封云濤, 郭曉君, 劉中芳, 張潤(rùn)祥,庾 琴, 史高川, 范仁俊*

(1. 山西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所, 農(nóng)業(yè)有害生物綜合治理山西省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,太原 030031; 2. 山西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院棉花研究所, 運(yùn)城 044000)

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山西省蘋(píng)果園山楂葉螨對(duì)5種殺蟲(chóng)劑抗藥性監(jiān)測(cè)

封云濤1, 郭曉君1, 劉中芳1, 張潤(rùn)祥1,庾 琴1, 史高川2, 范仁俊1*

(1. 山西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所, 農(nóng)業(yè)有害生物綜合治理山西省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,太原 030031; 2. 山西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院棉花研究所, 運(yùn)城 044000)

為了明確山西省蘋(píng)果園山楂葉螨(AmphitetranychusviennensisZacher)對(duì)化學(xué)殺蟲(chóng)劑的抗性現(xiàn)狀及發(fā)展趨勢(shì),本文采用玻片浸漬法建立了山楂葉螨相對(duì)敏感種群對(duì)5種殺蟲(chóng)劑的敏感基線,連續(xù)3年(2013-2015年)監(jiān)測(cè)了采自山西省蘋(píng)果主產(chǎn)區(qū)運(yùn)城蘋(píng)果園的山楂葉螨對(duì)5種殺蟲(chóng)劑的抗性水平及變化動(dòng)態(tài)。監(jiān)測(cè)結(jié)果表明:田間監(jiān)測(cè)種群對(duì)阿維菌素和三唑錫均處于敏感性下降及低水平抗性階段,對(duì)噠螨靈和噻螨酮的抗性由低水平抗性升至中等水平抗性,對(duì)炔螨特處于低水平抗性。田間防治山楂葉螨時(shí),噠螨靈與噻螨酮應(yīng)淘汰不再使用,阿維菌素、三唑錫、炔螨特則應(yīng)注意減少用藥量及輪換用藥,以延緩產(chǎn)生更高水平的抗藥性。

山楂葉螨; 蘋(píng)果園; 敏感基線; 抗性監(jiān)測(cè)

山楂葉螨(AmphitetranychusviennensisZacher)[1],又名山楂紅蜘蛛,是我國(guó)落葉果樹(shù)上普遍發(fā)生的重要害螨之一[2],該害螨以成螨、若螨聚集在葉背面刺吸為害,受害葉片出現(xiàn)失綠小斑點(diǎn),隨后擴(kuò)大成片,嚴(yán)重時(shí)葉背變?yōu)楹稚?甚至枯焦脫落[3]。多年來(lái)對(duì)其主要以化學(xué)防治為主,由于長(zhǎng)期大量頻繁使用化學(xué)農(nóng)藥,致使山楂葉螨早在20世紀(jì)60-80年代就對(duì)內(nèi)吸磷和對(duì)硫磷等多種藥劑產(chǎn)生了抗藥性[4-6]。近年來(lái),山楂葉螨在山西省及全國(guó)多省發(fā)生嚴(yán)重[7-10],因此,有必要明確其對(duì)近年來(lái)生產(chǎn)上常用殺蟲(chóng)劑的抗性程度,以便指導(dǎo)生產(chǎn)上合理選用農(nóng)藥。

敏感毒力基線是獲得某個(gè)敏感純合子的昆蟲(chóng)種群對(duì)某種殺蟲(chóng)劑的毒力回歸線[11]。害蟲(chóng)抗藥性監(jiān)測(cè)是指導(dǎo)殺蟲(chóng)藥劑合理使用的重要依據(jù),也是害蟲(chóng)抗藥性研究中最基本的工作,任何一種抗性監(jiān)測(cè)方法都必須首先建立敏感毒力基線,作為一個(gè)參比的標(biāo)準(zhǔn)[12]。基于此,本文應(yīng)用玻片浸漬法建立了山楂葉螨對(duì)5種殺蟲(chóng)劑的相對(duì)敏感毒力基線,并以此為標(biāo)準(zhǔn),連續(xù)3年監(jiān)測(cè)了山西省運(yùn)城地區(qū)蘋(píng)果園山楂葉螨的抗性水平及變化動(dòng)態(tài),為抗性的早期預(yù)警及制定相應(yīng)的農(nóng)藥科學(xué)使用策略和抗性治理工作提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試藥劑

所用藥劑均為原藥:90.0%炔螨特(propargite, 湖北仙隆化工股份有限公司)、96.9%噠螨靈(pyridaben,山東聯(lián)合化工股份有限公司)、98.3%噻螨酮(hexythiazox, 江蘇常隆化工有限公司)、96.4%三唑錫(azocyclotin, 浙江華興化學(xué)農(nóng)藥有限公司)、96.2%阿維菌素(abamectin, 河北威遠(yuǎn)化工有限公司)。

1.2 供試種群

相對(duì)敏感種群:于2013年6月采自山東省果樹(shù)研究所蘋(píng)果樹(shù)上,未曾接觸過(guò)藥劑,在室內(nèi)用海棠葉片和嫩枝繼代飼養(yǎng)至今。飼養(yǎng)條件為溫度(25±1)℃,相對(duì)濕度65%～85%,光周期L∥D=16 h∥8 h。

田間種群:于2013年-2015年,每年6月-7月自山西省運(yùn)城市臨猗縣北景鄉(xiāng)西里村蘋(píng)果樹(shù)上采集,在室內(nèi)用海棠葉片飼養(yǎng)1～2代后進(jìn)行室內(nèi)毒力測(cè)定。

試蟲(chóng)來(lái)源地山西省運(yùn)城市處于我國(guó)西北黃土高原蘋(píng)果優(yōu)勢(shì)產(chǎn)業(yè)帶上,臨猗縣曾被列為國(guó)家蘋(píng)果生產(chǎn)重點(diǎn)縣。根據(jù)研究者的調(diào)查,運(yùn)城地區(qū)蘋(píng)果園一個(gè)生長(zhǎng)季平均用藥8～9次,每667 m2用藥總量達(dá)到5 kg,農(nóng)戶普遍用藥量達(dá)到規(guī)定要求的2 倍以上,其中殺螨劑歷史上用藥量較多的為噻螨酮和噠螨靈,近幾年使用較多的為阿維菌素、炔螨特、三唑錫,如:阿維菌素一個(gè)生長(zhǎng)季用藥2～4次,用藥量3 000～4 000倍;炔螨特一個(gè)生長(zhǎng)季用藥2次,用藥量1 500～2 000倍。

1.3 成螨的毒力測(cè)定

參照聯(lián)合國(guó)糧農(nóng)組織推薦的玻片浸漬法(slide-dip method)進(jìn)行[13]。將雙面膠帶剪成2～3 cm長(zhǎng),貼在載玻片的一端,用鑷子揭去雙面膠帶上的紙片,用零號(hào)毛筆挑選大小一致、體色鮮艷、行動(dòng)活潑的雌成螨,將其背部粘在雙面膠帶上,不要粘住螨足、螨須和口器,每片膠帶粘3～4行,每行大約粘1～20頭葉螨。在溫度為(26±1)℃、光周期L∥D=16 h∥8 h、相對(duì)濕度60%的光照培養(yǎng)箱中放置4 h后,用Olympus雙目解剖鏡觀察,嚴(yán)格剔除死亡或不太活潑以及體位不合適的葉螨個(gè)體。各藥劑原藥用丙酮溶解稀釋成不同濃度的母液,再用蒸餾水稀釋為供試濃度,先進(jìn)行預(yù)備試驗(yàn),在預(yù)備試驗(yàn)的基礎(chǔ)上再稀釋5～7個(gè)濃度,將帶螨玻片的一端浸入藥液中,輕輕搖動(dòng)5 s后取出,迅速用吸水紙吸干螨體及其周?chē)嘤嗟乃幰骸Ｔ诎咨杀P(pán)內(nèi)鋪一層濕潤(rùn)紗布,浸過(guò)藥液的玻片放置于大瓷盤(pán)內(nèi),在白色瓷盤(pán)上面再覆蓋一層濕潤(rùn)紗布以達(dá)到保濕的效果。以帶螨玻片浸漬清水作為對(duì)照,每個(gè)處理重復(fù)3～4次。24 h后在解剖鏡下檢查結(jié)果,分別記錄存活和死亡的葉螨數(shù)量。用毛筆輕觸螨體,以螨足不動(dòng)者為死亡,對(duì)照處理死亡率在10%以下為有效試驗(yàn)。

1.4 數(shù)據(jù)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)根據(jù)Probit幾率值分析法計(jì)算毒力回歸方程、LC50及95%置信限等。以各殺蟲(chóng)劑的LC50與相對(duì)敏感種群毒力基線的LC50進(jìn)行比較,計(jì)算抗性倍數(shù)(resistance ratio)?？剐运桨凑丈驎x良和吳益東報(bào)道的標(biāo)準(zhǔn)[14]劃分為敏感(RR<3),敏感性下降(3≤RR<5),低水平抗性(5≤RR<10),中等水平抗性(10≤RR<40),高水平抗性(40≤RR<160)和極高水平抗性(RR≥160)。

2 結(jié)果與分析

2.1 山楂葉螨相對(duì)敏感種群對(duì)5種殺蟲(chóng)劑的敏感基線

通過(guò)測(cè)定5種殺蟲(chóng)劑對(duì)山楂葉螨相對(duì)敏感種群的毒力,表明山楂葉螨對(duì)阿維菌素的敏感性最高,LC50為0.075 mg/L,對(duì)噠螨靈的敏感性次之,LC50為0.28 mg/L,對(duì)炔螨特和噻螨酮的LC50分別為24.9 mg/L和26.03 mg/L;對(duì)三唑錫敏感性最低,LC50為42.97 mg/L(表1)。

2.2 山楂葉螨運(yùn)城種群對(duì)5種殺蟲(chóng)劑的抗性水平

2013年-2015年,山西省運(yùn)城地區(qū)山楂葉螨田間種群對(duì)5種殺蟲(chóng)劑抗性監(jiān)測(cè)結(jié)果如表2 所示。連續(xù)3年的監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)表明,阿維菌素和三唑錫處于敏感性下降及產(chǎn)生低水平抗性階段,阿維菌素的抗性倍數(shù)由2013年的1.27倍,上升至2014年的3.07倍和2015年的5.60倍,三唑錫的抗性倍數(shù)由2013年的1.69倍,上升至2014年的5.89倍和2015年的5.84倍;噠螨靈和噻螨酮的抗性則由低水平抗性升至中等水平抗性,噠螨靈抗性倍數(shù)由2013年的5.44倍分別上升至10.92倍(2014年)和14.18倍(2015年),噻螨酮的抗性由2013年的5.52倍分別上升至7.98倍(2014年)和16.04倍(2015年);炔螨特處于低水平抗性,3年監(jiān)測(cè)的抗性倍數(shù)介于8.00～9.44倍之間。

表1 山楂葉螨相對(duì)敏感種群對(duì)5種殺蟲(chóng)劑的敏感基線

表2 2013-2015年山楂葉螨運(yùn)城種群對(duì)5種殺蟲(chóng)劑的抗性水平

3 結(jié)論與討論

本研究利用山楂葉螨相對(duì)敏感種群建立了對(duì)5種殺蟲(chóng)劑的敏感基線,結(jié)果表明,山楂葉螨對(duì)阿維菌素的敏感性最高,對(duì)三唑錫的敏感性最低。以測(cè)定的敏感基線為標(biāo)準(zhǔn),連續(xù)3年對(duì)山西省運(yùn)城地區(qū)蘋(píng)果園山楂葉螨的抗性監(jiān)測(cè)表明,5種殺蟲(chóng)劑中阿維菌素與三唑錫處于敏感性下降及產(chǎn)生低水平抗性階段,噠螨靈與噻螨酮由低水平抗性升至中等水平抗性,炔螨特3年均處于低水平抗性階段。因此,田間防治時(shí),噠螨靈與噻螨酮應(yīng)淘汰不再使用;阿維菌素、三唑錫、炔螨特則應(yīng)注意減少用藥量及輪換用藥,以延緩產(chǎn)生更高的抗藥性。

劉慧萍[15]2005年報(bào)道山西運(yùn)城種群對(duì)噠螨靈產(chǎn)生了低水平抗性,本研究中監(jiān)測(cè)表明噠螨靈已經(jīng)產(chǎn)生了中等水平抗性;劉金香等[16]2004年測(cè)定結(jié)果表明,山西運(yùn)城種群對(duì)阿維菌素和三唑錫仍處于相對(duì)敏感階段,本研究與之相比,雖然阿維菌素和三唑錫仍處于敏感性下降階段,但是致死中濃度LC50卻遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于劉金香等[16]測(cè)定的0.01 mg/L和81.59 mg/L,這些研究都表明了隨著用藥時(shí)間的增加,運(yùn)城地區(qū)山楂葉螨種群與10年前相比,敏感性下降了很多,這與運(yùn)城地區(qū)用藥歷史長(zhǎng),用藥水平高的情況相一致。

彭麗娟等[17]2015年報(bào)道陜西蘋(píng)果園山楂葉螨各田間種群對(duì)噠螨靈產(chǎn)生了13.29～69.63倍的中等至高水平抗性,對(duì)阿維菌素，多數(shù)田間種群尚處于敏感性下降階段;本研究監(jiān)測(cè)結(jié)果顯示,運(yùn)城種群對(duì)噠螨靈的抗性已由低水平抗性升至中等水平抗性,抗性最高達(dá)到14.18倍,對(duì)阿維菌素的抗性由2013年的1.27倍,上升至2014年的3.07倍和2015年的5.60倍,敏感性也處于下降階段,雖然兩種藥劑的整體抗性水平與彭麗娟等2015年報(bào)道的結(jié)果類(lèi)似,但由于抗性倍數(shù)來(lái)自于不同的敏感基線,因此,仍不能比較出不同地區(qū)或不同省份的山楂葉螨對(duì)同一藥劑的抗性水平,如果以彭麗娟等2015年報(bào)道中的噠螨靈、阿維菌素基線中LC50為標(biāo)準(zhǔn),本研究中的運(yùn)城種群對(duì)噠螨靈的抗性則全部為高水平及極高水平抗性,而阿維菌素也處于中等或高水平抗性。王洪濤等[18]2012年監(jiān)測(cè)發(fā)現(xiàn)山東省11個(gè)地區(qū)的蘋(píng)果全爪螨中有部分地區(qū)種群已經(jīng)對(duì)阿維菌素、噠螨靈、炔螨特和三唑錫產(chǎn)生了不同程度的抗藥性。

阿維菌素、噠螨靈、三唑錫和炔螨特是近些年來(lái)生產(chǎn)上大量使用的殺螨劑,在山西、陜西、山東等蘋(píng)果產(chǎn)區(qū)都有一定的用藥歷史,長(zhǎng)期用藥勢(shì)必導(dǎo)致害螨敏感性下降,抗藥性產(chǎn)生。因此,在今后的防治中,加強(qiáng)統(tǒng)一連續(xù)性的抗性監(jiān)測(cè)尤為重要,根據(jù)抗性監(jiān)測(cè)結(jié)果,合理使用各類(lèi)農(nóng)藥,不僅能延緩害螨的抗藥性產(chǎn)生,還能減少農(nóng)藥使用量。

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(責(zé)任編輯:楊明麗)

Resistance of Amphitetranychus viennensis Zacher to five insecticides in apple orchards in Shanxi Province

Feng Yuntao1, Guo Xiaojun1, Liu Zhongfang1, Zhang Runxiang1,Yu Qin1, Shi Gaochuan2, Fan Renjun1

(1.Institute of Plant Protection, Shanxi Academy of Agricultural Sciences, Shanxi Key Laboratory of Integrated Pest Management in Agriculture, Taiyuan 030031, China; 2. Institute of Cotton Research, Shanxi Academy of Agricultural Sciences, Yuncheng 044000, China)

In order to define the resistance levels ofAmphitetranychusviennensisZacher to the predominantly used insecticides, the field populations were collected from Shanxi Yuncheng apple orchards from 2013 to 2015, and the slide-dip method was applied to establish the baseline susceptibility and monitor the resistance ofA.viennensisfield populations to five insecticides. The field populations had a decline susceptibility and low level of resistance to abamectin and azocyclotin, and low to moderate resistance to pyridaben and hexythiazox, and low resistance to propargite. Theses results suggested that in order to slow down resistance development ofA.viennensisin this region, pyridaben and hexythiazox should be stopped using, abamectin, azocyclotin and propargite should be reduced and rotated with other insecticides.

Amphitetranychusviennensis; apple orchard; baseline susceptibility; resistance monitoring

2016-01-13

2016-02-29

公益性行業(yè)(農(nóng)業(yè))科研專(zhuān)項(xiàng)(201203038)

S 436.611

A

10.3969/j.issn.0529-1542.2016.06.034

致 謝：感謝山東省果樹(shù)研究所孫瑞紅研究員饋贈(zèng)山楂葉螨相對(duì)敏感種群。

* 通信作者 E-mail:rjfan@163.com