楊 華,任 悅,龐惟俏,郭德軍*
(黑龍江八一農(nóng)墾大學食品學院,黑龍江 大慶 163319)
5 種常見野生漿果的抗紫外線和抗微波輻射性能
楊 華,任 悅,龐惟俏,郭德軍*
(黑龍江八一農(nóng)墾大學食品學院,黑龍江 大慶 163319)
通過亞甲基藍酵母染色法,測定大興安嶺地區(qū)5 種野生漿果水浸提液對釀酒酵母抗輻射的保護作用。隨著紫外線輻射距離的增加、輻射時間的減短、浸提液質(zhì)量濃度的提高、漿果抗紫外線輻射作用增強。大興安嶺地區(qū)常見5 種漿果抗微波和抗紫外線輻射的順序為:野生藍莓>紅豆越橘>五味子>黑果花楸>樹莓。在功率120 W微波輻射20 s時,5 種漿果浸提液的抗微波輻射能力在90%以上;功率380 W,微波處理時間為20 s時,野生藍莓、紅豆越橘、五味子漿果浸提液抗微波輻射能力依然在90%左右,黑果花楸、樹莓漿果浸提液的抗微波輻射能力較弱;功率780 W,微波處理時間為40 s時,野生藍莓抗微波輻射能力仍有84%,其余4 種漿果浸提液的抗微波輻射能力大幅度下降。實驗表明,大興安嶺地區(qū)5 種常見漿果浸提液均具有抗微波和抗紫外線輻射作用,其中野生藍莓抗輻射能力最強。
野生漿果;抗紫外線;抗微波;性能
樹莓營養(yǎng)齊全,含有多種維生素和微量元素,如VB2、Ca、Zn、Fe、Mg等,其中,VC含量是蘋果的5 倍[1-2]。還含有豐富的呈色物質(zhì)花色苷?,F(xiàn)代醫(yī)學證明,樹莓花色苷具有抗氧化、抗突變、降低血清及肝臟中脂肪含量等功能,是國內(nèi)現(xiàn)代興起的第3代水果之一[3]。紅豆越橘、野生藍莓同屬杜鵑花科,均含有豐富的生物活性物質(zhì),如多酚、黃酮、花色苷、超氧化物歧化酶以及豐富的VC、VE[4-6]。并具有多種保健功能,能夠抗菌、抗炎、抗氧化、抗衰老、防輻射,對癌癥、心血管疾病、視力問題、糖尿病具有一定的治療效果[7-11]。黑果花楸果實具有非凡的保健作用,果實及其提取物對心臟病、高血壓等心腦血管疾病具有特殊的療效,果實內(nèi)含有治療癌癥和心臟病的特定化合物[12]。五味子果實有增強記憶力及抗氧化作用,延緩神經(jīng)衰老的功效[13-14],有很高的藥用價值,主治津傷口渴、短氣脈虛、內(nèi)熱消渴、心悸失眠,是常用中藥之一[15]。
隨著生活水平的提高,人們對食品的品質(zhì)和功效的要求也有了較大的提高,使得人們不僅滿足于食品的色香味,還要求食品具有其他保健功效,如防輻射功效。現(xiàn)代人經(jīng)常暴露在紫外線和微波輻射條件下,細胞受到大量紫外線輻射,致使該細胞喪失與周圍細胞的溝通力或與周圍細胞共同凋亡[16]。另外,微波爐等家用電器的普遍使用會使人體受到微波輻射而導致慢性損傷。目前國內(nèi)外有關(guān)漿果的研究多集中在其延緩腦神經(jīng)衰老、增強記憶力、消除體內(nèi)炎癥的作用,抗癌作用等方面[17-19],對于漿果抗紫外線、抗微波輻射作用的研究報道很少,陳沙等[20]僅對藍莓和紅豆越橘的抗輻射性能進行過研究,本實驗利用大興安嶺地區(qū)5 種常見的漿果干浸提液對釀酒酵母進行抗紫外線和微波輻射的作用進行研究,以期為研制新的抗輻射保健食品和化妝品提供科學的依據(jù)。
1.1 菌種、材料與試劑
釀酒酵母D15 黑龍江八一農(nóng)墾大學食品學院微生物實驗室保藏。
樹莓(人工種植)、紅豆越橘、野生藍莓、黑果花楸(人工種植)、五味子 大興安嶺超越野生漿果加工有限公司提供。
亞甲基藍、乙醇、生理鹽水 生工生物工程(上海)股份有限公司。
酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(yeast peptone dextrose,YPD):蛋白胨20.0 g、酵母膏10.0 g、葡萄糖20.0 g、蒸餾水1 000 mL,pH 7.0,121 ℃條件下滅菌20 min。
1.2 儀器與設(shè)備
電子天平 上海精科天美貿(mào)易有限公司;FW-80型高速萬能粉碎機 北京市永光明醫(yī)療儀器廠;熱風干燥箱 蘇州瑞威凈化科技有限公司;微波爐 廣東格蘭仕集團有限公司;紫外照射儀 東莞市博世能實業(yè)有限公司;生物顯微鏡 上海巴拓儀器有限公司。
1.3 方法
1.3.1 漿果水浸提液的制備[21]
取適量鮮漿果→稱質(zhì)量→50 ℃條件下干燥48 h→稱質(zhì)量(計算水分含量)→組織破碎→浸泡2 h→3 000 r/min離心20 min→過濾(去渣)→3 000 r/min離心20 min→靜置→取上清液→4 ℃條件下避光保存
1.3.2 酵母菌懸液的制備
釀酒酵母菌種D15→接入YPD培養(yǎng)基活化→計數(shù)→稀釋→4 ℃條件下避光保存
1.3.3 釀酒酵母細胞抗輻射檢測方法[16]
在潔凈的載玻片上先加一滴釀酒酵母菌懸液,再加一滴漿果浸提液覆蓋在上面,利用生理鹽水作空白。將載玻片移入微波爐中或者紫外燈下照射。經(jīng)過一定時間照射以后,加一滴質(zhì)量分數(shù)為0.02%亞甲基藍覆蓋其上,放置5 s,移到生物顯微鏡下觀察,未被亞甲基藍染色的細胞記為活細胞,被亞甲基藍染成藍色的細胞記為死細胞。
多次轉(zhuǎn)換視野,重復3 次,取平均值。計算釀酒酵母細胞的存活率。利用釀酒酵母細胞的存活率來衡量漿果浸提液對釀酒酵母的抗輻射保護能力。細胞存活能力與抗輻射能力成正比。實驗分6 組:覆蓋樹莓果干浸提液輻射組、覆蓋紅豆越橘果干浸提液輻射組、覆蓋野生藍莓果干浸提液輻射組、覆蓋黑果花楸果干浸提液輻射組、覆蓋五味子果干浸提液輻射組、輻射對照組。按照下式計算酵母菌細胞存活率。
1.3.4 漿果浸提液的抗微波作用[16]
稱取0.6 g漿果干(鮮漿果在50 ℃條件下干燥48 h,下同),于10 mL蒸餾水(使?jié){果浸提液質(zhì)量濃度為0.06 g/mL,下同)中浸泡2 h,再于3 000 r/min離心20 min,靜置,取上清液,覆蓋有一滴酵母菌菌懸液的載玻片,于120、380、780 W微波輻射20、30、40 s,重復實驗3 次,再滴加亞甲基藍,靜置5 s,于顯微鏡下觀察,計算酵母菌細胞存活率。
1.3.5 不同輻射距離下漿果浸提液的抗紫外線輻射作用
稱量0.6 g漿果干于10 mL蒸餾水中浸泡2 h,于3 000 r/min離心20 min,靜置,取上清液,其上覆蓋有一滴酵母菌菌懸液的載玻片,在40、48、52 cm距離下用紫外照射儀照射30 min,重復實驗3 次,再滴加亞甲基藍,靜置5 s,于顯微鏡下觀察,計算酵母菌細胞存活率。
1.3.6 不同輻射時間下漿果浸提液的抗紫外線輻射作用
稱取0.6 g漿果干于10 mL蒸餾水中浸泡2 h,于3 000 r/min離心20 min,靜置,取上清液,其上覆蓋一滴有酵母菌菌懸液的載玻片,在52 cm的照射距離下分別照射20、30、40 s,重復實驗3 次,再滴加亞甲基藍,靜置5 s,于顯微鏡下觀察,計算酵母菌細胞存活率。
1.3.7 不同質(zhì)量濃度的漿果浸提液的抗紫外線輻射作用
分別稱取0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4 g漿果干于10 mL蒸餾水中(漿果浸提液質(zhì)量濃度分別為0.04、0.06、0.08、0.10、0.12、0.14 g/mL)浸泡2 h,于3 000 r/min離心20 min,靜置,取其上清液,在其上覆蓋有一滴酵母懸液的載玻片,在50 cm距離下用紫外照射儀照射1 h,重復實驗3 次,再滴加亞甲基藍,靜置5 s,于顯微鏡下觀察,計算酵母菌細胞存活率。
2.1 不同條件下漿果浸提液的抗微波輻射作用
2.1.1 微波輻照120 W時漿果浸提液的抗輻射作用
圖1 微波輻射功率120 W時不同漿果浸提液的抗微波輻射作用Fig.1 Anti-microwave radiation capacity of berry extracts at microwave power of 120 W
由圖1可知,隨著微波處理時間的延長,酵母菌細胞的存活率呈下降趨勢。在微波功率為120 W處理時間為20 s時,黑果花楸、紅豆越橘、五味子、野生藍莓漿果浸提液對酵母菌細胞的保護作用可達到90%以上,樹莓漿果浸提液對酵母菌細胞的保護作用可達到87%,而對照組的酵母菌細胞存活率僅有35%。當處理時間延長至40 s時,黑果花楸、五味子、野生藍莓漿果浸提液的保護作用仍可達到90%以上,紅豆越橘與樹莓漿果浸提液保護作用分別為89%、82%,對照組中酵母菌細胞存活率僅有27%。5 種漿果浸提液在低功率下的抗輻射能力均較強,酵母菌細胞的存活率較高,不同漿果之間差異不大,與對照組相比差異比較顯著。說明在低功率微波輻射條件下,5 種漿果浸提液均有很好的抗微波輻射作用。
陳沙等[20]研究中證明了紅豆越橘和野生藍莓具有抗輻射能力,但未進行方差分析和探討其他漿果的抗輻射能力。由表1可知,樹莓、紅豆越橘、野生藍莓、黑果花楸、五味子漿果浸提液在120 W的微波功率下、處理40 s時抗輻射能力差異極顯著。
表1 微波輻射120 W、40 s時不同漿果浸提液的抗微波輻射方差分析Table1 Analysis of variance for anti-microwave radiation capacity of different berries at the microwave power of 120 W and microwave radiation time of 40 s
2.1.2 微波輻照380 W時漿果浸提液的抗輻射作用
圖2 微波輻射功率380 W時不同漿果浸提液的抗微波輻射作用Fig.2 Anti-microwave radiation capacity of berry extracts at microwave power of 380 W
由圖2可知,微波功率為380 W,處理時間為20 s時,紅豆越橘、五味子、野生藍莓漿果浸提液具有良好的抗微波輻射作用,酵母菌細胞的存活率可達到90%以上,樹莓與黑果花楸漿果浸提液的酵母細胞存活率可達到80%左右,而對照組酵母細胞存活率僅為28%,隨著微波處理時間的延長,酵母菌細胞的存活率有所下降;當處理時間達到40 s時,野生藍莓漿果浸提液仍然表現(xiàn)出較高的保護作用,酵母菌細胞存活率仍高達90%以上,紅豆越橘和五味子漿果浸提液的保護能力也可達到88%左右,樹莓與黑果花楸漿果浸提液抗輻射保護能力略有下降,而對照組酵母菌細胞存活率僅為22%。說明當微波功率達到380 W時,樹莓、黑果花楸漿果浸提液的抗輻射能力相對于其他3 種漿果略低,紅豆越橘、五味子、野生藍莓漿果浸提液對酵母菌具有很好的保護作用。樹莓、黑果花楸漿果浸提液的抗輻射能力較弱的原因可能是人工種植的漿果中鉀、鐵、鋅等元素含量不如野生漿果,對微波的反射作用不大[22-23],而野生藍莓中含有極高的鉀[24],這也可能是其對酵母菌細胞的保護作用較強的一個原因。
對樹莓、紅豆越橘、野生藍莓、黑果花楸、五味子漿果浸提液在微波功率380 W、處理時間40 s條件下的酵母菌細胞存活率進行方差分析,由表2可知,樹莓、紅豆越橘、野生藍莓、黑果花楸、五味子漿果浸提液之間抗微波輻射作用差異顯著。
表2 微波輻射380 W、40 s時不同漿果浸提液的抗微波輻射方差分析Table2 Analysis of variance for anti-microwave radiation capacity of different berries at microwave power of 380 W and microwave radiation time of 400 ss
2.1.3 微波輻照780 W時漿果浸提液的抗輻射作用
圖3 微波輻射功率780 W時不同漿果浸提液的抗微波輻射作用Fig.3 Anti-microwave radiation capacity of berry extracts at microwave power of 780 W
由圖3可知,微波功率780 W時,野生藍莓漿果浸提液對酵母菌細胞的保護變化不大,在不同微波處理時間下,酵母菌細胞存活率均高達90%以上,而其余4 種漿果浸提液保護作用都有明顯下降,當微波處理時間達到40 s時,樹莓漿果浸提液的對酵母菌細胞的保護作用達到48%,紅豆越橘漿果浸提液的對酵母菌細胞的保護作用達到67%,黑果花楸漿果浸提液的酵母菌細胞存活率為56%,五味子漿果浸提液對酵母菌細胞的保護作用降至62%以下,而對照組為0。野生藍莓花色苷含量高達147.759~725.413 mg/100 g[25],野生藍莓之所以有較強的防微波輻射作用可能是野生藍莓汁中高含量的花色苷對紫外線、微波等輻射有強烈的吸收作用;野生藍莓中的花色苷能有效地清除細胞中的活性氧自由基,具有減少DNA斷裂的作用[20]。
分別對樹莓、紅豆越橘、野生藍莓、黑果花楸、五味子漿果浸提液在微波功率780 W、處理時間40 s條件下的酵母菌細胞存活率進行方差分析,由表3可知,樹莓、紅豆越橘、野生藍莓、黑果花楸、五味子漿果浸提液之間抗微波輻射作用呈極顯著差異。同時,對野生藍莓漿果浸提液在微波功率780 W條件下,不同處理時間的結(jié)果進行方差分析,由表4可知,野生藍莓漿果浸提液在不同微波處理時間條件下對酵母菌細胞的保護率呈顯著差異。表明微波處理的時間確實影響野生藍莓對酵母細胞的保護作用,處理時間越長,野生藍莓浸提液的抗輻射能力就越弱。
表3 微波輻射780 W、40 s時不同漿果浸提液抗微波輻射結(jié)果的方差分析Table3 Analysis of variance for anti-microwave radiation capacity of different berries at microwave power of 780 W and radiation time of 40 s
表4 不同輻照時間條件下野生藍莓漿果浸提液抗微波輻射結(jié)果的方差分析Table4 Analysis of variance for anti-microwave radiation capacity of blue berry at different radiation times
2.2 不同條件下漿果浸提液的抗紫外線輻射作用
2.2.1 輻射距離對漿果浸提液抗紫外線輻射保護作用的影響
圖4 不同輻射距離對漿果浸提液抗紫外線輻射保護作用的影響Fig.4 Effect of different radiation distances on the anti-ultraviolet radiation efficiency of berries
由圖4可知,紫外線輻射30 min,漿果浸提液質(zhì)量濃度為0.06 g/mL時,紅豆越橘和野生藍莓漿果浸提液均具有良好的防紫外線能力,而樹莓、黑果花楸、五味子漿果浸提液的抗輻射能力相對較弱。當輻射距離為52 cm時,野生藍莓和紅豆越橘漿果浸提液的抗輻射能力基本持平,為87%;隨著輻射距離逐漸減小,5 種漿果浸提液對酵母細胞抗紫外線保護能力逐漸減弱,抗紫外能力呈顯著差異。當距離縮短至40 cm時,野生藍莓與紅豆越橘漿果浸提液的抗輻射能力分別為70.6%、61.7%,樹莓、黑果花楸、五味子漿果浸提液的抗輻射能力分別為6.7%、12.4%、24.1%,而對照組酵母菌細胞存活率基本為0,實驗組間差異極顯著。這表明野生藍莓與紅豆越橘是很好的抗紫外線輻射食品資源。
對5 種不同漿果,在紫外線輻射距離為40 cm條件下的酵母菌細胞存活率進行方差分析,結(jié)果如表5所示,5 種漿果浸提液之間抗紫外線能力差異極顯著。
表5 在紫外線輻射距離40 cm時不同漿果的抗紫外線保護效果的方差分析Table5 Analysis of variance for anti-microwave radiation capacity of different berries at ultraviolet radiation distance of 40 cm
2.2.2 輻射時間對漿果浸提液抗紫外線輻射保護作用的影響
圖5 不同輻射時間對漿果浸提液抗紫外線輻射保護作用的影響Fig.5 Effect of different radiation times on the anti-ultraviolet radiation efficiency of berries
由圖5可知,漿果浸提液質(zhì)量濃度為0.06 g/mL,輻射距離為52 cm時,隨著輻射時間的逐漸延長,5 種漿果浸提液對酵母細胞的抗紫外線輻射保護能力逐漸減弱,但紅豆越橘和野生藍莓漿果浸提液始終都具有良好穩(wěn)定的防紫外線能力,而樹莓、黑果花楸、五味子漿果浸提液的抗輻射能力相對較弱。當輻射時間20 min時,紅豆越橘、野生藍莓漿果浸提液中酵母菌細胞存活率可達90%左右,而黑果花楸、樹莓和五味子漿果浸提液抗紫外線輻射能力相對較弱。當輻射時間超過30 min后,紅豆越橘、五味子漿果浸提液的抗紫外線輻射能力變化較大,而野生藍莓、樹莓漿果浸提液的保護能力變化趨于平穩(wěn);當紫外線照射時間達到40 min時,漿果浸提液對酵母菌細胞抗輻射保護能力的順序為:野生藍莓>紅豆越橘>黑果花楸>五味子>樹莓,此時對照組酵母菌細胞的存活率基本為0,與實驗組呈極顯著差異。
對5 種不同漿果在紫外線照射40 min條件下的酵母菌細胞存活率進行方差分析,結(jié)果如表6所示,5 種漿果浸提液之間抗紫外線能力呈極顯著差異。
表6 在紫外線輻射40 min時不同漿果的抗紫外線保護作用的方差分析Table6 Analysis of variance for anti-ultraviolet radiation capacity of different berries at ultraviolet radiation time of 40 min
2.2.3 漿果浸提液質(zhì)量濃度對抗紫外線輻射保護作用的影響
圖6 漿果浸提液質(zhì)量濃度對漿果浸提液抗紫外線保護作用的影響Fig.6 Effect of berry extract concentration on anti-ultraviolet radiation capacity
由圖6可知,當5 種漿果浸提液質(zhì)量濃度為0.04 g/mL時,野生藍莓和紅豆越橘漿果浸提液的抗紫外線輻射能力較好,酵母菌細胞存活率可達到80%以上,樹莓、黑果花楸、五味子漿果浸提液對酵母菌細胞保護作用較弱,酵母菌細胞存活率低于20%。隨著漿果浸提液質(zhì)量濃度的增大,對酵母菌細胞保護率也相應增大。在漿果浸提液質(zhì)量濃度小于0.06 g/mL時,5 種漿果浸提液對酵母菌細胞抗輻射保護作用的順序為:野生藍莓>紅豆越橘>五味子>黑果花楸>樹莓。當漿果浸提液質(zhì)量濃度大于0.10 g/mL時,黑果花楸的抗紫外線輻射能力明顯增強,當漿果浸提液質(zhì)量濃度大于0.12 g/mL時,黑果花楸漿果浸提液抗紫外線輻射保護效果比五味子漿果浸提液更好,但仍然不如野生藍莓和紅豆越橘漿果浸提液。當漿果浸提液質(zhì)量濃度為0.14 g/mL時,野生藍莓漿果浸提液抗紫外線輻射保護能力達96%;樹莓漿果浸提液抗紫外線輻射保護能力最弱,僅有43.74%。野生藍莓的抗紫外線輻射能力較強,但是野生藍莓中的花青素含量高,會使皮膚染色,這不利于抗紫外線化妝產(chǎn)品的開發(fā),同時,野生藍莓中的抗紫外線成分有待進一步的研究。因此,吃新鮮的野生藍莓或飲用高質(zhì)量濃度的野生藍莓果汁應該具有很好的防輻射效果。
樹莓、紅豆越橘、野生藍莓、黑果花楸、五味子5 種漿果均具有較好的抗紫外線和微波輻射效果,尤其紅豆越橘和野生藍莓具有很強的抗微波輻射和紫外線的能力,可作為抗輻射食品開發(fā)的資源。5 種漿果抗輻射能力的順序為:野生藍莓>紅豆越橘>五味子>黑果花楸>樹莓。隨著微波輻射功率的增加,野生藍莓抗微波輻射的保護作用變化不大,而樹莓、黑果花楸、五味子、紅豆越橘的抗輻射保護作用受微波輻射強度影響較大,呈快速遞減趨勢。隨著漿果浸提液質(zhì)量濃度的增大,樹莓、黑果花楸、紅豆越橘、五味子、野生藍莓的抗紫外線輻射保護能力增強,其中野生藍莓的抗紫外線輻射能力最好,但其抗輻射成分尚不明確,需待進一步研究。鑒于上述5 種漿果,尤其野生藍莓具有抗紫外線和抗微波輻射作用,而現(xiàn)代生活又經(jīng)常暴露于微波和紫外線環(huán)境下,尤其是孕婦,建議應常食用紅豆越橘和野生藍莓漿果,從而減弱紫外線、微波、電腦、手機、消毒柜臭氧等對人體的輻射性損傷。
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Anti-Ultraviolet and Anti-Microwave Radiation Effects of Five Common Wild Berry Varieties in Saccharomyces cerevisiae
YANG Hua, REN Yue, PANG Weiqiao, GUO Dejun*
(School of Food Science, Heilongjiang Bayi Agricultural University, Daqing 163319, China)
The anti-radiation effects of water extracts of five wild berries from the Daxinganling region of north China in the yeast Saccharomyces cerevisiae when exposed to ultraviolet (UV) or microwave were determined through methylene blue staining. The results showed that the anti-UV effect of berries on Saccharomyces cerevisiae became strong with its increasing concentration, increasing radiation distanc e and decreasing radiation time. The order of anti-UV and antimicrowave radiation effects of five berry varieties was blueberry > Vaccinium vitis-idaea L.> Schisandra chinensis > Aronia melanocarpa > raspberry. The anti-microwave efficiency of all five berry varieties to 20 s microwave radiation at 120 W was higher than 90%. When the microwave power was 380 W and the microwave treatment time was 20 s, the anti-microwave efficiency of wild blueberry, Vaccinium vitis-idaea L. and Schisandra chinensis was approximately 90%, but the antimicrowave efficiency of other berries was weaker. When the microwave radiation was carried out for 40 s at 780 W, the antimicrowave capacity of blueberry was still 84%; however, the anti-microwave capacity of other berries significantly declined. It is concluded that the five berry varieties grown in the Daxinganling region have anti-ultraviolet and anti-microwave radiation capacity, of which blueberry provides the strongest protection from radiation.
wild berries; anti-ultraviolet radiation; anti-microwave radiation; properties
10.7506/spkx1002-6630-201603012
TS255.1
A
1002-6630(2016)03-0060-06
楊華, 任悅, 龐惟俏, 等. 5 種常見野生漿果的抗紫外線和抗微波輻射性能[J]. 食品科學, 2016, 37(3): 60-65. DOI:10.7506/spkx1002-6630-201603012. http://www.spkx.net.cn
YANG Hua, REN Yue, PANG Weiqiao, et al. Anti-ultraviolet and anti-microwave radiation effects of five common wild berry varieties in Saccharomyces cerevisiae[J]. Food Science, 2016, 37(3): 60-65. (in Chinese with English abstract) DOI:10.7506/spkx1002-6630-201603012. http://www.spkx.net.cn
2015-05-28
黑龍江八一農(nóng)墾大學研究生創(chuàng)新科研項目(YJSCX2014-Y45);黑龍江農(nóng)墾總局技術(shù)開發(fā)課題(HNK13KF-15-01)
楊華(1990—),女,碩士研究生,研究方向為食品微生物。E-mail:1157836297@qq.com
*通信作者:郭德軍(1968—),男,教授,博士,研究方向為食品微生物。E-mail:187013609@qq.com