沈育鋒 胡 海

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P53在結(jié)節(jié)性甲狀腺腫合并甲狀腺癌中的表達(dá)及其相關(guān)性研究

沈育鋒 胡 海

目的 探討結(jié)節(jié)性甲狀腺腫合并甲狀腺癌患者中P53的表達(dá)及其臨床意義。方法 對(duì)70例結(jié)節(jié)性甲狀腺腫合并甲狀腺癌標(biāo)本,采用免疫組織化學(xué)SP法檢測(cè)P53表達(dá)，并與同期77例單純結(jié)節(jié)性甲狀腺腫組織的P53表達(dá)情況進(jìn)行對(duì)比分析。結(jié)果 在甲狀腺腫合并甲狀腺癌中P53陽(yáng)性表達(dá)率為47.14%(33/70)，單純結(jié)節(jié)性甲狀腺腫中其陽(yáng)性表達(dá)率為10.39%(8/77)，兩組差異有顯著性(P<0.05)。在單純結(jié)節(jié)性甲狀腺腫組及甲狀腺腫合并甲狀腺癌組中，年齡<50 歲與>50歲者P53陽(yáng)性率比較均無(wú)顯著性差異(P>0.05)。甲狀腺腫合并甲狀腺癌70例患者中腫瘤直徑<3 cm及>3 cm的患者P53陽(yáng)性率分別為39.02%、58.62%，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者P53陽(yáng)性率分別為59.26%、39.53%，兩者均無(wú)顯著差異性(P>0.05)。結(jié)論 P53表達(dá)在結(jié)節(jié)性甲狀腺腫患者的甲狀腺癌發(fā)生發(fā)展過(guò)程中具有特異性作用，對(duì)于結(jié)節(jié)性甲狀腺腫合并甲狀腺癌的診療具有重要意義。

P53；結(jié)節(jié)性甲狀腺腫；甲狀腺癌

(ThePracticalJournalofCancer,2016,31:1590～1592)

我國(guó)結(jié)節(jié)性甲狀腺腫發(fā)病率一直處于較高的水平，其中結(jié)節(jié)性甲狀腺腫與甲狀腺癌并存的報(bào)道越來(lái)越常見(jiàn)。本研究對(duì)P53本研究對(duì)70例甲狀腺腫合并甲狀腺癌患者P53的表達(dá)及其與臨床特征的相關(guān)性進(jìn)行分析，探討P53在甲狀腺腫合并甲狀腺癌患者的診治中的臨床意義。

1 材料與方法

1.1 研究對(duì)象

收集我院 2013年1月至2015年6月的甲狀腺腫合并甲狀腺癌患者手術(shù)的石蠟包埋病理標(biāo)本70 例，所有患者均經(jīng)病理檢查證實(shí)，且前均未接受行放、化療治療。其中男性23例，女性47例。年齡22～75歲，平均(46.1±10.4)歲。其中乳頭狀癌37例、濾泡狀癌10例、混合型癌11例、未分化癌12例。腫瘤 TNM 分期：Ⅰ、Ⅱ期共49例，Ⅲ、Ⅳ期21例。選取同期良性結(jié)節(jié)性甲狀腺腫取得手術(shù)病理標(biāo)本 的75例患者作為對(duì)照組，其中20例男性，55例女性，年齡 24～73歲，平均(52.12±17.87)歲。

1.2 方法

采用組織鏈霉菌抗生物素蛋白-過(guò)氧化物酶法(SP法)免疫組化染色，其中試劑盒來(lái)自福州邁新生物技術(shù)公司，嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。將組織標(biāo)本制備成4連續(xù)切片，經(jīng)烘烤、二甲苯脫蠟、3%過(guò)氧化氫滅活內(nèi)源性過(guò)氧化物酶后微波修復(fù)抗原、封閉。滴加特異性一抗，4 ℃孵育過(guò)夜；依次滴加生物素標(biāo)記的二抗、鏈霉菌抗生物素蛋白過(guò)氧化酶復(fù)合物三抗。采用二氨基聯(lián)苯胺 (DAB)顯色10 min 后蘇木精復(fù)染、梯度酒精脫水、二甲苯透明[1]。中性樹(shù)膠封片，顯微鏡下觀察 。

1.3 療效評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)[2]

P53 表達(dá)于胞核，以出現(xiàn)棕黃色為陽(yáng)性，以陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)百分比進(jìn)行等級(jí)區(qū)別，采用雙盲閱片法半定量觀察。陽(yáng)性細(xì)胞百分比<25%為(+)，25%～50% 為(++)，>50% 為(+++)，無(wú)陽(yáng)性細(xì)胞或陽(yáng)性細(xì)胞百分比<5%為(-)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

應(yīng)用SPSS 21.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)整理及數(shù)據(jù)分析， 定性檢測(cè)陽(yáng)性表達(dá)率采用百分比表示，組間比較采用檢驗(yàn)，P<0.05 表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 2組患者P53表達(dá)陽(yáng)性率的比較

P53mRNA 在甲狀腺腫合并甲狀腺癌中陽(yáng)性表達(dá)率為47.14%(33/70)，在甲狀腺腫合并甲狀腺癌中陽(yáng)性表達(dá)率為10.39%(8/77);兩組P53表達(dá)率比較差異有顯著性(P<0.05)，乳頭狀癌、濾泡狀癌、混合型癌、未分化癌陽(yáng)性表達(dá)率分別為13.52%、80.00%、81.82%、91.66%，見(jiàn)表1。

表1 2組患者P53表達(dá)陽(yáng)性率的比較/例

2.2 2組P53表達(dá)水平與患者年齡的關(guān)系比較

在單純結(jié)節(jié)性甲狀腺腫組中年齡<50 歲和>50歲P53陽(yáng)性率分別為 12.50%和 8.10%，兩者比較無(wú)顯著性差異(P>0.05);甲狀腺腫合并甲狀腺癌上述兩個(gè)年齡患者P53陽(yáng)性率分別為47.37%和46.88%，兩者差異亦無(wú)顯著性(P>0.05)，具體見(jiàn)表2。

表2 兩組患者P53表達(dá)水平與患者年齡的關(guān)系/例

2.3 P53表達(dá)與腫瘤大小的關(guān)系

70例甲狀腺腫合并甲狀腺癌組患者中腫瘤直徑<3 cm及>3 cm患者P53陽(yáng)性率分別為39.02%、58.62%，兩者比較差異無(wú)顯著性(P>0.05)；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者P53陽(yáng)性率分別為59.26%、39.53%，兩者差異亦無(wú)顯著性(P>0.05)，見(jiàn)表3。

表3 P53表達(dá)與腫瘤大小及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系/例

3 討論

結(jié)節(jié)性甲狀腺腫已經(jīng)不僅僅被認(rèn)為是1種良性甲狀腺病變，許多研究證實(shí)結(jié)節(jié)性甲狀腺腫與甲狀腺惡性病變之間的關(guān)系明顯，甚至在結(jié)節(jié)性甲狀腺腫增生的結(jié)節(jié)中可觀察到惡性病變的發(fā)生[3-4]。近年來(lái)關(guān)于結(jié)節(jié)性甲狀腺腫合并甲狀腺癌的報(bào)道也不在少數(shù)。然而，由于甲狀腺癌患者在早期并沒(méi)有非常明顯的癥狀，且其主要臨床表現(xiàn)與結(jié)節(jié)性甲狀腺腫相似，超聲檢查對(duì)于結(jié)節(jié)性甲狀腺腫合并甲狀腺癌的早期確診中無(wú)特異性，確診率比較低[5]。致使部分已經(jīng)合并甲狀腺癌的結(jié)節(jié)性甲狀腺腫患者常因手術(shù)范圍不夠而需接受2次手術(shù)。臨床上對(duì)于結(jié)節(jié)性甲狀腺腫的惡性轉(zhuǎn)化的早期確定非常重視，因此有必要尋找鑒別診斷結(jié)節(jié)性甲狀腺腫合并甲狀腺癌的特異性標(biāo)志物。P53 基因定位于17號(hào)染色體短臂1區(qū)3.1帶，幾乎表達(dá)于所有有核細(xì)胞，以編碼特定的磷酸核蛋白，但均是處于較低水平，而在癌細(xì)胞和轉(zhuǎn)化細(xì)胞中可達(dá)100倍。P53基因可以通過(guò)激活或抑制一系列基因,使腫瘤細(xì)胞周期阻滯,抑制腫瘤細(xì)胞放射損傷的修復(fù),促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的凋亡，抑制癌細(xì)胞生長(zhǎng)。

結(jié)節(jié)性甲狀腺腫增生結(jié)節(jié)的促甲狀腺激素長(zhǎng)期刺激引起甲狀腺內(nèi)部分濾泡上皮增生或乳頭狀增生，可能發(fā)生惡化[6]，研究指出在甲狀腺腫增生結(jié)節(jié)中出現(xiàn)RET/PTC重排和RAS突變[7]。因此，結(jié)節(jié)性甲狀腺腫伴增生結(jié)節(jié)很有可能是甲狀腺癌的癌前病變。當(dāng)結(jié)節(jié)性甲狀腺腫癌變一段時(shí)間后甲狀腺癌快速生長(zhǎng)，發(fā)展為結(jié)節(jié)性甲狀腺腫合并甲狀腺癌。多項(xiàng)研究已經(jīng)明確證明了P53 基因在DNA復(fù)制水平上調(diào)節(jié)細(xì)胞的正常生長(zhǎng)的重要作用，是細(xì)胞生長(zhǎng)的重要的調(diào)節(jié)因子。本研究發(fā)現(xiàn)，結(jié)節(jié)性甲狀腺腫合并增生結(jié)節(jié)P53的陽(yáng)性率明顯高于單純結(jié)節(jié)性甲狀腺腫，提示結(jié)節(jié)性甲狀腺腫合并增生結(jié)節(jié)時(shí)已經(jīng)開(kāi)始進(jìn)行細(xì)胞增殖，進(jìn)而通過(guò)演變轉(zhuǎn)化為惡性，有助于判別良性與惡性甲狀腺腫瘤[8]。

P53基因有野生型和突變型兩種，前者在細(xì)胞周期的調(diào)控、維持正常細(xì)胞生長(zhǎng)及抑制腫瘤增殖方面具有重要意義，但當(dāng)野生型P53過(guò)渡表達(dá)時(shí)則激活相關(guān)基因使其轉(zhuǎn)變?yōu)橥蛔冃蚉53基因，失去其原有的抑制細(xì)胞生長(zhǎng)的作用[9]。結(jié)節(jié)性甲狀腺腫惡變的機(jī)制可能與TSH等因子刺激促使正常細(xì)胞成為潛伏性瘤細(xì)胞，最終形成克隆。克隆之后在多種刺激信號(hào)導(dǎo)致P53基因的過(guò)度表達(dá)與轉(zhuǎn)化， P53表達(dá)過(guò)渡上升，反而促進(jìn)細(xì)胞轉(zhuǎn)化與增殖生長(zhǎng)，導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生逐步形成惡性表型。P53表達(dá)與患者年齡、腫瘤直徑、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等臨床特征無(wú)關(guān)，這與相關(guān)研究結(jié)果一致[10],提示結(jié)節(jié)性甲狀腺腫患者的甲狀腺組織異型增生、早期惡變的傾向與患者臨床特征的相關(guān)性不大。

P53具有調(diào)控細(xì)胞生長(zhǎng)、促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的凋亡，抑制癌細(xì)胞生長(zhǎng)的作用。P53的表達(dá)在結(jié)節(jié)性甲狀腺腫患者的甲狀腺癌發(fā)生發(fā)展過(guò)程中具有特異性標(biāo)志作用，在結(jié)節(jié)性甲狀腺腫合并甲狀腺癌患者中的表達(dá)明顯增加，對(duì)于結(jié)節(jié)性甲狀腺腫合并甲狀腺癌的診療具有重要意義。

[1] 應(yīng) 蓉,趙詠桔,李鳳英.P53、P73蛋白在甲狀腺乳頭狀癌中表達(dá)的意義〔J〕.診斷學(xué)理論與實(shí)踐,2009,8(3):325-328.

[2] 徐美榮,許建成,陳 云,等.RASSF1A、CK19 和P53在甲狀腺良惡性病變中的表達(dá)及臨床意義〔J〕.實(shí)用癌癥雜志,2010,25 (6):583-586.

[3] 張鴿文,朱斯維,王志明.結(jié)節(jié)性甲狀腺腫合并甲狀腺癌的診斷與治療〔J〕.中國(guó)普通外科雜志,2010,19 (5):467-470.

[4] 米泰宇,劉開(kāi)坤.結(jié)節(jié)性甲狀腺腫合并甲狀腺癌的臨床分析〔J〕.中國(guó)普通外科雜志,2011,20(9):979-980.

[5] 吳曉徽,陸漢魁,高云朝.甲狀腺球蛋白的測(cè)量及臨床應(yīng)用價(jià)值〔J〕.標(biāo)記免疫分析與臨床,2008,15(5):325-327.

[6] 馮聯(lián)忠,于吉人,李 斌,等.結(jié)節(jié)性甲狀腺腫并存甲狀腺癌86例回顧性分析〔J〕.全科醫(yī)學(xué)臨床與教育,2011,9 (1):63-65.

[7] Arora N,Scognamiglio T,Zhu B,et al.Do benign thyroid noduleshave malignant potential An evidence-based review〔J〕.World J Surg,2008,32(7):1237-1246.

[8] 張麗華,侯振江.P53基因在肺癌研究中的進(jìn)展〔J〕.臨床肺科雜志,2006,11(1):59-60.

[9] 張緒良，黃丹青，周俊偉.VEGF和P53在甲狀腺癌中的表達(dá)及臨床意義〔J〕.臨床和實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2015,14(18):1509-1511.

[10] 裘良斌,王軍森,王 平.P53和ret在不同類(lèi)型甲狀腺腫瘤中的表達(dá)及其臨床意義〔J〕.腫瘤學(xué)雜志,2012,18(8):618-621.

(編輯：吳小紅)

P53 Expression in Nodular Goiter with Thyroid Cancer and Their Correlation

SHENYufeng,HUHai.

ShanghaiEastHospitalAffiliatedtoTongjiUniversity,Shanghai,200120

Objective To explore the expression of p53 and clinical significance in the nodular goiter complicated with thyroid carcinoma.Methods Selected 70 cases of nodular goiter with thyroid cancer,and use immunohistochemical SP method to detect P53 expression.And it was analyzed and compared with P53 expression of 77 cases of nodular goiter.Results The p53 mRNA positive expression rate in goiter complicated with thyroid carcinoma group was 47.14%(33/70),while the positive rate in the pure nodular goiter group was 10.39%(8/77),and there was significant differences between the 2 groups (P<0.05).In pure nodular goiter group and thyroid goiter merger carcinoma group,the difference of P53 positive rate between patients less than 50 and over 50 was not significant (P>0.05).Among 70 cases of patients with goiter with thyroid carcinoma,the P53 positive rates of patients with diameter of tumor less than or equal to 3 cent and more than 3 cent were 39.02% and 58.62% respectively.The P53 positive rates of patients with lymph node metastasis and without were 59.26% and 39.53% respectively,the differences were no significant (P>0.05).Conclusion The p53 expression of nodular goiter with thyroid carcinoma has a specific role in the process of disease progression,which is of great significance for the diagnosis of nodular goiter with thyroid cancer.

P53;Nodular goiter;Thyroid cancer

200120 上海同濟(jì)大學(xué)附屬東方醫(yī)院

胡 海

10.3969/j.issn.1001-5930.2016.10.007

R73-36

A

1001-5930(2016)10-1590-03

2015-09-07

2016-06-20)