羅莎，王秋舉，陳玉珂，陳秀梅，劉洪建，張東鳴*

（1.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，吉林長(zhǎng)春130118；2.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，吉林長(zhǎng)春130118；3.吉林省水產(chǎn)技術(shù)推廣總站，吉林長(zhǎng)春130112）

氧化魚(yú)油對(duì)草魚(yú)幼魚(yú)背肌、全魚(yú)及肝胰臟營(yíng)養(yǎng)成分的影響

羅莎1，王秋舉2，陳玉珂2，陳秀梅2，劉洪建3，張東鳴2*

（1.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，吉林長(zhǎng)春130118；2.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，吉林長(zhǎng)春130118；3.吉林省水產(chǎn)技術(shù)推廣總站，吉林長(zhǎng)春130112）

本試驗(yàn)旨在研究不同程度氧化魚(yú)油對(duì)草魚(yú)幼魚(yú)背肌、全魚(yú)及肝胰臟營(yíng)養(yǎng)成分的影響。選取初始體質(zhì)量為（30.27±2.68）g的草魚(yú)幼魚(yú)204尾，分成4組（每組3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)17尾），在其飼料中添加不同氧化程度的魚(yú)油，第1組為對(duì)照組（新鮮魚(yú)油，過(guò)氧化值為9.07 meq O2/kg），其余3組為氧化魚(yú)油組1、組2和組3（49.72、144.64、345.45 meq O2/kg），養(yǎng)殖時(shí)間為58 d，測(cè)定其背肌、全魚(yú)及肝胰臟的水分、粗蛋白質(zhì)、粗脂肪及灰分的含量。結(jié)果表明：在本試驗(yàn)條件下，與對(duì)照組相比，345.45 meq O2/kg氧化魚(yú)油添加組草魚(yú)幼魚(yú)背肌、全魚(yú)及肝胰臟的粗蛋白質(zhì)、粗脂肪及灰分含量均顯著降低（P＜0.05），其中背肌粗蛋白質(zhì)、粗脂肪及灰分含量分別降低了6.55%、11.62%和12.14%，全魚(yú)中粗蛋白質(zhì)、粗脂肪及灰分含量分別降低了6.92%、6.79%和13.60%，同時(shí)肝胰臟中的粗蛋白質(zhì)、粗脂肪及灰分含量分別降低了8.08%、14.11%和3.52%。試驗(yàn)顯示，氧化的魚(yú)油能顯著降低草魚(yú)幼魚(yú)背肌、全魚(yú)及肝胰臟的營(yíng)養(yǎng)成分含量。

氧化魚(yú)油；草魚(yú)幼魚(yú)；營(yíng)養(yǎng)成分

油脂不僅能供給魚(yú)類生長(zhǎng)發(fā)育的能量，而且還是構(gòu)成魚(yú)體各種組織細(xì)胞結(jié)構(gòu)成分的必要原料，有助于脂溶性維生素吸收和運(yùn)轉(zhuǎn)，為魚(yú)類生長(zhǎng)提供必需脂肪酸（吉紅，2014）。油脂在飼料加工、處理、儲(chǔ)藏等過(guò)程中，極易被氧化，導(dǎo)致飼料品質(zhì)和飼料安全下降，降低動(dòng)物對(duì)油脂的利用效果，對(duì)動(dòng)物機(jī)體的生理功能、生長(zhǎng)和繁育造成負(fù)面影響（韓雨哲等，2010；尹彩娜等，2008；任澤林等，2001）。目前，關(guān)于魚(yú)類攝食氧化油脂對(duì)背肌、全魚(yú)及肝胰臟四大營(yíng)養(yǎng)成分影響的研究鮮有報(bào)道。因此，本試驗(yàn)以草魚(yú)幼魚(yú)為研究對(duì)象，在其飼料中分別添加不同氧化程度的魚(yú)油，經(jīng)過(guò)58 d飼喂后，測(cè)定其背肌、全魚(yú)及肝胰臟的水分、粗蛋白質(zhì)、粗脂肪及灰分含量，為草魚(yú)抗病性添加劑及防止油脂氧化劑的開(kāi)發(fā)和應(yīng)用提供參考資料。

1　材料與方法

1.1試驗(yàn)用草魚(yú)試驗(yàn)魚(yú)來(lái)自吉林省長(zhǎng)春市雙陽(yáng)區(qū)水庫(kù)漁場(chǎng)，長(zhǎng)期暫養(yǎng)于室內(nèi)控溫單循環(huán)養(yǎng)殖系統(tǒng)中。

1.2試驗(yàn)用魚(yú)油魚(yú)油購(gòu)自榮成海達(dá)魚(yú)粉有限公司。氧化魚(yú)油的制備參考陳科全等（2015）和Liu等（2014）方法。具體方法：在魚(yú)油中添加Fe2+300 mg/kg（FeSO4·7H2O）、Cu2+150 mg/kg（CuSO4· 5H2O）、H2O26000 mg/kg（30%H2O2水溶液）和0.3%的水，充分混合后，于37℃條件下攪拌氧化，分別經(jīng)17、46、72 h得到過(guò)氧化物值（POV）分別為49.72、144.64、345.45 meq O2/kg的氧化魚(yú)油。對(duì)照組添加Fe2+、Cu2+與處理組Fe2+、Cu2+達(dá)到平衡，POV為9.07 meq O2/kg。油脂氧化程度見(jiàn)表1。

表1　非氧化魚(yú)油和氧化魚(yú)油的POV、AV和IV值

1.3試驗(yàn)配方試驗(yàn)用魚(yú)油分對(duì)照組（即新鮮魚(yú)油，POV9.07 meq O2/kg）和氧化魚(yú)油組（POV分別為49.72、144.64、345.45 meq O2/kg），試驗(yàn)飼料脂肪源為魚(yú)油，能源為面粉和糊精，植物蛋白源為去皮豆粕和玉米蛋白粉，動(dòng)物蛋白源為魚(yú)粉，填充物為微晶纖維素，分別配制對(duì)照組飼料和三個(gè)氧化魚(yú)油組飼料。所有原料過(guò)40目篩，按試驗(yàn)設(shè)計(jì)配方（表2）混勻后，制粒成直徑2 mm的飼料，65℃烘干后保存于-20℃條件下，避免氧化。

表2　飼料配方及營(yíng)養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）

1.4試驗(yàn)設(shè)計(jì)試驗(yàn)開(kāi)始時(shí)，停食24 h，選取健壯整齊的初始體質(zhì)量為（30.27±2.68）g的草魚(yú)幼魚(yú)204尾，分成4組，每組3重復(fù)，每個(gè)重復(fù)17尾，以重復(fù)為單位放養(yǎng)于試驗(yàn)養(yǎng)殖桶中，每桶加水90L，分別飼喂對(duì)照組飼料和三組氧化魚(yú)油飼料，共飼喂58 d。

1.5飼養(yǎng)管理流水飼養(yǎng)，水流速度為0.2～ 0.25 L/min，水源為經(jīng)過(guò)曝氣充氧的自來(lái)水，用循環(huán)泵經(jīng)行水質(zhì)過(guò)濾。每天投喂相應(yīng)飼料兩次（8∶30，16∶30），投喂率3%，飽食投喂，投喂前關(guān)閉充氣泵。在整個(gè)養(yǎng)殖期間每周換水一次，每天監(jiān)測(cè)水溫、水流和充氣，記錄攝食量和死亡數(shù)等。整個(gè)試樣期間水溫控制在（26.5±1.0）℃，pH值7.0～7.5，溶氧≥5 mg/L，氨氮＜0.05 mg/L。

1.6樣品采集試驗(yàn)結(jié)束前，禁食24 h，每桶隨機(jī)取5尾魚(yú)，采血后于冰袋上解剖，分離肝胰臟及背肌。之后每桶隨機(jī)取5尾全魚(yú)，肝胰臟、背肌及全魚(yú)置于-80℃保存。

1.7指標(biāo)測(cè)定

1.7.1油脂氧化程度的測(cè)定過(guò)氧化值（POV）的測(cè)定參考GB/T 5538-1995；酸價(jià)（AV）的測(cè)定參考GB/T 5009.37-2003；碘價(jià)（IV）的測(cè)定參考GB/ T 5532-2008。

1.7.2營(yíng)養(yǎng)成分的測(cè)定水分含量測(cè)定采用105℃恒溫烘干失重法（GB 5009.3-2010）；粗蛋白質(zhì)測(cè)定采用凱氏定氮法（GB 5009.5-2010）；粗脂肪測(cè)定采用索氏抽提法（GB 5009.6-2010）；粗灰分測(cè)定采用馬福爐高溫灼燒法（GB 5009.4-2010）。

1.8統(tǒng)計(jì)分析試驗(yàn)數(shù)據(jù)以“平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示，每組3個(gè)重復(fù)，采用SPSS 19.0軟件進(jìn)行單因素方差分析，若方差分析顯著，進(jìn)一步進(jìn)行Duncan's比較，差異顯著水平設(shè)定為P＜0.05。

2　結(jié)果與分析

2.1氧化魚(yú)油對(duì)草魚(yú)幼魚(yú)背肌營(yíng)養(yǎng)成分的影響由表3可見(jiàn)，與新鮮魚(yú)油相比，草魚(yú)幼魚(yú)攝食添加氧化魚(yú)油的飼料后，影響草魚(yú)幼魚(yú)背肌的營(yíng)養(yǎng)成分。添加氧化魚(yú)油的飼料對(duì)草魚(yú)幼魚(yú)背肌水分有影響，但差異不顯著（P＞0.05）。草魚(yú)幼魚(yú)背肌中粗蛋白質(zhì)、粗脂肪和灰分含量有隨魚(yú)油氧化程度加深而逐漸降低的趨勢(shì)。與對(duì)照組相比，草魚(yú)幼魚(yú)攝食魚(yú)油氧化程度為144.64 meq O2/kg的飼料（氧化魚(yú)油組2）后，背肌中的粗脂肪含量比對(duì)照組降低了8.11%（P＜0.05）；與對(duì)照組相比，添加重度氧化魚(yú)油（345.45 meq O2/kg，氧化魚(yú)油組3），草魚(yú)幼魚(yú)背肌的粗脂肪、粗蛋白質(zhì)和灰分含量分別降低了11.62%（P＜0.05）、6.55%（P＜0.05）和12.14%（P＜0.05）。

表3　氧化魚(yú)油對(duì)草魚(yú)幼魚(yú)背肌營(yíng)養(yǎng)成分的影響%

2.2氧化魚(yú)油對(duì)草魚(yú)幼魚(yú)全魚(yú)營(yíng)養(yǎng)成分的影響由表4可見(jiàn)，隨著魚(yú)油氧化程度的增加，全魚(yú)中水分含量無(wú)顯著差異（P＞0.05），但粗蛋白質(zhì)、粗脂肪和灰分的含量呈降低趨勢(shì)。與對(duì)照組相比，三個(gè)不同氧化魚(yú)油組中草魚(yú)幼魚(yú)全魚(yú)的粗蛋白質(zhì)水平均顯著降低（P＜0.05），且分別降低了4.69%、4.53%和6.92%；氧化魚(yú)油組3中全魚(yú)粗脂肪含量比對(duì)照組低6.79%（P＜0.05）；氧化魚(yú)油組2和組3與對(duì)照組相比，全魚(yú)灰分含量分別降低了12.87%（P＜0.05）和13.60%（P＜0.05）。

表4　氧化魚(yú)油對(duì)草魚(yú)幼魚(yú)全魚(yú)營(yíng)養(yǎng)成分的影響%

2.3氧化魚(yú)油對(duì)草魚(yú)幼魚(yú)肝胰臟營(yíng)養(yǎng)成分的影響由表5可見(jiàn)，隨著魚(yú)油氧化程度的增加，肝胰臟中水分水平有逐漸降低的趨勢(shì)，但無(wú)顯著差異（P＞0.05）。與對(duì)照組相比，氧化魚(yú)油組2和組3中草魚(yú)幼魚(yú)肝胰臟的粗蛋白質(zhì)含量分別降低了3.06%（P＜0.05）和8.08%（P＜0.05）。三個(gè)氧化魚(yú)油組中肝胰臟粗脂肪和灰分水平均顯著低于對(duì)照組（P＜0.05），其中氧化魚(yú)油組1、組2和組3中粗脂肪水平比對(duì)照組分別降低了1.87%，3.73%和14.11%，灰分含量比對(duì)照組分別降低了3.52%，6.61%和3.52%。

表5　氧化魚(yú)油對(duì)草魚(yú)幼魚(yú)肝胰臟營(yíng)養(yǎng)成分的影響%

3　討論

油脂氧化酸敗后其物理性質(zhì)和化學(xué)性質(zhì)均有所變化，如黏稠度增加，流動(dòng)性變差，變渾濁甚至有沉淀，耗氧率降低，過(guò)氧化物、羥基化合物、各種游離脂肪酸和低級(jí)脂肪酸增多（陳芳等，2015；任澤林和霍啟光，2000）。研究發(fā)現(xiàn)，氧化油脂能夠影響魚(yú)類生長(zhǎng)、代謝、酶活性以及血液常規(guī)指標(biāo)，嚴(yán)重時(shí)可引起動(dòng)物神經(jīng)內(nèi)分泌功能紊亂，誘發(fā)各種疾病，甚至導(dǎo)致死亡（陳擁軍等，2016）。本試驗(yàn)中草魚(yú)幼魚(yú)攝食添加氧化魚(yú)油345.45 meq O2/kg的飼料后，背肌中的粗蛋白質(zhì)、粗脂肪及灰分均顯著降低；同時(shí)三個(gè)氧化魚(yú)油組草魚(yú)幼魚(yú)全魚(yú)的粗蛋白質(zhì)含量均顯著低于對(duì)照組，重度氧化魚(yú)油組草魚(yú)幼魚(yú)全魚(yú)的粗脂肪和灰分水平也顯著下降。說(shuō)明氧化魚(yú)油造成幼魚(yú)體內(nèi)蛋白質(zhì)及脂肪沉積下降，對(duì)礦物質(zhì)元素的積累降低。與本試驗(yàn)相似，殷永風(fēng)（2011）在對(duì)草魚(yú)的研究中發(fā)現(xiàn)，飼料中添加氧化豆油后會(huì)降低草魚(yú)的生長(zhǎng)速率、脂肪沉積率和蛋白質(zhì)沉積率。彭士明等（2007）在飼料中添加一定量氧化油脂后發(fā)現(xiàn)，黑鯛蛋白質(zhì)效率降低。劉偉等（1997）發(fā)現(xiàn)，鯉魚(yú)攝食氧化油脂后，飼料轉(zhuǎn)化率明顯降低。

肝胰臟是魚(yú)體解毒的主要場(chǎng)所，參與蛋白質(zhì)、脂肪、糖類等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的代謝，解毒、吞噬、防御機(jī)能，調(diào)節(jié)血容量及水電解質(zhì)平衡等（葉仕根，2004）。肝臟疾病尤其是肝臟中非腫瘤疾病常具有許多共同的組織結(jié)構(gòu)的損傷，而最主要的就是肝細(xì)胞損傷。本試驗(yàn)中，氧化魚(yú)油導(dǎo)致草魚(yú)幼魚(yú)肝胰臟中粗蛋白質(zhì)、粗脂肪及灰分水平均顯著下降，且隨隨油脂氧化程度的升高而加重。氧化魚(yú)油造成肝胰臟各營(yíng)養(yǎng)成分降低，可能是由于飼料中的油脂在氧化過(guò)程中產(chǎn)生的多種初級(jí)或次級(jí)氧化物，當(dāng)這些物質(zhì)富集打破腸道屏障功能，會(huì)進(jìn)入體循環(huán)直接作用于肝細(xì)胞，引起細(xì)胞內(nèi)氧化代謝物增加，造成肝細(xì)胞內(nèi)部代謝紊亂，膜修復(fù)作用失效，或肝細(xì)胞中抗氧化保護(hù)機(jī)制降低，產(chǎn)生毒性（Vázquez-A?ón等，2007），最終肝細(xì)胞凋亡，蛋白質(zhì)水平下降；同時(shí)氧化產(chǎn)物與蛋白質(zhì)形成加合物后還可防礙甘油三酯的運(yùn)轉(zhuǎn)引起肝細(xì)胞的嚴(yán)重受損，造成生物膜系統(tǒng)的過(guò)氧化，產(chǎn)生大量過(guò)氧化物質(zhì)，在膜內(nèi)能形成交鏈，最終降低膜流動(dòng)性，改變膜結(jié)構(gòu)，增加膜通透性；也可能是油脂氧化產(chǎn)物導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)氧化磷酸化耦聯(lián)過(guò)程加快，加劇ADP向ATP的轉(zhuǎn)化，ATP增多，引起動(dòng)物機(jī)體脂肪代謝失衡，脂肪轉(zhuǎn)化量增加，粗脂肪含量下降。

4　結(jié)論

本試驗(yàn)證明魚(yú)油過(guò)氧化值為345.45 meq O2/kg時(shí)，草魚(yú)幼魚(yú)背肌、全魚(yú)及肝胰臟的粗蛋白質(zhì)、粗脂肪及灰分水平均顯著下降。氧化魚(yú)油及其分解產(chǎn)物可危害魚(yú)類生長(zhǎng)，降低肌肉及全魚(yú)品質(zhì)，對(duì)肝胰臟有損傷，因此，在生產(chǎn)中應(yīng)注意飼料及其原料的存儲(chǔ)，適當(dāng)增加抗氧化劑的使用，以減輕其帶來(lái)的危害。

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The effects of different levels of oxidized fish oil on nutrients composition in back muscle，whole body and hepatopancreas of juvenile grass carp（Ctenopharyngodon idella）were studied.A total of 204 healthy juvenile grass carp with an average initial body weight（30.27±2.68）g were randomly divided into 4 treatments with 3 replicates of 17 each，by feeding the dietaries of different levels of oxidized fish oil for 58 d.The first group was the control group（fresh fish oil，peroxide value was 9.07 meq O2/kg），the remaining three groups was oxidized fish oil group，oxidized fish oil group 1（49.72 meq O2/kg），oxidized fish oilgroup 2（144.64 meq O2/kg），oxidized fish oil group 3（345.45 meq O2/kg）.Nutrients composition in back muscle，whole body and hepatopancreas of juvenile grass carp were measured.The results showed that，compared with the control group，oxidized fish oil group 3（345.45 meq O2/kg）significantly reduced the levels of crude protein，crude lipid and ash in back muscle，whole body and hepatopancreas of juvenile grass carp（P＜0.05），in which crude protein，crude lipid and ash in back muscle were decreased by 6.55%，11.62%and 12.14%，that in whole body were decreased by 6.92%，6.79%and 13.60%，and which of hepatopancreas were decreased by 8.08%，14.11%and 3.52%.In conclusion，oxidized fish oil reduced the nutrients composition in back muscle，whole body and hepatopancreas of juvenile grass carp.

oxidized fish oil；juvenile grass carp（Ctenopharyngodon idella）；nutrients composition

S816.7

A

1004-3314（2016）19-0030-03

10.15906/j.cnki.cn11-2975/s.20161908