張蓮英，肖 虎，魯 旭，肖林林△

(上海交通大學(xué)附屬第六人民醫(yī)院南院：1.輸血科；2.檢驗科 201499)

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·論 著·

2種檢測胃蛋白酶原方法的比較

張蓮英1，肖 虎2，魯 旭2，肖林林2△

(上海交通大學(xué)附屬第六人民醫(yī)院南院：1.輸血科；2.檢驗科 201499)

目的 探討膠體金免疫層析法和酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測胃蛋白酶原(PG)結(jié)果的一致性，為膠體金免疫層析法檢測PG的可靠性提供實驗依據(jù)。方法 選取該院消化內(nèi)鏡中心經(jīng)胃鏡確診的胃部炎性患者40例和體檢中心體檢健康者60例，分別采用膠體金免疫層析法和ELISA法檢測2組研究對象的PG，膠體金免疫層析法為待評價方法，ELISA法為參考方法，對2組結(jié)果進(jìn)行方法比對和偏倚分析。結(jié)果 2種方法檢測結(jié)果的相關(guān)系數(shù)均大于0.95，說明相關(guān)性良好且不存在整體偏倚；2種方法的敏感性和特異性分別為0.775、0.85和0.782、0.823。 結(jié)論 2種方法均可作為胃病患者的輔助診斷方法。

胃蛋白酶原； 膠體金免疫層析法； 酶聯(lián)免疫吸附法

胃蛋白酶原 (PG)是胃蛋白酶的無活性前體物質(zhì)，由胃液中的胃酸激活變成胃蛋白酶[1-2]。眾多學(xué)者認(rèn)為血清PG胃蛋白酶原指標(biāo)水平的變化反映機(jī)體胃黏膜健康狀況，而胃黏膜的病變情況又與胃癌進(jìn)展密切關(guān)聯(lián)，目前正嘗試將血清PG水平作為胃癌篩查的重要高敏感性指標(biāo)[3-4]?，F(xiàn)對目前較常用的膠體金免疫層析法和酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)的檢測結(jié)果進(jìn)行比對、偏倚分析，并對敏感性和特異性進(jìn)行比較，以便根據(jù)實際情況選用合適的方法[5]。

1 資料與方法

1.1 一般資料 以該院檢驗科接受的標(biāo)本中胃鏡資料顯示為胃部炎性疾病的40例患者為病例組，體檢60例的健康者為健康對照組,以試劑盒中的弱陽性質(zhì)控品為弱陽性對照組，等同標(biāo)本檢測40次。

1.2 儀器與試劑 PGⅠ、PGⅡ的ELISA法及膠體金免疫層析法試劑均購自寧波美康生物科技股份有限公司，科華ST360型號酶標(biāo)儀(上?？迫A)，Mokosensor-A300型膠體金免疫分析儀。

1.3 方法 采用患者標(biāo)本進(jìn)行方法比對和偏倚評估，以實驗室當(dāng)前使用的ELISA法為參考方法，以膠體金免疫層析法為參比方法，按照實驗室操作規(guī)程收集和處理患者標(biāo)本，4 h內(nèi)檢測，實驗前應(yīng)確保實驗儀器狀態(tài)正常，質(zhì)控在控[6]。(1)每天選擇4例符合條件的臨床標(biāo)本，使用2種方法同時檢測，連續(xù)10 d，共計40例。(2)每例標(biāo)本應(yīng)用2種方法均做雙份檢測，且測定序列按照正反交錯的方式。(3)規(guī)范記錄所有檢測數(shù)據(jù)，數(shù)據(jù)收集過程中注意分析系統(tǒng)誤差和人為誤差[7]。

2 結(jié) 果

2.1 2種方法檢測結(jié)果比較及相關(guān)性分析 分別將膠體金免疫層析法和ELISA法2種試劑檢測相同標(biāo)本，PGⅠ、PGⅡ檢測結(jié)果均值作散點(diǎn)圖。PGⅠ的線性回歸方程為Y=0.972X+ 4.277，R2=0.979(>0.95)，符合要求；PGⅡ的線性回歸方程為Y=0.985X+0.365，R2=0.967(>0.95)，符合要求。見圖1、2。

2.2 2種方法檢測PGⅠ、PGⅡ的偏倚分析 將2種檢測方法均值的差值對2種檢測方法的均值做偏倚圖，2種方法分別測定PGⅠ、PGⅡ均不存在整體偏倚[8]。見圖3、4。

圖1 PGⅠ試驗方法均值對比較方法

圖2 PGⅡ試驗方法均值對比較方法

圖3 PGⅠ偏倚圖

圖4 PGⅡ偏倚圖

2.3 PGⅠ、PGⅡ的預(yù)期偏倚、可接受偏倚及95%CI分析 見表1、2。

2.4 2種檢測方法的敏感性和特異性分析 ELISA法檢測PG的敏感性為0.782，特異性為0.883，Kappa值為0.708，Youden′s指數(shù)=0.708;膠體金免疫層析法檢測PG的敏感性為0.775，特異性為0.85，Kappa值為0.625，Youden′s指數(shù)=0.625。見圖5、6。

表1 PGⅠ醫(yī)學(xué)決定水平的預(yù)期偏倚、可接受偏倚及95%CI

表2 PGⅡ醫(yī)學(xué)決定水平的預(yù)期偏倚、可接受偏倚及95%CI

圖5 2種檢測方法的ROC曲線

圖6 2種檢測方法的ROC曲線

3 討 論

本實驗按照美國臨床和實驗室標(biāo)準(zhǔn)協(xié)會(CLSI)EP9-A2文件[6]，選取覆蓋ELISA法和膠體金免疫層析法檢測PG線性范圍的標(biāo)本，按照既定方法，記錄檢測結(jié)果，對其進(jìn)行方法學(xué)比對、偏倚評估和ROC曲線分析[9]。2種方法檢測PGⅠ、PGⅡ的相關(guān)系數(shù)分別為：R2=0.979、R2=0.967，均大于0.95，說明2種方法的相關(guān)性良好且不存在整體偏倚。弱陽性對照組結(jié)果顯示，2種方法檢測的敏感性接近，符合實驗要求。膠體金免疫層析法檢測PGⅠ、PGⅡ時，在各自3個醫(yī)學(xué)決定水平點(diǎn)時其預(yù)期偏倚置信區(qū)間上限均小于可接受偏倚范圍，說明2種檢測方法具有高度的一致性。

本研究結(jié)果表明，2種PG檢測方法的敏感性、特異性均以ELISA法最高(0.782,0.823)，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，提示均可用于血清PG檢測。ELISA法敏感性最高，但試劑成本較高，實驗時間較長，需多臺配套儀器，故有條件的大醫(yī)院可選用此法[10]。膠體金免疫層析法是近年來臨床應(yīng)用較多的檢測方法，因其操作簡便、省時，試劑成本低廉，特異性和敏感性也可滿足要求(0.775,0.85)，因此特別適合基層醫(yī)院或者小標(biāo)本量的即時檢測[11-12]。

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The comparison of two methods of detecting pepsinogen

ZHANGLianying1,XIAOHu2,LUXu2,XIAOLinlin2△

(1.DepartmentofBloodTransfusion;2.DepartmentofClinicalLaboratory,SouthCampusofSixthPeople'sHospitalAffiliatedofShanghaiJiaotongUniversity,Shanghai201499,China)

Objective To investigate colloidal gold immune chromatography(GICA) and enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) detection pepsinogen (PG) consistency of results,so as to provide experimental evidence for the use of colloidal gold immunochromatography assay PG and briefly analysis of its clinical utility.Methods Totally 40 cases in our hospital digested samples and medical centers 60 healthy population sample in Endoscopy Center by endoscopy diagnosed with inflammation of the stomach disease,respectively,with colloidal gold immune chromatography and enzyme-linked immunosorbent assay PG,colloidal gold immunoassay chromatography method to be evaluated,as the reference ELISA method.The results were compared to the method and bias analysis.Results GICA method with a correlation coefficient ELISA test results were greater than 0.95,indicating a good correlation between the two methods and there is no overall bias;sensitivity and specificity of the two methods were (0.775,0.85) and (0.782,0.823).Conclusion Both GICA and ELISA can be used for screening or diagnosis of stomach illnesses.

pepsinogen; GICA methods; ELISA

張蓮英，女，主管技師，主要從事免疫學(xué)及輸血方面研究。△

10.3969/j.issn.1673-4130.2016.20.003

A

1673-4130(2016)20-2810-03

2016-02-16

2016-07-21)