王巧華，李小明，段宇飛

（1.華中農(nóng)業(yè)大學(xué)工學(xué)院，湖北 武漢 430070；2.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 國家蛋品加工技術(shù)研發(fā)分中心，湖北 武漢 430070）

基于CUVE-PLS-DA的雞蛋新鮮度在線檢測分級

王巧華1,2，李小明1，段宇飛1

（1.華中農(nóng)業(yè)大學(xué)工學(xué)院，湖北 武漢 430070；2.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 國家蛋品加工技術(shù)研發(fā)分中心，湖北 武漢 430070）

針對目前雞蛋新鮮度檢測技術(shù)方法存在勞動強(qiáng)度大、檢測精度低、分級效率不足等缺陷，本研究在4 800 枚/h的禽蛋傳輸機(jī)上搭建了可見-近紅外透射光譜（501～1 000 nm）在線檢測裝置，動態(tài)采集雞蛋透射光譜數(shù)據(jù)，并建立光譜信息與雞蛋哈夫值等級的偏最小二乘判別模型。采用3∶1原則對雞蛋樣本進(jìn)行隨機(jī)劃分，其中校正集169 個，驗(yàn)證集57 個，通過比較多種光譜預(yù)處理方法以及兩種特征波長選擇方法，得出標(biāo)準(zhǔn)正態(tài)變換預(yù)處理方法和多模式共識方法能夠有效地提高模型的正確率、運(yùn)算效率和預(yù)測能力，優(yōu)化模型后的校正集和驗(yàn)證集準(zhǔn)確率分別為92.31%、91.23%。結(jié)果表明本實(shí)驗(yàn)建立的可見-近紅外光譜透射光譜檢測方法能夠?qū)﹄u蛋的新鮮度進(jìn)行無損、智能、在線檢測分級。

雞蛋；新鮮度；在線檢測；偏最小二乘判別法；多模式共識法

雞蛋因其易消化、口感佳，并含有大量的蛋白質(zhì)、脂肪、維生素等豐富營養(yǎng)物質(zhì)而深受廣大消費(fèi)者的喜愛。雞蛋新鮮度會隨著時間的推移逐步下降，營養(yǎng)成分逐漸丟失[1]。根據(jù)農(nóng)業(yè)部標(biāo)準(zhǔn)雞蛋品質(zhì)新鮮度在B級以下

不建議消費(fèi)者食用，而目前我國蛋品市場和蛋品加工企業(yè)在線智能無損檢測技術(shù)尚未成熟，因此對雞蛋新鮮度的快速無損檢測具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。

光譜分析技術(shù)是近幾年發(fā)展起來的一種高效、無損、智能檢測技術(shù)，并已經(jīng)在石油、農(nóng)業(yè)、醫(yī)療、工業(yè)等領(lǐng)域得到了成功的應(yīng)用[2-7]。國內(nèi)外眾多研究者對雞蛋的新鮮度、氣室高度、蛋白高度等方面開展了相關(guān)的研究和探索。侯卓成等[8]基于傅里葉近紅外漫反射光譜分析技術(shù)，運(yùn)用無偏最小二乘法建立了光譜信息與雞蛋的氣室高度、氣室直徑和蛋白高度3 個指標(biāo)的定量分析模型，所得出的回歸模型具有較好的準(zhǔn)確性和預(yù)測能力。林顥等[9]提出了一種基于近紅外光譜漫反射結(jié)合一類支持向量機(jī)技術(shù)，建立了一種鑒別新鮮蛋和非新鮮蛋的判別模型，其模型預(yù)測準(zhǔn)確率為80%。Soltani等[10]基于介電光譜技術(shù)和機(jī)器視覺技術(shù)，運(yùn)用神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)、決策樹、支持向量機(jī)3 種方法建立了光譜信息與雞蛋新鮮度的回歸模型，得出驗(yàn)證集的相關(guān)系數(shù)分別為0.817、0.906、0.920。Giunchi等[11]基于傅里葉近紅外光譜漫反射分析技術(shù)，運(yùn)用偏最小二乘法建立了光譜信息與雞蛋氣室高度、蛋白高度、哈室單位的定量回歸模型，得出了驗(yàn)證集的相關(guān)系數(shù)分別為0.722、0.789、0.676。

上述研究表明了雞蛋的新鮮度能夠通過近紅外光譜技術(shù)進(jìn)行定量和定性的分析，但是大部分研究者都是基于靜態(tài)分析，而動態(tài)研究雞蛋品質(zhì)的大多為機(jī)器視覺技術(shù)、生物傳感器技術(shù)等，少有應(yīng)用光譜技術(shù)的，針對目前我國市場、企業(yè)檢測雞蛋新鮮度勞動強(qiáng)度大、效率低、準(zhǔn)確率不高等缺點(diǎn)，本研究提出了一種基于多模式共識結(jié)合偏最小二乘判別分別（consensus uninformative variable elimination-partial least squares-discriminant analysis，CUVE-PLS-DA）的可見-近紅外透射光譜在線檢測雞蛋新鮮度等級的方法，為蛋品品質(zhì)的光譜檢測實(shí)際應(yīng)用提供了技術(shù)支撐[12-14]。

1 材料與方法

1.1 材料

當(dāng)日產(chǎn)的新鮮雞蛋，購于湖北省武漢市九峰山養(yǎng)雞場。供試樣本226 枚，雞蛋的質(zhì)量50～76 g；雞蛋的短軸直徑42～48 mm；雞蛋的長軸直徑53～65 mm。將所有雞蛋樣本均貯藏在溫度24 ℃、相對濕度65%的恒溫恒濕生化培養(yǎng)箱內(nèi)。

1.2 儀器與設(shè)備

本實(shí)驗(yàn)光譜采集裝置如圖1所示，主要由計(jì)算機(jī)、USB2000+便攜式光譜儀（美國Ocean Optics公司）、光電開關(guān)、準(zhǔn)直鏡、暗箱、雞蛋運(yùn)輸傳送裝置、光亮度調(diào)節(jié)箱、可編程控制器等部件構(gòu)成。雞蛋通過4 800 枚/h的傳送裝置運(yùn)輸?shù)焦怆妭鞲衅鞅挥|發(fā)的位置，控制器收到傳感器的觸發(fā)信號后將其轉(zhuǎn)換并反饋到電腦光譜采集軟件，從而通過軟件驅(qū)動光譜儀采集雞蛋的透射光譜。

電子天平 上海精密科學(xué)儀器有限公司。

圖1 雞蛋透射光譜在線采集裝置Fig.1 On-line transmission spectral acquisition device for eggs

1.3 方法

1.3.1 雞蛋原始透射光譜

實(shí)驗(yàn)每3 d從恒溫恒濕箱里隨機(jī)挑選雞蛋樣品30 枚，將雞蛋進(jìn)行編號并依次放入ZYJD330蛋品運(yùn)輸機(jī)上；光源選用LS-3000型的鹵素?zé)粼?；軟件設(shè)置積分時間100 ms、平滑次數(shù)10 次、平滑寬度為5 nm。采集的雞蛋原始透射光譜圖（光譜采集范圍500～1 000 nm），如圖2所示。

圖2 雞蛋的原始透射光譜Fig.2 Original transmission spectra of eggs

1.3.2 新鮮度常規(guī)檢測方法

通過上述采集裝置采集完雞蛋的光譜信息后，將雞蛋放入精度0.01 g的電子天平稱量，然后破殼，利用精度0.01 mm的數(shù)顯游標(biāo)卡尺測量環(huán)繞蛋黃邊境不同點(diǎn)的蛋白高度3 次，取平均值作為最終的蛋白高度，最后利用標(biāo)準(zhǔn)的哈夫（Ha）值公式計(jì)算雞蛋的新鮮度，并按照美國農(nóng)業(yè)部的劃分標(biāo)準(zhǔn)將其分為3 類：AA級（Ha≥72）、A級（60＜Ha＜72）、B級及以下（Ha≤60）。

式中：h為蛋白平均高度/mm；w為雞蛋質(zhì)量/g。

1.3.3 樣本集劃分方法

實(shí)驗(yàn)中不同新鮮度的雞蛋樣本226 個，按照3∶1原則將其隨機(jī)劃分校正集和驗(yàn)證集，其中校正集的樣本個數(shù)為169 個，用來建立新鮮度判別模型，而剩余的57 個雞蛋作為驗(yàn)證集用來檢驗(yàn)?zāi)Ｐ偷倪m用性及預(yù)測精度。

1.3.4 預(yù)處理和建模方法

雞蛋在線無損檢測的過程中需要一個運(yùn)行穩(wěn)定、運(yùn)算效率快、準(zhǔn)確率高的預(yù)測模型，本研究嘗試了PLS-DA法和K最鄰近（K-nearest neighbor，KNN）算法對雞蛋新鮮度進(jìn)行分級。

KNN算法的思路是未知類別樣本點(diǎn)去尋找與附近已知K個樣本點(diǎn)進(jìn)行比較，K個樣本點(diǎn)與未知樣本點(diǎn)某一類相似的個數(shù)最多，則歸結(jié)為該類，其中的相似是以歐式距離作為評判的依據(jù)，越小越相似，樣本點(diǎn)K的選擇是根據(jù)模型的交叉驗(yàn)證準(zhǔn)確率為依據(jù)。

PLS-DA是一個線性分類方法，是結(jié)合偏最小二乘回歸的性質(zhì)和判別分類技術(shù)的一種方法[15]。該方法的基本實(shí)現(xiàn)過程如下：

首先在原始變量X中提取與Y變量（M×1維矩陣，M代表校正集樣本數(shù)目，1列則代表著每一個樣本類別標(biāo)簽，本研究將類別標(biāo)簽分為3 類，1代表AA級，2代表A級，3代表B級及以下）協(xié)方差關(guān)聯(lián)比較大的主成分X1。

將原始Y變量轉(zhuǎn)換成虛設(shè)矩陣Y1（Y1為M×3維矩陣），即將原始標(biāo)簽轉(zhuǎn)換成二進(jìn)制的0和1標(biāo)簽，將樣本的歸屬類標(biāo)簽置為1，在剩余兩類的標(biāo)簽都置為0。

建立X1與Y1的偏最小二乘回歸模型，根據(jù)模型的運(yùn)算將得到每一個樣本的預(yù)測值Yc（M×3），樣本將歸屬于Yc最接近于1的那一類。

校證集的正確率能夠有效說明該判別模型的準(zhǔn)確性，驗(yàn)證集的正確率能夠表明該模型的預(yù)測能力及推廣性。校證集和預(yù)測集的正確率越高，說明本模型的精確度和預(yù)測能力越高。

在線采集雞蛋透射光譜的過程中，會受到機(jī)器的振動、高頻隨機(jī)噪聲、基線漂移、樣品不均勻、光散射等各種外界噪聲影響，因此有必要對原始透射光譜進(jìn)行濾波和校正，從而有利于提高模型的精度[16-18]。比較無預(yù)處理（NONE）、SG濾波（Savitzky-Golay，SG）、一階導(dǎo)數(shù)（first derivative，F(xiàn)D）、標(biāo)準(zhǔn)正態(tài)變換（standard normal variate，SNV）、多元散射校正（multiple scatter correction，MSC）不同種預(yù)處理的方法結(jié)合PLS-DA法建立了定性分級模型，并使用驗(yàn)證集來進(jìn)行驗(yàn)證模型。

1.3.5 特征波段提取方法

在采集雞蛋透射光譜的過程中，會受到各種各樣隨機(jī)的外界條件所干擾，所獲得的光譜信息中會存在一些基線漂移、冗雜、噪聲等無用信息。選擇合適的方法去剔除這些無用的信息，不僅能夠有效的改善模型的準(zhǔn)確率，而且也能夠極大地提高模型的運(yùn)算效率。

1.3.5.1 無信息變量消除法

無信息變量消除（uninformative variable elimination，UVE）法是Center最早提出的篩選特征波長的有效算法，該算法核心目的是淘汰一些與因變量關(guān)聯(lián)非常小的波長[19]。該算法的具體實(shí)現(xiàn)是首先向原始光譜數(shù)據(jù)添加等同行列大小一定數(shù)量級的（本實(shí)驗(yàn)采用大小0～10-8）隨機(jī)噪聲，并將其稱之為無信息的變量，然后每次剔除一個樣本，將剩余的樣本訓(xùn)練集建立偏最小二乘回歸模型，從而能夠得到每一個回歸模型的回歸系數(shù)β，通過可信度Cj判斷是否保留該波長點(diǎn)。

綜上所述，超細(xì)鼻胃鏡不僅能夠有效減低對患者的刺激程度，還可以在消化道狹窄性病變中對胃腸道進(jìn)行更全面、細(xì)致的檢查，配合相關(guān)器械還可進(jìn)行內(nèi)鏡下活檢與治療，在內(nèi)鏡下診療領(lǐng)域發(fā)揮獨(dú)特優(yōu)勢，應(yīng)當(dāng)廣泛推廣應(yīng)用于各內(nèi)鏡治療中心。

式中：βj為第j點(diǎn)波長的所有模型回歸系數(shù)，j=1，2，3，...1 000；mean（βj）表示平均回歸系數(shù)；std（βj）表示方差。滿足如下的條件，能夠有效地剔除光譜數(shù)據(jù)中的一些無信息的變量，也為最后的波長篩選結(jié)果。|Ck|＞max|Cm|，k取1～500，m取501～1 000。

1.3.5.2 多模式共識法

單一方法挑選的特征波段往往受到多種因素、參數(shù)的影響，而且或許會在不同的條件下選取的特征波段結(jié)果有所差別，因此本研究針對于此缺陷嘗試將多模式共識的理論應(yīng)用到特征波段的選取。CUVE的實(shí)現(xiàn)算法流程圖如圖3所示。

圖3 多模式共識法篩選波長的流程圖Fig.3 Flow chart of CUVE for wavelength selection

首先從總校正集樣本X（m×n）隨機(jī)選取約50%樣本X1（m×n），建立無信息變量消除-PLS（uninformative variables elimination，UVE-PLS）篩選波長；然后重復(fù)運(yùn)行上述步驟200 次，每一次都會有波長的篩選結(jié)果；記錄每一個波長點(diǎn)被選擇的頻率f，最后通過十折交互驗(yàn)證后的模型正確率來判斷最佳的頻率閾值，根據(jù)據(jù)頻率閾值，篩選出最后保留的波長點(diǎn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 樣本集的劃分結(jié)果

對樣本集隨機(jī)分選后的結(jié)果見表1。

表1 樣本的分類情況Table1 Sample classification

2.2 光譜數(shù)據(jù)建模及預(yù)處理結(jié)果分析

圖4 KNN算法K的選擇Fig.4 K Selection for KNN algorithm

KNN算法K的合適選擇對于模型的預(yù)測能力和推廣至關(guān)重要，本研究使用交叉驗(yàn)證的錯誤率來進(jìn)行K值的選取，根據(jù)圖4能夠看出當(dāng)K值為9的時候，此時的交叉驗(yàn)證錯誤率最低。通過K=9的KNN算法與PLS-DA去預(yù)測雞蛋新鮮度等級進(jìn)行比較，PLS-DA其校正集的準(zhǔn)確率和驗(yàn)證集的準(zhǔn)確率均高于KNN模型對應(yīng)的值。

表2 KNN和PLS-DA兩種建模方法比較Table2 Comparison of two modeling methods KNN and PLS-DA

KNN算法是通過領(lǐng)域空間去尋找相似樣本的個數(shù)，而在一些樣本離散度較大、樣本等級個數(shù)不均勻的情況下，往往所獲得的結(jié)果不夠理想。而PLS-DA是多元回歸、典型相關(guān)性、主成分分析集于一體的現(xiàn)代分析統(tǒng)計(jì)方法，比較適合復(fù)雜的數(shù)據(jù)分析，根據(jù)表2兩種建模方法結(jié)果的比較，最終選取了PLS-DA作為最終的建模方法。

表3 不同預(yù)處理方法所建立的PLS-DA模型結(jié)果Table3 Results of PLS-DA models based on different spectral preprocessing methods

由表3可以看出，不同預(yù)處理的方法所獲得的判別準(zhǔn)確率有所差別，而且經(jīng)過預(yù)處理后的模型預(yù)測準(zhǔn)確率均比無預(yù)處理的結(jié)果要高。經(jīng)比較，標(biāo)準(zhǔn)正態(tài)變換預(yù)處理更有效地去除了光譜噪聲、減弱顆粒大小、光程長短變化、表面散射等隨機(jī)因素對光譜的影響，經(jīng)其處理后所獲得的模型預(yù)測效果最優(yōu)。

2.3 特征波段提取與分析

2.3.1 無信息變量消除法挑選特征波段的結(jié)果

由表3可知，經(jīng)過預(yù)處理后的模型預(yù)測集正確率和預(yù)測能力仍然不足，模型的推廣性有待優(yōu)化。對光譜進(jìn)行特征波段提取能夠有效地濾除與雞蛋新鮮度沒有關(guān)聯(lián)或者是關(guān)聯(lián)微乎其微的波段，同時也能夠優(yōu)化判別模型，提高在線檢測分級的效率[20-24]。

圖5 基于無信息變量法選出的特征波長Fig.5 Selection of characteristic wavelengths by UVE

基于無信息變量法選出的特征波長見圖5。采取無信息變量后篩選出22 個波長，通過這些波長點(diǎn)建立PLS-DA模型，最后得到校正集的正確率為89%，預(yù)測集的正確率為88%，可見通過無信息變量法篩選后波長進(jìn)行建模能有效提高模型的預(yù)測能力。

2.3.2 多模式共識法挑選特征波段的結(jié)果

由于無信息變量法添加的為隨機(jī)噪聲，每一次使用該方法隨機(jī)噪聲大小數(shù)值都會有所變化，因此經(jīng)常會得到不同的波長篩選結(jié)果，這樣選取的波長變量往往有些不牢靠。針對此缺陷，本實(shí)驗(yàn)嘗試將多模式共識的方法應(yīng)用于波長篩選[25]。

圖6 最優(yōu)頻率閾值Fig.6 Optimization of frequency threshold

從圖6可以看出，f≥2的時候交叉驗(yàn)證后的模型準(zhǔn)確率最高，最后將按照f≥2的判定準(zhǔn)則選出如圖7中的39 個特征波長用來建立PLS-DA模型，建立模型的校正集準(zhǔn)確率為92.31%，預(yù)測集的準(zhǔn)確率為91.23%。

圖7 通過多模式共識法所選的特征波長Fig.7 Wavelength variables selected by CUVE

通過與無信息變量消除法相比，多模式共識采用隨機(jī)和組合的方式建立多個子模型，選出來的波長點(diǎn)更具有可靠性，有效地提取了特征波段，該方法篩選波段用來建模得到更好的檢測結(jié)果。

3 結(jié) 論

在比較多種光譜預(yù)處理方法對模型結(jié)果影響的基礎(chǔ)上，確定了SNV為最佳預(yù)處理，模型校正集的準(zhǔn)確率為86.39%，驗(yàn)證集的準(zhǔn)確率為84.21%，能夠有效地提高模型的準(zhǔn)確率和預(yù)測能力。將多模式共識理論應(yīng)用于雞蛋透射光譜的波長選擇，基于多模式共識法挑選特征波段后的建模效果優(yōu)于無信息消除變量法。

通過多模式共識法將500 個波長縮減到39 個特征波長，用39 個特征波長建模，最終得到的模型校正集的準(zhǔn)確率為92.31%，預(yù)測集的準(zhǔn)確率為91.23%，滿足了在線高效檢測要求，為可見-近紅外光譜用于雞蛋新鮮度在線檢測提供了技術(shù)支持。

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[25] 韓清娟, 張夢軍, 曹文軒, 等. 基于多模式共識的近紅外光譜波長的選擇方法[J]. 分析科學(xué)學(xué)報(bào), 2013, 29(6): 758-762.

On-Line Detection and Classification of Egg Freshness Based on Consensus Uninformative Variable Elimination-Partial Least Squares-Discriminant Analysis (CUVE-PLS-DA)

WANG Qiaohua1,2, LI Xiaoming1, DUAN Yufei1
(1. College of Engineering, Huazhong Agricultural University, Wuhan 430070, China; 2. National Egg Processing Technology Research and Development Sub-centers, Huazhong Agricultural University, Wuhan 430070, China)

Although there are many methods available to detect egg freshness at present, they have shortcomings including laboriousness, low precision and low classification efficiency. An on-line monitoring device based on visible/near infrared spectroscopy (501–1 000 nm) was fitted to the 4 800 eggs per hour egg transport machine for the purpose of dynamically collecting transmittance spectral data for eggs. The collected data were used to establish a partial least squares discriminant (PLS-DA) model for the Haugh unit value of eggs. A total of 226 egg samples were randomly divided into two set: calibration set (n = 169) and validation set (n = 57). By compared different spectral pretreatments and two wavelength selection methods, it was found that standard normal variate (SNV) transformation and multi-pattern consensus method could effectively improve the accuracy, efficiency and predictive ability of the PLS-DA model. The final calibration and validation accuracy were 92.31% and 91.23%, respectively. This study showed that visible-near infared spectroscopy could be used as a real-time and non-destructive detection method to classify egg freshness.

egg; freshness; online; partial least squares; multi-pattern

10.7506/spkx1002-6630-201622028

TS253.7

A

1002-6630（2016）22-0187-05

王巧華, 李小明, 段宇飛. 基于CUVE-PLS-DA的雞蛋新鮮度在線檢測分級[J]. 食品科學(xué), 2016, 37(22): 187-191. DOI:10.7506/spkx1002-6630-201622028. http://www.spkx.net.cn

WANG Qiaohua, LI Xiaoming, DUAN Yufei. On-line detection and classification of egg freshness based on consensus uninformative variable elimination-partial least squares-discriminant analysis (CUVE-PLS-DA)[J]. Food Science, 2016, 37(22): 187-191. (in Chinese with English abstract) DOI:10.7506/spkx1002-6630-201622028. http://www.spkx.net.cn

2016-04-17

國家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目（31371771）；湖北省科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目（2015BBA172）；

“十二五”國家科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目（2015BAD19B05）；公益性行業(yè)（農(nóng)業(yè)）科研專項(xiàng)（201303084）

王巧華（1970—），女，教授，博士，研究方向?yàn)闄C(jī)電一體化、智能化檢測與控制、機(jī)器視覺。E-mail：wqh@mail.hzau.edu.cn