個稀釋度做3個重復(fù)，取其平均值。37℃培養(yǎng)16h～24h后，計數(shù)細(xì)菌菌落。

1.2.3.7 脾臟中T淋巴細(xì)胞的活化分析 無菌采集小鼠脾臟細(xì)胞，制備單細(xì)胞懸液，計數(shù)。同時標(biāo)記CD4-PE、CD69-FITC和CD8-APC，4℃避光孵育20min后，加入紅細(xì)胞裂解液裂解，再用PBS 洗滌2次后，上流式細(xì)胞儀檢測。

2 結(jié)果

2.1 分離菌的生化試驗鑒定結(jié)果

用革蘭陰性菌生化鑒定試劑盒鑒定結(jié)果表明，該分離株產(chǎn)H2S，尿素酶陰性，β-半乳糖苷酶陰性，能發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣，甘露醇、甘露糖利用陽性，確定為沙門菌屬。經(jīng)進(jìn)一步血清學(xué)鑒定表明，該分離菌為鼠傷寒沙門菌。在透射電鏡下，細(xì)菌呈橢圓形短桿狀，有長絲狀鞭毛(圖1)。

圖1 細(xì)菌的透射電鏡觀察
Fig.1 Transmission microscopy observation ofSalmonella

2.2 分離菌的藥物敏感性試驗

VITEK 2Compact系統(tǒng)分析表明，該分離株對哌拉西林/三唑巴坦、頭孢他啶、頭孢三嗪、頭孢平、頭孢唑啉、頭孢替坦二鈉、氨曲南、亞胺培南、厄他培南、妥布霉素、左氧氟沙星、阿米卡星、慶大霉素、復(fù)方新諾明等藥物高度敏感；對氨芐青霉素/青霉素烷砜鈉、呋喃妥因等中度敏感；而對氨芐青霉素耐藥。

2.3 分離菌對小鼠的致死性試驗結(jié)果

將該沙門菌分離株按照不同劑量腹腔注射感染小鼠后結(jié)果表明，5×107CFU/只劑量組12h內(nèi)即全部死亡；5×106CFU/只劑量組從感染后第2天開始死亡，5d后全部死亡；而5×105CFU/只劑量組到第3天開始死亡，7d后全部死亡；5×104CFU/只劑量組小鼠狀態(tài)仍較好，無死亡發(fā)生。對照組小鼠狀態(tài)良好。表明該鼠傷寒沙門菌分離株具有較強(qiáng)的致病性。

2.4 感染后小鼠肝臟和脾臟病理切片觀察

相對于對照組，感染組小鼠的肝臟腫大，表面粗糙，散在出血點；感染組脾臟腫大，質(zhì)地柔軟，邊緣鈍圓，被膜緊張，呈喑紅色或者黑紅色。經(jīng)過組織病理切片和HE染色(圖2和圖3)，在顯微鏡下，細(xì)胞核呈藍(lán)色；細(xì)胞漿、肌肉、結(jié)締組織、紅細(xì)胞和嗜伊紅顆粒呈不同程度的紅色。肝臟觀察發(fā)現(xiàn)，對照組肝細(xì)胞清晰，感染組肝臟內(nèi)出現(xiàn)壞死灶，肝細(xì)胞裂解，淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞(macrophages,Mφs)浸潤。脾臟觀察結(jié)果表明，對照組脾臟淋巴小結(jié)清晰，而感染組脾臟腫大，炎性細(xì)胞浸潤明顯。

A.對照組；B.感染組
A.Control；B.Infected group

圖2 小鼠肝臟組織病理切片
Fig.2 Pathological section of mouse livers

A.對照組；B.感染組
A.Control；B.Infected group

圖3 小鼠脾臟組織病理切片
Fig.3 Pathological section of mouse spleens

2.5 感染后小鼠血清生化指標(biāo)分析

從表1中可以看出:①感染組小鼠血清中ALT 含量均高于對照組(P<0.01)，并且第2周達(dá)到高峰，之后逐漸降低;②感染組小鼠血清中AST含量在感染后前3周均高于對照組(P<0.01)，并且第2周達(dá)到高峰，之后降低;③感染組小鼠血清中ALP含量均低于對照組(P<0.01)，但隨著時間的延長，呈現(xiàn)遞增趨勢;④感染組小鼠血清中TP含量在感染后前3周均明顯低于對照組(P<0.01)，第4周與對照組無顯著差異；⑤感染組小鼠血清中ALB含量均顯著低于對照組(P<0.01)。

2.6 感染后小鼠血清中細(xì)胞因子分析

從表2中可以看出，對照組小鼠血清中各種細(xì)胞因子含量均低于檢測限(20pg/mL)。在沙門菌感染組中，IL-6含量第1周達(dá)到112.17pg/mL，之后低于檢測限；MCP-1和IFN-γ含量均第2周達(dá)到高峰，然后降低；TNF第3周達(dá)到高峰，之后降低。IL-10和IL-12P70均低于檢測限。

2.7 感染后肝臟中MDA和SOD分析

經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析表明，沙門菌感染后，感染組MDA含量均高于對照組(P<0.01)，但與感染時間無相關(guān)性。感染組SOD含量在第1周明顯高于對照組(P<0.01)，然后逐漸降低(表3)。

表1 小鼠血清中ALT含量分析結(jié)果Table 1 Contents of ALT in mouse sera U/L

表2 小鼠血清中細(xì)胞因子分析Table 2 The cytokine contents in mouse sera pg/mL

表3 肝臟中MDA和SOD含量動態(tài)分析結(jié)果Table 3 The dynamic assay of MDA and SOD contents in livers of mice mgprot

2.8 感染后沙門菌在小鼠體內(nèi)的定殖情況

從表4中可看出，沙門菌感染后，小鼠肝臟和脾臟中能明顯地分離到沙門菌，7d達(dá)到高峰(肝臟中約為注射劑量的13倍，脾臟中約為60倍)，然后隨著時間的延長，細(xì)菌數(shù)量逐漸降低，第4周時仍然接近注射劑量。而對照組自始至終未分離到細(xì)菌。說明該沙門菌分離株能夠在體內(nèi)存活并繁殖。

表4 沙門菌在小鼠體內(nèi)的定殖分析結(jié)果Table 4 Salmonella colonization in the liver and spleen of mice 104 CFU/g

2.9 感染后小鼠脾臟中T細(xì)胞活化分析

從表5分析結(jié)果表明，沙門菌感染后，CD4+/CD8+T細(xì)胞比率升高。并且感染組CD4+和CD8+T細(xì)胞的活化情況均明顯高于對照組(P<0.01)。

表5 小鼠脾臟T細(xì)胞亞群分析結(jié)果Table 5 T lymphocyte subsets in splenocytes of mice

3 討論

豬對多種血清型的沙門菌易感，亞臨床感染豬可以攜帶沙門菌，雖不呈現(xiàn)任何癥狀，但能加重疾病的傳播[2]。2006年-2007年，歐盟對13個成員國屠宰場中豬胴體擦拭樣品調(diào)查發(fā)現(xiàn)，沙門菌污染中主要為鼠傷寒沙門菌[9]。Arguello H等[7]分別在2004年-2006年和2009年-2010年期間對西班牙4家屠宰場的豬胴體調(diào)查發(fā)現(xiàn)，沙門菌分離率較高，并且鼠傷寒沙門菌是主要血清型之一。在中國，侯小剛等[10]隨機(jī)抽取四川省某屠宰場胴體肉樣調(diào)查發(fā)現(xiàn)，污染的沙門菌中鼠傷寒沙門菌也是優(yōu)勢血清型之一。本研究從揚(yáng)州某屠宰場豬胴體擦拭樣品中分離并鑒定出一株鼠傷寒沙門菌，進(jìn)一步驗證了鼠傷寒沙門菌的污染較為普遍。

鼠傷寒沙門菌的宿主極其廣泛，染菌的人、家禽、家畜及鼠類是該病的主要傳染源，其主要通過污染的食物和水經(jīng)口傳播，引起胃腸炎等疾病。鼠傷寒沙門菌能夠逃避機(jī)體防御系統(tǒng)，并在體內(nèi)生存，造成持續(xù)感染[11]。沙門菌感染的嚴(yán)重程度取決于細(xì)菌毒力、感染劑量和宿主免疫系統(tǒng)的遺傳結(jié)構(gòu)[2]。本試驗利用該分離株感染小鼠發(fā)現(xiàn)，5×105CFU/只的劑量腹腔注射即可導(dǎo)致小鼠死亡，1×104CFU/只的劑量雖不能致死小鼠，但能引起明顯的組織損傷，說明該菌株具有較強(qiáng)的致病性。沙門菌的耐藥性復(fù)雜多樣，已經(jīng)成為全球關(guān)注的焦點[12]。頭孢類藥物和第3代氟喹諾酮類是目前臨床抗沙門菌感染的首選藥，該分離株的藥敏試驗結(jié)果也說明了這一點。

病原菌感染后往往會引起小鼠血清生化指標(biāo)的改變。AST/ALT是氨基酸降解過程中的重要轉(zhuǎn)氨酶，是判斷肝臟受損的重要指標(biāo)[13]。本試驗中，小鼠感染沙門菌后，血清中ALT和AST活性水平顯著升高，可能是由于肝臟受損、細(xì)胞結(jié)構(gòu)破壞或膜通透性增加所致。另外，AST/ALT濃度先升后降，說明小鼠肝臟受損后有恢復(fù)的趨勢。血清中的ALP主要來源于肝臟和骨骼，是生物體代謝的關(guān)鍵酶之一[13]。試驗中，該酶活性明顯降低，推測可能與肝、腎小管和小腸黏膜等細(xì)胞傷害，或堿性磷酸酶從膽管排除出現(xiàn)障礙等有關(guān)。在感染的4周內(nèi)，ALP含量不斷回升，說明沙門菌感染可能導(dǎo)致肝細(xì)胞受損或腸道活力的減弱，但隨時間延長，由于沙門菌的調(diào)節(jié)和小鼠的自我修復(fù)與調(diào)整，肝細(xì)胞或腸道功能逐漸恢復(fù)。血清白蛋白是血清總蛋白的一部分，由肝臟合成。血清TP、ALB的含量反映了機(jī)體蛋白的吸收和代謝狀況[14]。本試驗中，ALB迅速降低，表明小鼠的肝細(xì)胞受到損害，合成蛋白的能力下降。血清中ALP、TP和ALB水平先降后升，說明肝臟功能部分恢復(fù)，與血清AST/ALT檢測結(jié)果相一致。

細(xì)胞因子在啟動和調(diào)節(jié)針對沙門菌的先天性和獲得性免疫反應(yīng)中起關(guān)鍵作用。在機(jī)體發(fā)生炎癥時，單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞、B細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞等都能分泌產(chǎn)生MCP-1，且MCP-1對單核/巨噬細(xì)胞具有特異性趨化激活作用[15]。IFN-γ主要由Th1細(xì)胞分泌，是強(qiáng)有力的吞噬細(xì)胞和中性粒細(xì)胞的激活物。TNF-α主要由活化的巨噬細(xì)胞產(chǎn)生，同時又是巨噬細(xì)胞的主要激活劑。另外，TNF-α也是IFN-γ清除細(xì)菌的增強(qiáng)劑。本試驗中，沙門菌感染小鼠后，血清中MCP-1、IFN-γ和TNF-α均顯著升高，并且呈現(xiàn)先升后降的趨勢，說明沙門菌感染初期，小鼠對沙門菌的免疫應(yīng)答活躍；而后降低，反映了沙門菌為了在細(xì)胞內(nèi)生存而逃逸殺傷的結(jié)果。

自由基理論認(rèn)為，許多疾病的發(fā)生和轉(zhuǎn)歸與自由基有關(guān)，在物理性、化學(xué)性和生物性致病因素的作用下，產(chǎn)生的氧自由基可引起細(xì)胞發(fā)生膜脂質(zhì)過氧化作用，從而導(dǎo)致組織損傷。生物體內(nèi)存在著自由基的清除系統(tǒng)，如抗氧化酶系統(tǒng)(如SOD)等。MDA是膜脂過氧化的終產(chǎn)物之一，其含量可反映細(xì)胞受損程度，特別是細(xì)胞膜的損傷。SOD是機(jī)體內(nèi)最主要的抗氧化酶之一，其活性的變化直接影響細(xì)胞內(nèi)氧自由基和其終末產(chǎn)物脂質(zhì)過氧化物的含量。正常生理條件下，自由基的產(chǎn)生與清除處于動態(tài)平衡。據(jù)報道，腸炎沙門菌感染三黃雞后，脾臟SOD活性先降后升，而MDA含量先升后降[16]。本研究中，沙門菌感染小鼠后，肝臟細(xì)胞生物膜自由基代謝中產(chǎn)生的MDA升高，說明肝臟細(xì)胞受損，而SOD先升后降的趨勢說明，一方面機(jī)體為了抵抗沙門菌的傷害，逐漸被誘導(dǎo)合成了相應(yīng)的氧化酶，降低細(xì)胞內(nèi)氧化劑對細(xì)胞的傷害。另一方面，沙門菌為了在細(xì)胞內(nèi)存活，通過分泌效應(yīng)蛋白調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)的抗氧化過程。這也證明了機(jī)體細(xì)胞與沙門菌之間的斗爭是一個復(fù)雜的過程。

免疫細(xì)胞的活化是免疫反應(yīng)成功的一個標(biāo)志。適度活化的T淋巴細(xì)胞具有增強(qiáng)機(jī)體免疫監(jiān)視、消除體內(nèi)有毒有害因子的功能，是機(jī)體執(zhí)行免疫效應(yīng)功能的基礎(chǔ)。靜息的T淋巴細(xì)胞極少表達(dá)CD69，而活化的T淋巴細(xì)胞則可上調(diào)表達(dá)，所以CD69可作為T細(xì)胞早期活化的標(biāo)志[17]。本試驗發(fā)現(xiàn)，沙門菌感染后，小鼠脾臟中T淋巴細(xì)胞被活化，并且CD4+/CD8+T細(xì)胞比例升高，說明機(jī)體針對沙門菌感染產(chǎn)生了獲得性免疫應(yīng)答。

本研究通過豬肉中沙門菌的分離鑒定及其生物學(xué)特性分析，為控制和預(yù)防豬沙門菌感染提供了參考。

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Detection of Mice Infected with Salmonella typhimurium Isolated from Pigs

HU Mao-zhi1,LI Wen-hua2,ZHAO Wei-xin2,GAO Wei1,YAN Qiu-xiang1,LI Hong-ying1,CUI Gui-you2

(1.TestingCenter,YangzhouUniversity，Yangzhou，Jiangsu，225009，China；2.CollegeofTourism&Cuisine，YangzhouUniversity，Yangzhou，Jiangsu，225009，China；3.CollegeofVeterinaryMedicine，YangzhouUniversity，Yangzhou，Jiangsu，225009，China)

Analysis of mice infected withSalmonellatyphimuriumwill benefit the understanding of bacterial pathogenic mechanism.In this experiment,aS.typhimuriumstrain was isolated from the pig carcass in Yangzhou slaughterhouse and identified by biochemical and serologic assays.The drug sensitivity assay indicated that this isolate was sensitive to cephalosporins,but not to ampicillin.It was found that the mice could be killed after 5×105CFU per mouse intraperitoneal injection.After intraperitoneally injected with the dose of 1×104CFU per mouse,no dead mice were found,but the obvious pathological damages and inflammation reactions in liver and spleen were shown.The colonization ability of this isolate was strong and it could still be isolated from liver and spleen four weeks after infection.Besides,the organ coefficients,the MDA and SOD levels in liver and the ALT,AST,ALP,TP and ALB levels in serum were significantly changed.What's more,the concentrations of cytokines (IFN-γ and TNF) in serum were elevated and this isolate also could induce the activation of T lymphocytes in spleen.Through the above analysis,we can get a preliminary understanding of the biological characteristics of this isolate.

Salmonellatyphimurium; isolation; biological property

2015-07-21

國家自然科學(xué)基金項目(31372414)；江蘇省動物預(yù)防醫(yī)學(xué)重點實驗室開放課題(K13040)

胡茂志(1976-)，男，山東臨沂人，副研究員，博士，主要從事微生物學(xué)和免疫學(xué)研究。

S852.612

A

1007-5038(2016)01-0052-06