楊波，何斌，蔡小軍，董革輝，韓建華

(遵義醫(yī)學(xué)院第三附屬醫(yī)院，貴州遵義563002)

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退行性變腰椎間盤組織中基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1表達(dá)變化及意義

楊波，何斌，蔡小軍，董革輝，韓建華

(遵義醫(yī)學(xué)院第三附屬醫(yī)院，貴州遵義563002)

目的 觀察基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1(SDF-1)在退行性變腰椎間盤組織中的表達(dá)變化，探討其在腰椎間盤退行性變中的作用。方法 選取60例腰椎間盤退行性變患者(觀察組)及30例外傷性腰椎骨折患者(對照組)，手術(shù)取得腰椎間盤組織，以免疫組化法檢測髓核與纖維環(huán)交界區(qū)(TNP)、髓核中央?yún)^(qū)(INP)、纖維環(huán)區(qū)(AF)、軟骨終板區(qū)(CEP)的SDF-1。結(jié)果 觀察組腰椎間盤TNP、INP、AF、CEP部位的SDF-1表達(dá)量均明顯高于對照組，觀察組不同Schneiderman病情分級患者腰椎間盤各部位SDF-1表達(dá)量4級﹥3級﹥2級，比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.05)；Pearson相關(guān)分析顯示，觀察組Schneiderman病情分級與腰椎間盤TNP、INP、AF、CEP部位SDF-1表達(dá)量均呈正相關(guān)(r分別為0.92、0.94、0.74、0.70，P均<0.05)。結(jié)論 腰椎間盤退行性變患者腰椎間盤組織中SDF-1表達(dá)明顯升高，并與病情嚴(yán)重程度密切相關(guān)，可能參與了疾病的發(fā)生發(fā)展過程。

基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1；椎間盤退行性變；腰椎

人在直立行走及負(fù)重等日常生活時均是腰椎在承受負(fù)荷，腰椎間盤可維持腰椎的穩(wěn)定性及活動性。因此，腰椎間盤會隨著時間的推移發(fā)生退行性變[1,2]，輕者表現(xiàn)為髓核失水，嚴(yán)重時可發(fā)展為椎間盤突出，影響生活質(zhì)量?；|(zhì)細(xì)胞衍生因子1(SDF-1)是骨髓基質(zhì)細(xì)胞產(chǎn)生的CXC類趨化因子。研究發(fā)現(xiàn)，SDF-1及其受體在骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞定向移植、軟骨損傷等疾病重建過程中起到一定修復(fù)作用[3～6]，但在腰椎間盤退行性變中的研究較少。2014年1月～2015年12月，我們對SDF-1在正常與退行性變腰椎間盤組織中的表達(dá)差異性進(jìn)行了研究?，F(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取遵義醫(yī)學(xué)院第三附屬醫(yī)院同期收治擬行手術(shù)治療的腰椎間盤退行性變患者60例(觀察組)，男41例、女19例，年齡(52.19±4.33)歲，經(jīng)MRI或CT檢查證實(shí)；病變位于L2/3者32例、L4/5者28例；Schneiderman病情分級2級15例，3級23例，4級22例。選取同期收治擬行手術(shù)治療的外傷性腰椎骨折患者30例(對照組)，男21例、女9例，年齡(50.43±4.15)歲，均排除受傷前存在腰椎間盤病變者；病變位于L2/3者17例、L4/5者13例。兩組均排除患有急慢性炎癥性疾病、惡性腫瘤、結(jié)締組織疾病、自身免疫性疾病者。本研究獲醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)，患者知情同意。兩組性別、年齡、病變部位具有可比性(P均>0.05)。

1.2 SDF-1檢測方法 將兩組術(shù)中取得的椎間盤組織-80 ℃保存，以免疫組化法檢測[7]。將標(biāo)本以無菌生理鹽水反復(fù)沖洗，石蠟包埋后切5 μm厚切片。以冷丙酮固定5 min，晾干后用PBS沖洗3次；以H2O2封閉，PBS沖洗3次；以羊血清封閉，加入一抗過夜，PBS沖洗；加二抗孵育，PBS沖洗；DAB顯色，蒸餾水沖洗；脫水后透明并封片，在顯微鏡下觀察SDF-1表達(dá)。將組織分為髓核與纖維環(huán)交界區(qū)(TNP)、髓核中央?yún)^(qū)(INP)、纖維環(huán)區(qū)(AF)、軟骨終板區(qū)(CEP)，以專用軟件計(jì)算SDF-1積分光密度(IOD)值。

2 結(jié)果

2.1 兩組腰椎間盤各部位SDF-1的IOD值比較 見表1。

2.2 觀察組不同Schneiderman病情分級患者腰椎間盤各部位SDF-1的IOD值比較 觀察組不同Schneiderman病情分級患者腰椎間盤各部位SDF-1的IOD值4級﹥3級﹥2級，比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.05)。見表2。

表1 兩組腰椎間盤各部位SDF-1的IOD值比較

表2 觀察組不同Schneiderman病情分級患者腰椎間盤 各部位SDF-1的IOD值比較

注：與2級比較，*P<0.05；與3級比較，△P<0.05。

2.3 觀察組Schneiderman病情分級與腰椎間盤各部位SDF-1表達(dá)的關(guān)系 觀察組Schneiderman病情分級與腰椎間盤TNP、INP、AF、CEP部位SDF-1的IOD值均呈正相關(guān)(r分別為0.92、0.94、0.74、0.70，P均<0.05)。

3 討論

椎間盤是連接上下兩個椎骨的圓盤狀纖維軟骨，由髓核、纖維化、軟骨終板組成，局部含有大量水分、蛋白多糖及膠原，可讓椎間盤承受較大的壓縮負(fù)荷。腰椎間盤的退行性變可導(dǎo)致椎間盤發(fā)生功能異常及椎管狹窄，影響運(yùn)動節(jié)段的穩(wěn)定性。目前，引起椎間盤退行性變的具體機(jī)制尚無定論，但普遍認(rèn)為除傳統(tǒng)力學(xué)因素、生化因素及神經(jīng)生理因素外，與免疫學(xué)及細(xì)胞因子、炎癥介質(zhì)等也有一定關(guān)系[8～11]。

SDF-1屬于趨化因子家族，又稱為趨化因子配體12(CXCL12)，能對小分子蛋白質(zhì)及淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞、樹突細(xì)胞等起到趨化作用。趨化因子受體4是SDF-1的特異性受體，在循環(huán)及組織的干細(xì)胞中均有廣泛表達(dá)；通過趨化因子受體4能介導(dǎo)諸多細(xì)胞的遷移，影響SDF-1的表達(dá)。這種影響在造血、新生血管生成、免疫細(xì)胞運(yùn)輸?shù)冗^程中均被證實(shí)[12～15]，但在腰椎間盤退行性變組織的研究極少。本研究結(jié)果顯示，觀察組腰椎間盤TNP、INP、AF、CEP部位SDF-1表達(dá)均高于對照組，且隨著患者病情加重各部位SDF-1表達(dá)增高，Schneiderman病情分級與椎間盤各部位SDF-1表達(dá)呈正相關(guān)。提示SDF-1在腰椎間盤組織中高表達(dá)是在各個部位均存在的，而且隨著病情加重而呈梯度性升高。這可能是由于分級越高病情越嚴(yán)重，此時椎間盤的髓核、纖維環(huán)等部位受壓越嚴(yán)重，會引起局部組織的缺氧，軟骨隨之出現(xiàn)缺氧，過早發(fā)生鈣化，導(dǎo)致SDF-1表達(dá)上調(diào)；同時以上研究也提示，SDF-1表達(dá)異常與腰椎間盤退行性變的發(fā)病及病情嚴(yán)重程度有關(guān)，可能參與了疾病過程。該過程可能是通過影響血管內(nèi)皮生長因子等途徑來實(shí)現(xiàn)的，具體機(jī)制尚需要相關(guān)研究來證實(shí)。

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貴州省科學(xué)技術(shù)基金項(xiàng)目編號(黔科合J字2015-2152號)

何斌(E-mail: yangbohyjf@163.com)

10.3969/j.issn.1002-266X.2016.38.025

R318

B

1002-266X(2016)38-0071-02

2016-05-29)