王　煥

(河南省濟(jì)源市人民醫(yī)院藥劑科,濟(jì)源,454650)

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欖香烯乳聯(lián)合人參皂苷對(duì)卵巢癌細(xì)胞耐藥株A2780/PTX的影響作用

王煥

(河南省濟(jì)源市人民醫(yī)院藥劑科,濟(jì)源,454650)

目的:觀察欖香烯乳聯(lián)合人參皂苷方案對(duì)卵巢癌細(xì)胞耐藥株A2780/PTX的影響作用。方法:采用體外培養(yǎng)的卵巢癌細(xì)胞耐藥株A2780/PTX進(jìn)行實(shí)驗(yàn),隨機(jī)分成4組,空白組:新鮮的全培養(yǎng)液;人參皂苷組:30 μg/mL人參皂苷培養(yǎng)液;欖香烯乳組:20 μg/mL欖香烯乳培養(yǎng)液;聯(lián)合組:30 μg/mL人參皂苷+20 μg/mL欖香烯乳培養(yǎng)液。通過流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期;通過MTT法檢測(cè)欖香烯乳及人參皂苷單用的細(xì)胞毒作用及2者聯(lián)合應(yīng)用時(shí)的作用;采用Western-blot觀察A2780/PTX細(xì)胞內(nèi)蛋白的表達(dá);采用激光共聚焦顯微鏡檢測(cè)線粒體膜電位的變化。結(jié)果:流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)結(jié)果顯示,與人參皂苷組、欖香烯乳組及空白組比較,聯(lián)合組在G0/G1期細(xì)胞有明顯增加,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),A2780/PTX細(xì)胞被阻止在G1期;MTT法檢測(cè)結(jié)果顯示不同濃度的藥物劑量可以對(duì)卵巢癌細(xì)胞產(chǎn)生抑制作用,并呈一定的劑量依賴性;Western blotting結(jié)果顯示,A2780/PTX細(xì)胞中聯(lián)合組蛋白表達(dá)較空白組、人參皂苷組、欖香烯乳組顯著降低(P<0.05);聯(lián)合組A2780/PTX細(xì)胞株線粒體膜電位下降較人參皂苷組、欖香烯乳組及空白組更為明顯(P<0.05)。結(jié)論:欖香烯乳聯(lián)合人參皂苷方案能對(duì)卵巢癌細(xì)胞耐藥株A2780/PTX產(chǎn)生明顯的生長抑制作用。2者聯(lián)合應(yīng)用可以提高有效率,降低不良反應(yīng)。

卵巢腫瘤;欖香烯乳;人參皂苷;A2780/PTX

卵巢癌是嚴(yán)重威脅女性健康的較為常見的一種惡性腫瘤。目前臨床上的主要治療手段是化療,但化療一段時(shí)間后腫瘤細(xì)胞會(huì)對(duì)化療藥物產(chǎn)生耐藥性[1-3],進(jìn)而降低化療效果,給患者的治療造成障礙。人參皂苷是從中藥人參中提取,能提高患者自身免疫力,具有抗腫瘤活性,因其具有潛在的抑癌作用已被研究者認(rèn)為是理想的抗癌藥物[4-6]。另外從中藥莪術(shù)中提取的非細(xì)胞毒性抗癌藥欖香烯乳是一種新的化療藥物,其在卵巢癌的治療中發(fā)揮重要作用,此藥的有效成分是β-欖香烯,經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)β-欖香烯乳的不良反應(yīng)較少,具有放射增敏效應(yīng),可逆轉(zhuǎn)腫瘤細(xì)胞的耐藥性[7-9]。本研究就人參皂苷與欖香烯乳聯(lián)合應(yīng)用,探討此聯(lián)合方案對(duì)卵巢癌細(xì)胞耐藥株A2780/PTX的影響作用,現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1　材料與方法

1.1實(shí)驗(yàn)材料人卵巢癌A2780/PTX細(xì)胞購于南京凱基生物科技有限公司;人參皂苷購自天津馬克生物技術(shù)有限公司(批號(hào):41753-43-9);欖香烯乳劑注射液購自大連金港制藥有限公司(批號(hào):081152);DMEM培養(yǎng)液購于美國Gibco;蛋白定量試劑盒為美國Klontech公司產(chǎn)品;四甲基氮唑藍(lán)(MTI7)為美國Sigma公司產(chǎn)品;小牛血清、DMEM培養(yǎng)液購于杭州四季青生物有限公司;細(xì)胞裂解液購自碧云天生物技術(shù)有限公司;HER-2兔抗人抗體及二抗均為Santa Cruz公司產(chǎn)品;蛋白酶抑制劑、磷酸化酶抑制劑購自南京凱基生物科技發(fā)展有限公司;紫外分光光度計(jì)、倒置顯微鏡購自日本TOYOBO公司;流式細(xì)胞儀購于美國Biorad公司。

1.2細(xì)胞培養(yǎng)用含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)液培養(yǎng)人卵巢癌A2780/PTX細(xì)胞,于37 ℃含5% CO2的空氣培養(yǎng)箱中培養(yǎng),2 d傳代1次,取處于生長對(duì)數(shù)期的細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。

1.3實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1藥物預(yù)處理及實(shí)驗(yàn)分組藥物預(yù)處理:將卵巢癌A2780/PTX細(xì)胞以1×106個(gè)/mL的密度接種至6孔板中,于每孔加入DMEM 3 mL。人參皂苷、欖香烯乳先用DMSO溶解,然后用培養(yǎng)基稀釋至終濃度。培養(yǎng)體系中人參皂苷的濃度為30 μg/mL,此時(shí)DMSO的終濃度為0.1%;欖香烯乳20 μg/mL。6 h后收集細(xì)胞懸液以1 000 r/min離心5 min收集細(xì)胞并用PBS清洗滌1遍。實(shí)驗(yàn)隨機(jī)分成4組,空白組:新鮮的全培養(yǎng)液;人參皂苷組:30 μg/mL人參皂苷培養(yǎng)液;欖香烯乳組:20 μg/mL欖香烯乳培養(yǎng)液;聯(lián)合組:30 μg/mL人參皂苷+20 μg/mL欖香烯乳培養(yǎng)液。

1.3.2流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期收集上述分組的A2780/PTX細(xì)胞,調(diào)整細(xì)胞濃度為1×106個(gè)/L,以冷PBS洗滌兩遍后,以70%的冷乙醇(4 ℃)將細(xì)胞沉淀并混勻備用,洗滌細(xì)胞后再調(diào)整細(xì)胞濃度為1×106個(gè)/L(用PBS)與含50 μg/mL RNA酶的Tris-HCL緩沖液(pH 7.4)共同孵育30 min。100 μg/mL(1 μg/mL)碘化丙啶(PI)進(jìn)行細(xì)胞的DNA染色,放置暗室中1 h后,經(jīng)流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞的DNA含量分布,并計(jì)算出各周期細(xì)胞所占的百分比。

1.3.3MTT法檢測(cè)欖香烯乳及人參皂苷單用及2者聯(lián)合應(yīng)用時(shí)的細(xì)胞毒作用MTT法測(cè)定人參皂苷、欖香烯乳對(duì)A2780/PTX細(xì)胞的毒性:細(xì)胞貼壁后,于空白組加入新鮮的全培養(yǎng)液;人參皂苷組加入終質(zhì)量濃度為分別為:10、20、30、40 μg/mL人參皂苷培養(yǎng)液;欖香烯乳組加入終質(zhì)量濃度為分別為:10、20、30、40 μg/mL欖香烯乳培養(yǎng)液;聯(lián)合組分別聯(lián)合加入上述2組不同濃度的培養(yǎng)液(用含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基稀釋)。藥物作用72 h后于每孔加入5 mg/mL的MTT溶液繼續(xù)培養(yǎng)4 h,離心后棄上清,置搖床上低速振蕩10 min。采用全自動(dòng)酶標(biāo)儀(檢測(cè)490 nm處的吸光度值(A值),取平均值計(jì)算細(xì)胞生長率。規(guī)定生長率>95%的藥物濃度為該藥的非細(xì)胞毒性劑量,并作為最佳逆轉(zhuǎn)耐藥濃度。

1.3.4Westem blot觀察A2780/PTX細(xì)胞內(nèi)蛋白的表達(dá)于每組收集生長狀態(tài)良好的卵巢癌A2780/PTX細(xì)胞1×106個(gè),棄去培養(yǎng)液后用PBS沖洗3次,提取總蛋白,通過BCA法測(cè)定蛋白質(zhì)濃度,吸取50 μg總蛋白,行10%SDSPAGE電泳,通過電轉(zhuǎn)移(40V 150 min的轉(zhuǎn)印條件)印跡到PVDF膜上,封閉5%脫脂奶粉FIBS液中,于37 ℃下孵育2 h。加入1∶1 000稀釋的一抗孵育,4 ℃過夜,用TBST洗膜5次,5 min/次;加入1∶5 000 HRP標(biāo)記的二抗孵育,于37 ℃培育2 h,經(jīng)PBS沖洗,采用ECL法檢測(cè)。于暗室曝光X線片,通過GDSS000凝膠自動(dòng)成像系統(tǒng)攝像,漂洗并干燥后避光保存。Image-Pro Plus 8.0軟件分析條帶灰度值,以A2780/PTX/β-actin代表A2780/PTX的相對(duì)表達(dá)量。

1.3.5采用激光共聚焦顯微鏡檢測(cè)線粒體膜電位的變化激光共聚焦熒光顯微鏡檢測(cè)2種藥物對(duì)A2780/PTX細(xì)胞線粒體膜電位(△Ψm)的影響,各組以不同濃度藥物作用72 h后,加入無血清培養(yǎng)基稀釋的線粒體熒光染料(JC-1)(終濃度為10 mg/L),于37 ℃下培養(yǎng)15 min,離心5 min后棄除多余染料,在各組均制片3張,放于激光共聚焦顯微鏡下進(jìn)行掃描、拍照。JC-1單體在激發(fā)波長為488 nm,發(fā)射波長為530 nm處能檢測(cè)到綠色熒光,JC-1聚合物在激發(fā)波長為535 nm，發(fā)射波長為590 nm處檢測(cè)到紅色熒光。選擇5個(gè)不重復(fù)視野,并對(duì)其平均熒光密度進(jìn)行計(jì)算,以紅色熒光/綠色熒光光密度比值表示線粒體△Ψm的高低,比值降低提示線粒體△Ψm下降。

2　結(jié)果

2.1流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞A2780/PTX周期流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)結(jié)果顯示,空白組細(xì)胞主要分布在G0/G1期,人參皂苷組、欖香烯乳組在G0/G1期細(xì)胞較對(duì)照組增加,人參皂苷組、欖香烯乳組與空白組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),人參皂苷組及欖香烯乳組之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);聯(lián)合組在G0/G1期細(xì)胞與人參皂苷組、欖香烯乳組及空白組比較有明顯增加,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),提示A2780/PTX細(xì)胞被阻止在G1期。見表1。

表1　A2780/PTX細(xì)胞周期的檢測(cè)

注:與人參皂苷組、欖香烯乳組及空白組比較,*P<0.05。

2.2MTT法檢測(cè)細(xì)胞毒作用MTT法檢測(cè)結(jié)果顯示不同濃度的藥物劑量可以對(duì)卵巢癌細(xì)胞產(chǎn)生抑制作用,并呈一定的劑量依賴性。但隨著2種藥物濃度的提高,對(duì)A2780/PTX細(xì)胞生長的抑制情況明顯上升。2種藥物在中高濃度時(shí),抑制腫瘤細(xì)胞生長的作用尤為顯著,并呈一定的劑量依賴性,且中高濃度時(shí)能產(chǎn)生更嚴(yán)重的對(duì)細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)破壞的損傷。根據(jù)本研究結(jié)果以及參考文獻(xiàn)[10]，我們選擇30 μg/mL濃度的人參皂苷及20 μg/mL濃度的欖香烯乳作用A2780/PTX細(xì)胞24 h為研究2種藥物逆轉(zhuǎn)A2780/PTX細(xì)胞耐藥性的最適濃度和時(shí)間。不同濃度藥物抑制A2780/PTX細(xì)胞生長情況見表2、圖1。

表2　人參皂苷及欖香烯乳對(duì)A2780/PTX細(xì)胞生長的抑制情況

注:*P<0.05。

2.3Westem blot檢測(cè)A2780/PTX蛋白的表達(dá)Western blotting結(jié)果顯示,A2780/PTX細(xì)胞中聯(lián)合組蛋白表達(dá)較空白組、人參皂苷組、欖香烯乳組顯著降低(P<0.05)。見表3。

圖1　不同濃度藥物的吸光度值

組別A2780/PTXprotein空白組098±023?人參皂苷組085±016?欖香烯乳組084±032聯(lián)合組073±012?

注:與人參皂苷組、欖香烯乳組及空白組比較,*P<0.05。

圖2　Western blot檢測(cè)A2780/PTX細(xì)胞的protein的表達(dá)

圖3　細(xì)胞內(nèi)線粒體膜電位的熒光強(qiáng)度(×400)

2.4人參皂苷及欖香烯乳對(duì)A2780/PTX細(xì)胞株線粒體膜電位的影響結(jié)果顯示,在藥物最適濃度下作用24 h后,空白組細(xì)胞(圖3a)可見紅色熒光,胞膜完整,胞核清晰可見,表明線粒體△Ψm沒有明顯變化;人參皂苷組(圖3b)、欖香烯乳組(圖3c)可見部分細(xì)胞呈現(xiàn)紅色熒光,部分細(xì)胞呈現(xiàn)綠色熒光,還有部分細(xì)胞呈破裂狀,胞內(nèi)可見內(nèi)容物外流,提示線粒體△Ψm有所下降;聯(lián)合組(圖3 d)中顯示大量細(xì)胞呈現(xiàn)綠色熒光,部分細(xì)胞出現(xiàn)核固縮、部分細(xì)胞呈破裂狀,胞內(nèi)可見內(nèi)容物外流,表明線粒體△Ψm有顯著下降。

3　討論

卵巢癌是婦科較為常見的惡性腫瘤之一,嚴(yán)重影響著女性的生命健康。目前主要治療手段是以手術(shù)切除為主,輔助藥物化療的綜合治療。因其發(fā)病隱匿,多數(shù)患者發(fā)現(xiàn)時(shí)已屬中、晚期,而晚期卵巢癌患者的生存率較低,尤其是5年生存率僅為30%左右[10],對(duì)化療藥物產(chǎn)生耐藥性是導(dǎo)致化療失敗及影響5年生存率的主要原因。因此對(duì)卵巢癌細(xì)胞耐藥機(jī)制的研究是目前的熱門領(lǐng)域。

近年來隨著中藥及中醫(yī)技術(shù)的發(fā)展,中藥資源越來越豐富,且中藥作用靶點(diǎn)較多,具有針對(duì)多藥耐藥機(jī)制復(fù)雜的特點(diǎn)。我國自行研發(fā)的抗癌新藥欖香烯乳注射液就是一種可以逆轉(zhuǎn)多藥耐藥的中藥[11]。研究發(fā)現(xiàn)作為其主要成分的β-欖香烯,其具有抑制腫瘤細(xì)胞DNA的合成,降低腫瘤細(xì)胞的增殖能力,同時(shí)具有增強(qiáng)機(jī)體T淋巴細(xì)胞亞群的功能,發(fā)揮加強(qiáng)免疫作用等的優(yōu)點(diǎn)[12-13]。其所具有的逆轉(zhuǎn)多藥耐藥途徑的作用已被多項(xiàng)研究所證實(shí)。此外多項(xiàng)研究均表明,人參皂苷可以通過不同途徑抑制腫瘤細(xì)胞的生長[14-15]。人參皂苷可通過調(diào)節(jié)凋亡相關(guān)基因的表達(dá)及活性,誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞的凋亡;可通過抑制藥物向細(xì)胞外流動(dòng)而逆轉(zhuǎn)腫瘤細(xì)胞的耐藥性;還可通過抑制腫瘤血管生成、減低細(xì)胞黏附性及調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度等途徑抑制腫瘤的侵襲及轉(zhuǎn)移。有研究表明,人參皂苷可加速外周淋巴細(xì)胞增殖,增強(qiáng)體液和細(xì)胞免疫[16]。

本研究采用低細(xì)胞毒濃度的人參皂苷和非細(xì)胞毒性抗癌藥欖香烯乳聯(lián)合干預(yù)卵巢癌細(xì)胞耐藥株A2780/PTX。通過比較在總劑量不變的前提下,人參皂苷和欖香烯乳單獨(dú)用藥和2者聯(lián)合用藥后,卵巢癌細(xì)胞耐藥株A2780/PTX的生長情況,通過流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)結(jié)果顯示,聯(lián)合組在G0/G1期細(xì)胞與人參皂苷組、欖香烯乳組及空白組比較有明顯增加,A2780/PTX細(xì)胞被阻止在G1期,表明2者聯(lián)合應(yīng)用可以增強(qiáng)抑制腫瘤細(xì)胞生長的效應(yīng);通過MTT法檢測(cè)結(jié)果顯示在不同濃度的藥物劑量時(shí),對(duì)卵巢癌細(xì)胞產(chǎn)生抑制作用,并呈一定的劑量依賴性,且聯(lián)合組的抑制作用大于單獨(dú)用藥組,提示2者聯(lián)合應(yīng)用促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的逆轉(zhuǎn)耐藥作用會(huì)增強(qiáng);Western blotting結(jié)果顯示,A2780/PTX細(xì)胞中聯(lián)合組蛋白表達(dá)較空白組、人參皂苷組、欖香烯乳組顯著降低,提示聯(lián)合應(yīng)用可進(jìn)一步使癌細(xì)胞增殖能力下降;不同濃度的人參皂苷及欖香烯乳聯(lián)合能使A2780/PTX細(xì)胞株線粒體膜電位下降,表明細(xì)胞線粒體膜受到損傷,從而誘導(dǎo)了細(xì)胞的凋亡。

綜上所述,人參皂苷和欖香烯乳聯(lián)合干預(yù)具有明確的抗腫瘤作用。但是本實(shí)驗(yàn)結(jié)果尚缺乏相關(guān)機(jī)制的研究,此外還需通過大量臨床病例資料進(jìn)行深入研究與佐證。

[1]Dai ZJ,Tang W,Lu WF,et al.Antiproliferative and apoptotic effects of β-elemene on human hepatoma HepG2 cells[J].Cancer Cell Int,2013,13(1):27.

[2]楊春肖,黃運(yùn)蘭,司立慧,等.人參皂苷Rh2對(duì)人卵巢癌細(xì)胞的作用及其機(jī)制的研究[J].中國婦幼保健,2012,27(32):5162-5165.

[3]Greither T,Koser F,Kappler M,et al.Expression of human Piwi-like genes is associated with prognosis for soft tissue sarcoma patients[J].BMC Cancer,2012,12:272.

[4]李冬,王旋,戴燕,等.抗菌肽LL-37在巨噬細(xì)胞促卵巢癌細(xì)胞增殖中的作用[J].中華腫瘤雜志,2013,35(9):660-665.

[5]Hagemann S,Wohlschlaeger J,Bertram S,et al.Loss of Survivin influences liver regeneration and is associated with impaired Aurora B function[J].Cell Death Differ,2013,20(6):834-844.

[6]王翠英,宋春燕.參麥注射液治療卵巢癌臨床研究[J].中醫(yī)學(xué)報(bào),2013,28(4):471-472.

[7]Hetland TE,Nymoen DA,Holth A,et al.Aurora B expression in metastatic effusions from advanced-stage ovarian serous carcinoma is predictive of intrinsic chemotherapy resistance[J].Hum Pathol,2013,44(5):777-785.

[8]張小風(fēng),蔡元訓(xùn).參麥注射液聯(lián)合化療治療惡性腫瘤療效觀察[J].浙江中西醫(yī)結(jié)合雜志,2006,15(12):741-742.

[9]劉寨東,齊元富,李秀榮,等.六神丸抗腫瘤實(shí)驗(yàn)研究現(xiàn)狀[J].中醫(yī)學(xué)報(bào),2011,10(7):519-520.

[10]金英慧,何津,徐紅梅,等.人參皂苷Rh2聯(lián)合順鉑對(duì)人卵巢癌SKOV-3細(xì)胞凋亡的影響[J].中國婦幼保健,2012,27(9):1398-1400.

[11]高巖,林英嘉,李楊,等.人參皂苷代謝產(chǎn)物CK誘導(dǎo)卵巢癌細(xì)胞CAOV3的凋亡機(jī)制[J].中國生物制品學(xué)雜志,2015,28(2):142-146.

[12]田紅,于鵬,吳小茗,等.卵巢癌的治療藥物研究進(jìn)展[J].現(xiàn)代藥物與臨床,2015,30(1):103-107.

[13]陳魯,屠玨,張英麗.人參皂苷Rg3與順鉑對(duì)荷卵巢癌裸鼠免疫功能及腫瘤相關(guān)蛋白的影響[J].腫瘤學(xué)雜志,2014,20(11):914-919.

[14]孫倩,肖玲.人參皂苷Rh1誘導(dǎo)卵巢癌細(xì)胞凋亡及對(duì)piwi基因的表達(dá)影響[J].中國現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志,2013,23(3):1-5.

[15]陳魯,朱筧青,錢麗娟,等.人參皂苷Rg3與順鉑對(duì)高轉(zhuǎn)移人卵巢癌細(xì)胞系HO-8910PM細(xì)胞周期和轉(zhuǎn)移抑制的影響[J].浙江醫(yī)學(xué),2009,31(2):169-172.

[16]許天敏,崔滿華,谷麗萍,等.20(S)-人參皂苷Rg3對(duì)卵巢癌生長抑制作用的實(shí)驗(yàn)研究[J].中國實(shí)用婦科與產(chǎn)科雜志,2007,23(2):108-110.

(2015-09-04收稿責(zé)任編輯：王明)

Elemi olefinic emulsion joint ginseng saponin on ovarian cancer cell A2780/PTX impact resistant strains

Wang Huan

(Jiyuan city of henan province people′s hospital pharmacy department，Jiyuan 454650,China)

Objective:To observe the elemi olefinic emulsion combined ginseng saponin scheme on ovarian cancer cell A2780/PTX impact resistant strains.Methods:Using vitro cultured ovarian cancer cell A2780/resistant strains PTX experiment，randomly divided into 4 groups：blank group：just add fresh whole culture; Ginseng saponin groups：30 mu g/mL culture ginsenosides; Elemi ene group：20 mu g/mL olive incense ene milk culture medium; Joint group：30 mu g/mL + 20 mu g/mL ginsenosides elemi milk culture medium.By flow cytometry instrument to detect cell cycle; Lam incense ene milk by determined by MTT method and use the cytotoxic effect of ginsenosides and their joint application; Using Western blot observation A2780/PTX protein expression in the cell; With laser confocal microscope detection of mitochondrial membrane potential changes.Results:Flow cytometry detection，according to the results and ginseng saponin，lam incense ene milk group and the blank group comparison，the joint group of cells in G0/G1 phase increased markedly，and the statistical significant difference(P<0.05)，A2780/PTX cells in G1 phase is blocked; Determined by MTT method to detect the result shows that different concentrations of doses can inhibitory effect on ovarian cancer cells，and a certain dose dependent;，according to the results of Western blotting A2780/zhonglian PTX cells to form protein expression than blank group，ginseng saponin，lam incense ene group significantly reduced(P<0.05); Joint group A2780/PTX cell lines of mitochondrial membrane potential decreased the ginseng saponins group，lam incense ene group and blank group is more obvious(P<0.05).Conclusion:Lam incense ene milk can joint scheme ginsenosides on ovarian cancer cell A2780/PTX resistant strains produce obvious growth inhibition.The joint application can improve the efficient，reduce the adverse reaction.

Ovarian cancer; Elemi olefinic emulsion; Ginseng saponin; A2780/PTX

王煥(1972.01—),女,本科,主管藥師,研究方向:藥學(xué),E-mail:wanghuanjyyy@163.com

R285.5

A doi：10.3969/j.issn.1673-7202.2016.09.049