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        405株B群鏈球菌感染的臨床分布及耐藥性分析

        2016-11-15 01:01:28
        關(guān)鍵詞:紅霉素鏈球菌霉素

        雷 蜜 倪 維

        1.湖北省十堰市中醫(yī)醫(yī)院檢驗(yàn)科,湖北十堰442000;2.湖北省中醫(yī)院檢驗(yàn)科,湖北武漢430074

        405株B群鏈球菌感染的臨床分布及耐藥性分析

        雷 蜜1倪 維2

        1.湖北省十堰市中醫(yī)醫(yī)院檢驗(yàn)科,湖北十堰442000;2.湖北省中醫(yī)院檢驗(yàn)科,湖北武漢430074

        目的了解十堰市中醫(yī)醫(yī)院(以下簡(jiǎn)稱“我院”)B群鏈球菌感染的分布現(xiàn)狀和耐藥性變遷,為臨床預(yù)防和合理用藥提供依據(jù)。方法對(duì)2010年1月~2015年12月我院臨床分離的405株B群鏈球菌的來(lái)源分布和藥敏結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果B群鏈球菌在我院臨床科室中產(chǎn)科和新生兒科分布最多,分別占為43.7%和30.6%;臨床標(biāo)本分布中陰道分泌物分離B群鏈球菌最多,占45.7%,新生兒鼻咽拭子占12.0%,尿液占11.4%;2010~2015年B群鏈球菌各年度的檢出率呈下降趨勢(shì)。405株B群鏈球菌藥敏結(jié)果顯示:對(duì)四環(huán)素的耐藥率最高,為76.3%;對(duì)克林霉素、紅霉素和左氧氟沙星的耐藥率分別為70.9%、56.8%和53.8%,并且耐藥性均呈逐年上升趨勢(shì);未發(fā)現(xiàn)對(duì)萬(wàn)古霉素、替加環(huán)素、利奈唑胺、頭孢曲松、氯霉素耐藥的菌株。近年出現(xiàn)少量對(duì)青霉素、氨芐西林、喹奴普汀-達(dá)福普汀耐藥菌株,耐藥率均低。結(jié)論我院分離的B群鏈球菌對(duì)多種抗生素的耐藥性均呈上升趨勢(shì),應(yīng)加強(qiáng)耐藥性監(jiān)測(cè)和控制;治療B型鏈球菌感染仍可首選青霉素和氨芐西林,但已出現(xiàn)其耐藥菌株,應(yīng)引起重視。

        B群鏈球菌曰抗生素曰耐藥性

        B群鏈球菌(group B streptococcu,GBS)又名無(wú)乳鏈球菌,常寄生于陰道和直腸,為兼性厭氧的革蘭陽(yáng)性條件致病菌,莢膜多糖是GBS的主要致病因子,還可產(chǎn)生溶血素、神經(jīng)氨酸酶及磷脂壁酸等增強(qiáng)其毒力和侵襲力[1]。健康人群的GBS帶菌率可達(dá)15%~35%,妊娠婦女的帶菌率可達(dá)10%~30%[2-3]。GBS對(duì)成人的侵襲力較弱,主要對(duì)腎盂腎炎、子宮內(nèi)膜炎、糖尿病和泌尿生殖道功能失調(diào)、腫瘤和免疫功能低下者易感。GBS是圍生期孕婦感染排在首位的致病菌[4],易導(dǎo)致產(chǎn)婦泌尿生殖道感染、產(chǎn)褥感染、敗血癥和早產(chǎn)等。美國(guó)疾病預(yù)防控制中心統(tǒng)計(jì)GBS感染40%~70%通過(guò)母嬰傳播,新生兒免疫功能還未發(fā)育完全,抵抗力差[5],會(huì)誘發(fā)新生兒肺炎、敗血癥、腦膜炎等,死亡率高。GBS感染是新生兒的嚴(yán)重感染性疾病之一[6]。本研究旨在了解十堰市中醫(yī)醫(yī)院(以下簡(jiǎn)稱“我院”)B群鏈球菌感染臨床分布特征和耐藥性變遷,為臨床預(yù)防和合理用藥提供參考,現(xiàn)報(bào)道如下:

        1 資料與方法

        1.1 菌株來(lái)源

        1.1.1 臨床菌株我院2010年1月~2015年12月從臨床送檢樣本中分離GBS共405株。

        1.1.2 質(zhì)控菌株B群鏈球菌ATCC12386,大腸埃希菌ATCC25922,金黃色葡萄球菌ATCC25923,白色念珠菌ATCC10231,肺炎鏈球菌ATCC49619。

        1.2 培養(yǎng)鑒定和藥敏

        1.2.1 培養(yǎng)鑒定按照《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》(第3版)規(guī)范操作[7],按照不同類型標(biāo)本的培養(yǎng)要求選擇培養(yǎng)基和培養(yǎng)環(huán)境。GBS鑒定:觸酶陰性,CAMP試驗(yàn)陽(yáng)性,用API 20 Strep、VITEK2 Compact自動(dòng)細(xì)菌鑒定儀(法國(guó)生物梅里埃公司)進(jìn)行細(xì)菌鑒定;最后用協(xié)同凝集血清學(xué)試驗(yàn)(Lancefield抗原血清學(xué)分型法國(guó)生物梅里埃公司)進(jìn)行分群。

        1.2.2 藥敏試驗(yàn)GBS藥敏試驗(yàn)根據(jù)美國(guó)國(guó)家臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)(clinical and laboratory standards institute,CLSI)推薦的紙片擴(kuò)散法(K-B法),并選擇藥敏譜[8]:青霉素G、頭孢曲松、氨芐西林、紅霉素、克林霉素、萬(wàn)古霉素、呋喃妥因、四環(huán)素、左氧氟沙星、利奈唑胺、氯霉素、替加環(huán)素、喹奴普汀-達(dá)福普?。ㄓ?guó)Oxoid)。藥敏質(zhì)控對(duì)照菌株為肺炎鏈球菌ATCC49619(購(gòu)于湖北省臨檢中心)。血M-H瓊脂購(gòu)于鄭州安圖生物工程公司。另外,為檢測(cè)GBS的紅霉素誘導(dǎo)克林霉素耐藥情況,分析GBS耐藥表型[9],應(yīng)報(bào)告D試驗(yàn)結(jié)果。按照2006年CLSI標(biāo)準(zhǔn)[10],相距15 mm和12 mm處(邊緣到邊緣)貼上紅霉素和克林霉素紙片,若紅霉素耐藥,克林霉素敏感,發(fā)現(xiàn)克林霉素的抑菌圈靠近紅霉素一側(cè)鈍圓,形似大寫(xiě)字母D,則為D試驗(yàn)陽(yáng)性,為誘導(dǎo)性(iMLS)耐藥;若克林霉素仍為圓形,則為D試驗(yàn)陰性,為MS型耐藥;若紅霉素和克林霉素均耐藥,則為原發(fā)性(cMLS)耐藥。采用WHONET 5.6進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)。

        1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

        采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,計(jì)數(shù)資料用率表示,組間比較采用χ2檢驗(yàn),以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

        2 結(jié)果

        2.1 菌株臨床分布

        2.1.1 臨床科室分布及構(gòu)成比2010年1月~2015年12月分離GBS陽(yáng)性菌株共405株,GBS感染的科室中產(chǎn)科和新生兒科分布最多,構(gòu)成比為43.7%和30.6%。見(jiàn)表1。

        表1 405株B群鏈球菌臨床科室分布及構(gòu)成比

        2.1.2 臨床標(biāo)本分布及構(gòu)成比臨床科室送檢的標(biāo)本分類顯示,陰道分泌物標(biāo)本中檢出GBS陽(yáng)性最多,為185株,構(gòu)成比為45.7%,其次為新生兒的鼻咽拭子占12.0%,再次為尿液占11.4%。見(jiàn)表2。

        表2 B群鏈球菌臨床標(biāo)本分布及構(gòu)成比

        2.2 不同年份GBS檢出情況

        2010~2015年從臨床分離GBS共405株,GBS各年度檢出率呈下降趨勢(shì),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2= 16.72,P<0.05),其中,2015年的檢出率最低為3.5%,6年的平均檢出率為4.5%。見(jiàn)表3。

        表3 2010~2015年我院B群鏈球菌檢出情況

        2.3 GBS耐藥情況

        藥敏試驗(yàn)顯示,GBS對(duì)四環(huán)素的耐藥率最高,為76.3%,對(duì)克林霉素的耐藥率高達(dá)70.9%,對(duì)紅霉素和左氧氟沙星的耐藥率較高,分別為56.8%和53.8%,并且耐藥率均呈逐年上升趨勢(shì)。未發(fā)現(xiàn)對(duì)萬(wàn)古霉素、替加環(huán)素、利奈唑胺、頭孢曲松、氯霉素耐藥的GBS菌株。近年已出現(xiàn)少量對(duì)青霉素、氨芐西林、喹奴普汀-達(dá)福普汀耐藥菌株,耐藥率均較低。見(jiàn)表4。

        表4 2010~2015年405株GBS對(duì)12種抗生素的耐藥情況[n(%)]

        針對(duì)尿液、腦脊液、精液、前列腺液標(biāo)本加做呋喃妥因藥敏試驗(yàn),共檢測(cè)65株,其中呋喃妥因耐藥菌株13株,耐藥率為20.0%;2010~2015年呋喃妥因的耐藥率分別為11.1%、18.2%、20.0%、12.5%、25.0%、26.7%,基本呈上升趨勢(shì)。

        D試驗(yàn)結(jié)果顯示:405株GBS中紅霉素耐藥230株,紅霉素和克林霉素均耐藥217株,cMLS檢出率為53.6%;紅霉素耐藥克林霉素敏感菌株共70株,D試驗(yàn)陽(yáng)性33株,iMLS檢出率為8.1%;D試驗(yàn)陰性37株,MS檢出率為9.1%。

        3 討論

        GBS為條件致病菌,當(dāng)孕婦免疫力低下時(shí),可通過(guò)產(chǎn)道上行擴(kuò)散感染子宮和胎膜[11-12],使帶菌孕婦易發(fā)生早產(chǎn)、胎兒發(fā)育不全、胎膜早破,GBS可垂直傳播[13]。GBS感染是新生兒的嚴(yán)重感染性疾病之一[14]。本研究結(jié)果顯示,GBS感染主要發(fā)生在產(chǎn)科和新生兒科,分布比例為43.7%和30.6%;2010~2015年檢出GBS共 405株,分離臨床標(biāo)本主要為陰道分泌物,分布比為45.7%;其次為新生兒的鼻咽拭子,占12.0%;再次為尿液,占11.4%。泌尿生殖道標(biāo)本(尿液、尿道分泌物、陰道分泌物、宮頸分泌物、前列腺液、精液)占比高達(dá)64.8%。我院產(chǎn)科對(duì)35~37周孕婦進(jìn)行產(chǎn)道GBS定植篩查,相關(guān)篩查量大,因而產(chǎn)科分離率最高。另外,結(jié)果顯示,GBS的檢出率2010~2015年呈逐年下降趨勢(shì),這與進(jìn)行產(chǎn)前篩查后進(jìn)行預(yù)防和干預(yù)治療降低GBS感染率有關(guān)。產(chǎn)前產(chǎn)道定植篩查GBS陽(yáng)性的產(chǎn)婦,自產(chǎn)程開(kāi)始和胎膜破裂時(shí)會(huì)使用抗生素治療[15]。本研究藥敏試驗(yàn)顯示,GBS對(duì)萬(wàn)古霉素、替加環(huán)素、利奈唑胺、頭孢曲松、氯霉素均未出現(xiàn)耐藥,對(duì)紅霉素耐藥率為56.8%,克林霉素為70.9%,左氧氟沙星為53.8%,四環(huán)素為76.3%,呋喃妥因?yàn)?0.0%,這與胡發(fā)龍[16]的相關(guān)研究結(jié)論基本一致。青霉素和氨芐西林是疾病預(yù)防控制中心推薦的一線用藥,CLSI建議臨床無(wú)需進(jìn)行藥敏試驗(yàn),可經(jīng)驗(yàn)性用青霉素類抗生素治療[17],但在本研究中顯示GBS出現(xiàn)對(duì)青霉素、氨芐西林耐藥菌株,但耐藥率低;萬(wàn)古霉素具有一定的肝腎毒性[18],不宜用于孕婦和新生兒,當(dāng)出現(xiàn)重度感染時(shí)考慮使用利奈唑胺[19-20];四環(huán)素耐藥率高,不推薦用于GBS防治;左氧氟沙星雖然耐藥率為53.8%,但對(duì)胎兒軟骨有損害[21-23],不建議臨床使用;對(duì)青霉素過(guò)敏但既往并無(wú)嚴(yán)重過(guò)敏史的孕婦建議采用頭孢,且不建議使用第3代頭孢菌素,因其選擇性壓力可能帶來(lái)耐藥菌株的產(chǎn)生[24];當(dāng)存在青霉素過(guò)敏高風(fēng)險(xiǎn)時(shí)建議使用紅霉素和克林霉素,本研究顯示其耐藥率分別為56.8%和70.9%且呈上升趨勢(shì);臨床使用克林霉素時(shí),需要參考D試驗(yàn)結(jié)果,減少耐藥菌株產(chǎn)生,防治耐藥引起的預(yù)防和治療失敗。經(jīng)回顧性分析發(fā)現(xiàn),405株GBS中D試驗(yàn)陽(yáng)性共33株,iMLS檢出率為8.1%。

        綜上所述,GBS是孕產(chǎn)婦和新生兒感染的重要致病菌,應(yīng)重視圍生期的GBS篩查,本研究顯示隨著抗生素廣泛用于GBS感染的預(yù)防和治療,青霉素、氨芐西林仍可作為臨床首選藥物,但已經(jīng)出現(xiàn)少量耐藥菌株,為防止預(yù)防和治療中因細(xì)菌耐藥而失敗,以及耐藥菌株的產(chǎn)生,建議進(jìn)行藥敏試驗(yàn)合理選擇抗生素;同時(shí)由于GBS的耐藥性呈上升趨勢(shì),必須強(qiáng)化抗菌藥的使用管理,密切關(guān)注動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)耐藥性的變遷,控制耐藥性繼續(xù)上升的危險(xiǎn)。

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        Distribution and antibiotic resistance of 405 strains of group B strepto-coccu

        LEI Mi1NI Wei2
        1.Department of Laboratory,Shiyan Hospital of Traditional Chinese Medicine,Hubei Province,Shiyan442000,China;2.Department of Laboratory,Hubei Provincial Hospital of Traditional Chinese Medicine,Hubei Province,Wuhan 430074,China

        Objective To understand the distribution and drug resistance of group B streptococcus infection in Shiyan Hospital of Traditional Chinese Medicine(“our hospital”for short),in order to provide a basis for clinical prevention and rational use of drugs.Methods The source distribution and drug sensitivity results of 405 strains of group B streptococcus isolated from our hospital from January 2010 to December 2015 were statistically analyzed.Results Group B streptococcus mainly distributed in Obstetric Department and Neonatal Department of our hospital,accounted for 43.7% and 30.6%,respectively.Clinical specimens distribution of group B streptococcus isolated in vaginal secretions was the most,accounted for 45.7%,neonatal nasopharyngeal swab was 12.0%and urine was 11.4%.The detection rate of group B streptococcus in each year from 2010 to 2015 showed a downward trend.The drug sensitivity results of group B streptococcu showed that the resistance to Tetracycline was the highest,accounted for 76.3%,and the resistant rates to Clindamycin,Erythromycin and Levofloxacin were 70.9%,56.8%and 53.8%.The drug resistance showed an upward trend year by year.The strains of group B streptococcus resistant to Vancomycin,Tigecycline,Linezolid,Ceftriaxone and Chloramphenicol had no found.A small amount of Penicillin,Ampicillin,Quinupristin-Dalfopristin resistant strains appeared in recent years and the rate of drug resistance was low.Conclusion The group B streptococcu strains isolated from our hospital showed an upward trend in the resistance of many kinds of antibiotics and the monitoring and control of drug resistance should be strengthened.The treatment of group B streptococcu infection is still the preferred Penicillin and Ampicillin,but the resistant strains appeared should be paid attention to.

        Group B streptococcu;Antibiotic;Drug resistance

        R969.3

        A

        1673-7210淵2016冤07淵b冤-0103-04

        2016-04-11本文編輯:程銘)

        國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(81573815)。

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