岳鼎鼎，楊嚴(yán)鷗，萬(wàn)全,卜遠(yuǎn)富，姚峰，陳路

(安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，安徽合肥230036)

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米粉蛋白替代商品膨化飼料對(duì)黃鱔肝臟抗氧化指標(biāo)的影響

岳鼎鼎，楊嚴(yán)鷗，萬(wàn)全,卜遠(yuǎn)富，姚峰，陳路

(安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，安徽合肥230036)

以冰鮮魚和膨化飼料2種原料各占1/2質(zhì)量混合所得飼料作為對(duì)照組，再以米粉蛋白分別按25%、50%、75%和100%比例替代膨化飼料，研究了米粉蛋白的替代對(duì)黃鱔(Monopterusalbus)肝臟抗氧化能力的影響。結(jié)果顯示，隨著米粉蛋白替代比例上升，肝臟超氧化物歧化酶(SOD)、過(guò)氧化氫酶(CAT)、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)活力和丙二醛(MDA)含量先上升后下降，總谷胱甘肽(T-GSH)、還原型谷胱甘肽(GSH)含量先顯著下降再上升，氧化型谷胱甘肽(GSSG)含量各組無(wú)顯著變化，而替代組維生素E含量均顯著低于對(duì)照組(P<0.05)。結(jié)果表明，隨著米粉蛋白的替代比例上升，黃鱔肝臟抗氧化能力顯著下降，但當(dāng)完全替代時(shí)，抗氧化能力又有所提高。

黃鱔(Monopterusalbus)；米粉蛋白；替代；抗氧化

黃鱔(Monopterusalbus)是我國(guó)重要的淡水名優(yōu)養(yǎng)殖魚類，養(yǎng)殖中一般使用黃鱔專用膨化飼料與冰鮮魚混合投喂。由于膨化飼料價(jià)格較高，一般會(huì)考慮使用其他飼料替代膨化飼料[1～3]。這種替代需要考慮替代量的問(wèn)題，過(guò)多的替代會(huì)造成生長(zhǎng)下降[4]，同時(shí)也要考慮替代對(duì)魚體抗氧化能力的影響，因?yàn)椴贿m宜的替代會(huì)降低魚體抗氧化能力，導(dǎo)致免疫力下降[5，6]。米粉蛋白是大米加工過(guò)程的副產(chǎn)品，具有抗原性低[7]、蛋白含量高[8]的特點(diǎn)，是一種優(yōu)良的植物性蛋白。目前，有關(guān)探討米粉蛋白在水產(chǎn)飼料中應(yīng)用的研究尚無(wú)報(bào)道，而且主要是從生長(zhǎng)和飼料利用的角度評(píng)定替代效果[4,9]，對(duì)抗氧化能力影響的研究非常缺乏。因此，本研究采用米粉蛋白替代黃鱔商品飼料，探討其對(duì)黃鱔肝臟主要抗氧化指標(biāo)的影響，以期為黃鱔配合飼料的研究提供基礎(chǔ)資料。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)魚購(gòu)自合肥市肥西縣野生黃鱔收購(gòu)站，挑選個(gè)體大小均勻、健康無(wú)傷者放入水族箱中暫養(yǎng)1周，暫養(yǎng)期間投喂對(duì)照組飼料。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)共分5個(gè)處理，每個(gè)處理4個(gè)重復(fù)。試驗(yàn)魚在由20 個(gè)塑料水族箱(60cm×60cm×65cm)組成的循環(huán)水養(yǎng)魚系統(tǒng)中進(jìn)行飼養(yǎng)。養(yǎng)殖用水為曝氣自來(lái)水，使用沸石和活性炭過(guò)濾凈化水體，水深3～6cm，用真空泵提水；使用羅茨鼓風(fēng)機(jī)通過(guò)連接有散氣石的通風(fēng)管間斷性充氧。

設(shè)計(jì)魚糜(鮮重)和膨化飼料含量各為50%的飼料作為對(duì)照組，在此基礎(chǔ)上，用米蛋白粉分別替代對(duì)照組飼料中的膨化飼料的25%、50%、75%、100%，共5種試驗(yàn)飼料，飼料主要生化成分見(jiàn)表1。制作飼料時(shí)，將新鮮鳙魚切塊，用小型粉碎機(jī)攪成魚糜，膨化飼料粉碎過(guò)篩，米粉蛋白過(guò)篩，再按比例將三者混合均勻并揉成團(tuán)狀，放入水族箱中。

表1 飼料主要生化成分 %

1.3 飼養(yǎng)管理

正式試驗(yàn)前24h停止投喂試驗(yàn)魚，每個(gè)養(yǎng)殖箱隨機(jī)放入30尾。養(yǎng)殖期間，每天18:30喂食1次(以半小時(shí)內(nèi)吃完為準(zhǔn))，持續(xù)30d。每天8:00和19:00各換水1次，水溫為(24±1.5)℃。節(jié)能日光燈提供照明，光照時(shí)間8:00～20:00，瞬時(shí)開(kāi)斷。

1.4 樣本采集

養(yǎng)殖試驗(yàn)結(jié)束后，饑餓黃鱔24h，再隨機(jī)取10尾處死，取肝臟置于液氮罐中保存。

1.5 樣品分析

超氧化物歧化酶(SOD)、過(guò)氧化氫酶(CAT)、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)活性及丙二醛(MDA)、總谷胱甘肽(T-GSH)、還原型谷胱甘肽(GSH)、氧化型谷胱甘肽(GSSG)、維生素E(VE)含量均采用南京建成生物有限公司試劑盒測(cè)定，測(cè)定詳細(xì)步驟請(qǐng)查閱試劑盒說(shuō)明書。

1.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，采用SPSS 19.0數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素方差分析(One-Way ANOVA)，用Duncan’s多重比較組間差異,顯著性表示P<0.05。

2 結(jié)果與分析

如表2所示，隨著替代水平的增加,SOD、CAT活性和MDA含量先上升后下降，呈拋物線變化，并在50%替代水平時(shí)顯著最高(P<0.05)。100%替代時(shí)，SOD活性與對(duì)照組無(wú)顯著差異(P>0.05)，CAT活性與MDA含量顯著低于對(duì)照組(P<0.05)。

隨著替代水平的增加,GSH-Px活性先上升后下降，呈拋物線變化，并在50%替代水平時(shí)顯著最高(P<0.05)。T-GSH、GSH含量變化趨勢(shì)與之相反，隨替代水平的增加而先下降后上升，75%替代水平組顯著最低(P<0.05)，GSSG含量在各組間差異不顯著(P>0.05)，而各替代組的VE含量均顯著低于對(duì)照組(P<0.05)。

表2 不同米粉蛋白替代水平下的黃鱔肝臟抗氧化指標(biāo)

注：同行數(shù)據(jù)上標(biāo)字母不同表示組間存在顯著差異(P<0.05)。

3 討論

據(jù)卜遠(yuǎn)富等[4]報(bào)道，米蛋白粉分別替代對(duì)照組飼料中的膨化飼料的25%、50%、75%、100%量時(shí)各組黃鱔無(wú)死亡現(xiàn)象，成活率無(wú)差異；黃鱔生長(zhǎng)率分別為對(duì)照組的84.2%、59.4%、52.4%以及40.7%?？梢?jiàn)隨著替代水平的增加，生長(zhǎng)速度明顯下降。

SOD是生物體內(nèi)一種重要的抗氧化酶，能夠清除生物體內(nèi)超氧陰離子自由基[10，11]，而CAT能清除SOD在歧化超氧陰離子自由基(O2 -)過(guò)程中產(chǎn)生的過(guò)氧化氫(H2O2)[12]。本研究中，隨著替代升高，肝臟中SOD和CAT活力呈拋物線變化，替代50%時(shí)顯著高于對(duì)照組，然后逐漸下降，而用豆粕分別替代飼料30%、50%和70%的魚粉時(shí)，黃顙魚(Pelteobagrusfulvidraco)肝臟SOD、CAT活性均顯著低于對(duì)照組[13]，用1︰1的大豆蛋白和肉骨粉替代魚粉時(shí)，虹鱒(Oncorhynchusmykiss)血液SOD、CAT的活性也是隨著替代增加而顯著下降[14]，本研究變化趨勢(shì)與上述研究不一致，這可能與替代方式不同有關(guān)。本研究中，替代只針對(duì)占飼料配比50%的膨化飼料，按計(jì)算對(duì)整個(gè)飼料替代比例相對(duì)較小，可能脅迫壓力相對(duì)較小，在一定程度上會(huì)激發(fā)魚體的SOD、CAT活性，但當(dāng)替代比例加大，SOD和CAT開(kāi)始下降，完全替代時(shí)CAT 顯著低于對(duì)照組(P<0.05)，這又與對(duì)黃顙魚等的研究結(jié)果一致。

MDA是機(jī)體內(nèi)過(guò)多的氧自由基攻擊生物膜的多不飽和脂肪酸形成的脂質(zhì)過(guò)氧化物[15]。本研究中，黃鱔肝臟的MDA含量隨著替代比例增加顯著升高，這與一般情況下脅迫加劇時(shí)魚類MDA含量會(huì)升高[16]的研究結(jié)論相一致，但替代比例進(jìn)一步升高(75%)時(shí)MDA開(kāi)始下降，完全替代時(shí)則顯著低于對(duì)照組。這可能與替代比例增大時(shí)生長(zhǎng)速度過(guò)慢、代謝下降有關(guān)，具體原因還有待進(jìn)一步研究。

GSH-Px具有清除脂類氫過(guò)氧化物和減輕有機(jī)氫過(guò)氧化物對(duì)機(jī)體的損傷的作用[17]。本研究中，GSH-Px活性隨替代先上升后下降，這表明一定的脅迫可以激發(fā)魚類GSH-Px活性升高[18]，但脅迫加劇則導(dǎo)致GSH-Px活性下降。GSH是生物體內(nèi)抗氧化防御系統(tǒng)中重要的小分子活性寡肽,具有抗氧化、清除氧自由基等作用[19]，本研究中，GSH含量隨替代比例增加而降低，這說(shuō)明替代造成了抗氧化能力減弱。但在完全替代時(shí)又有上升趨勢(shì)，這同樣可能與黃鱔生長(zhǎng)速度過(guò)慢有關(guān)。

VE是脂溶性抗氧化劑，在體內(nèi)參與清除氧自由基終止脂肪過(guò)氧化反應(yīng)[20]。本研究中，替代導(dǎo)致VE含量均顯著下降，但各替代組VE含量無(wú)顯著差異，即VE含量沒(méi)有受到替代量的影響，其原因還有待進(jìn)一步研究。

替代水平對(duì)不同抗氧化指標(biāo)影響有差異，總體而言，隨著替代量的增加，魚體肝臟的抗氧化能力顯著下降，但當(dāng)完全替代時(shí)，魚體抗氧化能力有所恢復(fù)，這可能與完全替代時(shí)魚體生長(zhǎng)過(guò)于緩慢有關(guān)。

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2016-08-08

安徽省科技富民強(qiáng)縣專項(xiàng)行動(dòng)計(jì)劃資金項(xiàng)目(2069999)。

岳鼎鼎(1993-)，男，碩士生，研究方向?yàn)樗a(chǎn)動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)與飼料。通信作者:楊嚴(yán)鷗,cdyyo@126.com。

S917;Q959.482

A

1673-1409(2016)27-0036-03

[引著格式]岳鼎鼎，楊嚴(yán)鷗，萬(wàn)全，等.米粉蛋白替代商品膨化飼料對(duì)黃鱔肝臟抗氧化指標(biāo)的影響[J].長(zhǎng)江大學(xué)學(xué)報(bào)(自科版)，2016，13(27)：36～38，50.