王明明，孫 贊，權(quán)勤玲

(南京醫(yī)科大學(xué)康達(dá)學(xué)院藥學(xué)系，江蘇 連云港 222000)

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羥乙基淀粉130/0.4注射液中乳酸鈉質(zhì)量研究

王明明，孫 贊，權(quán)勤玲

(南京醫(yī)科大學(xué)康達(dá)學(xué)院藥學(xué)系，江蘇 連云港 222000)

建立高效液相色譜法測定羥乙基淀粉130/0.4乳酸鈉林格注射液中乳酸鈉含量的方法并考察樣品的穩(wěn)定性。采用thermo BDS HYPERSIL C18(25 cm×4.6 mm，5 μm)，流動(dòng)相為0.39%磷酸二氫鉀(pH=2.0)：乙腈，梯度洗脫，檢測波長210 nm。結(jié)果表明，乳酸鈉在0.185～1.235 mg·mL-1范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，r=0.9998，樣品中乳酸鈉平均含量為0.588 mg·mL-1，長期穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)乳酸鈉含量穩(wěn)定。該方法能夠準(zhǔn)確的測定羥乙基淀粉130/0.4注射液中乳酸鈉含量，復(fù)方注射液穩(wěn)定性良好。

羥乙基淀粉130/0.4；乳酸鈉；穩(wěn)定性

羥乙基淀粉130/0.4乳酸鈉林格注射液為羥乙基淀粉130/0.4、氯化鈉、乳酸鈉、氯化鉀與氯化鈣的滅菌水溶液，處方為羥乙基淀粉130/0.460.0 g、氯化鈉6.0 g、乳酸鈉3.1 g、氯化鉀0.3 g和氯化鈣0.3 g加注射用水制成1000 mL的溶液，各成分含量均為標(biāo)示量的95.0%～105.0%。羥乙基淀粉130/0.4注射液具有擴(kuò)容和稀釋血液的作用，乳酸鈉林格注射液為復(fù)方注射液，氯化鉀、氯化鈉、氯化鈣其中是臨床常用的電解質(zhì)補(bǔ)充液，能及時(shí)補(bǔ)充體內(nèi)流失的電解質(zhì)成分，乳酸鈉為營養(yǎng)性成分，具有L型和D型2種結(jié)構(gòu)，藥用L型，結(jié)構(gòu)構(gòu)型如圖1所示。該復(fù)方具有調(diào)節(jié)體液、電解質(zhì)和酸堿平衡的功效[1-3]。羥乙基淀粉130/0.4與乳酸鈉林格注射液配伍使用，可以改善人體微循環(huán)，避免器官的功能性損害，起到補(bǔ)充藥物治療作用的效果[4]。最新有研究表明，羥乙基淀粉130/0.4(hydroxyethyl starch，HES)溶液會(huì)出現(xiàn)腎毒性反應(yīng)、出血風(fēng)險(xiǎn)增加以及死亡率增高的趨勢，有待于進(jìn)一步的研究[5-7]。本實(shí)驗(yàn)以羥乙基淀粉130/0.4乳酸鈉林格注射液作為研究對象，應(yīng)用高效液相色譜方法檢測復(fù)方注射液中乳酸鈉的含量并對樣品進(jìn)行穩(wěn)定性考察，為新型制劑的質(zhì)量控制提供參考數(shù)據(jù)。

圖1 乳酸鈉構(gòu)型結(jié)構(gòu)

1 儀器與試藥

戴安U3000高效液相色譜儀，賽默飛世爾科技；HD-E702-225恒溫恒濕試驗(yàn)箱，海達(dá)儀器；DZF-6000減壓真空干燥箱，上海善志儀器設(shè)備有限公司；XS千分之一分析天平，梅特勒科技有限公司。

羥乙基淀粉130/0.4乳酸鈉林格注射液(批號：1212151，1212152，1212153)，南京正大天晴制藥有限公司；乳酸鈉對照品(批號：100911-201501，規(guī)格100 mg)，中國食品藥品檢定所；磷酸二氫鉀(分析純，500 g)，天津科密歐化學(xué)試劑有限公司；乙腈(色譜純，500 mL)，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

采用thermo BDS HYPERSIL C18(25 cm×4.6 m，5 μm)色譜柱，0.39%磷酸二氫鈉(pH=0.2)為流動(dòng)相A，乙腈為流動(dòng)相B，梯度洗脫，流速為0.5 mL·min-1，檢測波長210 nm，進(jìn)樣量10 μL。梯度洗脫條件見表1。

表1 梯度洗脫條件

2.2 溶液的配制

供試品溶液：取羥乙基淀粉130/0.4乳酸鈉林格注射液10 mL，精密量取，置于50 mL量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻?yàn)V過，取續(xù)濾液作為供試品溶液。

對照品溶液：取乳酸鈉對照品適量，精密稱定，制成每1 mL含乳酸鈉0.62 mg的溶液，搖勻?yàn)V過，取續(xù)濾液作為對照品溶液。

乳酸鈉對照品使用前需要前處理，處理方法為打開瓶蓋，置于減壓真空干燥箱中真空干燥4 h，加蓋密封，置于專用干燥皿中備用，室溫20 ℃下貯存，48 h內(nèi)使用有效。

2.3 系統(tǒng)適用性考察

取羥乙基淀粉130/0.4約1.2 g，氯化鈉約0.12 g，乳酸鈉約0.062 g，氯化鉀約0.006 g，無水氯化鈣約0.004 g 置于100 mL量瓶中，加水稀釋溶解至刻度搖勻，作為系統(tǒng)適用性溶液。精密量取10 μL，按照“2.1色譜條件”項(xiàng)，進(jìn)樣，記錄色譜圖。乳酸鈉保留時(shí)間7.4 min，色譜峰面積7.327 mAU·s，理論塔板數(shù)5438，拖尾系數(shù)1.05，分離度大于1.5，無機(jī)鹽和羥乙基淀粉130/0.4在該色譜條件下不出峰。系統(tǒng)適用性實(shí)驗(yàn)結(jié)果見圖1。

圖1 系統(tǒng)適用性和穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)

2.4 精密度考察

取濃度為0.62 mg·mL-1的乳酸鈉對照品溶液，連續(xù)進(jìn)樣6次，進(jìn)樣量10 μL，結(jié)果表明，6次進(jìn)樣峰面積RSD為0.49%，表明精密度良好。

2.5 線性和線性范圍考察

取乳酸鈉對照品約31.0 mg，精密稱定，置于10 mL量瓶中，加水溶解稀釋至刻度，搖勻，分別精密量取上述溶液0.3、0.8、1.0、1.5、2 mL置5 mL量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻?yàn)V過。按照“2.1色譜條件”項(xiàng)進(jìn)樣測定，以濃度(C)為橫坐標(biāo)，峰面積(A)為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。計(jì)算線性回歸方程為：A=12.3190C+0.0921(r=0.9999)。結(jié)果表明，乳酸鈉質(zhì)量濃度在0.2039～0.6118 mg·mL-1范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2.6 檢測限和定量限考察

取“2.2”項(xiàng)下對照品溶液，加水逐步稀釋，分別配制成濃度為6.175 μg·mL-1和2.031 μg·mL-1的溶液，進(jìn)樣，記錄色譜圖。結(jié)果表明，乳酸進(jìn)樣量為61.75 ng時(shí)，S/N=10，進(jìn)樣量為20.31 ng時(shí)，S/N=3。

2.7 穩(wěn)定性考察

取“2.2”項(xiàng)下新配乳酸鈉對照品溶液室溫條件下放置0、5、7、9、12、14、16 h后分別進(jìn)樣，記錄色譜圖。結(jié)果表明12 h內(nèi)，5次進(jìn)樣結(jié)果的RSD%為1.18%；14 h內(nèi)6次進(jìn)樣結(jié)果的RSD%為1.31%；16 h后，乳酸鈉對照品色譜峰分裂，出現(xiàn)雜質(zhì)峰。因此，乳酸鈉對照品溶液14 h內(nèi)保持穩(wěn)定，16 h后發(fā)生分解現(xiàn)象。穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)色譜圖見圖1。

2.8 加樣回收率考察

取不含乳酸鈉處方條件下羥乙基淀粉130/0.4乳酸鈉林格注射液9份，置100 mL量瓶中，分別加入乳酸鈉對照品適量，流動(dòng)相A溶解稀釋定容，按“2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測定，記錄色譜圖。計(jì)算結(jié)果，結(jié)果表明回收率為99.79%，RSD=1.14%。加樣回收率見表2。

表2 樣品回收率結(jié)果

3 樣品檢測

3.1 樣品含量測定

取批號1212151 1212152 12121153三批樣品，按照“2.2”項(xiàng)下溶液配制方法配制對照品溶液和供試品溶液，按照“2.1”項(xiàng)下色譜條件，精密取10 μL進(jìn)樣，記錄色譜圖。外標(biāo)法以峰面積計(jì)算結(jié)果，乳酸鈉含量分別為標(biāo)示量的100.8%、99.7%和99.1%，符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

3.2 樣品穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)考察

3.2.1 加速實(shí)驗(yàn)

取供試品三批，按照市售包裝，置恒溫恒濕干燥箱中，在溫度(40±2) ℃，相對濕度75%±5%的條件下放置6個(gè)月，分別于1月、2月、3月、6月時(shí)間點(diǎn)取樣一次，測定樣品中乳酸鈉含量，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)和結(jié)果見表。

3.2.2 長期實(shí)驗(yàn)

取供試品三批，按照市售包裝，置恒溫恒濕干燥箱中，在溫度(25±2) ℃，相對濕度60%±5%的條件下放置12個(gè)月，分別于0月、3月、6月、9月、12月時(shí)間點(diǎn)取樣一次，測定樣品中乳酸鈉含量。穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)和結(jié)果見表3。

表3 樣品穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)結(jié)果

注：樣品中乳酸鈉含量在95.0%～105.0%范圍內(nèi)，均符合質(zhì)量規(guī)定。

4 討 論

本實(shí)驗(yàn)采用常用的十八烷基硅烷鍵合硅膠反向色譜柱，梯度洗脫對羥乙基淀粉130/0.4乳酸鈉林格注射中的乳酸含量進(jìn)行測定，建立方法學(xué)標(biāo)準(zhǔn)并考察了樣品的放樣穩(wěn)定性。這種方法比早前應(yīng)用旋光儀測定法測定乳酸鈉含量的方法操作更加方便，結(jié)果更準(zhǔn)確，樣品的用量更少[8]。在實(shí)驗(yàn)中，我們發(fā)現(xiàn)乳酸鈉溶液在室溫條件下24 h內(nèi)存在明顯降解的現(xiàn)象，但是在放樣穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)中，我們沒有發(fā)現(xiàn)樣品中乳酸鈉含量降低，這可能是由于復(fù)方溶液中的K+、Na+等離子對乳酸鈉起到穩(wěn)定的作用。檢測波長和溶劑的選擇方面，L型乳酸鈉在210 nm處存在最大紫外吸收波長，屬于末端吸收的范圍，溶劑的選取會(huì)一定范圍內(nèi)影響乳酸鈉含量的測定，選用乙腈作為有機(jī)相能有效的減少末端吸收，降低柱壓，防止色譜基線漂移現(xiàn)象。

5 結(jié) 論

綜上所述，本方法建立了高效液相色譜方法用于測定羥乙基淀粉130/0.4乳酸鈉林格復(fù)方注射液中乳酸鈉的含量，并對樣品的長期和加速實(shí)驗(yàn)穩(wěn)定性進(jìn)行考察。結(jié)果表明，該方法測定乳酸鈉含量，測定值不受注射劑處方中其余藥物成分和輔料的干擾，樣品在存放期內(nèi)，性質(zhì)保持穩(wěn)定，該復(fù)方注射液具有廣闊的市場應(yīng)用前景。

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Study on Quality of Sodium Lactate Injection in Hydroxyethyl Starch 130/0.4

WANGMing-ming,SUNZan,QUANQin-ling

(Department of Pharmacy, Kangda College of Nanjing Medical University, Jiangsu Lianyungang 222000, China)

The HPLC method for determination the content of sodium lactate in hydroxyethyl starch 130/0.4 was established and the stability of the sample was investigated. Thermo BDS HYPERSIL C18(25 cm×4.6 mm, 5 μm), mobile phase 0.39% potassium dihydrogen phosphate (pH=2.0)：acetonitrile and program of gradient elution were used, and detection wavelength was 210 nm. Results indicated that sodium lactate maintained fine linear relationship in the concentration range of 0.185～1.235 mg·mL-1, r=0.9998, the content of sodium lactate in the samples was 0.588 mg·mL-1, long-term stability of the experimental results were stable. The methods could accurately determine the content of sodium lactate in hydroxyethyl starch 130/0.4 injection and the stability of the compound injection was good.

hydroxyethyl starch130/0.4; sodium lactate; stability

王明明(1986-)，男，助教，主要從事藥物質(zhì)量研究。

R917

A

1001-9677(2016)020-0111-03