鐘映梅，張俊峰，張君，汪淼，蘇景，張加勇，孫剛*

（黑龍江省動(dòng)物疫病預(yù)防與控制中心，黑龍江哈爾濱　150069）

黑龍江省種牛疫病監(jiān)測(cè)與凈化

鐘映梅，張俊峰，張君，汪淼，蘇景，張加勇，孫剛*

（黑龍江省動(dòng)物疫病預(yù)防與控制中心，黑龍江哈爾濱150069）

2014～2016年，對(duì)黑龍江省3家規(guī)模種牛場(chǎng)1594頭份牛樣品開展布魯氏菌?。˙rucellosis）、口蹄疫（FMD）、牛傳染性鼻氣管炎（IBR）、牛白血?。˙L）、牛病毒性腹瀉（BVD）、藍(lán)舌?。˙T）6種疫病監(jiān)測(cè)。結(jié)果顯示，除了藍(lán)舌病和口蹄疫外，其他病均有檢出。由于采取預(yù)防、控制和凈化措施，2015年以后未檢出布病和白血病陽(yáng)性牛，牛傳染性鼻氣管炎和牛病毒性腹瀉的血清學(xué)陽(yáng)性率有所下降。通過從源頭上控制牛疫病發(fā)生和傳播，為畜牧產(chǎn)業(yè)發(fā)展提供了技術(shù)支持和保障。

種牛；監(jiān)測(cè)；凈化

近年來，黑龍江省發(fā)展以“兩牛一豬”（奶牛、肉牛和生豬產(chǎn)業(yè)）為重點(diǎn)的質(zhì)量效益型現(xiàn)代畜牧產(chǎn)業(yè)，大力推進(jìn)奶牛規(guī)?；?、標(biāo)準(zhǔn)化、產(chǎn)業(yè)化發(fā)展，2014年全省奶牛存欄197萬(wàn)頭，肉牛出欄264萬(wàn)頭，牛奶產(chǎn)量達(dá)到557萬(wàn)噸，80%牛奶銷往全國(guó)和國(guó)際市場(chǎng)。同時(shí)，牛疫病流行趨勢(shì)日趨復(fù)雜，對(duì)養(yǎng)牛業(yè)發(fā)展構(gòu)成嚴(yán)重威脅。2014～2016年，我單位對(duì)3家規(guī)模種牛場(chǎng)開展了布魯氏菌?。˙R）、口蹄疫（FMD）、牛傳染性鼻氣管炎(IBR)、牛白血?。˙L）、牛病毒性腹瀉（BVD）、藍(lán)舌?。˙T）6種疫病的監(jiān)測(cè)與凈化工作，旨在掌握我省種牛疫病流行情況和分布狀況，從源頭上控制牛病發(fā)生和傳播，提高牛群生產(chǎn)性能，為畜牧產(chǎn)業(yè)健康發(fā)展提供技術(shù)支撐。

1　材料和方法

1.1監(jiān)測(cè)樣品2014～2016年連續(xù)3年對(duì)黑龍江省3家規(guī)模種牛場(chǎng)按存欄數(shù)10%抽樣監(jiān)測(cè)，每年采集牛血清562份、428份、604份，合計(jì)1594份。

1.2檢測(cè)方法

1.2.1布魯氏菌病應(yīng)用虎紅平板凝集試驗(yàn)方法初篩，試管凝集方法進(jìn)行確認(rèn)。按照GB/T-18646執(zhí)行。試劑購(gòu)自哈藥集團(tuán)生物疫苗有限公司。

1.2.2口蹄疫應(yīng)用牛羊口蹄疫病毒抗體檢測(cè)試劑盒（FMD-3ABC Bo-Ov），檢測(cè)牛血清非結(jié)構(gòu)蛋白抗體，試劑購(gòu)自IDEXX公司。對(duì)于陽(yáng)性樣品采集OP液，應(yīng)用口蹄疫熒光定量RT-PCR試劑盒進(jìn)行病原學(xué)檢測(cè)，試劑購(gòu)自中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所。

1.2.3牛傳染性鼻氣管炎應(yīng)用固相間接ELISA方法檢測(cè)牛傳染性鼻氣管炎抗體，試劑購(gòu)自瑞士SVANOVIR公司。

1.2.4牛白血病應(yīng)用固相間接ELISA方法檢測(cè)牛白血病gp51抗體，試劑購(gòu)自瑞士SVANOVIR公司。

1.2.5牛病毒性腹瀉應(yīng)用固相間接ELISA方法檢測(cè)牛病毒性腹瀉抗體，試劑購(gòu)自瑞士SVANOVIR公司。

1.2.6藍(lán)舌病應(yīng)用固相阻斷ELISA方法檢測(cè)藍(lán)舌病VP7抗體，試劑購(gòu)自美國(guó)IDEXX公司。

2　結(jié)果

2.1布病檢測(cè)結(jié)果

2014年在1個(gè)場(chǎng)檢出2頭布病陽(yáng)性牛，經(jīng)試管法確認(rèn)陽(yáng)性后撲殺并無害化處理。其余場(chǎng)的牛血清未檢出布病陽(yáng)性。

2.2口蹄疫檢測(cè)結(jié)果

對(duì)于口蹄疫非結(jié)構(gòu)蛋白（NSP）抗體陽(yáng)性牛，開展臨床調(diào)查并采集OP液進(jìn)行病原學(xué)檢測(cè)，未檢出病原學(xué)陽(yáng)性牛。

2.3牛傳染性鼻氣管炎檢測(cè)結(jié)果

2014～2016年，對(duì)3個(gè)場(chǎng)牛傳染性鼻氣管炎血清學(xué)陽(yáng)性數(shù)進(jìn)行合并統(tǒng)計(jì)，每年陽(yáng)性率分別為39.68%，18.46%和16.72%，但是每個(gè)場(chǎng)的陽(yáng)性率差距較大，最低陽(yáng)性率為0，最高可達(dá)48.24%。養(yǎng)殖量小的牛場(chǎng)該病的陽(yáng)性率較低。

2.4牛白血病檢測(cè)結(jié)果

2014年在1個(gè)牛場(chǎng)檢測(cè)出牛白血病陽(yáng)性牛，2015年和2016年未檢測(cè)出陽(yáng)性。

2.5牛病毒性腹瀉檢測(cè)結(jié)果

2014-2016年，對(duì)3個(gè)場(chǎng)牛病毒性腹瀉病血清學(xué)陽(yáng)性數(shù)合并統(tǒng)計(jì)，每年陽(yáng)性率分別為22.24%，20.32%和18.71%。不同場(chǎng)的牛該病陽(yáng)性率分化非常大，從0%～41.23%不等。

2.6藍(lán)舌病檢測(cè)結(jié)果

在3個(gè)牛場(chǎng)中均未檢出藍(lán)舌病病毒抗體。

2014～2016年種牛疫病檢測(cè)結(jié)果

3　討論

3.1通過對(duì)種牛6種疫病的監(jiān)測(cè)發(fā)現(xiàn)，除了藍(lán)舌病和口蹄疫之外，其他病均有檢出。對(duì)于布病陽(yáng)性牛和白血病陽(yáng)性牛及時(shí)進(jìn)行了撲殺和淘汰，使兩種病得到了有效控制。

3.2我們對(duì)非結(jié)構(gòu)蛋白抗體陽(yáng)性牛采集O-P液，采用RT-PCR進(jìn)一步檢測(cè)未發(fā)現(xiàn)陽(yáng)性病例。對(duì)于牛檢測(cè)出口蹄疫非結(jié)構(gòu)蛋白抗體，許多學(xué)者認(rèn)為疫苗中殘留的NSP或非特異性應(yīng)激因素亦可引起假陽(yáng)性反應(yīng)。另外，實(shí)施口蹄疫撲滅計(jì)劃時(shí)，也有人應(yīng)用OIE認(rèn)可的3ABC-ELISA和酶聯(lián)免疫電轉(zhuǎn)印試驗(yàn)（EITB）聯(lián)合法，從而及時(shí)發(fā)現(xiàn)真正的陽(yáng)性牛。

3.3牛傳染性鼻氣管炎為B類動(dòng)物傳染病，可引起上呼吸道黏膜炎癥、膿皰性外陰陰道炎、龜頭炎、結(jié)膜炎、腦膜腦炎、乳房炎和流產(chǎn)等牛多系統(tǒng)感染，發(fā)病率為20%～100%，奶牛繼發(fā)性流產(chǎn)有時(shí)高達(dá)50%，死亡率為1%～12%。過去牛場(chǎng)出現(xiàn)類似癥狀時(shí)，多考慮布病方面問題或單純的炎癥問題。我們通過監(jiān)測(cè)發(fā)現(xiàn)，許多牛場(chǎng)該病的血清學(xué)感染率較高，并指導(dǎo)牛場(chǎng)查找育肥牛生長(zhǎng)緩慢、奶牛產(chǎn)奶量下降、流產(chǎn)原因，及時(shí)開展本病的防治，對(duì)陽(yáng)性牛隔離，并及時(shí)淘汰出現(xiàn)臨床癥狀的牛，或使用IBR基因缺失疫苗進(jìn)行控制。

3.4牛病毒性腹瀉病常表現(xiàn)為發(fā)熱、腹瀉，急、慢性黏膜病，持續(xù)性感染與免疫耐受，此外還可以引起母畜流產(chǎn)、死胎和畸形等。通過監(jiān)測(cè)發(fā)現(xiàn)，某些場(chǎng)的血清學(xué)陽(yáng)性率非常高，我們建議牛場(chǎng)將血清學(xué)陰性和陽(yáng)性牛分開飼養(yǎng)，血清學(xué)陽(yáng)性公牛不再作為供精動(dòng)物，并且逐步淘汰有臨床癥狀的陽(yáng)性牛，目前已經(jīng)使1個(gè)牛場(chǎng)的陽(yáng)性率下降50%。

3.5對(duì)種牛來說，疫病傳播的風(fēng)險(xiǎn)較大，因此不僅要注重布病和口蹄疫的防控，還應(yīng)關(guān)注牛白血病、牛病毒性腹瀉、牛傳染性鼻氣管炎及藍(lán)舌病。重點(diǎn)是嚴(yán)格把好引種關(guān)，實(shí)行分類飼養(yǎng)，加大監(jiān)測(cè)力度，撲殺布病陽(yáng)性牛，逐步淘汰其他患病牛和隱形感染牛，從而有效控制疫病傳播。

[1]朱詠梅，等.口蹄疫非結(jié)構(gòu)蛋白研究進(jìn)展，中國(guó)動(dòng)物檢疫[J].2011，5：83-86.

[2]中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所主編，動(dòng)物傳染病學(xué)[M].北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2008，5.

[3]Nardelli S，et al.Dynamics of infection and immunity in a dairy cattle population undergoing an eradication programme for Infectious Bovine Rhinotracheitis（IBR）[J].Prev Vet Med，2008，85（1-2）：68-80.

[4]殷震，等.動(dòng)物病毒學(xué)12版[M].北京:科學(xué)技術(shù)出版社，1997: 6452-6521.

10．3969/J.ISSN．1671-6027．2016．11.010

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