王 哲,劉 碩,苗文龍

(河北北方學(xué)院附屬第一醫(yī)院泌尿外科,河北 張家口 075000)

?

P53與Mta-1在膀胱癌中的表達(dá)及臨床意義

王 哲,劉 碩,苗文龍

(河北北方學(xué)院附屬第一醫(yī)院泌尿外科,河北 張家口 075000)

目的 探討P53及Mta-1在膀胱癌中的表達(dá)及臨床意義。方法 采用免疫組化法分別對(duì)60例膀胱癌和10例癌旁正常膀胱黏膜的石蠟標(biāo)本行P53與Mta-1蛋白檢測(cè)。結(jié)果 P53和Mta-1在膀胱癌標(biāo)本中的陽(yáng)性率分別是63.3%(38/60)和71.6%(43/60)，在正常膀胱黏膜組織中的陽(yáng)性率均為0%，差異有顯著性(P<0.01)。P53和Mta-1陽(yáng)性表達(dá)均與膀胱癌患者的臨床分期及病理分級(jí)相關(guān)(P<0.05)；與患者性別、年齡、腫瘤大小等不相關(guān)(P>0.05)。Mta-1與P53在膀胱癌的表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.596，P=0.000)。結(jié)論 P53及Mta-1的高表達(dá)可作為膀胱癌惡性程度及判斷預(yù)后的重要指標(biāo)。

膀胱癌；P53；Mta-1

膀胱癌是泌尿系統(tǒng)常見惡性腫瘤，在我國(guó)的發(fā)病率和病死率均居泌尿生殖系腫瘤首位，腫瘤的復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移是導(dǎo)致膀胱癌患者死亡的主要原因[1]。到目前為止，還沒有一種可以用作膀胱癌獨(dú)立診斷的標(biāo)記物。本研究回顧性分析了河北北方學(xué)院附屬第一醫(yī)院病理科2013-2014年間收集的原發(fā)性膀胱癌術(shù)后病例資料，采用免疫組織化學(xué)技術(shù)研究生物標(biāo)記物P53及Mta-1蛋白在膀胱癌的表達(dá)并探討它們與腫瘤生物學(xué)特點(diǎn)及轉(zhuǎn)移的關(guān)系，以期為臨床提供更多信息，指導(dǎo)治療，減少?gòu)?fù)發(fā)與轉(zhuǎn)移。

1 材料與方法

1.1 材料

河北北方學(xué)院附屬第一醫(yī)院病理科2013-2014年間收集的60例原發(fā)性膀胱癌術(shù)后病例資料，所有患者術(shù)前均未行放療、化療、激素治療或免疫治療。同時(shí)選取10例癌旁正常膀胱黏膜石蠟標(biāo)本為對(duì)照。

1.2 方法

1.2.1 HE染色 切片進(jìn)行常規(guī)HE染色核實(shí)病理診斷。

1.2.2 免疫組織化學(xué)染色 所選蠟塊連續(xù)切取4 μm白片各2張以供做免疫組化染色，應(yīng)用S-P法檢測(cè)。

1.3 結(jié)果判斷

判斷標(biāo)準(zhǔn)：每張圖片隨機(jī)選擇5個(gè)高倍鏡視野，然后計(jì)數(shù)陽(yáng)性細(xì)胞百分比的平均數(shù)，以出現(xiàn)淺黃色、棕黃色、黃褐色顆粒記為陽(yáng)性細(xì)胞，依陽(yáng)性細(xì)胞占所觀察細(xì)胞的百分比和著色強(qiáng)度綜合計(jì)分：無(wú)染色記為0分,弱染色(顏色為淺黃色)記為1分，中等染色(顏色為棕黃色)記為2分，強(qiáng)染色(顏色為黃褐色)記為3分；陽(yáng)性細(xì)胞率≤5%記0分，5%～25%記1分，25%～50%記2分，>50%記3分。然后將上述兩項(xiàng)積分相加，0分記為陰性(-)，1～2分記為弱陽(yáng)性(+)，3～4分記為中等陽(yáng)性(++)，5～6分記為強(qiáng)陽(yáng)性(+++)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 11.5統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。根據(jù)不同的數(shù)據(jù)類型采用χ2檢驗(yàn)(Chi-square test)檢驗(yàn)和Spearman等級(jí)資料相關(guān)分析。

2 結(jié) 果

2.1 P53免疫組織化學(xué)染色結(jié)果

2.1.1 P53在膀胱癌及正常膀胱黏膜中的表達(dá)情況 結(jié)果表明，膀胱癌組織中P53的陽(yáng)性表達(dá)率為63.3%(38/60)，與正常膀胱黏膜差異有顯著性(χ2=13.854,P=0.000)(表1)。

表1 P53蛋白在膀胱癌及正常膀胱黏膜中的表達(dá) (n)

2.1.2 P53表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系 P53陽(yáng)性表達(dá)與患者臨床分期及病理分級(jí)等相關(guān)(P<0.05)。臨床分期為浸潤(rùn)型、病理分級(jí)高的患者P53表達(dá)強(qiáng)，其陽(yáng)性表達(dá)與患者性別、年齡、腫瘤大小等不相關(guān)(P>0.05)(表2)。

表2 P53表達(dá)與膀胱癌臨床病理特征的關(guān)系(n)

2.2 Mta-1免疫組織化學(xué)染色結(jié)果

2.2.1 Mta-1蛋白在膀胱癌及正常膀胱黏膜中的表達(dá)情況 膀胱癌組織中Mta-1陽(yáng)性表達(dá)率為71.6%(43/60)，與正常膀胱黏膜差異有顯著性(χ2=18.580,P=0.000)(表3)。

表3 Mta-1在膀胱癌及正常膀胱黏膜中的表達(dá) (n)

2.2.2 Mta-1表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系 Mta-1陽(yáng)性表達(dá)與患者臨床分期、病理分級(jí)等相關(guān)(P<0.05)。臨床分期為浸潤(rùn)型、病理分級(jí)高的患者M(jìn)ta-1表達(dá)強(qiáng)。其陽(yáng)性表達(dá)與患者性別、年齡、腫瘤大小等均不相關(guān)(P>0.05)(表4)。

表4 P53表達(dá)與膀胱癌臨床病理特征的關(guān)系 (n)

2.3 P53與Mta-1在膀胱癌表達(dá)中的關(guān)系

Mta-1與P53在膀胱癌的表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.596)。P53在Mta-1陽(yáng)性組中的表達(dá)(陽(yáng)性率81.4%)明顯高于在Mta-1陰性組中的表達(dá)(陽(yáng)性率17.6%)，差異有顯著性(P=0.000)。

3 討 論

近年來(lái)，膀胱癌的發(fā)病率有所增長(zhǎng)，在我國(guó)，膀胱癌的發(fā)病率和死亡率均在泌尿外科腫瘤中占首位，且膀胱癌的組織學(xué)類型以膀胱尿路上皮癌最為常見，占膀胱癌的90%以上。其中約20%～40%的患者為肌層浸潤(rùn)性膀胱癌或高危非肌層浸潤(rùn)性膀胱癌[2]，術(shù)后復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移仍是導(dǎo)致患者不良預(yù)后的常見原因。目前雖然有影像學(xué)、尿脫落細(xì)胞學(xué)檢查等多種診斷膀胱癌的方法，但確診仍依賴于膀胱鏡檢查及病理活檢，到目前為止，還沒有一種可以用作膀胱癌獨(dú)立診斷的標(biāo)記物。因此，尋找特異性及敏感性均較高的生物學(xué)標(biāo)記物對(duì)指導(dǎo)膀胱癌的臨床診斷、治療和預(yù)后觀察極為重要。

P53基因是與人類腫瘤相關(guān)性較高的抑癌基因，也是研究較為廣泛的基因之一[3]，研究表明，突變型p53基因?qū)?xì)胞凋亡有抑制作用[4]。人體癌組織中過量表達(dá)的P53蛋白通常是由p53基因突變引起的[5]。突變型p53基因目前已證實(shí)與乳腺癌、結(jié)腸癌、頭頸部腫瘤、白血病等惡性腫瘤的不良預(yù)后密切相關(guān)[6]。本研究采用免疫組化方法檢測(cè)P53蛋白在膀胱癌及正常膀胱黏膜組織中的表達(dá)情況，結(jié)果顯示，P53高表達(dá)且與膀胱癌患者臨床分期、病理分級(jí)等密切相關(guān)，與孫玉朝等[7]的研究結(jié)果一致，其表達(dá)的變化可能對(duì)膀胱癌的演化和進(jìn)展起重要作用，可作為潛在預(yù)測(cè)膀胱癌浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移的敏感指標(biāo)。

Mta-1是一種腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)基因，該基因全長(zhǎng)2.2 kb，其cDNA全長(zhǎng)為2756 bp，編碼一個(gè)含有703個(gè)氨基酸殘基的蛋白質(zhì)Mta-1蛋白，該蛋白主要存在于細(xì)胞核內(nèi)，分子量為79 400。Mta-1基因在大多數(shù)正常組織和器官如肝、腦、心、肺、腎、腸道、甲狀腺、肌肉組織、睪丸中均有不同程度的表達(dá)，在睪丸中表達(dá)最高，在骨骼肌表達(dá)水平最低，說(shuō)明Mta-1基因可能在細(xì)胞生理與病理狀態(tài)下均發(fā)揮作用[8]。本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果顯示，膀胱癌組織中Mta-1的陽(yáng)性表達(dá)率為71.6%，與正常膀胱黏膜表達(dá)差異有顯著性(P=0.000)，提示Mta-1與膀胱癌的發(fā)生有關(guān)。本研究結(jié)果表明，Mta-1陽(yáng)性表達(dá)與患者臨床分期、病理分級(jí)等相關(guān)，臨床分期為浸潤(rùn)型、病理分級(jí)高的患者M(jìn)ta-1表達(dá)強(qiáng)，而其陽(yáng)性表達(dá)與患者的性別、年齡、腫瘤大小等均不相關(guān)，與既往報(bào)道結(jié)果相一致[9]。

綜上，P53及Mta-1的高表達(dá)均與膀胱癌患者臨床分期、病理分級(jí)等有相關(guān)性。二者在膀胱癌的表達(dá)存在明顯正相關(guān)，提示二者可能通過某種途徑促進(jìn)膀胱癌細(xì)胞的增殖、浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移。

[1]呂磊,袁敬東,吳維，等.長(zhǎng)鏈非編碼RNA尿路上皮癌相關(guān)1基因與miR-34 b在膀胱癌中的表達(dá)及臨床相關(guān)性研究[J].中華泌尿外科雜志,2016,37(7):538-543.

[2]Pharmacogenomics,楊宏，劉志敏，雷永虹等.膀胱癌根治性膀胱切除加腸道原位新膀胱術(shù)患者圍手術(shù)期致命性并發(fā)癥分析[J].中華腫瘤雜志,2016,38(3):236-239.

[3]You J,Yang H,Lai Y,et a1.ARID2,P110α,P53 and β-catenin protein expression in hepatocellular carcinoma and elinieopathologie implications[J].Hum Pathol,2015,46(7)：1068-1077.

[4]任鵬,傅亞軍,謝珊艷.C-erbB-2、P53及增殖細(xì)胞核抗原在卵巢上皮癌中的表達(dá)及臨床意義[J].浙江實(shí)用醫(yī)學(xué),2016,21(1):12-14.

[5]佐晶，宋艷，李卓，等.P53蛋白表達(dá)與晚期卵巢漿液性腺癌預(yù)后的相關(guān)性[J].中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院學(xué)報(bào),2016,38(2):169-174.

[6]Petitjean A,Achatz M I,Borresen-Dale A L,，et a1.P53 mutations in human cancers：functional selection and impact on cancer prognosis and outcome[J].Oncogene，2007,26(15)：2157-2165.

[7]孫玉朝.膀胱癌組織中P53、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子、環(huán)氧化酶-2和表皮生長(zhǎng)因子受體的表達(dá)中國(guó)老年學(xué)雜志[J].2014,34(17):4732-4734.

[8]Nawa A，Nishimori K，Lin P，et al.Tumor metastasis-associated human Mta-1 gene:its deduced protein sequence，localization，and associated with breast cancer cell proliferation using antisense phosphorothioate oligonueleotides[J].Cell Bioehem,2000,79(2):202-212.

[9]李春生.Mta-1與Ezrin在膀胱移行細(xì)胞癌組織中的表達(dá)及其相關(guān)性[J].中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)生,2010,46(28):4-5.

[責(zé)任編輯：李薊龍 英文編輯：劉彥哲]

Expressions of P53 and Mta-1 in Bladder Cancer and Their Clinical Significance

WANG Zhe,LIU Shuo,MIAO Wen-long

(Urology Department,First Affiliated Hospital of Hebei North University,Zhangjiakou,Hebei 075000,China)

Objective To investigate the expression of P53 and Mta-1 in bladder cancer tissue and their clinical significance.Methods The samples comprised of formalin-fixed paraffin-embedded tissue blocks of 60 cases of primary bladder cancer and 10 cases of normal bladder mucosa.The expressions of P53 and Mta-1 in the samples were immunohistochemically determined and their correlation with clinicopathological parameters was statistically analyzed.Results The rates of positive expression of P53 and Mta-1 in bladder cancer tissue were 63.3%(38/60)and 71.6%(43/60),respectively,and in normal bladder mucosa 0%.There was significant difference between the two groups(P<0.01).Furthermore,high expressions of P53 and Mta-1 in bladder cancer were closely related with the clinical stage and pathological grade(P<0.05),but there was no obvious relationship with patient’s sex,age and tumor size(P>0.05).Also,it was found that the expression of P53 was positively correlated with Mta-1 expression in bladder cancer(r=0.596,P=0.000).Conclusion Expressions of P53 and Mta-1 in bladder cancer tissue could serve as significant biomarkers to predict the aggressiveness and prognostic outcome.

bladder cancer;P53;Mta-1

王哲(1978-)，男，河北張家口人，碩士，主治醫(yī)師，主要研究方向：泌尿系統(tǒng)腫瘤基礎(chǔ)和臨床研究。

R 737.14

A

10.3969/j.issn.1673-1492.2016.10.002

來(lái)稿日期：2016-08-12