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        三丁酸甘油酯對宮內(nèi)發(fā)育遲緩哺乳仔豬肝臟抗氧化和線粒體功能的影響

        2016-11-11 07:34:34何進(jìn)田白凱文張莉莉
        食品科學(xué) 2016年3期
        關(guān)鍵詞:丁酸哺乳線粒體

        何進(jìn)田,董 麗,2,白凱文,徐 穩(wěn),牛 玉,黃 強,張莉莉,王 恬,*

        (1.南京農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院,江蘇 南京 210095;2.揚州大學(xué)動物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院,江蘇 揚州 225009)

        三丁酸甘油酯對宮內(nèi)發(fā)育遲緩哺乳仔豬肝臟抗氧化和線粒體功能的影響

        何進(jìn)田1,董 麗1,2,白凱文1,徐 穩(wěn)1,牛 玉1,黃 強1,張莉莉1,王 恬1,*

        (1.南京農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院,江蘇 南京 210095;2.揚州大學(xué)動物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院,江蘇 揚州 225009)

        目的:研究三丁酸甘油酯(tributyrin,TB)對宮內(nèi)發(fā)育遲緩(intrauterine growth retardation,IUGR)哺乳仔豬肝臟抗氧化和線粒體功能的調(diào)節(jié)作用。方法:選取8 頭正常初生體質(zhì)量仔豬和16 頭IUGR仔豬,將IUGR仔豬隨機均分為2 組,分別飼喂基礎(chǔ)人工乳(IUGR組)、基礎(chǔ)人工乳+0.1% TB(IUGR+TB,IT組),正常仔豬飼喂基礎(chǔ)人工乳(NBW組)。從仔豬7 日齡開始飼喂,21 日齡時每組選取6 頭體質(zhì)量接近的仔豬進(jìn)行屠宰取樣,并對肝臟進(jìn)行組織切片觀察,酶活力以及相關(guān)酶mRNA表達(dá)量的測定。結(jié)果:與NBW組相比,IUGR組仔豬的肝臟組織切片出現(xiàn)中央靜脈充血現(xiàn)象,而IT組無顯著變化。IUGR組仔豬肝臟谷胱甘肽過氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)活力較NBW組顯著降低(P<0.05),丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量極顯著升高(P<0.01),線粒體蘋果酸脫氫酶(malate dehydrogenase,MDH)、錳-超氧化物歧化酶(Mn-superoxide dismutase,Mn-SOD)活力顯著低于NBW組(P<0.05);與IUGR組相比,IT組仔豬肝臟SOD活力、還原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)含量、GSH-Px活力及總抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AOC)均顯著升高(P<0.05),且MDA含量極顯著降低(P<0.01),線粒體MDH、Mn-SOD活力均顯著升高(P<0.05);與NBW組相比,IT組仔豬肝臟GSH含量、T-AOC顯著升高(P<0.05),MDA含量極顯著降低(P<0.01),其他指標(biāo)無顯著差異。與NBW組相比,IUGR組仔豬肝臟SOD、CAT mRNA表達(dá)水平均顯著升高(P<0.05),IT組仔豬肝臟SOD、PRDX3 mRNA表達(dá)水平均顯著升高(P<0.05)。IT組仔豬肝臟CAT mRNA表達(dá)水平較IUGR組顯著降低(P<0.05),PRDX3 mRNA表達(dá)水平較IUGR組顯著升高(P<0.05)。結(jié)論:IUGR哺乳仔豬肝臟抗氧化能力降低,線粒體功能受損。TB能夠提高IUGR仔豬肝臟抗氧化能力,保護(hù)線粒體免受損傷,具有作為抗氧化劑的潛力。

        宮內(nèi)發(fā)育遲緩;肝臟;抗氧化能力;線粒體;哺乳仔豬

        宮內(nèi)發(fā)育遲緩(intrauterine growth retardation,IUGR)通常發(fā)生在哺乳動物妊娠期,表現(xiàn)為胎兒或胎兒體內(nèi)器官生長發(fā)育受阻[1]。據(jù)統(tǒng)計,IUGR在人類和動物生產(chǎn)中的發(fā)生率高達(dá)5%~10%,具有較高的發(fā)病率和死亡率[2]。研究表明子宮內(nèi)生長環(huán)境受限會提高胎兒出生后患代謝綜合征(metabolic syndrome,MS)的可能性,如2型糖尿病、高血壓、代謝異常等,并且與成年期發(fā)病率有緊密的聯(lián)系[3]。IUGR還降低了具有免疫、抗氧化、蛋白質(zhì)合成等功能蛋白的表達(dá)水平[4],引起機體氧化應(yīng)激。肝臟是動物體內(nèi)重要的代謝器官,可以清除體內(nèi)氧化代謝產(chǎn)生的自由基,避免機體聚積過多的自由基而造成損傷[5]。

        三丁酸甘油酯(tributyrin,TB)是由3 分子丁酸和1 分子甘油酯化后的產(chǎn)物,屬于丁酸鹽衍生物,在腸道酶的作用下分解為β-羥基丁酸和甘油進(jìn)入肝臟進(jìn)行代謝。TB能有效緩解IUGR引起的腸道損傷[6],緩解肝臟炎癥反應(yīng)[7],其良好的抗癌作用已在人類和動物身上得到了驗證[8]。日糧中添加2 kg/t TB時,斷奶仔豬的生長性能及健康狀況均得到了明顯改善[9],TB添加量為0.1%時,可緩解由脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)引起的肉雞肝臟損傷[10]。這些結(jié)果都表明TB作為食品添加劑具有保護(hù)動物健康、保障食品安全的研究潛力。豬具有與人類相似的器官構(gòu)造、功能等特征,IUGR豬已被廣泛用于臨床疾病研究,對預(yù)防和治療人類IUGR病具有重要的參考意義。但目前有關(guān)TB在IUGR方面的應(yīng)用還較少。因此,本實驗選擇IUGR哺乳仔豬為研究模型,觀察IUGR對仔豬出生早期肝臟造成的影響(組織形態(tài)、抗氧化能力等),并探討TB對其調(diào)節(jié)作用,為進(jìn)一步評估IUGR對動物健康造成的影響奠定理論基礎(chǔ),同時為TB作為一種食品添加劑在生產(chǎn)中的應(yīng)用提供基本依據(jù)。

        1 材料與方法

        1.1 動物與材料

        選取體質(zhì)量相近、預(yù)產(chǎn)期相近、同胎次(3~4)的妊娠母豬20 頭,在其分娩當(dāng)日,選擇8 窩仔豬,每窩新生仔豬(杜洛克×長白×大白)中選擇1 頭正常體質(zhì)量(normal body weight,NBW)仔豬((1.67±0.13) kg)設(shè)為NBW組和2 頭IUGR仔豬((0.93±0.11) kg)分別均分到IUGR組和IT組中(以初生體質(zhì)量低于群體兩個標(biāo)準(zhǔn)差的仔豬為IUGR仔豬,而初生體質(zhì)量在群體一個標(biāo)準(zhǔn)差范圍內(nèi)的仔豬為NBW仔豬[11]),即共8 頭NBW仔豬和16頭IUGR仔豬。哺乳至7 日齡,進(jìn)行單獨人工飼喂,NBW和IUGR組飼喂基礎(chǔ)人工乳,IT組飼喂基礎(chǔ)人工乳+0.10% TB,至21 日齡,每組屠宰6 頭仔豬,雌雄各半。宰前空腹12 h,屠宰后立即取肝臟相同部位于-20 ℃冰箱和液氮罐保存供后期指標(biāo)測定。基礎(chǔ)人工乳配方和營養(yǎng)成分見表1。

        表1 基礎(chǔ)人工乳配方和營養(yǎng)成分(消化能水平)Table1 Compositions and nutrient contents of diets (DM basis)

        1.2 試劑

        超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)試劑盒、谷胱甘肽過氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)試劑盒、總抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AOC)試劑盒、還原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)試劑盒、丙二醛(malondialdehyde,MDA)試劑盒、琥珀酸脫氫酶(succinatedehydrogenase,SDH)試劑盒、蘋果酸脫氫酶(malate dehydrogenase,MDH)試劑盒、銅鋅-超氧化物歧化酶(CuZn-SOD)試劑盒 南京建成生物工程研究所;Trizol 美國Invitrogen公司;SYBR、Rox Reference Dye 日本TaKaRa生物科技股份有限公司。

        1.3 方法

        1.3.1 動物飼養(yǎng)管理

        實驗期內(nèi)仔豬在育仔箱內(nèi)飼養(yǎng),自由采食人工乳,按人工乳與溫水1∶4(m/V)的比例調(diào)和。實驗在安徽宣城安佑實驗豬場進(jìn)行,按豬場飼養(yǎng)管理要求進(jìn)行常規(guī)免疫和定期消毒。

        1.3.2 肝臟組織形態(tài)學(xué)觀察

        取仔豬肝臟右葉相同組織部位于質(zhì)量分?jǐn)?shù)為4%的多聚甲醛液中固定,用乙醇及二甲苯脫水、透明,石蠟包埋、切片,蘇木精-伊紅(hematoxylin-eosin,HE)染色,在光學(xué)顯微鏡下觀察肝臟組織學(xué)形態(tài)變化。

        1.3.3 肝臟處理與指標(biāo)測定

        將仔豬肝臟組織按質(zhì)量比1∶9加入預(yù)冷的生理鹽水,冰水浴條件下勻漿破碎,3 000 r/min離心10 min,取上清液于-20 ℃冰箱中保存待用。肝臟線粒體的提取參考Tang等[12]的方法。肝臟中SOD、GSH-Px活力,T-AOC及GSH、MDA含量,肝臟線粒體中SDH、MDH、SOD、CuZn-SOD活力,以上指標(biāo)均嚴(yán)格按照試劑盒說明書方法和步驟進(jìn)行測定。錳-超氧化物歧化酶(Mn-SOD)活力為SOD活力與CuZn-SOD活力的差值。

        1.3.4 反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(reverse transcript polymerase chain reaction,RT-PCR)檢測肝臟SOD、過氧化氫酶(catalase,CAT)與過氧化物還原酶3(peroxiredoxin 3,PRDX3)mRNA的表達(dá)量

        1.3.4.1 RNA的提取和cDNA的合成

        仔豬屠宰后取肝臟,立即放入液氮罐中凍存。采用Trizol試劑從肝臟中提取總RNA。瓊脂糖凝膠電泳檢查總RNA的完整性。所有用于測定的樣品都需要檢查RNA純度(1.8≤OD260nm/OD280nm≤2.0),并用0.1%焦碳酸二乙酯(diethyl pyrocarbonate,DEPC)水稀釋到相同質(zhì)量濃度500 ng/μL。稀釋后的RNA采用10 μL反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)體系,以TaKaRa反轉(zhuǎn)錄試劑盒測定加樣量,按照試劑盒說明書中方法和步驟進(jìn)行測定。反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)參數(shù)為:37 ℃ 15 min,3 個循環(huán);85 ℃ 5 s。反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物(cDNA)保存于-20 ℃條件下備用。

        1.3.4.2 SOD、CAT與PRDX3 mRNA表達(dá)量的測定

        基因引物序列見表2,GAPDH作為內(nèi)參基因校準(zhǔn)目的基因mRNA的表達(dá),RT-PCR采用20 μL反應(yīng)體系:10 μL SYBR、上下游引物各0.4 μL、Rox Reference Dye(50×)0.4 μL、6.8 μL DEPC水和2 μL cDNA模板。

        表2 RT-PCR引物序列Table2 Primer sequences used in RT-PCR

        PCR反應(yīng)步驟為:95 ℃ 30 s;95 ℃ 5 s,40 個循環(huán);60 ℃ 34 s,每個樣品均先做預(yù)試。使用ABI軟件檢測相關(guān)基因表達(dá),用2–ΔΔCT法對基因mRNA表達(dá)量進(jìn)行統(tǒng)計。

        1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析

        實驗數(shù)據(jù)以Excel初步處理后,采用SPSS Statistics 20分析,結(jié)果以表示。所有數(shù)據(jù)采用單因素方差分析中的Duncan’s法進(jìn)行多重比較,以P<0.05和P<0.01作為差異顯著性的判斷標(biāo)準(zhǔn)。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 TB對IUGR哺乳仔豬肝臟組織形態(tài)的影響

        圖1 仔豬肝臟組織形態(tài)切片(HE,×100)Fig.1 Histological images of liver (HE, × 100)

        由圖1可知,與NBW組相比,IUGR組仔豬肝臟組織中央靜脈和門管區(qū)(圖1B中箭頭所指部位)充血較嚴(yán)重,而IT組與NBW組比較則沒有顯著變化。

        2.2 TB對IUGR哺乳仔豬肝臟抗氧化功能的影響

        表3 TB對IUGR哺乳仔豬肝臟抗氧化功能的影響Table3 Effect of tributyrin on liver antioxidant function of suckling piglets with intrauterine growth retardation

        由表3可知,與NBW組相比,IUGR組仔豬肝臟中GSH-Px活力顯著降低(P<0.05),SOD活力和GSH含量均有降低趨勢(P>0.05),T-AOC無顯著變化(P>0.05),MDA含量極顯著升高(P<0.01)。與IUGR組相比,IT組仔豬肝臟中GSH-Px、SOD活力和GSH含量均顯著升高(P<0.05),MDA含量極顯著降低(P<0.01)。IT組仔豬肝臟中GSH含量和T-AOC顯著高于NBW組(P<0.05),MDA含量則極顯著低于NBW組(P<0.01),SOD及GSH-Px活力與NBW組相比沒有顯著差異(P>0.05)。

        2.3 TB對IUGR哺乳仔豬肝臟線粒體功能的影響

        表4 TB對IUGR哺乳仔豬肝臟線粒體功能的影響Table4 Effect of tributyrin on liver mitochondrial function of suckling piglets with intrauterine growth retardation

        由表4可知,與NBW組相比,IUGR組仔豬肝臟線粒體中SDH、Mn-SOD活力均顯著降低(P<0.05)。IT組仔豬肝臟線粒體中SDH、Mn-SOD活力均較IUGR組顯著升高(P<0.05),且與NBW組之間無顯著差異(P>0.05)。

        2.4 B對IUGR哺乳仔豬肝臟SOD、CAT、PRDX3 mRNA表達(dá)量的影響

        表5 TB對IUGR哺乳仔豬肝臟SOD CAT PRDX3 mRNA相對表達(dá)量的影響Table5 Effect of tributyrin on mRNA expression of SOD, CAT and PRDX3 in liver of suckling piglets with intrauterine growth retardation

        由表5可知,IUGR組仔豬肝臟SOD、CAT mRNA表達(dá)水平較NBW組均顯著升高(P<0.05)。IT組仔豬肝臟CAT mRNA表達(dá)水平較IUGR組顯著降低(P<0.05),PRDX3 mRNA表達(dá)水平較IUGR組顯著升高(P<0.05)。與NBW組相比,IT組肝臟SOD、PRDX3 mRNA表達(dá)水平均顯著升高(P<0.05),CAT mRNA表達(dá)水平無顯著差異(P>0.05)。

        3 討 論

        IUGR對動物器官的不良影響已有較多報道,IUGR新生胎兒肝臟的營養(yǎng)代謝會發(fā)生異常。近年來,許多研究者也在試圖通過開發(fā)有效的添加劑來改善IUGR對機體產(chǎn)生的不良影響。肝臟在機體內(nèi)發(fā)揮著不可替代的作用,健康狀態(tài)下能夠維持體內(nèi)氧化還原的動態(tài)平衡。TB分解產(chǎn)生的丁酸能通過抑制核轉(zhuǎn)錄因子κB(nuclear factor-κB,NF-κB)的激活、降低肝臟腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)mRNA的表達(dá),實現(xiàn)抑制肝臟損傷和降低血清TNF-α水平的功能[13]。有研究發(fā)現(xiàn),TB能減少氫過氧化物的產(chǎn)生、提高抗氧化酶的活性、增強抗氧化能力[14],但目前有關(guān)TB作為食品添加劑對IUGR引起的肝臟損傷和抗氧化功能影響的研究報道仍較少。

        黃雪新[15]研究發(fā)現(xiàn)7 日齡IUGR仔豬肝臟內(nèi)細(xì)胞總數(shù)、肝細(xì)胞、枯否細(xì)胞、淋巴樣細(xì)胞數(shù)量均顯著減少,表明IUGR可能會對仔豬肝臟造成損傷,影響營養(yǎng)物質(zhì)的轉(zhuǎn)運。劉闖等[16]利用雙熒光標(biāo)記miRNA芯片技術(shù)對IUGR胎豬肝臟分析發(fā)現(xiàn),肝臟細(xì)胞的增殖受到了抑制。本研究發(fā)現(xiàn)21 日齡IUGR仔豬肝臟組織充血,但在日糧中添加TB后這一現(xiàn)象得到明顯的改善,并且與正常仔豬無顯著差異。Dong等[6]的研究也發(fā)現(xiàn)IUGR會造成仔豬腸道絨毛發(fā)育受損,脾臟質(zhì)量顯著下降,在日糧中添加TB后對IUGR造成的機體器官損傷均有一定的緩解作用,這也與本實驗結(jié)果一致。TB在腸道分解生成的β-羥基丁酸能被腸道表面細(xì)胞快速吸收,進(jìn)入肝臟為細(xì)胞的生長發(fā)育提供能量,加快細(xì)胞增殖,TB對器官損傷的緩解作用可能與此有關(guān)。李嬌龍等[10]研究發(fā)現(xiàn)飼料中添加0.1%的TB緩解了LPS引起的肉雞肝臟損傷,這些都表明TB作為食品添加劑可能對動物機體遭受的損傷具有一定的緩解作用,這可能是通過加速細(xì)胞增殖實現(xiàn)的,但具體機制還有待研究。

        動物機體在健康狀態(tài)下保持著氧化和抗氧化之間的動態(tài)平衡,當(dāng)機體遭到攻擊時(如疾病、應(yīng)激、營養(yǎng)失衡等),體內(nèi)會發(fā)生一系列的氧化應(yīng)激反應(yīng),產(chǎn)生大量自由基,抗氧化酶活性降低[17]。體內(nèi)的氧化還原平衡狀態(tài)一旦被打破,氧化應(yīng)激會引發(fā)多種疾病,嚴(yán)重影響人類和動物的健康。SOD、GSH是體內(nèi)重要的抗氧化劑和自由基清除劑[18],GSH-Px是機體一種重要的過氧化物分解酶,MDA是體內(nèi)脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物之一,上述幾種物質(zhì)活力或含量的高低可在一定程度上反應(yīng)機體的氧化應(yīng)激狀態(tài)[19]。本實驗結(jié)果顯示,受IUGR影響,21 日齡仔豬肝臟GSH含量及SOD、GSH-Px活力均降低,其中GSH-Px活力顯著降低,MDA含量顯著升高,這提示IUGR可能促進(jìn)了肝臟脂質(zhì)過氧化反應(yīng),降低了抗氧化酶的活力。李博等[20]研究也發(fā)現(xiàn)23 日齡IUGR仔豬肝臟清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基的能力有下降的趨勢,并且SOD活性顯著下降,與本實驗結(jié)果相似。研究發(fā)現(xiàn),發(fā)育未成熟的早產(chǎn)兒機體氧自由基活性較高,能夠損害體內(nèi)的大分子物質(zhì),如DNA、蛋白質(zhì)、多不飽和脂肪酸及碳水化合物等,這種氧化損傷會導(dǎo)致蛋白質(zhì)的二級、三級結(jié)構(gòu)發(fā)生改變[21]。Kamath等[21]證實了IUGR新生兒氧化應(yīng)激損傷嚴(yán)重。由此可見,IUGR會引起肝臟氧化應(yīng)激,降低機體抗氧化能力。本實驗發(fā)現(xiàn)在日糧中添加TB后,IUGR仔豬肝臟中MDA含量顯著下降,抗氧化酶活力升高。王遠(yuǎn)孝等[22]通過在斷奶仔豬日糧中添加60 mg/kg的γ-氨基丁酸顯著提高了仔豬機體的抗氧化能力,提示丁酸鹽能使機體產(chǎn)生更多抗氧化酶,增強機體清除脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物的能力。Leonel等[14]發(fā)現(xiàn)通過給患結(jié)腸炎的小鼠飼喂TB,小鼠體內(nèi)SOD活性得到了顯著提高,MDA含量顯著降低,抗氧化性能得到了增強,這與本實驗結(jié)果相似。體外實驗也表明了丁酸鹽具有顯著的抗氧化活性[23]。

        線粒體是機體進(jìn)行氧化代謝的部位,也是氧自由基產(chǎn)生的主要場所,線粒體在肝臟組織中的含量極高。SDH是三羧酸循環(huán)中唯一嵌入線粒體內(nèi)膜的酶[24],為線粒體的一種標(biāo)志酶。MDH是一種重要的氧化還原酶,Mn-SOD主要存在于線粒體基質(zhì)中,作為抗氧化劑在機體防御疾病的過程中起著重要的作用[25]。本實驗發(fā)現(xiàn)IUGR仔豬肝臟線粒體SDH、Mn-SOD活力均顯著降低,在食用添加TB的日糧后其SDH、Mn-SOD活力均能夠得到提高。機體氧化和抗氧化動態(tài)平衡被打破后,產(chǎn)生大量的活性氧(reactive oxygen species,ROS)自由基,改變膜蛋白的結(jié)構(gòu)和酶的活性,進(jìn)而引起線粒體膜發(fā)生改變,對細(xì)胞造成氧化損傷[26]。有報道以低蛋白日糧模擬IUGR環(huán)境,發(fā)現(xiàn)仔豬肝臟線粒體DNA拷貝數(shù)較正常組降低,母體攝入低蛋白日糧可能會影響胎兒線粒體DNA的復(fù)制和轉(zhuǎn)錄,IUGR抑制線粒體的功能[27],這也與本實驗結(jié)果一致。本實驗通過進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn),IUGR仔豬肝臟SOD、CAT mRNA表達(dá)水平顯著上升,PRDX3 mRNA表達(dá)水平也有上升趨勢。PRDX3主要分布于線粒體內(nèi),在調(diào)控線粒體內(nèi)ROS暴發(fā)引起的細(xì)胞凋亡中發(fā)揮著十分重要的作用。IT組仔豬肝臟SOD、CAT mRNA表達(dá)水平下降,仍高于NBW組。這些結(jié)果表明IUGR仔豬機體發(fā)生了氧化應(yīng)激,線粒體功能受損,激活自我損傷修復(fù)。在食用添加TB的日糧后對IUGR引起的線粒體功能損傷有一定的緩解作用,并且顯著提高了PRDX3 mRNA表達(dá)水平。有報道證明丁酸鹽能夠提高AMP激酶活性,增強小鼠骨骼肌中線粒體功能[28]。本實驗中TB對IUGR仔豬肝臟線粒體功能的增強作用可能與丁酸鹽作用的發(fā)揮密切相關(guān),具體作用機制還有待進(jìn)一步研究。

        本實驗結(jié)果表明,IUGR哺乳仔豬肝臟會發(fā)生損傷和氧化應(yīng)激,線粒體功能受損。日糧中添加0.1% TB可能具有緩解IUGR引起的肝臟線粒體損傷和增強肝臟抗氧化功能的潛力。結(jié)果提示TB作為食品添加劑可能具有修復(fù)機體早期遭受內(nèi)外環(huán)境變化引起的損傷、保護(hù)動物健康的重要作用。

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        Effect of Tributyrin on Liver Antioxidant Capacity and Mitochondrial Function of Piglets with Intrauterine Growth Retardation during Sucking Period

        HE Jintian1, DONG Li1,2, BAI Kaiwen1, XU Wen1, NIU Yu1, HUANG Qiang1, ZHANG Lili1, WANG Tian1,*
        (1. College of Animal Science and Technology, Nanjing Agricultural University, Nanjing 210095, China; 2. College of Animal Science and Technology, Yangzhou University, Yangzhou 225009, China)

        Objective: The effect of tributyrin on liver antioxidant capacity and mitochondrial function of sucking piglets with intrauterine growth retardation (IUGR) was observed in the present study. Methods: Totally 8 piglets with normal birth weight and 16 IUGR piglets were selected. The IUGR piglets were randomly divided into 2 groups (IUGR group fed basic artifi cial milk; IT group (IUGR + 0.1% tributyrin) fed basic artifi cial milk supplemented with 0.1% tributyrin). The piglets with normal birth weight were provided with basic artifi cial milk (NBW group). The experiment started at the age from 7 to 21 days. Totally 6 piglets (similar body weight) were selected from each group and slaughtered, and liver histological sections, antioxidant enzyme activities and mRNA expression were measured. Results: 1) Compared with NBW group, liver histological sections from IUGR group revealed central venous congestion, but IT group had no signifi cant change. 2) Compared with NBW group, IUGR group had lower glutathione peroxidase (GSH-Px) activity (P < 0.05) and increased malondialdehyde (MDA) content (P < 0.01) in liver, and lower malate dehydrogenase (MDH) and Mn-superoxide (Mn-SOD)activities in mitochondria (P < 0.05). IT group had higher SOD and GSH-Px activities, glutathione (GSH) content and total antioxidant capacity (T-AOC) (P < 0.05), and lower MDA content (P < 0.01) in liver, as well as higher activities of MDH and Mn-SOD in mitochondria when compared to IUGR group. Compared with NBW group, the activities of GSH and T-AOC were significantly increased (P < 0.05), and the MDA content was significantly decreased (P < 0.01) in IT group. 3) Compare with NBW group, the mRNA expression levels of the SOD and CAT genes in liver of IUGR group were significantly increased (P < 0.05), and the mRNA expression levels of SOD and PRDX3 in liver of IT group were also signifi cantly increased (P < 0.05). Compared to IUGR group, the mRNA expression of CAT was signifi cantly decreased (P < 0.05) and the mRNA expression of PRDX3 was signifi cantly increased (P < 0.05) in liver of IT group. Conclusion: Piglets with IUGR exhibited decreased antioxidant capacity in liver and impaired mitochondrial function. Diets supplemented with tributyrin could improve antioxidant capacity and protect mitochondria from damage in liver of IUGR piglets. Tributyrin may be an effi cient antioxidant.

        intrauterine growth retardation (IUGR); liver; antioxidant capacity; mitochondria; piglets

        10.7506/spkx1002-6630-201603035

        TS202.3

        A

        1002-6630(2016)03-0191-06

        何進(jìn)田, 董麗, 白凱文, 等. 三丁酸甘油酯對宮內(nèi)發(fā)育遲緩哺乳仔豬肝臟抗氧化和線粒體功能的影響[J]. 食品科學(xué), 2016, 37(3): 191-196. DOI:10.7506/spkx1002-6630-201603035. http://www.spkx.net.cn

        HE Jintian, DONG Li, BAI Kaiwen, et al. Effect of tributyrin on liver antioxidant capacity and mitochondrial function of piglets with intrauterine growth retardation during sucking period[J]. Food Science, 2016, 37(3): 191-196. (in Chinese with English abstract) DOI:10.7506/spkx1002-6630-201603035. http://www.spkx.net.cn

        2015-05-01

        國家自然科學(xué)基金青年科學(xué)基金項目(31201808);教育部高等學(xué)校博士點基金項目(20110097120033)

        何進(jìn)田(1990—),男,碩士研究生,研究方向為動物營養(yǎng)與飼料科學(xué)。E-mail:2013105040@njau.edu.cn

        *通信作者:王恬(1958—),男,教授,博士,研究方向為動物營養(yǎng)與飼料科學(xué)。E-mail:twang18@163.com

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