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        H5高致病性禽流感免疫抗體監(jiān)測(cè)及分析

        2016-11-16 11:51:20胡洪柱秦學(xué)娜楊
        中國(guó)畜牧獸醫(yī)文摘 2016年7期
        關(guān)鍵詞:免疫抗體致病性微量

        胡洪柱 秦學(xué)娜楊 丹

        (1.天津市濱海新區(qū)塘沽動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所,天津 300450;2.天津市津南區(qū)畜牧水產(chǎn)業(yè)發(fā)展服務(wù)中心,天津 300350;3.天津市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心,天津 300402)

        H5高致病性禽流感免疫抗體監(jiān)測(cè)及分析

        胡洪柱1秦學(xué)娜2楊 丹3

        (1.天津市濱海新區(qū)塘沽動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所,天津300450;2.天津市津南區(qū)畜牧水產(chǎn)業(yè)發(fā)展服務(wù)中心,天津300350;3.天津市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心,天津300402)

        為了全面了解和掌握我縣禽流感的免疫效果,科學(xué)評(píng)價(jià)基層免疫工作質(zhì)量,匯總了從2013-2015年三年的試驗(yàn)結(jié)果,共采集血樣5888份,合格數(shù)量是5147,合格率是87.41%,合格率高于農(nóng)業(yè)部要求的70%的標(biāo)準(zhǔn),免疫抗體檢測(cè)結(jié)果分析討論如下。

        高致病性禽流感抗體水平監(jiān)測(cè)與分析

        禽流感是由A型流感病毒引起多種家禽及野鳥(niǎo)的高度接觸性傳染病,又名歐洲雞瘟。高致病性禽流感是世界養(yǎng)禽業(yè)最重要的疫病之一[1],給養(yǎng)禽業(yè)帶來(lái)了巨大的損失。疫苗免疫是一種非常有效的預(yù)防疾病發(fā)生的方法。在我國(guó)是采取以疫苗免疫為主的綜合性防治措施來(lái)防控本病。為監(jiān)測(cè)已免疫家禽H5高致病性禽流感免疫抗體水平,適時(shí)指導(dǎo)防疫,對(duì)防控高致病性禽流感的發(fā)生和流行具有十分重要的作用。因此,筆者對(duì)本區(qū)2013~2015年高致病性禽流感免疫抗體檢測(cè)結(jié)果分析討論如下。

        1 材料與方法

        1.1試驗(yàn)材料

        1.1.1試驗(yàn)動(dòng)物

        部分規(guī)模雞場(chǎng)和散養(yǎng)戶(hù)。

        1.1.2血清樣品

        采集部分規(guī)模雞場(chǎng)和散養(yǎng)戶(hù)雞的全血,血液凝固后以3000r/ min離心5min,吸出血清,4度保存。

        1.1.3主要儀器

        V型96孔微量反應(yīng)板,離心機(jī),微量振蕩器,微量移液器及相配的槍頭,滅菌離心管。

        1.1.4禽流感標(biāo)準(zhǔn)抗原和陽(yáng)性血清

        禽流感病毒H5亞型血凝抑制試驗(yàn)抗原和陽(yáng)性血清是購(gòu)自青島易邦生物工程有限公司。

        1.2試驗(yàn)方法

        1.2.1單位抗原的配置

        取出凍干的濃縮抗原,加入2ml的生理鹽水稀釋融化后,測(cè)定其抗原效價(jià),能使雞紅細(xì)胞完全凝集的抗原的最高稀釋倍數(shù),就為該抗原滴度紅細(xì)胞凝集效價(jià),即沉淀的前一孔為該抗原的效價(jià),此稀釋度為1個(gè)HA單位抗原,此稀釋度除以4即為4個(gè)HA單位抗原。

        1.2.24單位抗原校正

        (1)首先用微量移液槍向反應(yīng)板的第二孔至第六孔加生理鹽水25μl。第一孔不加。

        (2)用微量移液槍吸取4單位抗原25μl分別加入第一孔、第二孔,從第二孔開(kāi)始擠壓6次混合,后吸出25μl至第三孔,依次倍比稀釋到第5孔,棄去25μl。

        (3)1~6孔加25μl生理鹽水。

        (4)用移液槍再吸取1%紅細(xì)胞懸液依次加入到1~6孔,每孔25μl。

        (5)于微量振蕩器振蕩1min。室溫靜置30min后觀察結(jié)果。

        (6)結(jié)果觀察:第一、二、三孔為完全凝聚,第四孔紅細(xì)胞為50%沉淀,第五孔為對(duì)照完全沉淀,如果出現(xiàn)以上結(jié)果,表明所配4單位抗原準(zhǔn)確,校正成立。

        1.2.3抗體檢測(cè)方法

        按照國(guó)標(biāo)GB/T18936-2003《高致病性禽流感診斷技術(shù)》和禽流感微量紅細(xì)胞凝聚抑制試驗(yàn)(SN/T1182.2-2004)[2]規(guī)定,采用血凝抑制試驗(yàn),集中對(duì)血清樣品機(jī)械實(shí)驗(yàn)室檢測(cè),并作系統(tǒng)分析。.

        2 試驗(yàn)結(jié)果

        ⑴不同年份的見(jiàn)表1,由表1可見(jiàn)2013-2015年共檢測(cè)5888份血清,2013年的合格率為82.06%,2014年的合格率為87.15%,2015年的合格率為96.21%,近三年整體的合格率為87.41%。

        表1 不同年份免疫抗體合格率情況

        ⑵不同免疫次數(shù)與免疫效果的關(guān)系見(jiàn)表2,由表2可見(jiàn),免疫次數(shù)越多,合格率越高。

        表2 免疫次數(shù)與免疫效果的相關(guān)分析

        ⑶不同飼養(yǎng)方式見(jiàn)表3,由表3可見(jiàn),規(guī)模場(chǎng)的合格率遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于散養(yǎng)戶(hù)的合格率。

        表3 不同飼養(yǎng)方式免疫抗體合格率情況

        4 分析與討論

        ⑴從以上數(shù)據(jù)可以看出,近三年我區(qū)的高致病性禽流感的抗體水平為87.41%,遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于農(nóng)業(yè)部規(guī)定的70%的要求,有些報(bào)道認(rèn)為[3],經(jīng)禽流感免疫接種后的家禽7d可以產(chǎn)生抗體,21d能產(chǎn)生堅(jiān)強(qiáng)的免疫力,但有的一定的有效免疫時(shí)間,我們通過(guò)這幾年的試驗(yàn)也驗(yàn)證了這一點(diǎn),免疫1次的合格率僅為31.52%,而免疫2次以上的合格率高達(dá)93.83%,隨著免疫次數(shù)的增加,抗體合格率明顯升高,免疫效果與免疫次數(shù)成正相關(guān)。

        ⑵規(guī)模場(chǎng)比散養(yǎng)戶(hù)的抗體合格率高,據(jù)分析其原因是,規(guī)模場(chǎng)防疫意識(shí)比較強(qiáng),管理實(shí)行規(guī)范化、科學(xué)化、常態(tài)化。另外,規(guī)模場(chǎng)的技術(shù)力量強(qiáng),技術(shù)人員操作熟練,保證了禽流感的抗體合格率。而散養(yǎng)戶(hù),養(yǎng)殖量小,防疫意識(shí)差,免疫工作不到位,所以抗體水平低,存在一定的隱患。

        ⑶禽流感抗體監(jiān)測(cè)工作是評(píng)價(jià)和指導(dǎo)防控工作的重要措施,禽流感,尤其是高致病性禽流感,其危害十分嚴(yán)重,疫苗免疫是防止禽流感發(fā)生和流行的主要方法,在家禽養(yǎng)殖中,長(zhǎng)期對(duì)AI的血清學(xué)監(jiān)測(cè)是十分必要,這對(duì)疫苗的選擇、疫苗免疫效果的考察、免疫計(jì)劃的執(zhí)行是分成有用的,通過(guò)血清學(xué)

        監(jiān)測(cè),可以準(zhǔn)確掌握疫情動(dòng)態(tài),根據(jù)免疫抗體水平科學(xué)地進(jìn)行綜合免疫預(yù)防。禽流感防控是一項(xiàng)長(zhǎng)期持久的工作,但只要我們認(rèn)真做好疫情的監(jiān)測(cè),及時(shí)采取有關(guān)措施,緊急免疫預(yù)防,這樣禽流感疫情是完全可以得到有效控制和消滅的。

        [1]劉素梅,楊士清,張連英,等.禽流感區(qū)域控制重點(diǎn)環(huán)節(jié)-抗體監(jiān)測(cè)應(yīng)用技術(shù)的探討[J].當(dāng)代畜牧,2006,(6):9.

        [2]國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì).SN/T1182.2-2004禽流感微量紅細(xì)胞凝聚抑制試驗(yàn)[S].北京:中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社,2004.

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