王成強　徐后國　梁萌青*　鄭珂珂　柳　茜

(1.中國水產(chǎn)科學研究院黃海水產(chǎn)研究所，青島266071；2.上海海洋大學水產(chǎn)與生命學院，上海201306)

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飼料亞麻酸含量對大規(guī)格鱸魚生長性能、抗氧化指標和血清生化指標的影響

王成強1,2徐后國1梁萌青1*鄭珂珂1柳茜1,2

(1.中國水產(chǎn)科學研究院黃海水產(chǎn)研究所，青島266071；2.上海海洋大學水產(chǎn)與生命學院，上海201306)

本試驗旨在探討飼料亞麻酸(ALA)含量對大規(guī)格鱸魚生長性能、抗氧化指標和血清生化指標的影響，以確定大規(guī)格鱸魚飼料中ALA的適宜含量。通過在基礎飼料中添加蘇子油，制成ALA含量分別為飼料干重0.06%、0.99%、2.03%、3.18%、4.12%和5.08%的6種等氮等脂的試驗飼料。將上述試驗飼料投喂初始體重為(207.77±0.64) g的鱸魚，每種飼料設3個重復，每個重復放養(yǎng)20尾魚，養(yǎng)殖周期為12周。結果表明：1)特定生長率(SGR)和飼料效率(FE)隨飼料ALA含量的升高均呈先升高后降低的趨勢，且SGR和FE均在2.03%ALA組有最大值，同時2.03%與3.18%ALA組的SGR和FE差異不顯著(P>0.05)；肝體指數(shù)(HSI)與臟體指數(shù)(VSI)均在5.08%ALA組達到最大值，且顯著高于0.06%ALA組(P<0.05)；存活率(SR)和肥滿度(CF)在各組之間無顯著差異(P>0.05)。2)隨著飼料中ALA含量的升高，魚體粗蛋白質(zhì)含量表現(xiàn)為逐漸下降的趨勢，粗脂肪含量呈現(xiàn)增加趨勢，4.12%和5.08%ALA組魚體粗蛋白質(zhì)含量顯著低于0.06%ALA組(P<0.05)，而4.12%和5.08%ALA組魚體粗脂肪含量則顯著高于0.06%、0.99%、2.03%、3.18%ALA組(P<0.05)；不同組之間魚體的水分與粗灰分含量無顯著差異(P>0.05)。3)2.03%ALA組血清和肝臟中超氧化物歧化酶(SOD)活性與3.18%ALA組無顯著差異(P>0.05)，但顯著高于0.06%與5.08%ALA組(P<0.05)。2.03%、3.18%ALA組血清中丙二醛(MDA)含量顯著低于0.06%和5.08%ALA組(P<0.05)；同時，肝臟中MDA含量在2.03%ALA組達到最低，除與3.18%ALA組無顯著差異(P>0.05)外，顯著低于其他各組(P<0.05)。4)血清中谷草轉(zhuǎn)氨酶(GOT)和谷丙轉(zhuǎn)氨酶(GPT)活性均在2.03%ALA組最低，且顯著低于0.06%與5.08%ALA組(P<0.05)；血清中甘油三酯(TG)和膽固醇(CHOL)含量在4.12%ALA組有最大值，且顯著高于0.06%ALA組(P<0.05)；隨著飼料中ALA含量的升高，血清中高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)含量呈先升高后降低趨勢，2.03%、3.18%、4.12%ALA組顯著高于其他組(P<0.05)。綜上所述，飼料中適宜含量(2.03%～3.18%)的ALA能夠促進大規(guī)格鱸魚的生長，提高抗氧化能力與肝臟健康水平；以SGR與FE作為評價指標，經(jīng)二次曲線回歸分析得出體重為207.77～406.94 g的鱸魚飼料中ALA的適宜含量分別為飼料干重的2.53%和2.72%。

大規(guī)格鱸魚；亞麻酸；生長性能；血清生化指標；抗氧化能力

亞麻酸(α-linolenic acid，ALA)是一種n-3系列多不飽和脂肪酸，主要來源于蘇子油、亞麻籽油等植物油，在促進動物生長、增強免疫力、改善肉質(zhì)和降低血脂等方面具有重要作用[1-2]。相關研究表明，部分淡水魚能夠利用ALA通過去飽和作用及碳鏈延長作用轉(zhuǎn)化為機體所必需的n-3系列長鏈多不飽和脂肪酸來滿足自身需求[3-4]。而海水魚和廣鹽性魚類的這種轉(zhuǎn)化能力相對較弱，但是也有研究證實用富含ALA的植物油替代一定比例的魚油時，部分海水魚和廣鹽性魚類的生長與存活不會受到影響，甚至還會起到一定的促進作用[5-6]。

關于魚類對ALA需求量的研究，主要集中在淡水魚上。姜召山等[7]在鯽魚的研究中指出，ALA含量為0.5%的飼料能夠顯著提高鯽魚的特定生長率(SGR)和飼料效率(FE)；Bogut等[8]報道，歐洲六須鲇對ALA的需求量為1%；關勇[9]研究表明，飼料中添加1.2%的ALA時，羅非魚得到最佳的生長效果。而在海水魚和廣鹽性魚上，因為其必需脂肪酸是高不飽和脂肪酸[(花生四烯酸(ARA)、二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)]，因此高不飽和脂肪酸的需求量研究在海水魚和廣鹽性魚類中報道較多，但是在ALA方面，眾多試驗主要是以替代魚油為基礎開展[10-11]，關于海水魚和廣鹽性魚類對ALA的需求量仍有待于進一步研究。同時，血清生化指標是反映機體健康與否的重要指標，近年來在大菱鲆[10]、鯉魚[12]、墨瑞鱈[13]等研究中均證實，飼料中不同ALA添加量能夠影響試驗魚血清生化指標的變化，進而對機體和肝臟健康造成一定的影響。

鱸魚(Lateolabraxjaponicus)屬于鱸形目科花鱸屬，俗稱花鱸、花寨、伴鱸等，屬于廣鹽性魚類，其生長速度較快，并且具有較高的經(jīng)濟價值，因此成為我國沿海養(yǎng)殖地區(qū)一種重要的養(yǎng)殖魚類。至今，關于鱸魚脂肪酸方面的研究已有眾多報道，但是在大規(guī)格鱸魚中，關于ALA對其生長、抗氧化能力及肝臟健康方面的研究較為匱乏。因此，本研究通過配制不同ALA含量的飼料，研究飼料ALA含量對大規(guī)格鱸魚生長性能、抗氧化指標及血清生化指標的影響，并確定大規(guī)格鱸魚對ALA的最適需求量，旨在為廣鹽性魚類ALA的營養(yǎng)學研究提供一定的理論基礎，并進一步完善鱸魚營養(yǎng)學參數(shù)數(shù)據(jù)庫。

1　材料與方法

1.1試驗飼料

以魚粉、豆粕和酪蛋白為主要蛋白質(zhì)源，以小麥粉為主要糖源，配制粗蛋白質(zhì)含量約為44%、粗脂肪含量約為12%的基礎飼料，在此基礎上，分別添加0、2%、4%、6%、8%和10%的蘇子油(江蘇天凱生物科技有限公司產(chǎn)品，主要脂肪酸組成：C16∶0，5.96%；C18∶0，2.63%；C18∶1n-9，21.18%；C18∶2n-6，14.61%；C18∶3n-3，54.85%)，以硬脂酸甘油三酯(江蘇天凱生物科技有限公司產(chǎn)品，主要脂肪酸組成：C14∶0，2.56%；C16∶0，27.74%；C18∶0，64.27%)進行配平，制成6種等氮等脂的試驗飼料。通過氣相色譜分析，ALA在6種試驗飼料中的含量分別為飼料干重的0.06%(對照)、0.99%、2.03%、3.18%、4.12%和5.08%，并分別命名為A1、A2、A3、A4、A5和A6組。試驗飼料組成及營養(yǎng)水平見表1，試驗飼料的脂肪酸組成見表2。各種飼料原料均經(jīng)過粉碎之后，再按照配比從小到大逐級定量均勻混合，隨后將蘇子油與干粉充分混勻，之后加水制粒，顆粒制成后，放置于烘箱中，50 ℃左右烘干，保存于陰涼干燥處備用。

表1　試驗飼料組成及營養(yǎng)水平(干物質(zhì)基礎)

續(xù)表1項目Items組別GroupsA1A2A3A4A5A6維生素預混料Vitaminpremix1)1．001．001．001．001．001．00礦物質(zhì)預混料Mineralpremix2)1．001．001．001．001．001．00磷酸二氫鈣Ca(H2PO4)21．001．001．001．001．001．00維生素CVitaminC0．500．500．500．500．500．50氯化膽堿Cholinechloride0．500．500．500．500．500．50誘食劑Attractant3)0．300．300．300．300．300．30乙氧基喹啉Ethoxyquin0．050．050．050．050．050．05防霉劑Moldinhibitor0．100．100．100．100．100．10蘇子油Perillaoil2．004．006．008．0010．00硬脂酸甘油三酯Tristearin10．008．006．004．002．00合計Total100．00100．00100．00100．00100．00100．00營養(yǎng)水平Nutrientlevels粗蛋白質(zhì)CP44．8744．0144．6344．1844．3444．46粗脂肪EE11．7811．7112．1512．5212．4211．66粗灰分Ash7．597．557．667．737．667．66亞麻酸ALA0．060．992．033．184．125．04

1)每千克維生素預混料含有Contained the following per kg of vitamin premix：VA 1 200 000 IU，VD 300 000 IU，VE 5 000 mg，VB13 000 mg，VB22 000 mg，VB6800 mg，VB125 mg，VC 20 000 mg，VK 33 000 mg，生物素 biotin 30 mg，肌醇 inositol 10 000 mg，葉酸 folic acid 300 mg，泛酸鈣 calcium pantothenate 3 000 mg，煙酸 nicotinic acid 3 000 mg。

2)每千克礦物質(zhì)預混料含有Contained the following per kg of mineral premix：Cu 1 500 mg，Se 25 mg，F(xiàn)e 5 000 mg，Co 500 mg，I 150 mg，Zn 2 000 mg。

3)誘食劑組成 Composition of attractant：甘氨酸glycine+甜菜堿betaine。

表2　試驗飼料脂肪酸組成(相對比例)

SFA：飽和脂肪酸；MUFA：單不飽和脂肪酸；n-6 PUFA：n-6系列多不飽和脂肪酸；n-3 PUFA：n-3系列多不飽和脂肪酸；LC-PUFA：長鏈多不飽和脂肪酸。

SFA: saturated fatty acids; MUFA: mono-unsaturated fatty acids; n-6 PUFA: n-6 poly-unsaturated fatty acids; n-3 PUFA: n-3 poly-unsaturated fatty acid; LC-PUFA: long-chain polyunsaturated fatty acids.

1.2試驗用魚及養(yǎng)殖管理

養(yǎng)殖地點是浙江省象山港灣苗種有限公司，養(yǎng)殖方式為海水浮式網(wǎng)箱養(yǎng)殖，養(yǎng)殖周期為12周，試驗用鱸魚為前1年人工培育的同一批苗種(寧波象山縣一養(yǎng)殖戶提供)。首先將所有試驗用魚放置于大網(wǎng)箱(3.0 m×3.0 m×3.0 m)中，用對照組飼料暫養(yǎng)15 d，使其適應試驗飼料和養(yǎng)殖環(huán)境。試驗開始前，將試驗魚饑餓24 h，然后用丁香酚麻醉(1∶10 000)后稱重。大小均一的鱸魚[初始均重為(207.77±0.64) g]被隨機分到18個養(yǎng)殖網(wǎng)箱(1.5 m×1.5 m×2.0 m)中，每個網(wǎng)箱放置20尾鱸魚，每種試驗飼料投喂3個網(wǎng)箱(重復)，每天在規(guī)定時間(06:00和17:00)各投喂1次。試驗期間，水溫為23.0～30.5 ℃，鹽度為26‰～31‰，溶解氧濃度為6.5 mg/L左右。

1.3樣品收集

12周的養(yǎng)殖試驗結束時，將試驗魚饑餓24 h，然后對每個網(wǎng)箱中的試驗魚進行計數(shù)和稱重。之后，從每個養(yǎng)殖網(wǎng)箱中隨機取出3尾鱸魚，密封袋裝好，將其放置于-20 ℃冰柜中進行保存，用于全魚常規(guī)營養(yǎng)成分的分析。另外，分別從每個養(yǎng)殖網(wǎng)箱中隨機取5尾鱸魚，進行解剖取樣，分別取肝臟、肌肉、腸道等組織，組織取好后將裝有組織的離心管迅速置于液氮中速凍，之后將這些冷凍好的樣品保存于-80 ℃超低溫冰箱中備用。從每個養(yǎng)殖網(wǎng)箱中隨機取出4尾鱸魚，采用尾部靜脈取血法取出約1.5 mL血液，4 ℃靜置4 h，3 000 r/min離心10 min，輕輕將血清吸出，-80 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.4測定指標及方法

1.4.1生長性能

存活率(SR，%)=100×終末魚尾數(shù)/

初使魚尾數(shù)；

增重率(WGR，%)=100×(終末體重-

初始體重)/初始體重；

SGR(%/d)=100×(ln終末體重-

ln初始體重)/試驗天數(shù)；

FE= (終末體重-初始體重)/

攝食飼料干重；

肝體指數(shù)(HSI，%)=100×肝臟濕重/體重；

臟體指數(shù)(VSI，%)=100×內(nèi)臟濕重/體重；

肥滿度(CF，%)=100×體重/體長3

(體重單位：g；體長單位：cm)。

1.4.2抗氧化指標和血清生化指標

血清和肝臟中丙二醛(MDA)含量與超氧化物歧化酶(SOD)活性采用南京建成生物工程研究所生產(chǎn)的相應試劑盒測得。

血清生化指標經(jīng)全自動生化分析儀(BS-200，邁瑞醫(yī)療國際股份有限公司生產(chǎn))使用其配套試劑盒測得，測定指標有谷草轉(zhuǎn)氨酶(GOT)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(GPT)、堿性磷酸酶(AKP)活性及甘油三酯(TG)、膽固醇(CHOL)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)含量。

1.4.3魚體及組織化學組成

樣品的水分與粗灰分含量均采用失重法測定；粗蛋白質(zhì)含量采用凱氏定氮法(VELP UDK-142全自動凱氏定氮儀，意大利)測定；粗脂肪含量采用索氏抽提法(FOSS索氏抽提儀SOXTEC-2050，瑞典)測定。

1.4.4飼料脂肪酸組成

飼料脂肪酸組成的測定參考Mourente等[14]的氣相色譜法(HP-6890 plus氣相色譜儀，美國)，并稍作修改，具體操作如下：取100 mg冷凍干燥后磨碎的樣品，置于15 mL的頂空進樣玻璃瓶中，加入1 mol/L KOH-甲醇溶液3 mL，放在75 ℃水浴中加熱20 min，冷卻至室溫后，加入2 mol/L HCl-甲醇溶液3 mL，放在75 ℃水浴中加熱20 min，冷卻之后加入1.5 mL正己烷(色譜級)，振蕩萃取，靜置分層。小心吸取上層正己烷和脂肪酸甲酯的混合物，用微量進樣器吸取1 μL注入氣象色譜儀(HP5890Ⅱ，美國)中，采用火焰電離檢測器檢測。最后，根據(jù)標準脂肪酸出峰時間確定樣品中脂肪酸的種類，通過峰面積歸一法進行相對比例測定。

1.5數(shù)據(jù)處理與分析

試驗結果用平均值±標準誤(mean±SE)來表示，同時試驗數(shù)據(jù)用SPSS 19.0軟件分析，先對試驗數(shù)據(jù)進行單因素方差分析(one-way ANOVA)，若有顯著差異，則用Tukey’s檢驗方法進行多重比較，當P<0.05時表示具有顯著性差異。

2　結　果

2.1飼料ALA含量對大規(guī)格鱸魚生長性能的影響

由表3可知，各組鱸魚SR均在95.00%～100.00%，不同組之間無顯著差異(P>0.05)。隨著飼料中ALA含量的升高，大規(guī)格鱸魚的WGR與SGR均呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢，A3組WGR與SGR顯著高于A1、A2和A6組(P<0.05)，與A4和A5組無顯著差異(P>0.05)。在飼料ALA含量為0.06%～2.03%時，大規(guī)格鱸魚的FE隨著飼料中ALA含量的升高顯著升高(P<0.05)，之后呈現(xiàn)下降趨勢，并在A3組達到最大值。大規(guī)格鱸魚的HSI與VSI受到飼料ALA含量的顯著影響(P<0.05)，均在A6組達到最大值，且顯著高于A1組(P<0.05)。大規(guī)格鱸魚的CF在不同組之間無顯著差異(P>0.05)。

表3　飼料亞麻酸含量對大規(guī)格鱸魚生長性能的影響

同行數(shù)據(jù)肩標無字母或相同字母表示差異不顯著(P>0.05)，不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)。下表同。

In the same row, values with no letter or the same letter superscripts mean no significant difference (P>0.05), while with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05). The same as below.

由圖1可知，在本試驗條件下，以飼料ALA含量(x)為橫坐標，以大規(guī)格鱸魚SGR(y)為縱坐標，利用二次曲線回歸分析得到回歸方程y=-0.019 8x2+0.100 1x+0.730 2(R2=0.892 9)。由回歸方程得出，當ALA含量為飼料干重的2.53%時，大規(guī)格鱸魚的SGR獲得最高值。由圖2可知，以飼料ALA含量(x)為橫坐標，以大規(guī)格鱸魚FE(y)為縱坐標，利用二次曲線回歸分析得到回歸方程y=-0.026 3x2+0.143 2x+0.473 9(R2=0.948 3)。由回歸方程得出，當ALA含量為飼料干重的2.72%時，大規(guī)格鱸魚的FE獲得最高值。

圖1　大規(guī)格鱸魚特定生長率與飼料亞麻酸含量的二次曲線模型

2.2飼料ALA含量對大規(guī)格鱸魚魚體和組織化學組成的影響

由表4可知，大規(guī)格鱸魚魚體粗蛋白質(zhì)含量隨著飼料中ALA含量的升高表現(xiàn)為逐漸下降的趨勢，A5、A6組魚體粗蛋白質(zhì)含量顯著低于A1組(P<0.05)；隨著飼料中ALA含量的升高，大規(guī)格鱸魚魚體粗脂肪含量呈現(xiàn)增加趨勢，且表現(xiàn)為A5、A6組顯著高于A1、A2、A3和A4組(P<0.05)；不同組之間魚體的水分與粗灰分含量無顯著差異(P>0.05)。

同時結果顯示，A3組肝臟粗脂肪含量顯著低于A1和A2組(P<0.05)，除此之外，各組間肝臟粗脂肪含量均無顯著差異(P>0.05)；肌肉粗脂肪含量隨著飼料中ALA含量的升高先降低后升高，并表現(xiàn)為A4組顯著高于A1和A2組(P<0.05)。

圖2　大規(guī)格鱸魚飼料效率與飼料亞麻酸含量的二次曲線模型

2.3飼料ALA含量對大規(guī)格鱸魚抗氧化指標的影響

由表5可知，血清中SOD活性隨著飼料中ALA含量的升高呈先升高后降低的趨勢，在A3組達到最大值，與A4組無顯著差異(P>0.05)，但顯著高于其他4組(P<0.05)；肝臟中SOD活性同血清SOD活性具有相同的變化趨勢。

隨著飼料中ALA含量的升高，血清中MDA含量呈先下降后上升趨勢，且A3與A4組血清中MDA含量顯著低于A1和A6組(P<0.05)；同時，肝臟中MDA含量在A3組達到最低，除與A4組無顯著差異(P>0.05)外，顯著低于其他各組(P<0.05)。

2.4飼料ALA含量對大規(guī)格鱸魚血清生化指標的影響

由表6可知，隨著飼料中ALA含量的升高，血清GOT、GPT活性均呈現(xiàn)先降低后升高的趨勢，且A3和A4組血清GOT活性顯著低于其他各組(P<0.05)，A3、A4和A5組血清GPT活性顯著低于其他各組(P<0.05)。大規(guī)格鱸魚血清AKP活性在各組間均無顯著差異(P>0.05)。

表5　飼料亞麻酸含量對大規(guī)格鱸魚抗氧化指標的影響

同時，試驗結果顯示當飼料中ALA含量從0.06%升高到4.12%時，血清CHOL和TG含量呈顯著上升(P<0.05)，分別從4.76 nmol/L升高到6.28 nmol/L和從3.71 nmol/L升高到4.86 nmol/L；當飼料中ALA含量繼續(xù)升高至5.08%時，血清CHOL和TG含量顯著下降(P<0.05)，分別下降到4.79和3.99 nmol/L。此外，血清HDL-C含量隨著飼料中ALA含量的升高呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢，并表現(xiàn)為A3、A4和A5組之間差異不顯著(P>0.05)，但均顯著高于其他組(P<0.05)。血清LDL-C含量各組間無顯著差異(P>0.05)。

表6　飼料亞麻酸含量對大規(guī)格鱸魚血清生化指標的影響

3　討　論

3.1飼料ALA含量對大規(guī)格鱸魚生長性能的影響

本試驗結果表明，飼料ALA含量對大規(guī)格鱸魚的SGR與FE均產(chǎn)生了一定的影響，當飼料中ALA含量過高或過低時，會對大規(guī)格鱸魚的生長產(chǎn)生抑制作用，并且降低飼料的利用率，這表明飼料中適宜含量的ALA對大規(guī)格鱸魚的生長性能和機體健康具有重要的作用。這在其他一些海水魚和廣鹽性魚類的研究中也得到了證實。例如：Mourente等[5]在歐洲鱸魚的研究中指出，當飼料中添加10.6%的亞麻籽油時，試驗魚獲得了良好的生長效果；Xu等[15]在鱸魚幼魚的試驗中指出，當飼料中添加3%的亞麻油時，鱸魚幼魚得到最佳的生長效果；彭墨等[10]研究報道，飼料中7.50%的魚油全部被亞麻籽油替代后，大菱鲆幼魚仍能獲得較好的生長性能；Friesen等[16]研究表明，飼料添加10%的冷榨亞麻油時，裸蓋魚的生長與對照組相比無顯著變化。而Bell等[17]在大菱鲆幼魚中的研究中顯示，當飼料中亞麻油添加量為19%時，試驗魚生長受到抑制；Tu等[18]的研究表明，飼料中添加14%富含亞麻酸的植物油時，尖吻鱸的生長明顯降低。由此可以推斷，在飼料中添加適量的亞麻酸能夠?qū)Σ糠趾Ｋ~和廣鹽性魚類的生長產(chǎn)生一定的促進作用；另外，由于魚種的差異、規(guī)格的不同及養(yǎng)殖環(huán)境不同等因素的影響，使得不同魚類對亞麻酸的需求產(chǎn)生差異。

3.2飼料ALA含量對大規(guī)格鱸魚抗氧化能力的影響

另外，MDA是自由基引發(fā)脂質(zhì)過氧化反應后得到的最終分解產(chǎn)物，其含量越高說明機體受到的損害越嚴重。血清與肝臟中MDA含量的變化正好與SOD活性相對應，A6組血清與肝臟中MDA含量顯著高于A3和A4組，造成這一結果的原因可能是為ALA含量過高引起細胞的過多氧化應激反應，影響了魚體的免疫系統(tǒng)，從而導致MDA含量偏高。這一結果與關勇[9]在羅非魚中的研究結果相似。在本試驗的生長性能結果中可知，大規(guī)格鱸魚對ALA的需求量為2.53%～2.72%，同時在這個范圍內(nèi)，血清與肝臟中SOD活性較高、MDA含量較低，從而魚體也獲得較好的抗氧化能力。

3.3飼料ALA含量對大規(guī)格鱸魚魚體化學組成的影響

眾多研究指出，飼料組成對魚體化學組成具有一定的影響[22-23]。本試驗發(fā)現(xiàn)，隨著飼料中ALA含量的升高，魚體粗脂肪含量增加，粗蛋白質(zhì)含量下降，這表明飼料中ALA含量升高會導致大規(guī)格鱸魚魚體脂肪沉積，推測產(chǎn)生這一結果的原因可能是飼料ALA含量對肝臟脂肪酸合成和氧化相關基因的表達產(chǎn)生了不同的影響，從而使得魚體化學組成受到影響。本研究結果同Bjerkeng等[24]在大西洋鮭、王愛民等[25]在吉富羅非魚、Xu等[15]在鱸魚幼魚、關勇[9]在吉富羅非魚上的研究結果相似；同時，另有研究發(fā)現(xiàn)ALA不會影響鱒魚[26]、大比目魚[27]、大菱鲆[28]的化學組成。上述研究結果存在差異的原因可能與飼料中ALA含量、試驗魚種類與魚體規(guī)格不同及基礎飼料配方存在差異有關。

3.4飼料ALA含量對大規(guī)格鱸魚血清生化指標的影響

血清中GPT和GOT活性的大小常作為評價肝臟健康的酶學指標[29-30]，同時，這2種轉(zhuǎn)氨酶在機體代謝中起著重要作用，當肝臟功能受到損害時，細胞中的轉(zhuǎn)氨酶就會大量地釋放到血清中，使得血清中GPT和GOT活性得到大幅度提升[31]。本試驗結果表明，當飼料ALA含量過低或過高時，血清GPT和GOT活性均顯著高于生長良好的A3和A4組，這也說明飼料中過高或過低的ALA含量均會對大規(guī)格鱸魚的肝臟健康產(chǎn)生不良影響，進而影響其生長性能。這與前人在大菱鲆[10]、墨瑞鱈[13]等上的研究中結果一致。

血清TG、CHOL、HDL-C和LDL-C含量也同樣是臨床上用來反映血脂代謝功能的常用指標[32-33]。血液中，高密度脂蛋白能夠?qū)⒀獫{中的膽固醇以HDL-C的形式運回肝臟，所以血清內(nèi)HDL-C含量與心血管疾病呈負相關，低密度脂蛋白則負責將膽固醇以LDL-C的形式由肝臟運送至血液。本試驗結果顯示，當飼料中ALA含量從0.06%升至4.12%時，血清TG、CHOL含量均呈現(xiàn)顯著升高，當ALA含量再進一步升高至5.08%時，血清中TG、CHOL含量顯著降低，由此可以推斷在一定ALA含量范圍內(nèi)，血清中TG、CHOL含量會隨著飼料中ALA含量的升高而增加，這同關勇[9]在吉富羅非魚中的研究結果相似。另外，本試驗結果也表明，相對于低ALA含量飼料，高ALA含量飼料能夠降低血清中TG、CHOL含量，表明亞麻油具有降低動物血脂的能力[34]。另外，也可推測是因為高含量的ALA損傷了魚體的肝臟功能，造成肝臟脂肪代謝系統(tǒng)紊亂，使得血清中TG、CHOL含量降低，值得關注的是其他血清生化指標也證明高含量的ALA在一定程度上對肝臟健康造成負面影響，同這一推測結果相符。本試驗結果還顯示，血清中HDL-C含量隨飼料中ALA含量的升高呈先上升后降低趨勢，這同姚林杰等[35]在團頭魴中的研究結果相一致；同時，當飼料中ALA含量在2.03%～4.12%時，血清中HDL-C含量顯著高于A1和A6組，這也說明飼料中適宜含量的ALA有利于魚體的肝臟和心血管的健康。

4　結　論

在本試驗條件下，飼料中適宜含量(2.03%～3.18%)的ALA對大規(guī)格鱸魚的生長具有促進作用；同時，在該ALA含量下，鱸魚也具有較高的抗氧化能力及肝臟健康水平。以SGR和FE作為評價指標，經(jīng)二次曲線回歸分析得出207.77～406.94 g的鱸魚飼料中ARA的適宜含量分別為飼料干重的2.53%和2.72%。

[1]呂耀平,成永旭,吳旭干.水產(chǎn)養(yǎng)殖中亞麻酸應用的研究進展[J].水產(chǎn)科技情報,2007,34(2):68-72.

[2]劉穗華,曹俊明,黃燕華,等.飼料中不同亞麻酸/亞油酸比對凡納濱對蝦幼蝦生長性能和脂肪酸組成的影響[J].動物營養(yǎng)學報,2010,22(5):1413-1421.

[3]TOCHER D R,AGABA M,HASTINGS N,et al.Nutritional regulation of hepatocyte fatty acid desaturation and polyunsaturated fatty acid composition in zebrafish (Daniorerio) and tilapia (Oreochromisniloticus)[J].Fish Physiology and Biochemistry,2001,24(4):309-320.

[4]OLSEN R E,HENDERSON R J,MCANDREW B J.The conversion of linoleic-acid and linolenic acid to longer chain polyunsaturated fatty-acids by tilapia (Oreochromisnilotica)invivo[J].Fish Physiology and Biochemistry,1990,8(3):261-270.

[5]MOURENTE G,DICK J R,BELL J G,et al.Effect of partial substitution of dietary fish oil by vegetable oils on desaturation and β-oxidation of [1-14C]18∶3n-3 (LNA) and [1-14C]20∶5n-3 (EPA) in hepatocytes and enterocytes of European sea bass (DicentrarchuslabraxL.)[J].Aquaculture,2005,248(1/2/3/4):173-186.

[6]MILLER M R,NICHOLS P D,CARTER C G.Replacement of dietary fish oil for Atlantic salmon parr (SalmosalarL.) with a stearidonic acid containing oil has no effect on omega-3 long-chain polyunsaturated fatty acid concentrations[J].Comparative Biochemistry and Physiology Part B:Biochemistry and Molecular Biology,2007,146(2):197-206.

[7]姜召山,王銳,劉輝宇.亞麻酸對鯽魚生長性能和魚體成分的影響[J].糧食與飼料工業(yè),2010(6):56-58.

[9]關勇.亞麻籽油對吉富羅非魚生長、體組成、脂質(zhì)代謝及抗氧化能力的影響[D].碩士學位論文.重慶:西南大學,2014:88-100.

[10]彭墨,徐瑋,麥康森,等.亞麻籽油替代魚油對大菱鲆幼魚生長、脂肪酸組成及脂肪沉積的影響[J].水產(chǎn)學報,2014,38(8):1131-1139.

[11]SMITH D M,HUNTER B J,ALLAN G L,et al.Essential fatty acids in the diet of silver perch (Bidyanusbidyanus):effect of linolenic and linoleic acid on growth and survival[J].Aquaculture,2004,236(1/2/3/4):377-390.

[12]潘瑜,陳文燕,林仕梅,等.亞麻油替代魚油對鯉魚生長性能、肝胰臟脂質(zhì)代謝及抗氧化能力的影響[J].動物營養(yǎng)學報,2014,26(2):420-426.

[13]FRANCIS D S,TURCHINI G M,JONES P L,et al.Growth performance,feed efficiency and fatty acid composition of juvenile Murray cod,Maccullochellapeeliipeelii,fed graded levels of canola and linseed oil[J].Aquaculture Nutrition,2007,13(5):335-350.

[14]MOURENTE G,TOCHER D R,DIAZ-SALVAGO E,et al.Study of the n-3 highly unsaturated fatty acids requirement and antioxidant status ofDentexdentexlarvae at theArtemiafeeding stage[J].Aquaculture,1999,179(1/2/3/4):291-307.

[15]XU H G,ZHANG Y J,WANG J,et al.Replacement of fish oil with linseed oil or soybean oil in feeds for Japanese seabass,Lateolabraxjaponicus:effects on growth performance,immune response,and tissue fatty acid composition[J].Journal of the World Aquaculture Society,2015,46(4):349-362.

[16]FRIESEN E N,BALFRY S K,SKURA B J,et al.Evaluation of cold-pressed flaxseed oil as an alternative dietary lipid source for juvenile sablefish (Anoplopomafimbria)[J].Aquaculture Research,2013,44(2):182-199.

[17]BELL J G,TOCHER D R,MACDONALD F M,et al.Effects of diets rich in linoleic (18∶2n-6) and α-linolenic (18∶3n-3) acids on the growth,lipid class and fatty acid compositions and eicosanoid production in juvenile turbot (ScophthalmusmaximusL.)[J].Fish Physiology and Biochemistry,1994,13(2):105-118.

[18]TU W C,MüHLHAUSLER B S,JAMES M J,et al.Dietary alpha-linolenic acid does not enhance accumulation of omega-3 long-chain polyunsaturated fatty acids in barramundi (Latescalcarifer)[J].Comparative Biochemistry and Physiology Part B:Biochemistry and Molecular Biology,2013,164(1):29-37.

[19]HALLIWELL B,GUTTERIDGE J M C.Free radicals in biology and medicine[M].3rd ed.Oxford:Oxford University Press,1999.

[20]KIRON V,FUKUDA H,TAKEUCHI T,et al.Essential fatty acid nutrition and defence mechanisms in rainbow troutOncorhynchusmykiss[J].Comparative Biochemistry and Physiology Part A:Physiology,1995,111(3):361-367.

[21]MONTERO D,MATHLOUTHI F,TORT L,et al.Replacement of dietary fish oil by vegetable oils affects humoral immunity and expression of pro-inflammatory cytokines genes in gilthead sea breamSparusaurata[J].Fish & Shellfish Immunology,2010,29(6):1073-1081.

[22]YOSHIKAWA T,SHIMANO H,YAHAGI N,et al.Polyunsaturated fatty acids suppress sterol regulatory element-binding protein 1c promoter activity by inhibition of liver X receptor (LXR) binding to LXR response elements[J].Journal of Biological Chemistry,2002,277(3):1705-1711.

[23]HANSEN A C,ROSENLUND G,KARLSEN ?,et al.Total replacement of fish meal with plant proteins in diets for Atlantic cod (GadusmorhuaL.)Ⅰ—effects on growth and protein retention[J].Aquaculture,2007,272(1/2/3/4):599-611.

[24]BJERKENG B,REFSTIE S,FJALESTAD K T,et al.Quality parameters of the flesh of Atlantic salmon (Salmosalar) as affected by dietary fat content and full-fat soybean meal as a partial substitute for fish meal in the diet[J].Aquaculture,1997,157(3/4):297-309.

[25]王愛民,韓光明,韋信鍵,等.吉富羅非魚FAS基因的克隆及再投喂和飼料脂肪水平對其表達的影響[J].水產(chǎn)學報,2010,34(7):1113-1120.

[26]ARZEL J,LOPEZ F X M,MéTAILLER R,et al.Effect of dietary lipid on growth performance and body composition of brown trout (Salmotrutta) reared in seawater[J].Aquaculture,1994,123(3/4):361-375.

[27]REGOST C,ARZEL J,ROBIN J,et al.Total replacement of fish oil by soybean or linseed oil with a return to fish oil in turbot (Psettamaxima):1.Growth performance,flesh fatty acid profile,and lipid metabolism[J].Aquaculture,2003,217(1/2/3/4):465-482.

[28]BENEDITO-PALOS L,SAERA-VILA A,CALDUCH-GINER J A,et al.Combined replacement of fish meal and oil in practical diets for fast growing juveniles of gilthead sea bream (SparusaurataL.):networking of systemic and local components of GH/IGF axis[J].Aquaculture,2007,267(1/2/3/4):199-212.

[29]馮健,劉永堅,田麗霞,等.草魚實驗性鎘中毒對肝胰臟、腎臟和骨骼的影響[J].水產(chǎn)學報,2004,28(2):195-200.

[30]王麗宏,葉元土,張寶彤,等.幾種養(yǎng)殖魚類血清轉(zhuǎn)氨酶活性參考值的探討[J].飼料工業(yè),2011,32(24):18-20.

[31]張璐,李靜,譚芳芳,等.飼料中不同維生素A含量對花鱸生長和血清生化指標的影響[J].水產(chǎn)學報,2015,39(1):88-96.

[32]沈竑,張勤,徐韌,等.石油污染對莫桑比克羅非魚血清酶活性的影響[J].海洋學報,1998,20(4):60-64.

[33]何志謙.人類營養(yǎng)學[M].2版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2000:95-123.

[34]雙金,黎明,敖力格日瑪,等.亞麻籽對肉羊血清脂蛋白和脂肪代謝相關生化指標的影響[J].動物營養(yǎng)學報,2014,26(4):918-929.

[35]姚林杰,葉元土,蔡春芳,等.團頭魴幼魚飼料中α-亞麻酸、亞油酸的適宜含量[J].動物營養(yǎng)學報,2015,27(3):766-774.

(責任編輯菅景穎)

Effects of Dietary α-Linolenic Acid Content on Growth Performance,Antioxidant Indices and Serum Biochemical Indices of Large Size Japanese Seabass (Lateolabraxjaponicus)

WANG Chengqiang1,2XU Houguo1LIANG Mengqing1*ZHENG Keke1LIU Xi1,2

(1. Yellow Sea Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fishery Sciences, Qingdao 266071, China;2. College of Fisheries and Life Sciences, Shanghai Ocean University, Shanghai 201306, China)

A 12-week feeding experiment was conducted to evaluate the effects of dietary α-linolenic acid (ALA) content on growth performance, antioxidant indices and serum biochemical indices of large size Japanese seabass (Lateolabraxjaponicus), in order to get the optimal dietary ALA content for large size Japanese seabass. Six isonitrogenous and isoenergetic diets were formulated with dietary ALA content of 0.06%, 0.99%, 2.03%, 3.18%, 4.12% and 5.08% dry weight by adding perilla oil in a basal diet, respectively. Japanese seabass with the initial body weight of (207.77±0.64) g were fed experimental diets, and each diet had 3 replicates with 20 fish in each replicate. The results showed as follows: 1) the specific growth rate (SGR) and feed efficiency (FE) increased at first and then decreased with the increase of dietary ALA content, and reached their peaks at the 2.03% ALA group, but no significant differences were found in SGR and FE between 2.03% and 3.18% ALA groups (P>0.05). The highest values of hepatosomatic index (HSI) and viscerasomatic index (VSI) were found in 5.08% ALA group, and significantly higher than those in 0.06% ALA group (P<0.05). 2) The body ether extract content increased with increase of dietary ALA content, while the body crude protein content increased at first and then decreased with the increase of dietary ALA content. The body crude protein content in 4.12% and 5.08% ALA groups was significantly lower than that in 0.06% ALA group (P<0.05), while the body ether extract content in 4.12% and 5.08% ALA groups was significantly higher than that in 0.06%, 0.99%, 2.03% and 3.18% ALA groups (P<0.05). No significant differences were found in body moisture and ash contents among groups (P>0.05). 3) The activity of superoxide dismutase (SOD) in serum and liver in 2.03% ALA group had no significant difference compared with 3.18% ALA group (P>0.05), but significantly higher than that in 0.06% and 5.08% ALA groups (P<0.05). The malondialdehyde (MDA) content in serum in 2.03% and 3.18% ALA groups was significantly lower than that in 0.06% and 5.08% ALA groups (P<0.05), and the MDA content in liver in 2.03% ALA group was the lowest, which significantly lower than that in other groups except 3.18% ALA group (P<0.05). 4) The activities of glutamic-oxaloacetic transaminase (GOT) and glutamic-pyruvic transaminase (GPT) in serum in 2.03% ALA group was the lowest, which significantly lower than those in 0.06% and 5.08% ALA groups (P<0.05). The contents of triglycerides (TG) and cholesterol (CHOL) in serum reached their peaks in 4.12% ALA group (P<0.05), and significantly higher than those in 0.06% ALA group (P<0.05). The high density lipoprotein cholesterol (HDL-C) content in serum firstly increased and then showed a declining tendency with the increase of dietary ALA content, and that in 2.03%, 3.18% and 4.12% ALA groups was significantly higher than that in other groups (P<0.05). These results indicate that optimal dietary ALA content can improve the growth of large size Japanese seabass, and increase the antioxidant ability and liver health level. The broken-line model analysis based on SGR and FE as evaluation indices indicate that the optimal dietary ALA content is 2.53% and 2.72% dry weight of diet for Japanese seabass (body weight: 207.77 to 406.94 g), respectively.[ChineseJournalofAnimalNutrition, 2016, 28(10)：3123-3133]

large size Japanese seabass (Lateolabraxjaponicus); α-linolenic acid; growth performance; serum biochemical indices; antioxidant ability

, professor, E-mail: liangmq@ysfri.ac.cn

10.3969/j.issn.1006-267x.2016.10.014

2016-04-11

農(nóng)業(yè)公益性行業(yè)專項(201003200)；中國博士后科學基金第八批特別資助項目(2015T80763)

王成強(1988—)，男，山東濰坊人，碩士研究生，研究方向為水產(chǎn)動物營養(yǎng)。E-mail： chengqiangwang@126.com

梁萌青，研究員，碩士生導師，E-mail: liangmq@ysfri.ac.cn

S963

A

1006-267X(2016)10-3123-11