曹雪松，楊亞鵬，楊華，董艷秋，李克梅

(1. 新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院，烏魯木齊 830052；2. 新疆農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所，烏魯木齊 830091)

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新疆苜蓿根際寄生線蟲種類研究

曹雪松1，楊亞鵬1，楊華2，董艷秋1，李克梅1

(1. 新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院，烏魯木齊 830052；2. 新疆農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所，烏魯木齊 830091)

【目的】調(diào)查新疆苜蓿根際寄生線蟲種類，明確寄生線蟲種類和優(yōu)勢(shì)種群，為評(píng)價(jià)寄生線蟲危害苜蓿提供依據(jù)?！痉椒ā繌男陆?9個(gè)地區(qū)的苜蓿種植地采集493份苜蓿根圍土壤，采用淺盤法分離其中的線蟲，根據(jù)線蟲形態(tài)結(jié)合文獻(xiàn)鑒定線蟲種類?！窘Y(jié)果】共分離鑒定得到 7 屬9種植物線蟲?！窘Y(jié)論】總體而言，目前新疆苜蓿根際寄生蟲種類不多，數(shù)量相對(duì)較少，其中真滑刃屬線蟲、滑刃屬線蟲、螺旋屬線蟲是優(yōu)勢(shì)種群，未發(fā)現(xiàn)根結(jié)線蟲。

苜蓿；寄生線蟲；根際；鑒定

0 引 言

【研究意義】新疆作為畜牧大省，主要的人工牧草是苜蓿，苜蓿的重要特點(diǎn)是產(chǎn)量高、品質(zhì)優(yōu)，是新疆發(fā)展畜牧產(chǎn)業(yè)的重要基礎(chǔ)[1]。苜蓿同其他農(nóng)作物一樣，在生長過程中，常常遭致各種病原生物侵染危害，導(dǎo)致苜蓿產(chǎn)量降低、品質(zhì)下降，種植年限縮短。目前國內(nèi)對(duì)苜蓿病害的研究主要集中在真菌病害、細(xì)菌病害、病毒病害方面[2]，而對(duì)因線蟲引起的苜蓿病害鮮見報(bào)道。至2011年我國苜蓿種植面積達(dá)到377.5×104hm2[3]，掌握苜蓿寄生線蟲種類，對(duì)正確評(píng)價(jià)苜蓿線蟲病害的危害有重要意義?！厩叭搜芯窟M(jìn)展】致苜蓿病害的病原生物包括傳統(tǒng)的真菌、細(xì)菌、病毒、線蟲和寄生性種子植物，其中最主要的是真菌，我國已發(fā)現(xiàn)36種病原真菌危害苜蓿[4]，已報(bào)道新疆有苜蓿病害24種，病原35種[5]。據(jù)國外報(bào)道，植物線蟲是一種危害廣泛的病原，已知危害牧草的寄生性線蟲有250種以上[6]，其中嚴(yán)重危害苜蓿的寄生性線蟲主要有苜蓿莖線蟲(DitylenchusmedicaginisWasilewska，1965)[7]和根結(jié)線蟲(Meloidogyne)[8]。我國寶音溫都蘇[9]報(bào)道在內(nèi)蒙古苜蓿寄生線蟲有8個(gè)屬，但未鑒定到種。其他地區(qū)尚未見苜蓿寄生線蟲的報(bào)道?！颈狙芯壳腥朦c(diǎn)】目前新疆地區(qū)未見關(guān)于苜蓿線蟲病害的報(bào)道，研究擬對(duì)新疆苜蓿根際寄生線蟲開展調(diào)查?！緮M解決的關(guān)鍵問題】準(zhǔn)確鑒定新疆苜蓿根際寄生線蟲的種類并掌握其分布。明確寄生線蟲種類和優(yōu)勢(shì)種群，為評(píng)價(jià)寄生線蟲危害苜蓿提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材 料

根圍土壤樣本均采自新疆地區(qū)各苜蓿種植地。2014年6月至2015年10月在新疆各地州、市、團(tuán)場(chǎng)苜蓿地采用對(duì)角線五點(diǎn)采樣法[10]隨機(jī)選取紫花苜蓿植株采集根圍土壤樣本。采集時(shí)，先用鐵鍬鏟去比較干燥的2～3 cm表層土，再取苜蓿根圍0～30 cm深度的土壤約500 g，裝入自封袋中，作為一個(gè)樣本，標(biāo)記后帶回實(shí)驗(yàn)室，取200 g土樣及時(shí)分離其中的線蟲或置4℃冰箱保存。

1.2 方 法

1.2.1 線蟲分離、殺死與固定

采用淺盤法分離土壤中的線蟲。繼而將線蟲懸浮液放入60～65℃的水浴鍋中2～3 min溫和熱殺死，將殺死后的線蟲用FG固定液(福爾馬林∶甘油∶蒸餾水=10∶1∶89)固定后放入1.5 mL的離心管中進(jìn)行保存，待鑒定[11]。

1.2.2 線蟲的形態(tài)觀察和鑒定

將已固定的線蟲制成臨時(shí)玻片，在解剖鏡及光學(xué)顯微鏡下逐條進(jìn)行形態(tài)觀察、描述及鑒定指標(biāo)的數(shù)據(jù)測(cè)量。形態(tài)測(cè)計(jì)采用De Man公式[12]。根據(jù)謝暉等[13]、劉維志[14]分類系統(tǒng)進(jìn)行分類，同時(shí)參照Siddiqi[15]和Fortuner[16]分類系統(tǒng)鑒定種類。

2 結(jié)果與分析

2.1 新疆苜蓿根際寄生線蟲種類

從新疆各地的苜蓿種植區(qū)域采取土樣493份，共分離鑒定出7屬9種植物線蟲，分別為：絲尾墊刃線蟲屬(Filenchus)、平滑墊刃屬(Psilenchus)、新平滑墊刃屬(Neopsilenchus)、莖線蟲屬(Ditylenchus)、螺旋屬(Helicotylenchus)、真滑刃屬(Aphelenchus)、滑刃屬(Aphelenchoides)；普通絲尾墊刃線蟲[Filenchusvulgaris(Brzeski，1963)Lowmsbery et Lownsbery，1983]、活潑平滑墊刃線蟲(Psilenchushilarulusde Man，1921)、食菌莖線蟲(DitylenchusmyceliophagusGoodey，1958)、燕麥真滑刃線蟲(AphelenchusavenaeBastian，1865 )、孤獨(dú)真滑刃線蟲(AphelenchuseremitusThoren，1961)、同形真滑刃線蟲[AphelenchusisomerusAnderson & Hooper，1980(Ebsary，1991)]、帕拉莫諾夫真滑刃線蟲(AphelenchusparamonoviNesterov & Lisetskaya，1965)、林伯滑刃線蟲(AphelenchiodeslimberiSteiner，1936)、蘑菇滑刃線蟲(AphelenchiodescomposticolaFranklin，1957)。

2.2 新疆苜蓿寄生線蟲的優(yōu)勢(shì)種群

在新疆苜蓿各類寄生線蟲中，真滑刃屬線蟲占絕對(duì)優(yōu)勢(shì)，達(dá)總數(shù)的53.04%，其次是螺旋屬占總數(shù)的23.82%，而滑刃屬則相對(duì)出現(xiàn)幾率小，僅9.63%，其他類群則差別不大。表1

2.3 新疆苜蓿寄生線蟲的分布

真滑刃屬、螺旋屬線蟲分布最廣，幾乎在每個(gè)采集地均有發(fā)現(xiàn)，其次為滑刃屬線蟲。其他鑒定出的線蟲分布主要集中在呼圖壁縣及塔城地區(qū)。同時(shí)發(fā)現(xiàn)南疆地區(qū)苜蓿寄生線蟲種類、數(shù)量較少，僅發(fā)現(xiàn)真滑刃屬線蟲，這可能與南疆地區(qū)干旱的氣候及土質(zhì)有關(guān)。表2

表1 不同屬種線蟲檢出頻次及百分?jǐn)?shù)

表2 新疆苜蓿根際寄生線蟲分布

3 討 論

線蟲動(dòng)物門是動(dòng)物界中最大的門之一，其中，有許多種類是寄生植物的，這些線蟲稱為植物線蟲[17]。植物寄生線蟲直接危害各種農(nóng)林經(jīng)濟(jì)作物，除自身對(duì)植物構(gòu)成危害之外，還常與其周圍的一些病原細(xì)菌、真菌和病毒共同侵染，引起“復(fù)合侵染”，有些線蟲還是病毒傳播的介體，使其危害更重，同時(shí)植物寄生線蟲也是制約植物及其產(chǎn)品進(jìn)出口的主要有害生物[10]。新疆已有報(bào)道根結(jié)線蟲嚴(yán)重危害設(shè)施黃瓜和番茄[18]，甘薯莖線蟲嚴(yán)重影響沙灣地區(qū)的甘薯種植[19]，大豆孢囊線蟲亦威脅新疆大豆生產(chǎn)[20]。

研究從各采樣地區(qū)苜蓿根際寄生線蟲的檢測(cè)結(jié)果來看，線蟲種類和數(shù)量均不多，且很多樣品中未能分出線蟲。且在北疆分布較廣泛，南疆地區(qū)鑒定種類相對(duì)較少，這可能與南疆夏季高溫、長途運(yùn)輸導(dǎo)致南疆樣品中線蟲存活率低有關(guān)。因此，應(yīng)進(jìn)一步加強(qiáng)南疆地區(qū)苜蓿根際線蟲的研究。

在已鑒定的寄生線蟲中，真滑刃屬線蟲占絕對(duì)的優(yōu)勢(shì)，其次是螺旋屬和滑刃屬，其他類群檢出率低，差別不大。這些線蟲均為植物根際常見寄生線蟲，且數(shù)量不多，尚不足以對(duì)苜蓿生長造成危害。但也不排除苜蓿根系深，而采樣深度僅局限在0～30 cm根際土壤，是否根尖附近有其他種類的線蟲還有待進(jìn)一步研究。

4 結(jié) 論

研究對(duì)苜蓿根際寄生線蟲種類的調(diào)查結(jié)果表明，新疆苜蓿根際已發(fā)現(xiàn)7屬9種寄生線蟲，分別是絲尾墊刃線蟲屬中的普通絲尾墊刃線蟲；平滑墊刃屬中的活潑平滑墊刃線蟲；新平滑墊刃屬；莖線蟲屬中的食菌莖線蟲；螺旋屬；真滑刃屬中的燕麥真滑刃線蟲、孤獨(dú)真滑刃線蟲、同形真滑刃線蟲、帕拉莫諾夫真滑刃線蟲；滑刃屬中的林伯滑刃線蟲、蘑菇滑刃線蟲。其中真滑刃屬線蟲檢出率占絕對(duì)優(yōu)勢(shì)，達(dá)53.04%，其次是螺旋屬，而滑刃屬則相對(duì)出現(xiàn)幾率小，其他類群則差別不大。從分布情況來看，北疆地區(qū)苜蓿根際寄生線蟲種類及數(shù)量較多，而南疆地區(qū)種類及數(shù)量均較少，僅發(fā)現(xiàn)有真滑刃屬線蟲。此次調(diào)查中并未發(fā)現(xiàn)在國外嚴(yán)重危害的根結(jié)線蟲。

References)

[1] 朱進(jìn)忠,趙清,阿不來提·阿不都熱依木,等. 新疆苜蓿生產(chǎn)可持續(xù)發(fā)展研究[J].新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2006,(1):36-39.

ZHU Jin-zhong, ZHAO Qing，Abulaiti Abudoureyimu，et al. (2006). Study on Sustainable Development of Alfalfa Production in Xinjiang [J].JournalofXinjiangAgriculturalUniversity, (1):36-39.(in Chinese)

[2] 侯發(fā)遠(yuǎn).美國牧草病害研究近況(文獻(xiàn)綜述)[J].四川草原,1983,(2):76-82,66.

HOU Fa-yuan. (1983) US pasture disease research status (Literature review) [J].JournalofSichuanGrassland, (2):76-82,66. (in Chinese)

[3] 孫啟忠,王宗禮,徐麗君.旱區(qū)苜蓿[M].北京:中國科學(xué)出版社,2013:1-50.

SUN Qi-zhong, WANG Zong-li, XU Li-jun. (2013).AlfalfainAridRegions[M]. Beijing: China Science Press:1-50. (in Chinese)

[4] 李克梅,趙莉,孫紅艷.新疆苜蓿病害研究現(xiàn)狀與展望[J].新疆農(nóng)業(yè)科學(xué),2010,47(7):1 348-1 352.

LI Ke-mei, ZHAO Li, SUN Hong-yan. (2010). Progress and Prospect on Alfalfa Disease in Xinjiang [J].XinjiangAgriculturalSciences, 47(7):1,348-1,352.(in Chinese)

[5] 南志標(biāo). 我國的苜蓿病害及其綜合防治體系[J]. 動(dòng)物科學(xué)與動(dòng)物醫(yī)學(xué),2001,(4):81-84.

NAN Zhi-biao. (2001). Medicago Diseases and Integrated Control System of China [J].AnimalScienceandVeterinaryMedicine, (4):81-84.(in Chinese)

[6] Н.М.Пуца,魯挺.牧草的線蟲病[J].國外畜牧學(xué):草原與牧草,1985,(4):45-47.

Н.М.Пуца, LU Tin.(1985). Forage nematode [J].AnimalSciencesabroad,GrasslandandTurf, (4):45-47.(in Chinese)

[7] 侯天爵.我國苜蓿病害發(fā)生現(xiàn)狀及防治對(duì)策[J]. 內(nèi)蒙古草業(yè),1994,(Z2):4-8.

НOU Tian-jue.(1994). Alfalfa disease occurrence and Countermeasures of China [J].JournalofNeimongolPrataculture, (Z2):4-8.(in Chinese)

[8] Postnikova, O. A., Hult, M., Shao, J., Skantar, A., & Nemchinov, L. G. (1932). Correction: transcriptome analysis of resistant and susceptible alfalfa cultivars infected with root-knot nematode meloidogyne incognita.PlosOne, 10(2):188-193.

[9] 寶音溫都蘇.不同種植模式下苜蓿地土壤線蟲群落結(jié)構(gòu)的變化[D].呼和浩特：內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué),2012.

Baoyinwendusu. (2012).DifferentPlantingpatternsonSoilNematodeCommunityinAlfalfaSpeciesandFloraImpact[D]. Master Dissertation. Mongolia Agricultural University, Hohhot. (in Chinese)

[10] 謝輝.植物線蟲分類學(xué)[M].合肥:安徽科學(xué)技術(shù)出版社,2000.

XIE Hui.(2000).PlantNematodesTaxology[M].Hefei: Anhui Science and Technology Publishing House. (in Chinese)

[11] 楊意伯.福建龍眼、荔枝、番石榴線蟲病害調(diào)查及寄生線蟲種類鑒定[D].福州：福建農(nóng)林大學(xué)博士論文,2013.

YANG Yi-bo.(2013).Identificationofparasiticnematodespeciesandinvestigationonnematodediseasesoflongan,litchiandguavainFujian,China[D]. PhD Dissertaion. Fujian Agriculture and Forestry University, Fuzhou. (in Chinese)

[12] Reddy, P. P. (1983).PlantNematology. New Delhi: Pratibha Printing Press, 287.

[13] 謝輝,馮志新.植物線蟲分類系統(tǒng)概述[J].云南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),1999,14(增刊):17-36.

XIE Hui, FEN Zhi-xin.(1999).Outline of Classification for Plant Nematodes [J].JournalofYunnanAgriculturalUniversity, 14(sup):17-36.(in Chinese).

[14] 劉維志.植物線蟲志[M].北京:中國農(nóng)業(yè)出版社,2003

LIU Wei-zhi. (2003).Plantnematodesblog[M].Beijing: China Agriculture Press. (in Chinese)

[15] Siddiqi, M. R. (1986). Tylenchida: parasites of plants and insects.CommonwealthInsitituteofParasitology.

[16] Fortuner. R. (1984).ListandstatusoftheGeneraandFamiliesofPlant-parasiticNematodesHelAbsSeriesBPlantNematology,53(3):87-106.

[17] 卓侃,廖金鈴.植物線蟲分子鑒定研究進(jìn)展[J]. 植物保護(hù),2015,(6):1-8.

ZUO Kan, LIAO Jin-ling. (2015).Advances in molecular identification of plant nematodes [J].PlantProtection, (6):1-8. (in Chinese)

[18] 董艷秋,楊華,李克梅.設(shè)施蔬菜根結(jié)線蟲病發(fā)生與防治[J].農(nóng)村科技,2015,(5):34-35.

DONG Yan-qiu, YANG Ha, LI Ke-mei. (2015).Occurrence and Prevention of root knot nematode disease in Greenhouse [J].RuralScience&Technology, (5):34-35. (in Chinese)

[19] 王曉東,張莉,杜娟.新疆塔城地區(qū)甘薯莖線蟲病原鑒定[J].植物保護(hù),2013,(2):139-142,157.

WANG Xiao-dong, ZHANG Li, DU Juan. (2013).Identification of the pathogen of sweet potato stem nematode disease in Tacheng area of Xinjiang [J].PlantProtection, (2):139-142,157. (in Chinese)

[20] 李克梅,日孜旺古麗,董艷秋.新疆大豆孢囊線蟲病的初步研究[J].植物保護(hù),2014,(2):132-134.

LI Ke-mei, Riziwang Guli, DONG Yan-qiu. (2014). A preliminary study on the soybean cyst nematodeHeteroderaglycinesin Xinjiang Uygur Autonomous Region [J].PlantProtection, (2):132-134. (in Chinese)

Fund project:Supported by the key laboratory project of grassland resources and ecology in Xinjiang Uygur Autonomous Region (XJDX0209-2012-01)，Special funds for public welfare industry (agriculture) scientific research projects (201303057) and Joint program of production, study and research base project for graduate students training of Xinjiang Agricultural University (xjaucxy-yjs-20141035)funding

Preliminary Report of Alfalfa Rhizosphere Parasitic Nematodes Species in Xinjiang

CAO Xue-song1, YANG Ya-peng1, YANG Hua2, DONG Yan-qiu1, LI Ke-mei1

(1. College of Agronomy, Xinjiang Agricultural University, Urumqi 830052, China；2.ResearchInstituteofPlantProtection,XinjiangAcademyofAgriculturalSciences,Urumqi830091,China)

【Objective】 This project aims to conduct the investigation of Xinjiang alfalfa plant-parasitic nematodes in order to clarify the species of plant-parasitic nematodes and dominant population and provide an evidence for accurate evaluation of the damage of plant-parasitic nematodes to Alfalfa.【Method】493 samples of alfalfa rhizosphere soil were collected from 19 regions of alfalfa cultivated fields in Xinjiang, and the nematodes were isolated by using the shallow dish method. The nematode specifies was identified according to the morphological characteristics of nematode species and references to the literatures.【Result】7 groups and 9 species of plant nematodes were separated and identificated from alfalfa rhizosphere soil.【Conclusion】Overall, the species of Xinjiang alfalfa plant-parasitic nematodes was few, and the quantity was relatively less at present.Aphelenchus,AphelenchoidesandHelicotylenchusare the dominant population among them but Meloidogyne was not found.

alfalfa; parasitic nematodes; rhizosphere; identification

10.6048/j.issn.1001-4330.2016.07.014

2016-03-10

新疆維吾爾自治區(qū)草地資源與生態(tài)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室項(xiàng)目(XJDX0209-2012-01)；國家公益性行業(yè)農(nóng)業(yè)科研專項(xiàng)(201303057)；新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)產(chǎn)學(xué)研聯(lián)合培養(yǎng)研究生示范基地項(xiàng)目(xjaucxy-yjs-20141035)

曹雪松(1991-)，男，碩士研究生，研究方向?yàn)槟敛莶『胺乐危?E-mail)976403178@qq.com

李克梅(1973-),女，江蘇如皋人，副教授，博士，研究方向?yàn)槟敛莶『Γ?E-mail) lindali1118@sina.com

S551+.7；S186

A

1001-4330(2016)07-1276-05