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        P16表達(dá)在宮頸上皮內(nèi)病變中的診斷價(jià)值

        2016-11-29 06:55:10程濤沈紅邱學(xué)芳
        中外醫(yī)療 2016年30期
        關(guān)鍵詞:昭通市內(nèi)瘤鱗狀

        程濤,沈紅,邱學(xué)芳

        昭通市第一人民醫(yī)院病理科,云南昭通 657000

        P16表達(dá)在宮頸上皮內(nèi)病變中的診斷價(jià)值

        程濤,沈紅,邱學(xué)芳

        昭通市第一人民醫(yī)院病理科,云南昭通657000

        目的 探討p16蛋白表達(dá)在宮頸上皮內(nèi)病變中的診斷價(jià)值。方法 方便選取云南省昭通市第一人民醫(yī)院2004—2015年間的宮頸標(biāo)本180例作為研究對(duì)象,采用免疫組化SP法檢測(cè)180例宮頸良性病變及宮頸上皮內(nèi)病變中p16蛋白的表達(dá),并對(duì)其表達(dá)和意義進(jìn)行分析。結(jié)果 宮頸良性病變中p16表達(dá)率為0%,LSIL中p16表達(dá)率為45%且多為點(diǎn)灶狀表達(dá)并主要局限于中間及表層,HSIL中p16表達(dá)率100%且多為帶狀強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá),各組之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論p16可以作為宮頸良性病變、LSIL及HSIL之間鑒別診斷的一個(gè)有用的標(biāo)記物。

        宮頸上皮內(nèi)病變;p16;診斷

        在女性生殖系統(tǒng)三大惡性腫瘤之中,宮頸癌居首位,發(fā)病率9.98/10萬(wàn),30~50歲是發(fā)病高峰年齡,死亡的高峰為50~70歲,在中國(guó)地區(qū)農(nóng)村高發(fā)病率高于城市,山區(qū)地區(qū)高于平原地區(qū)。在以前使用的是宮頸上皮內(nèi)腫瘤(CIN)的診斷術(shù)語(yǔ)來(lái)診斷宮頸鱗狀細(xì)胞癌的癌前病變,分為三級(jí),分別簡(jiǎn)稱為CIN1、CIN2和CIN3,這種診斷方式在第3版WHO分類(2003年)提出后,已經(jīng)使用了10多年。第4版WHO(2014年)的女性生殖系統(tǒng)腫瘤分類中,宮頸鱗狀細(xì)胞癌前病變使用鱗狀上皮內(nèi)病變(SIL)來(lái)命名,只分為低級(jí)別鱗狀上皮內(nèi)病變(LSIL)及高級(jí)別鱗狀上皮內(nèi)病變(HSIL)兩類[1]。近些年以來(lái)國(guó)際和國(guó)內(nèi)使用了一種新的分子標(biāo)記物,就是使用免疫組織化學(xué)染色的方法在宮頸組織中檢測(cè)p16有無(wú)過(guò)度表達(dá),來(lái)作為HPV感染引起的細(xì)胞周期失調(diào)的整合標(biāo)記物。該研究選取2004—2015年該院宮頸標(biāo)本180例為研究對(duì)象,旨在研究P16在宮頸上皮內(nèi)病變中的輔助診斷價(jià)值,現(xiàn)報(bào)道如下。

        1 資料與方法

        1.1一般資料

        方便選取云南省昭通市第一人民醫(yī)院2004—2015年間的宮頸標(biāo)本180例,包括良性病變50例,LSIL 60例,HSIL 70例,所有病例均經(jīng)病理檢驗(yàn)證實(shí)。

        1.2方法

        采用10%中性甲醛進(jìn)行組織脫水固定,常規(guī)石蠟包埋,切片厚度在3~4 μm之間,免疫組化染色采用SP法,DAB顯色,陰性對(duì)照采用 PBS液 (0.01 mol/L,pH7.4)代替第一抗體作為對(duì)照,陽(yáng)性對(duì)照用已知陽(yáng)性組織切片對(duì)照。選用的P16單克隆抗體、SP試劑盒等相關(guān)試劑均購(gòu)自福州邁新生物技術(shù)開(kāi)發(fā)有限公司。所有實(shí)驗(yàn)操作均嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

        1.3結(jié)果判定

        結(jié)果評(píng)價(jià)參照說(shuō)明書(shū),棕黃色顆粒視為P16陽(yáng)性染色,隨機(jī)選取10個(gè)高倍視野,人工計(jì)數(shù)陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)量,<30%為(+),30%~50%為(++),>50%為(+++)。

        1.4統(tǒng)計(jì)方法

        使用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析數(shù)據(jù),設(shè)定P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

        2 結(jié)果

        從表1中可以看出p16在宮頸良性病變中均不表達(dá),LSIL中p16陽(yáng)性率達(dá)45%,主要為點(diǎn)灶狀表達(dá)并主要集中在中間及表層,HSIL中p16表達(dá)率達(dá)100%,且絕大部分為帶狀表達(dá),各組之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

        表1 p16在180例宮頸病變中的表達(dá)情況

        3 討論

        隨著社會(huì)的發(fā)展,在女性群體當(dāng)中,宮頸癌已經(jīng)逐漸成為女性生殖系統(tǒng)惡性腫瘤之中發(fā)病率最高的腫瘤,而且患者多為老年婦女,致死率較高,嚴(yán)重危害婦女的生命健康。為了更好地防范和治療宮頸癌,臨床上常常使用p16基因作為病情診斷的標(biāo)記物,具有一定應(yīng)用意義。在醫(yī)學(xué)上p16基因又稱p161NK4a、CDKN2及MTS1基因,是美國(guó)冷泉實(shí)驗(yàn)室Kamb等于1994年發(fā)現(xiàn)的新的一種抗癌基因,它是一種重要的抑癌基因,是一種細(xì)胞周期中的基本基因,負(fù)調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖及分裂,抑制CDK4的活性,從而抑制細(xì)胞由G1進(jìn)入S期,對(duì)Rb基因控制的細(xì)胞增殖有負(fù)性調(diào)節(jié)。p16染色體定位在9p21上,是由2個(gè)內(nèi)含子及2個(gè)外顯子組成,它是細(xì)胞周期依賴激酶抑制子。正常情況下,p16通過(guò)對(duì)抑癌基因視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤蛋白(pRb)磷酸化過(guò)程的阻止,起到抑制細(xì)胞周期的進(jìn)展的作用。當(dāng)高危型HPV病毒蛋白與pRb結(jié)合,從而導(dǎo)致轉(zhuǎn)錄因子E2F的釋放,引起pRb依賴的p16表達(dá)上調(diào)。所以p16陽(yáng)性被認(rèn)為是存在高危HPV感染的替代性標(biāo)志物,而應(yīng)用于高級(jí)別上皮內(nèi)病變的輔助診斷中。相關(guān)報(bào)道已經(jīng)證實(shí)p16的異常甲基化能夠參與多種腫瘤細(xì)胞的增殖和發(fā)展[2]。Sano等[3]的研究顯示,p16能夠作為宮頸上皮內(nèi)瘤變的一個(gè)病理診斷標(biāo)志物被應(yīng)用于臨床。

        由于宮頸良性病變和惡性變的處理方案完全不同,因此做好鑒別診斷,區(qū)分良性病變、LSIL及HSIL是個(gè)比較困難的問(wèn)題。在第四版WHO分類(2014年)方案中也沒(méi)有簡(jiǎn)單地將CIN2病變歸入到HSIL中,許多之前診斷的CIN2病變包含了部分的LSIL及部分的HSIL。近些年來(lái)的研究顯示:利用免疫組織化學(xué)染色檢測(cè)P16的表達(dá)情況,可以幫助區(qū)別兩者。按照美國(guó)陰道鏡與宮頸病理學(xué)會(huì)和美國(guó)病理學(xué)會(huì)的LAST項(xiàng)目研究,加做p16標(biāo)記有助于對(duì)CIN進(jìn)行更為準(zhǔn)確的分級(jí)。對(duì)臨床較難處理的CIN1-CIN2宮頸標(biāo)本,p16陽(yáng)性時(shí),可診斷為HSIL,判定為CIN2;p16陰性則可診斷為L(zhǎng)SIL,判定為CIN1。LAST研究結(jié)果表明,p16的標(biāo)記對(duì)提高診斷重復(fù)性具很好的作用,推薦以下幾種情況中使用p16標(biāo)記:HSIL和容易混淆的非腫瘤性病變的鑒別,譬如不成熟性鱗狀上皮化生、萎縮、上皮修復(fù)性增生及人為假象;有爭(zhēng)議的CIN2;病理醫(yī)師之間診斷意見(jiàn)不同;組織學(xué)診斷為陰性,但細(xì)胞學(xué)陰道鏡提示有高級(jí)別病變可能,HPV檢測(cè)高危型病毒感染。通過(guò)該研究提示按照宮頸良性病變→LSIL→HSIL的順序,p16的表達(dá)也逐漸增高,組間對(duì)比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,且表達(dá)方式逐漸由弱陽(yáng)性轉(zhuǎn)為強(qiáng)陽(yáng)性,說(shuō)明p16的表達(dá)會(huì)隨著宮頸病變的惡性程度而升高,可以作為鑒別宮頸上皮內(nèi)瘤變的一個(gè)有效標(biāo)志物。

        綜上所述,當(dāng)患者的病情加重的時(shí)候,p16的表達(dá)也逐漸增高,充分表現(xiàn)出宮頸病變的惡性程度的變化規(guī)律,因此p16可以作為宮頸良性病變、LSIL及HSIL之間鑒別診斷的一個(gè)有用的標(biāo)記物,值得臨床上加以使用。

        [1]沈丹華.解讀第4版WHO(2014)女性生殖系統(tǒng)腫瘤分類中宮頸癌前期病變的命名及分級(jí)變化[J].診斷病理學(xué)雜志,2015,22(3):129-132.

        [2]Rocco JW,Sidransky D p16(MTS-1/CDKN2/INK4a)in cancer progression[J].Exp Cell Res,2001,264(1):42-55.

        [3]Sano T,Oyama T,Kashiwabara K,et al.Immunohistochemical overexpression of p16 protein associated with intact retinoblastoma protein expression in cervical cancer and cervical intraepithelial neoplasia[J].Pathol lnt,1998,48(8):580-585.

        [4]劉彤,崔莉,許麗娟,等.p16、Ki-67蛋白表達(dá)及HPV檢測(cè)在宮頸上皮內(nèi)瘤變中的診斷意義[J].診斷病理學(xué)雜志,2009,16(5):343-345.

        [5]張王亮.P16、Ki-67聯(lián)合半定量評(píng)分在宮頸上皮內(nèi)瘤變分級(jí)診斷中的應(yīng)用及其HPV感染的關(guān)系[D].太原:山西醫(yī)科大學(xué):2015.

        [6]李艷東,鄭建云,劉冰.E-cadherin、p16及Ki67在宮頸上皮內(nèi)瘤變?cè)\斷中的應(yīng)用[J].山西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),2011,42(11): 876-879,939-940.

        [7]張紅凱,杜強(qiáng),嚴(yán)美申,等.Ki-67和p16在子宮宮頸病變中的表達(dá)及其協(xié)助診斷的意義[J].首都醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),2008, 29(3):344-349.

        [8]劉濤,何麗超,李竹琴.p16蛋白和Ki67抗原標(biāo)記指數(shù)表達(dá)在宮頸上皮內(nèi)瘤變中的診斷價(jià)值[J].中國(guó)腫瘤臨床與康復(fù),2013,2(2):119-121.

        Diagnostic Value of P16 Expression in Cervical Intraepithelial Lesions

        CHENG Tao,SHENG Hong,QIU Xue-fang
        Zhaotong City People's Hospital Department of Pathology,Zhaotong,Yunnan Province,657000 China

        Objective To investigate the expression of p16 protein in cervical intraepithelial lesions diagnostic value. Methods Convenient from Zhaotong City of Yunnan Province in 2004 to 2015 the first people's Hospital cervical specimens of 180 cases as the research object,using immunohistochemistry SP method to detect the expression of 180 cases of benign cervical lesions and cervical intraepithelial lesion in p16 protein,and the expression and significance of analysis. Results Cervical benign lesions of p16 expression rate was 0%,the rate of p16 expression in LSIL is 45%and is focal point to express and largely confined to the middle and the surface,p16 expression in HSIL rate more than 100%and for ribbon strong positive expression,the significant difference between groups(P<0.05).Conclusion P16 can be used as a differential diagnosis between cervical benign lesions,LSIL and HSIL a useful marker.

        Cervical intraepithelial lesions;P16;Diagnosis

        R737.33

        A

        1674-0742(2016)10(c)-0019-03

        10.16662/j.cnki.1674-0742.2016.30.019

        程濤(1974.12-),男,云南鎮(zhèn)雄人,本科,副主任醫(yī)師,研究方向:病理學(xué)。

        (2016-07-26)

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