甄森萍

（青海省西寧市畜牧獸醫(yī)站，青海西寧 810003）

西寧地區(qū)農戶散養(yǎng)生豬藍耳病感染情況調查

甄森萍

（青海省西寧市畜牧獸醫(yī)站，青海西寧 810003）

應用 ELISA試劑診斷盒對西寧市郊的160份生豬血清，進行了PRRS的血清抗體檢測，共檢出陽性血清7份。

豬藍耳??；酶聯免疫吸附試驗

豬藍耳?。≒RRS）是由豬繁殖與呼吸綜合征病毒（PRRSV）引起的豬的一種高度接觸性傳染病，不同年齡、品種和性別的豬均能感染，但以妊娠母豬和1月齡以內的仔豬最易感；該病以母豬流產、死胎、弱胎、木乃伊胎以及仔豬呼吸困難、敗血癥、高死亡率等為主要特征。1992年國際獸醫(yī)組織將其定為B類傳染病。該病1987年首先在美國報道，其后在德國、加拿大、日本和荷蘭等發(fā)達國家相繼報道。1996年郭寶清等專家首次從國內發(fā)病豬群中分離出PRRSV，從而證實我國存在本?。?］，1997年以后有青海省發(fā)現本病的報道［2］，［3］。為了更加詳細了解PRRS在西寧市的最新感染情況，我們于2015年9月對農戶散養(yǎng)生豬進行了PRRS 的血清學調查，現報告如下：

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 檢測樣品 隨機從西寧市郊農戶散養(yǎng)生豬采集血液160份，分離血清，置于4℃冰箱備用，采集生豬均沒有注射豬藍耳病疫苗。

1.1.2 ELISA試劑盒 美國IDEXX公司生產，購自上海羅曼動物保健公司。

1.2 方法

（1）將待檢血清用稀釋液40倍稀釋，取100μl加于酶標板的病毒（PRRSV）包被孔和正常宿主細胞（NHC）對照孔中，同時做2份陽性對照和1份陰性對照，室溫孵化30min。

（2）棄去酶標板中的溶液，每孔加300μl洗滌液洗滌3～5次，每次靜置2～3min，最后一次用吸水紙拍干。

（3）每孔加酶標二抗100μl，室溫孵化30min。

（4）重復（2）步驟，每孔加底物溶液100μl，室溫孵化15min。

（5）每孔加終止液100μl終止反應，用酶標儀測定OD650值。

1.3 結果判定

檢測結果若出現陽性對照PRRS孔OD值與陰性對照PRRS孔OD值之差≥0.15，陽性對照NHC孔OD值≤0.12，陰性對照NHC孔OD值≤0.25者，判定為有效，否則判結果無效，必須重做。PRRS抗體的檢測結果根據樣品與陽性對照的比值S/P計算：

當S/P≥0.40時被檢樣品判為陽性；當S/P＜ 0.40時被檢樣品判為陰性。

2 檢測結果

整個調查共采血160份，檢出陽性結果7份，陽性率為4.38%。

3 小結與討論

（1）本次結果顯示，PRRS感染的陽性率為4.38%，低于王生祥［2］、馬利青［3］的報道，這與當時豬藍耳病流行有關。

（2）目前，國內外診斷PRRS常用的血清學方法較多，有間接熒光抗體試驗（IFA）、免疫過氧化物酶單層試驗（IPMA）、酶聯免疫吸附試驗（ELISA）、血清中和試驗（SN）［4］。本試驗選用IDEXX公司的ELISA試劑盒進行檢測，該方法用正常細胞培養(yǎng)物包被孔作為對照，血清作40倍稀釋，減少了血清與細胞成分間的非特異性反應，降低了試驗誤差，提高了準確度，所測結果穩(wěn)定，重復性好，操作簡單快速，可用于大規(guī)模血樣檢測。

（3）豬藍耳病的傳播常發(fā)生于豬只之間的密切接觸，因此豬只移動成為最主要的傳播方式。加強對調運生豬的監(jiān)管，嚴格執(zhí)行生豬運輸的報檢制度，這些措施對控制本病的流行和傳播具有十分重要的意義。

（4）由于散養(yǎng)農戶的仔豬來源主要是外地販運仔豬，并且飼養(yǎng)管理較差，因此，大力發(fā)展母豬養(yǎng)殖，提高生豬自販自育水平，加強飼養(yǎng)管理，也是防治本病流行的重要途徑之一。

（5）目前疫苗注射仍然是防治本病的最重要的手段之一，因此，在生豬飼養(yǎng)的各個環(huán)節(jié)注重疫苗免疫注射，注意注射方法和注射劑量，確保免疫抗體達到保護水平，對控制和凈化豬藍耳病病具有決定性的意義。

［1］ 郭寶清，陳章水，劉文興，等.應用間接血凝法從國內生殖障礙綜合征豬群中測定生殖和呼吸系統綜合征抗體的研究［J］.中國獸醫(yī)科技，1996，26（30）：3-5.

［2］ 王生祥，王裕敦，許丙根，等.用ELISA檢測豬生殖和呼吸綜合征血清抗體［J］.青海畜牧獸醫(yī)雜志，1997，27（6）：20-21.

［3］ 馬利青.豬繁殖與呼吸綜合征的血清學調查［J］.青海畜牧獸醫(yī)雜志，2000，30（4）：29.

［4］ 朵紅.豬生殖和呼吸系統綜合征診斷技術研究進展［J］.青海畜牧獸醫(yī)雜志，2003，33（5）：47-48.