劉愛平

顱腦外傷患者腦脊液及血液中白細(xì)胞介素-6的表達(dá)分析

劉愛平

目的 探討顱腦外傷患者腦脊液和血液中白細(xì)胞介素-6（IL-6）的表達(dá)情況。方法 選取2015年1—12月遼寧省大連市旅順口區(qū)中醫(yī)院收治的36例顱腦損傷患者作為研究對象，根據(jù)格拉斯哥昏迷評分法（GCS）分為A組（中輕型顱腦損傷）GCS≤8分16例，B組（重型顱腦損傷）GCS＞8分20例。采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測所有患者腦脊液和血液中IL-6水平。結(jié)果 兩組患者腦脊液中IL-6水平均明顯高于血清組，且B組患者腦脊液中IL-6水平明顯高于A組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（均P＜0.05）；在損傷發(fā)生第1天內(nèi)，兩組患者腦脊液和血液中的IL-6水平便開始升高，在72 h達(dá)最高濃度，1周左右開始下降，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（均P＜0.05）。結(jié)論 在臨床上，可以通過動態(tài)監(jiān)測腦脊液中IL-6水平，來了解顱腦損傷的嚴(yán)重程度，以此作為參考來對病情進(jìn)行判斷，以便更加科學(xué)、合理的實施治療，改善患者預(yù)后。

顱腦損傷；腦脊液；血清；白細(xì)胞介素-6

顱腦外傷是一種常見的神經(jīng)外科疾病，可對患者生命安全造成嚴(yán)重威脅，致殘率和致死率均較高，這主要是因為在顱腦外傷出現(xiàn)后，易出現(xiàn)繼發(fā)性腦損傷，其病理過程非常復(fù)雜，已成為目前臨床研究的難題。曾有研究［1］指出，急性顱腦損傷發(fā)病后，將會導(dǎo)致腦出血、腦缺血，在損傷的影響下，一些炎性介質(zhì)會被釋放，細(xì)胞因子會參與至炎性反應(yīng)中，最后導(dǎo)致繼發(fā)性損傷出現(xiàn)。目前，有不少針對顱腦外傷的研究［2-3］均將重點集中于白細(xì)胞介素-6（IL-6）的表達(dá)，認(rèn)為顱腦外傷的生理和病理發(fā)展均與IL-6存在直接關(guān)系，通過檢測IL-6水平可以為顱腦外傷的診斷和治療提供一定指導(dǎo)，其對提高治療效果、改善患者預(yù)后具有重要意義。顱腦損傷后中樞神經(jīng)會產(chǎn)生大量細(xì)胞因子，IL-6作為一種細(xì)胞因子，具有較為廣泛的免疫調(diào)節(jié)能力，可明顯影響人的集體防御能力，在感染、炎癥、損傷等方面起到積極作用。在顱腦外傷中，其有助于損傷修復(fù)，能夠促進(jìn)神經(jīng)元生存、分化，刺激神經(jīng)營養(yǎng)因子生成，促進(jìn)星形膠質(zhì)細(xì)胞增生。本研究就顱腦外傷患者腦脊液和血液中IL-6的表達(dá)情況進(jìn)行分析，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2015年1—12月我院收治的36例顱腦損傷患者作為研究對象，其中男28例，女8例，平均年齡（39.3±2.6）歲，根據(jù)格拉斯哥昏迷評分法（GCS）分為A組（中輕型顱腦損傷）GCS≤8分16例，B組（重型顱腦損傷）GCS＞8分20例。所有患者均符合本院醫(yī)學(xué)倫理委員會相關(guān)要求，均簽署了知情同意書。兩組患者一般資料比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2方法

1.2.1儀器 低速離心機(jī)LD5-1OB（北京醫(yī)用離心機(jī)廠）；微量移液器SOCOREX（常州東譜科學(xué)儀器有限公司）；洗板機(jī)TECAN COLUMBUS PLUS（天津開元生物工程儀器有限公司）；電熱恒溫水溫箱HW1（深圳杰特電子有限公司）；酶標(biāo)儀TECAN SUNRISE（瑞士TECAN集團(tuán)公司）。

1.2.2標(biāo)本采集 采集所有患者入院后8 h、24 h、48 h、72 h、1周腦脊液約2 ml，同時采集靜脈血2 ml，置試管混勻，4 ℃下以每分鐘3000 r，離心10 min，離心半徑為10 cm，分離血清，-40 ℃保存待測。

1.2.3檢測方法 采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測患者IL-6水平，ELISA試劑盒（美國Biosource公司），具體過程：設(shè)標(biāo)準(zhǔn)孔8孔，每孔中加入樣品稀釋液100 μl，第1孔加標(biāo)準(zhǔn)品100 μl，混勻后加樣器吸出100 μl移至第2孔。如此反復(fù)對倍稀釋至第7孔，最后，從第7孔中吸出100 μl棄取，使之體積為100 μl。第8孔為空白對照。待測品孔每孔各加入待測樣品100 μl；將反應(yīng)板充分混勻后置于37 ℃水浴中120 min；用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4～6次，向濾紙上印干；每孔加第1抗體工作液50 μl；將反應(yīng)板充分混勻后置37 ℃水浴中60 min；洗板方法同前；每孔加酶標(biāo)抗體工作液100 μl；將反應(yīng)板置于37 ℃水浴中60 min；洗板方法同前；每孔加入底物工作液100 μl，置37 ℃暗處反應(yīng)5～10 min；每孔加入1滴終止液混勻；在492 nm處測吸光值。

1.3統(tǒng)計學(xué)分析 采用SPSS 11.5統(tǒng)計軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計量資料以±s表示，組間比較采用t檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1腦脊液及血清IL-6水平比較 兩組患者腦脊液中IL-6水平均明顯高于血清組，且B組患者腦脊液中IL-6水平明顯高于A組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（均P＜0.05）；兩組患者血清中IL-6水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。見表1。

表1　兩組患者腦脊液及血清IL-6水平比較（pg/ml±s）

表1　兩組患者腦脊液及血清IL-6水平比較（pg/ml±s）

注：與血清水平比較，*P＜0.05；與A組比較，#P＜0.05

組別 例數(shù) 腦脊液IL-6 血清IL-6 A組 16 386±125*90±64 B組 20 694±195*#94±74

2.2腦脊液及血清中IL-6動態(tài)變化比較 在損傷發(fā)生第1天內(nèi)，兩組患者腦脊液和血液中的IL-6水平便開始升高，在72 h達(dá)最高濃度，1周左右開始下降，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（均P＜0.05），見表2。

表2　兩組患者腦脊液及血清中IL-6動態(tài)變化比較（pg/ml±s）

表2　兩組患者腦脊液及血清中IL-6動態(tài)變化比較（pg/ml±s）

注：與A組比較，*P＜0.05

組別 例數(shù) 8 h 24 h 48 h 72 h 1周腦脊液IL-6 A組 16 386±125 406±117 583±136 670±110510±115 B組 20 694±195*724±183*826±148*964±105*818±117*組別 例數(shù) 8 h 24 h 48 h 72 h 1周血清IL-6 A組 16 90±64 121±51 156±62 187±7391±51 B組 20 94±74 123±62 170±72 183±5092±63

3 討論

隨著社會生活環(huán)境的改變，顱腦外傷已經(jīng)成為了一種高發(fā)疾病，不論是車禍、跌倒、鈍物打擊等，均有可能造成顱腦外傷。而顱腦外傷與IL-6密切相關(guān)，通過對IL-6的檢測可以為顱腦外傷的診斷、治療提供一定指導(dǎo)。

IL-6與人體中各種細(xì)胞均存在關(guān)系，其與免疫炎性反應(yīng)具有直接聯(lián)系。在人體急性炎性反應(yīng)早期，IL-6細(xì)胞因子水平便會顯著升高，可以作為一種炎性反應(yīng)觀察指標(biāo)，它比C反應(yīng)蛋白的靈敏性更高［4］。正常情況下腦組織IL-6的表達(dá)量較低，血清中通常不能檢測到IL-6［5］，但腦組織創(chuàng)傷后，IL-6的表達(dá)量會明顯增加［6］。本研究結(jié)果顯示，腦脊液和血清中IL-6水平均有所升高，可能與受損后局部腦組織產(chǎn)生更多IL-6有關(guān)，但也有可能與全身應(yīng)激反應(yīng)相關(guān)，因為人體全身應(yīng)激反應(yīng)也會導(dǎo)致IL-6產(chǎn)生［7］。此外，顱腦損傷患者腦脊液中IL-6增高水平明顯高于血清中IL-6的增高水平。說明血清與腦脊液在損傷后的表達(dá)水平不平行［8］，與神經(jīng)損傷以及局部腦組織繼發(fā)炎性反應(yīng)有直接關(guān)系［9］。

本研究中，B組患者腦脊液中IL-6水平明顯高于A組。提示IL-6與顱腦損傷程度呈正相關(guān)，即IL-6越高，損傷情況越嚴(yán)重。另外，在損傷發(fā)生第1天內(nèi)，兩組患者腦脊液和血液中的IL-6水平便開始升高，在72 h達(dá)最高濃度，1周左右開始下降，與張永和等［10］的研究結(jié)論相似。

綜上所述，在顱腦外傷的病理和生理變化過程中，IL-6始終參與其中，所以在臨床上，可以通過對腦脊液IL-6水平的動態(tài)監(jiān)測，來了解顱腦損傷的程度和炎性反應(yīng)程度，以此作為參考來對病情進(jìn)行判斷，以便更加科學(xué)、合理的實施治療，改善患者預(yù)后。

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R651.1+5

A 【DOI】10.12010/j.issn.1673-5846.2016.10.053

遼寧省大連市旅順口區(qū)中醫(yī)院，遼寧大連 116041