馮雪 付連軍 林博 等

摘要：通過測(cè)定鹿特異性復(fù)合麻醉劑麻醉下大鼠大腦皮層Na+-K+-ATP酶活性的變化，探討了其麻醉與大鼠大腦皮層Na+-K+-ATP酶的關(guān)系。將32只純種SD大鼠隨機(jī)分成對(duì)照組、誘導(dǎo)組、麻醉組和催醒組，對(duì)照組大鼠按30 mL/kg體重腹腔注射生理鹽水，其余各組按30 mg/kg體重腹腔注射鹿特異性復(fù)合麻醉劑，于各時(shí)間點(diǎn)冰上采集各組大鼠大腦皮層，采用比色法測(cè)定其Na+-K+-ATP酶活性。結(jié)果顯示，藥物作用后大鼠大腦皮層Na+-K+-ATP酶活性顯著低于對(duì)照組（P<0.05或P<0.01）。該結(jié)果提示大鼠大腦皮層Na+-K+-ATP酶活性變化與鹿特異性復(fù)合麻醉劑的麻醉作用具有相關(guān)性。

關(guān)鍵詞：鹿特異性復(fù)合麻醉劑；大鼠；大腦皮層；Na+-K+-ATP酶

中圖分類號(hào)：S859.79+1 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：0439-8114（2016）04-0964-02

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2016.04.037

Effects of Specificity Anesthetic for Deer on Na+-K+-ATPase Activity

in Cerebral Cortex of Rats

FENG Xue， FU Lian-jun， LIN Bo， CHANG Nai-yuan， LI Jing-cheng， LI Wen-xuan， YIN Bai-shuang

（Department of Animal Medicine， Jilin Agricultural Science and Technology， Jilin 132101，Jilin，China）

Abstract： This experiment was aimed to determine the activity of Na+-K+-ATPase in rats' cerebral cortex region and investigate the relationship between specificity anesthetic for deer and Na+-K+-ATPase in cerebral cortex. 32 SD rats were randomly divided into control group， induction group， anesthesia group and the wake group. Rats of the control were injected with saline（30 mL/kg），rats of the other group were injected with drug （30 mg/kg）. The samples of cerebral cortex in different period were separated and the activities of Na+-K+-ATPase were determined by using colorimetry methods. The results showed that the activities of Na+-K+-ATPase in cerebral cortex after administration were decreased obviously compared with that in the control group（P<0.05 or P<0.01）. It indicated that the changes of the activity of Na+-K+-ATPase in the cerebral cortex were correlated with the specificity anesthetic for deer.

Key words： specificity anesthetic for deer； rats； cerebral cortex； Na+-K+-ATPase

在哺乳動(dòng)物腦組織中Na+-K+-ATP酶含量豐富，該酶在維持神經(jīng)細(xì)胞的興奮性、傳導(dǎo)性及調(diào)節(jié)神經(jīng)遞質(zhì)代謝等方面發(fā)揮著重要作用[1]。動(dòng)物在麻醉過程中腦組織神經(jīng)細(xì)胞處于抑制狀態(tài)，神經(jīng)細(xì)胞的轉(zhuǎn)導(dǎo)作用受阻。過去的研究表明，多種麻醉藥物均可引起跨膜信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)中Na+-K+-ATP酶活性降低，從而調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度，控制神經(jīng)遞質(zhì)的釋放，抑制神經(jīng)細(xì)胞之間及神經(jīng)細(xì)胞與肌肉或腺體細(xì)胞之間的興奮傳遞，產(chǎn)生麻醉現(xiàn)象[2]。鹿特異性復(fù)合麻醉劑是吉林農(nóng)業(yè)科技學(xué)院動(dòng)物外科學(xué)教研室自行研制成功的以賽拉嗪、替來他明及強(qiáng)痛寧為主要成分的鹿專屬?gòu)?fù)合麻醉劑，臨床應(yīng)用麻醉效果顯著，對(duì)鹿的生理指標(biāo)影響輕微，無副作用。本試驗(yàn)通過研究鹿特異性復(fù)合麻醉劑對(duì)大鼠大腦皮層Na+-K+-ATP酶活性的影響，以初步探討其全麻作用的跨膜信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物

32只純種SD大鼠，雌雄兼?zhèn)洌w重（180±20） g，購(gòu)于吉林大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，實(shí)驗(yàn)室環(huán)境下飼養(yǎng)2周后進(jìn)行試驗(yàn)。

1.2 試驗(yàn)藥品及試劑

鹿特異性復(fù)合麻醉劑（噻啦嗪∶替來他明∶強(qiáng)痛寧=0.90∶0.82∶0.26，吉林農(nóng)業(yè)科技學(xué)院動(dòng)物外科學(xué)教研室自行研制）；Na+-K+-ATP酶測(cè)定試劑盒（南京建成生物工程研究所，批號(hào)：20130821），考馬斯亮藍(lán)蛋白質(zhì)含量測(cè)定試劑盒（南京建成生物工程研究所，批號(hào)：20130816）。

1.3 樣品采集與處理

對(duì)照組大鼠按30 mL/kg體重腹腔注射生理鹽水，其余各組按30 mg/kg體重腹腔注射鹿特異性復(fù)合麻醉劑，分別于誘導(dǎo)期、麻醉期和催醒期斷頭取腦，分離大腦皮層，稱重后置于10倍體積的生理鹽水介質(zhì)中勻漿，1 000 r/min 離心10 min，收集上清液，沉淀用預(yù)冷的生理鹽水混懸后再次1 000 r/min 離心10 min，收集上清液，合并兩次上清液，然后以17 000 r/min 離心55 min，棄去上清液。

1.4 檢測(cè)方法

利用比色法測(cè)定Na+-K+-ATP酶活性。按考馬斯亮藍(lán)法測(cè)定蛋白質(zhì)含量。

酶活力測(cè)定：酶活力以每小時(shí)每毫克組織蛋白分解ATP產(chǎn)生1 μmol無機(jī)磷的量為1個(gè)ATP酶活力單位。即微摩爾分子磷/毫克蛋白·小時(shí)[μmol

Pi/mg（prot）·h]。

1.5 試驗(yàn)數(shù)據(jù)的分析與統(tǒng)計(jì)

應(yīng)用SPSS 16.0軟件對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，Microsoft Excel 2003 對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)制圖。

2 結(jié)果與分析

試驗(yàn)結(jié)果見圖1。由圖1可見，大鼠腹腔注射鹿特異性復(fù)合麻醉劑后誘導(dǎo)期大腦皮層Na+-K+-ATP 酶活力顯著低于對(duì)照組（P<0.05）；麻醉期和催醒期大鼠大腦皮層Na+-K+-ATP 酶活力與對(duì)照組比較差異極顯著（P<0.01）。

3 討論

全麻狀態(tài)下動(dòng)物的意識(shí)消失主要由大腦皮層抑制所致，各種感覺及來自大腦、小腦、脊髓及顱神經(jīng)的沖動(dòng)首先在網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)匯集并進(jìn)行信號(hào)處理，然后通過上行通路與丘腦及下丘腦（與醒覺及痛覺有關(guān)）中的各神經(jīng)核群發(fā)生聯(lián)系，最終對(duì)大腦皮層的活動(dòng)產(chǎn)生影響[3，4]。張宇等[5]研究指出Na+-K+-ATP酶活性的降低影響了突觸的電化學(xué)傳遞，氯胺酮、靜松靈以及復(fù)合麻醉劑對(duì)小型豬不同腦區(qū)中Na+-K+-ATP酶活性的抑制是其產(chǎn)生麻醉作用的主要原因之一[6]；范宏剛等[7]研究發(fā)現(xiàn)小型豬復(fù)合麻醉劑的全麻作用與抑制大腦皮層、小腦等腦區(qū)突觸體Na+-K+-ATP酶活性相關(guān)；高利等[2]研究提出噻拉嗪對(duì)山羊麻醉的作用機(jī)制可能與抑制跨膜信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)中Na+-K+-ATP酶活性有關(guān)。

本研究發(fā)現(xiàn)，鹿特異性復(fù)合麻醉劑抑制大鼠大腦皮層Na+-K+-ATP酶的活性，使動(dòng)作電位在峰電流期間產(chǎn)生的膜外高K+和膜內(nèi)高Na+的狀態(tài)不能及時(shí)消除，導(dǎo)致動(dòng)作電位后時(shí)相電位時(shí)程延長(zhǎng)，細(xì)胞的相對(duì)不應(yīng)期延長(zhǎng)，興奮性閾值增高，引起受抑制區(qū)域所支配的各項(xiàng)生理功能暫時(shí)性喪失或減退，產(chǎn)生麻醉效應(yīng)。

4 結(jié)論

本研究結(jié)果表明，鹿特異性復(fù)合麻醉劑抑制大鼠大腦皮層Na+-K+-ATP酶活性可能是其產(chǎn)生麻醉作用的機(jī)理之一。

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