鄭永仁 劉傳鳳 王礴 楊曉密

【摘 要】 目的：[JP2]探討人參皂苷（Rg1）對2型糖尿病大鼠血糖的調(diào)控作用。方法：選取SD雄性大鼠120只，體重（200±20）g，采用高糖高脂高鹽飲食和鏈脲佐菌素結合的方法建立大鼠2型糖尿病模型；實驗設對照組、模型組、鹽酸吡格列酮組，人參皂苷（Rg1）高低劑量組；血糖儀測定血糖濃度，ELISA測定胰島素含量；結果：給予高糖高脂喂養(yǎng)和腹腔注射鏈脲佐菌素（STZ）造模后，造模動物血糖濃度、胰島素含量顯著高于空白對照組（P<001 ）；給藥6周治療后，吡格列酮組血糖濃度、胰島素含量顯著低于模型組（P<005）；與模型對照組比較，給藥6周治療后人參皂苷（Rg1）低、中、高劑量組血糖濃度、胰島素含量呈現(xiàn)不同程度降低，其中人參皂苷（Rg1）高劑量組、人參皂苷（Rg1）中劑量組血糖濃度、胰島素含量明顯低于模型組（P<005），并且人參皂苷（Rg1）高劑量組、人參皂苷（Rg1）中劑量組動物體征基本正常，體重增長明顯快于模型組。結論：人參皂苷（Rg1）對2型糖尿病大鼠血糖濃度和胰島素含量均有調(diào)節(jié)作用。[JP]

【關鍵詞】 2型糖尿?。蝗藚⒃碥?；鏈脲佐菌素

【中圖分類號】R2856 【文獻標志碼】 A 【文章編號】1007-8517（2016）20-0018-02

糖尿病是一種常見的內(nèi)分泌系統(tǒng)疾病，主要是由于體內(nèi)的胰島素的缺乏，或是胰島素本身質(zhì)量及其他原因造成其不能發(fā)揮正常生理作用，引起以糖代謝為主的糖、脂肪、蛋白質(zhì)三大物質(zhì)代謝混亂的一種綜合病癥。糖尿病又會引發(fā)一系列的與之相關的眾多健康問題，其各種并發(fā)癥及心腦血管合并癥不斷危害公眾健康，給個人、家庭及社會帶來了沉重負擔[1]。

據(jù)世界衛(wèi)生組織統(tǒng)計，全球患有糖尿病的人群高達28億，近年來，糖尿病患者數(shù)以驚人的速度在迅速增長。最近流行病學調(diào)查顯示，國內(nèi)20歲以上人群糖尿病患病率達到97%[2]，按照這個推算，現(xiàn)在我國糖尿病患者總人數(shù)是9240多萬，而糖尿病潛在已達到15億，糖尿病患者中，95%以上為2型糖尿病[2]。2型糖尿病為慢性病，至今沒有有效的治愈方法。在2型糖尿病的發(fā)生中，胰島素抵抗（Insulin Resistance，IR）是最主要的誘因。IR又稱胰島素敏感性下降，通常指胰島素介導的葡萄糖利用率降低。IR 是2型糖尿病主要發(fā)病機制之一，并伴隨著糖尿病發(fā)生、發(fā)展的全過程，其在肥胖、高血壓和血脂異常等多種代謝疾病中亦可存在。流行病學研究表明，人群中約有25% 的個體患有IR， 而2 型糖尿?。═2DM）患者中IR 患病率超過80%。多年來，諸多學者圍繞IR 的發(fā)生原因、發(fā)病機制、臨床特點、診斷方法和治療策略開展了多層面、多方位的研究，以揭示其與糖尿病的關系，并已從中發(fā)現(xiàn)了更多、更為有效的治療靶點，為日趨增多的糖尿病患者帶來福音[3] 。

三七含有人參皂苷Rb1、Rb2、 Rg1、Rg2等多種成分，其中人參皂苷Rg1（簡稱Rg1）是三七的主要成分，含量較高，具有抗炎癥、抗氧化損傷、神經(jīng)保護和抗纖維化等作用 [4-5] 。本實驗通過建立大鼠IR動物模型，給予Rg1通過，檢測大鼠血糖和胰島素的改變，探討三七皂苷（Rg1）是否具有降低血糖和增加胰島素的敏感性作用。

1 材料與方法

11 實驗動物與實驗環(huán)境 SD雄性大鼠120只，體重（200±20）g，由昆明醫(yī)科大學實驗動物學部提供，動物生產(chǎn)許可證號：SCXK（滇）2011-0004；大鼠高糖高脂飼料由昆明醫(yī)科大學實驗動物學部提供，飼料生產(chǎn)許可證號：SCXK（滇）2011-0005。實驗環(huán)境，云南中醫(yī)學院實驗動物室SPF實驗室，使用許可證：SYXK（滇）K2011-011。

12 主要試劑與儀器 人參皂苷Rg1（含量95%，昆明醫(yī)科大學生化教研室提供）。鹽酸吡格列酮片，石藥集團遠大（大連）制藥有限公司產(chǎn)品，批號：H20052682；鏈脲佐菌素（Sterptozotocin，STZ），美國Sigma公司產(chǎn)品，批號：CAS1883-66-4；檸檬酸、檸檬酸三鈉，由云南澤浩公司提供，批號：T20110105；胰島素ELISA檢測試劑盒：由上海前塵生物科技有限公司公司生產(chǎn)，批號：S20050104；JY2001電子分析天平，上海浦春計量儀器有限公司； 血糖儀（羅氏血糖儀型號：GN21258252）。

13 處理與分組

131 T2DM模型制作和分組 120只SD雄性大鼠適應性飼養(yǎng)3d，隨機抽取12只作為空白對照組，給予標準飼料及飲水正常飼喂；其余108只大鼠喂高脂高糖飼料（30%脂肪、50%碳水化合物和20%蛋白），并每隔1天加喂30%蔗糖水和15%鹽水用于制作大鼠T2DM模型；連續(xù)喂飼高糖髙脂8周后，108只大鼠按55mg/kg腹腔注射1%的檸檬酸鈉緩沖液配制的鏈脲佐菌素溶液（STZ）；3d后108只大鼠禁食12 h，尾靜脈取血測量血糖，選取高糖高脂和腹腔注射1%STZ造模并且血糖≥111 mmol/L的68只大鼠作為2型糖尿病模型，并右眼眶取血加抗凝血劑離心獲得血漿測定胰島素濃度，胰島素濃度和對應的血糖值和作為給藥前的檢測值，淘汰造模不成功的大鼠；對造模成功大鼠隨機選60只，隨機分為5組，每組12只，即模型對照組、陽性對照吡格列酮組、人參皂苷Rg1低、中、高劑量組。分組后所有實驗大鼠飼喂普通飼料和普通水。

132 給藥 鹽酸吡格列酮片劑量為25mg/kg，用純化水配制成混懸液，按10mL/100g體重容積每日灌胃給予1次，連續(xù)給藥6周。

人參皂苷（Rg1）低劑量20mg/kg、中劑量40mg/kg、高劑量80mg/kg均用純化水配制成溶液，按10mL/100g體重容積每日分別灌胃給予對應劑量樣品1次，連續(xù)給藥6周；空白對照組和模型對照組按10mL/100g體重容積每日灌胃給予純化水1次，連續(xù)灌胃6周。

14 測定指標與統(tǒng)計分析

141 血糖和胰島素測定 藥物治療給藥6周，末次給藥后禁食12h，各組動物尾靜脈取血測量血糖值，左眼眶取血加抗凝血劑離心獲得血漿ELISA測定胰島素含量。

142 動物體征觀察 每日觀察觀測動物體征變化，每周對所有動物稱重一次，并對結果進行統(tǒng)計分析。

143 統(tǒng)計學分析 各項實驗數(shù)據(jù)以均數(shù)加減標準差（x[TX-*3]±s）表示，采用SPSS150 統(tǒng)計軟件對測定數(shù)據(jù)統(tǒng)計進行單因素方差分析及最小顯著差法進行組間兩兩比較，P<005為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

21 給藥前后血糖和胰島素含量檢測結果 實驗結果顯示，給予高糖高脂喂養(yǎng)和腹腔注射STZ造模后，血糖濃度、胰島素含量顯著高于空白對照組（P<001 ）；給藥6周治療后，吡格列酮組血糖濃度、胰島素含量顯著低于模型組（P<005）；與模型對照組比較，給藥6周治療后人參皂苷（Rg1）低、中、高劑量組血糖濃度、胰島素含量呈現(xiàn)不同程度降低，其中人參皂苷（Rg1）高劑量組、人參皂苷（Rg1）中劑量組血糖濃度、胰島素含量顯著低于模型組（P<005）。

22 動物體征變化 實驗過程中，與空白組比較，模型動物組血糖維持在較高水平，明顯表現(xiàn)多飲、多食、多尿，普遍出現(xiàn)毛發(fā)灰暗、體重增長緩慢，其中部分大鼠出現(xiàn)瞎眼、爛尾、反應遲鈍，目光呆滯無神等現(xiàn)象。陽性對照吡格列酮組和人參皂苷（Rg1）大鼠中多飲、多食、多尿現(xiàn)象明顯比模型組減少，動物活動基本正常，未出現(xiàn)瞎眼、爛尾、反應遲鈍，目光呆滯無神等現(xiàn)象。

23 造模給藥后動物體重變化 實驗結果顯示，高糖高脂喂養(yǎng)和腹腔注射STZ造模后，各造模組動物體重增長明顯緩慢，其中模型組最為明顯；陽性對照吡格列酮組和人參皂苷低、中、高劑量組動物雖然增長緩慢，但隨著給予治療，體重增長較模型組快。見圖1。

結論：人參皂苷（Rg1）對2型糖尿病大鼠血糖濃度和胰島素含量均有調(diào)節(jié)作用。

3 討論

人參皂苷（Rg1）藥理作用廣泛，目前研究其相關方面的文獻報道很多。 本實驗研究結果表明人參皂苷（Rg1）有明顯降低2型糖尿病大鼠血糖濃度、胰島素含量的作用，其作用機制尚不清楚，但此實驗證實人參皂苷（Rg1）有降低血糖濃度和抑制造模后大鼠體內(nèi)胰島素含量的作用，提示人參皂苷（Rg1）對2型糖尿病大鼠作用于胰島素分泌和血糖代謝有關，值得進一步研究。而人參皂苷（Rg1）作為三七皂苷的主要成分，且目前三七已經(jīng)能夠規(guī)?；笈糠N植，如能進一步證實Rg1對2型糖尿病的藥理作用和臨床療效，對于三七的開發(fā)，推動三七產(chǎn)業(yè)的發(fā)展，進一步幫助藥農(nóng)脫貧致富藥，推進中藥現(xiàn)代化進程、產(chǎn)業(yè)化發(fā)展等方面有重要社會意義和經(jīng)濟意義。

參考文獻

[1]陳灝珠.實用內(nèi)科學[M].北京：人民衛(wèi)生出版社， 2009：949-957.

[2]YangwY，Lu JM，Weng JP，et a1.Prevalence ofDiabetes amongMen and Women in China[J].New England Journal of Medicine，2010，362：1090-1101.

[3]賈偉平.胰島素抵抗在2型糖尿病發(fā)病機制中的作用[J].診斷學理論與實踐，2009，8（3）：233-236.

[4]Hatada EN， Krappmann D，Scheidereit C.NF-kappa B and the innate immune response[J]. Curr Opin Immunol，2000，12：52-58.

[5]Liu WJ， Ma LQ， Liu WH， et al. Inhibition of hepatic glycogen synthesis by hyperhomocysteinemia mediated by TRb3 [J]. Am J Pathol，2011， 178（4）：1489-1499.

（編輯：陶希睿）