楊曉東，肖珊美，刁銀軍，許玲玲，楊彩紅

（金華職業(yè)技術(shù)學(xué)院，浙江金華 321007）

紫外可見分光光度法測定酶解桑葚酒中多糖含量*

楊曉東，肖珊美，刁銀軍，許玲玲，楊彩紅

（金華職業(yè)技術(shù)學(xué)院，浙江金華 321007）

采用紫外可見分光光度法測定酶解桑葚酒中的多糖含量。向酶解桑葚酒中加入硫酸，使樣品中的多糖水解成單糖，并迅速脫水生成糖醛衍生物，加入苯酚作為顯色劑，檢測波長為490 nm，標(biāo)準(zhǔn)工作曲線線性方程為y=0.056 8x-0.035，相關(guān)系數(shù)r=0.999 4。測定結(jié)果的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.03%（n=5），平均加標(biāo)回收率為98.69%。該方法用于檢測酶解桑葚酒中多糖含量，簡便、快速。

桑葚酒；酶解；多糖；紫外可見分光光度法

桑葚為?？贫嗄晟颈局参锷涞墓麑?shí)，俗稱桑果、桑棗等。桑葚味甘酸，性寒，具有補(bǔ)肝益腎、養(yǎng)血生津、滋陰熄風(fēng)、滋陰補(bǔ)血、潤腸通便、生津止渴等功效，為滋補(bǔ)強(qiáng)壯、養(yǎng)心益智之佳果。桑葚含有豐富的維生素、多種氨基酸及微量元素，同時(shí)含有蘆丁、白藜蘆醇、花青素及多糖等生物活性成分。桑葚多糖是桑葚滋陰補(bǔ)血等補(bǔ)益功用的重要物質(zhì)基礎(chǔ)［1-4］。

由于桑葚沒有果皮保護(hù)，成熟季節(jié)恰逢高溫高濕的春夏之交，極易腐爛變質(zhì)，桑葚酒也就成了民間保存桑葚多糖等功效成分以便常年服用的重要飲品。而桑葚多糖的含量則是衡量桑葚酒品質(zhì)的重要指標(biāo)。傳統(tǒng)浸泡法制作的桑葚酒，因植物細(xì)胞壁的阻礙作用，桑葚多糖難以順利進(jìn)入酒體之中。發(fā)酵釀制法制作的桑葚酒，因發(fā)酵過程中不能避免花青素等活性成分的氧化損失，也存在不足之處。筆者采用復(fù)合果膠酶酶解白酒浸提法制作桑葚酒，酒體中可以得到更多的多糖和花青素。

采用酶輔助提取植物多糖與花青素，可降低能耗，減少污染，簡化工藝程序。常用的酶有纖維素酶、半纖維素酶、果膠酶和淀粉酶等［5-6］。如劉曉露等［7］用纖維素酶提取桑葚多糖，平均得率為14.64%；王鳳杰［8］采用纖維素酶提取，蘆薈多糖含量為9.146 g/L；侯軒等［9］用復(fù)合酶（纖維素酶與果膠酶）提取白術(shù)多糖，多糖的得率為43.00%。

多糖含量的測定方法主要有高效液相色譜法及苯酚-硫酸分光光度法。高效液相色譜法測定多糖需加衍生試劑進(jìn)行衍生后才能測定，實(shí)驗(yàn)條件難以控制，成本較高，污染較大。苯酚-硫酸分光光度法是利用多糖在硫酸的作用下，水解成單糖分子，并迅速脫水生成糖醛衍生物，然后與苯酚形成有色化合物，再用分光光度計(jì)進(jìn)行檢測，該法簡便、快速、準(zhǔn)確、靈敏。目前文獻(xiàn)中未見酶解桑葚酒中多糖含量測定的報(bào)道，酶解桑葚酒含糖量比普通浸泡桑葚高，本實(shí)驗(yàn)將苯酚-硫酸法應(yīng)用于酶解桑葚酒多糖含量的測定并對實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)行優(yōu)化，為酶解桑葚酒的品質(zhì)保障提供依據(jù)。

1　實(shí)驗(yàn)部分

1.1主要儀器與試劑

紫外可見分光光度計(jì)：TU1901型，配1 cm石英比色皿，北京普析通用有限公司；

酶解桑葚酒：體積分?jǐn)?shù)為28%，自制；

濃硫酸：分析純，揚(yáng)州市華富化工有限公司；

苯酚溶液：0.06 g/mL，準(zhǔn)確稱取3.0 g苯酚固體，加少量蒸餾水溶解，移至50 mL容量瓶中，加水定容至標(biāo)線，避光保存；

葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)樣品：分析純，德州潤昕實(shí)驗(yàn)儀器有限公司；

葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)儲備液：500 μg/mL，準(zhǔn)確稱取標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖固體0.1 g，加少量蒸餾水溶解，移至250 mL容量瓶中，加水定容至標(biāo)線，使用時(shí)用蒸餾水稀釋成50 μg/mL葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。

1.2實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1葡萄糖的吸收曲線

準(zhǔn)確吸取葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液1.8 mL，補(bǔ)充蒸餾水至2.0 mL，然后加入0.06 g/mL苯酚溶液0.5 mL及濃硫酸1.0 mL，搖勻，于室溫下放置20 min，冷卻后以紫外可見分光光度計(jì)在400～600 nm之間掃描，得紫外可見吸收曲線如圖1。由圖1可知，葡萄糖最大吸收波長為490 nm。

圖1　葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)吸收曲線

1.2.2標(biāo)準(zhǔn)工作曲線的繪制

分別準(zhǔn)確移取葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)工作溶液0.4，0.6，1.0，1.2，1.5，1.8 mL，均用蒸餾水補(bǔ)充至2.0 mL，然后加入0.06 g/mL苯酚溶液0.5 mL及濃硫酸1.0 mL，搖勻，于室溫下放置20 min，冷卻后以紫外可見分光光度計(jì)在490 nm處測定吸光度。按上述步驟進(jìn)行試劑空白試驗(yàn)。

1.2.3樣品測定

準(zhǔn)確移取酶解桑葚酒0.1 mL至10 mL比色管中，依次加入2.9 mL蒸餾水、0.5 mL苯酚溶液、1 mL濃硫酸，搖勻，于室溫下放置20 min，冷卻后以紫外分光光度計(jì)在490 nm處測定吸光度。

2　結(jié)果與討論

2.1樣品處理

普通浸泡或釀制桑葚酒中往往含有果肉殘?jiān)⑽慈芙夤z等細(xì)小顆粒物。膠體溶液的分散相粒子直徑范圍是1～100 nm，粗分散系分散相粒子直徑大于100 nm。膠體溶液分散相粒子對于入射光會產(chǎn)生散射現(xiàn)象（丁達(dá)爾效應(yīng)），粗分散系分散相粒子則直接阻礙入射光通過。因此用紫外可見分光光度法檢測普通浸泡或釀制桑葚酒中某些物質(zhì)含量時(shí)，比色杯內(nèi)的膠體和粗分散相粒子都會影響測定的準(zhǔn)確性。采用濾膜過濾的辦法可以除去粗分散相粒子，但是難以除去膠粒，測定結(jié)果仍然受到影響。

酶解桑葚酒制作過程中添加了果膠酶和纖維素酶等，能夠較好地除去上述細(xì)小顆粒物，充分釋放桑葚多糖。測定酶解桑葚酒可以直接取樣，無須濾膜過濾，不影響測定結(jié)果的準(zhǔn)確性。

2.2線性方程與檢出限

按照1.2.2繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線，以葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液的質(zhì)量濃度對測得吸光度進(jìn)行線性回歸，葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)工作溶液在0.92～15.25 μg/mL范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系，回歸方程為y=0.056 8x-0.035，相關(guān)系數(shù)r=0.999 4。在本實(shí)驗(yàn)條件下，采用3倍于空白值的標(biāo)準(zhǔn)偏差（n=7）計(jì)算得檢出限為0.090 μg/mL。

2.3精密度試驗(yàn)

分別精確移取酶解桑葚酒樣0.1 mL于5只10 mL比色管中，依次加入1.9 mL蒸餾水、0.5 mL苯酚溶液、1.0 mL濃硫酸，搖勻，于室溫下放置20 min，冷卻后以紫外可見分光光度計(jì)在490 nm處測定吸光度，測定結(jié)果見表1。由表1可知，該方法測定結(jié)果的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.03%，表明精密度良好。

表1　精密度試驗(yàn)結(jié)果

2.4穩(wěn)定性試驗(yàn)

精確移取酶解桑葚酒樣0.1 mL于10 mL比色管中，依次加入2.9 mL蒸餾水、0.5 mL苯酚溶液、1.0 mL濃硫酸，搖勻，于室溫下放置20 min，冷卻后于490 nm處測定吸光度，每隔30 s測一次，結(jié)果表明在25 min之內(nèi)測定結(jié)果穩(wěn)定。

2.5加標(biāo)回收試驗(yàn)

分別精確移取酶解桑葚酒樣0.1 mL于2只10mL比色管內(nèi)，其中一只比色管加入葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液0.1 mL，然后加水至2.0 mL；另一只直接用蒸餾水補(bǔ)充至2.0 mL。然后各加入0.5 mL 苯酚溶液、1.0 mL濃硫酸，搖勻，于室溫下放置20 min，冷卻后以紫外可見分光光度計(jì)在490 nm處測定吸光度，測定結(jié)果見表2。由表2可知，該方法測定桑葚多糖的回收率在95.90～101.40%之間，平均回收率為98.69%，方法準(zhǔn)確度滿足測定要求。

表2　加標(biāo)回收試驗(yàn)結(jié)果

3　結(jié)語

用苯酚-硫酸紫外可見分光光度法測定酒中多糖含量，方法可行且簡便快速。該方法是針對酶解桑葚果汁果酒中的多糖的測定建立起來的，也可應(yīng)用于其它果汁果酒中多糖及花青素的分析測定。

［1］ 王曉楊，張媛，張志琴，等.桑葚提取物對動(dòng)物實(shí)驗(yàn)性高脂血癥預(yù)防作用的研究［J］.心血管康復(fù)醫(yī)學(xué)雜志，2009，18（5）： 494-497.

［2］ 劉玉玲，紀(jì)國力.桑葚中多糖的提取及含量測定［J］.中國醫(yī)藥科學(xué)，2012，2（18）： 109-110.

［3］ 林耀盛，劉學(xué)銘，楊榮玲，等.桑葚片中多酚及花青素含量的測定［J］.現(xiàn)代食品科技，2013，29（4）： 890-893.

［4］ 黃正勇，梁貴秋，黎書明，等.桑葚果酒釀造質(zhì)量控制的研究［J］.廣西蠶業(yè)，2013，50（2）： 53-58.

［5］ 陳小婕，陰文婭.植物中花青素提取方法探討［J］.食品科技，2013，34（2）： 395-399.

［6］ 張勝，李湘州，吳志平，等.植物多糖分離純化與行列測定方法研究進(jìn)展［J］.林產(chǎn)化學(xué)與工業(yè)，2009，29（10）： 238-242.

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［8］ 王鳳杰.中華蘆薈多糖提取方法的研究［J］.白求恩軍醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2007，5（5）： 303-304.

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一種質(zhì)譜分析儀器的自動(dòng)進(jìn)樣裝置

公布號：CN105304450A 公布日：2016.02.03

申請人：南京華欣分析儀器制造有限公司

本申請涉及一種質(zhì)譜分析儀器的自動(dòng)進(jìn)樣裝置。主要由調(diào)速電機(jī)、聯(lián)軸器、傳動(dòng)裝置、樣品托架、直流變壓器，直流變壓器與調(diào)速電機(jī)連接，傳動(dòng)裝置通過聯(lián)軸器連接到調(diào)速電機(jī)，樣品托架連接在傳動(dòng)裝置上，所述傳動(dòng)裝置包括絲杠，可采用精密滾動(dòng)絲杠；調(diào)速電機(jī)上帶有調(diào)速旋鈕。調(diào)速電機(jī)上還有控制開關(guān)，該控制開關(guān)通過正轉(zhuǎn)、反轉(zhuǎn)、停止3個(gè)方向控制電機(jī)，從而帶動(dòng)絲杠上的樣品托架正轉(zhuǎn)、反轉(zhuǎn)或停止。通過設(shè)置調(diào)速電機(jī)和傳動(dòng)裝置可有效控制自動(dòng)進(jìn)樣的精確性；通過調(diào)節(jié)進(jìn)樣的速度，確保每次進(jìn)樣的可重現(xiàn)性，工作效率高，運(yùn)行安全可靠。

一種柴油機(jī)尾氣檢測分析儀器

公布號：CN105334297A 公布日：2016.02.17

申請人：南京華欣分析儀器制造有限公司

本申請涉及一種柴油機(jī)尾氣檢測分析儀器，包括外殼及顯示屏、外殼內(nèi)安裝供電裝置、外殼上設(shè)有進(jìn)氣口和出氣口，在進(jìn)氣口后方的通氣管路上安裝冷凝器，冷凝器后方的通氣管路上通過一三通閥分別連通管路一和管路二，管路一接通用于檢測氣體中粉塵含量的粉塵檢測儀，管路二內(nèi)安裝粉塵濾網(wǎng)，在粉塵濾網(wǎng)后方，管路二通過四通閥分別連通管路三、管路四和管路五，管路三接通用于檢測氣體中氮氧化合物含量的氮氧化合物檢測儀，管路四接通用于檢測氣體中碳氧化合物含量的碳氧化合物檢測儀，管路五接通用于檢測氣體中硫氧化合物含量的硫氧化合物檢測儀。該儀器提高了在線測量結(jié)果的準(zhǔn)確性。

一種智能化免疫層析及光譜分析一體化裝置及其分析方法

公布號：CN105277680A 公布日：2016.01.27

申請人：北京倍肯華業(yè)科技發(fā)展有限公司

本發(fā)明公開了一種智能化免疫層析分析裝置及其分析方法，用于食品藥品化妝品及飲用水中的一些有毒有害物質(zhì)的篩查。包括殼體、人機(jī)交互模塊、光源系統(tǒng)、圖像采集模塊、數(shù)據(jù)分析處理模塊和數(shù)據(jù)上傳模塊，其中人機(jī)交互模塊主要包括液晶顯示觸摸屏和控制電路，在殼體上設(shè)有液晶顯示觸摸屏和電源開關(guān)鍵，在殼體右側(cè)面設(shè)有樣本檢測窗，在殼體后面設(shè)有電源插口、USB插口和網(wǎng)絡(luò)插口，圖像采集模塊主要包括面陣式CCD攝像頭。由于采用面陣式CCD攝像頭解決了定量檢測儀體積大的問題，另外配合上位機(jī)軟件可以實(shí)現(xiàn)測試卡的精確定標(biāo)，解決了檢測結(jié)果穩(wěn)定性差的問題，另外還可以對測試區(qū)域進(jìn)行圖像采集、存儲和重現(xiàn)。

一種尿液中段分析系統(tǒng)及分析方法

公布號：CN105334338A 公布日：2016.02.17

申請人：揚(yáng)州大晟藥用玻璃有限公司

Determination of Polysaccharide by UV-Vis Spectrometry in Mulberry Wine Made by Enzymatic Method

Yang Xiaodong， Xiao Shanmei， Diao Yinjun， Xu Lingling， Yang Caihong
（Jinhua Polytechnic，Jinhua 321007， China）

The content of polysaccharide in Mulberry wine made by enzymatic method was determined by UV spectrometry. Sulphuric acid was added in Mulberry wine sample， and polysaccharide in the sample was hydrolyzed to monosaccharide which was dehydrated to geberate furfural derivatives， then phenol was added as chromogenic agent， the detection wave length was 490 nm. The standard curve regression equation was y=0.056 8x-0.035 with the correlation coefficient of 0.999 4. The relative standard deviation of the detection results was 0.03%（n=5）， and the average recovery was 98.69%. This method is simple and fast， it can be used to determine polysaccharide in Mulberry wine.

Mulberry wine； enzymatic method； polysaccharide； UV-visible spectrophotometry

本發(fā)明公開了一種尿液中段分析系統(tǒng)及分析方法，所述分析系統(tǒng)包括條形碼讀取裝置、取樣裝置、多關(guān)節(jié)機(jī)械臂、分析裝置和控制器。取樣裝置的尿液漏斗上設(shè)有具有身份信息的條形碼，當(dāng)條形碼讀取裝置初次讀取到某個(gè)條形碼時(shí)，控制器開始執(zhí)行取樣及分析操作，當(dāng)之后讀取不到該條形碼時(shí)，進(jìn)行清洗、吹掃操作。本發(fā)明的分析系統(tǒng)及方法操作簡單，能夠?qū)崿F(xiàn)全自動(dòng)分析。

O657.3

A

1008-6145（2016）02-0034-03

10.3969/j.issn.1008-6145.2016.02.010

*浙江省科技廳分析測試科技計(jì)劃項(xiàng)目（2014C37057）

聯(lián)系人：楊曉東；E-mail： jhyxd@163.com

2015-12-31