文敏，肖瑞飛，劉金玲，王璐，高文，左亞杰

（1.湖南中醫(yī)藥大學(xué)，湖南長沙410208；2.湖南中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院，湖南長沙410007；3.長沙和陽醫(yī)療器械貿(mào)易有限公司，湖南長沙410013）

小兒健脾溫通貼的提取工藝研究

文敏1，肖瑞飛2，劉金玲3，王璐2，高文3，左亞杰2

（1.湖南中醫(yī)藥大學(xué)，湖南長沙410208；2.湖南中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院，湖南長沙410007；3.長沙和陽醫(yī)療器械貿(mào)易有限公司，湖南長沙410013）

目的優(yōu)化小兒健脾溫通貼的提取工藝。方法采用L9（34）正交試驗設(shè)計篩選揮發(fā)油最佳提取工藝條件，采用單因素分析優(yōu)選浸膏最佳提取次數(shù)。結(jié)果揮發(fā)油最優(yōu)提取工藝為浸泡30 min，加6倍量水，提取7 h，浸膏最優(yōu)提取次數(shù)為2次。結(jié)論該提取工藝方法簡便、可行，適于工業(yè)化生產(chǎn)。

小兒健脾溫通貼；揮發(fā)油；正交設(shè)計；提取工藝

小兒厭食癥和小兒功能性消化不良是兒科常見病，屬中醫(yī)“厭食”范疇，以1～6歲兒童多見，發(fā)病率較高，約占兒童疾病的40%，是兒科常見?。?］。小兒健脾溫通貼來源于湖南中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院兒科外用協(xié)定方，由蒼術(shù)Atractylodi Rhizoma、白術(shù)Atractylodis Macrocephalae Rhizoma、砂仁Amomi Fructus、藿香Pogostemonis Herba、佩蘭Eupatorii Herba、白豆蔻Amomi Fructus Rotundus、艾葉Artemisiae Argyi Folium、小茴香Foeniculi Fructus、干姜Zingiberis Rhizoma等藥組方，具有消食、導(dǎo)滯、開胃、健脾的功效，用于6個月至6歲的小兒厭食癥和功能性消化不良，療效確切，且安全。凝膠貼劑［2-4］是指原料藥物與適宜的親水性基質(zhì)混勻后涂布于背襯材料上制成的貼膏劑，具有載藥量大、生物利用度高、保濕性強、透氣性好、耐汗性強、對皮膚刺激性小、貼敷舒適、不污染衣物、貼敷方便、依從性好等特點［2-4］。本試驗中擬研究小兒健脾溫通方制備成凝膠貼劑的最佳提取工藝，為該產(chǎn)品的開發(fā)提供依據(jù)。

1　儀器與試藥

1.1儀器

SB12003型電子天平（上海精密科學(xué)儀器有限公司）；DK-98-Ⅱ型恒溫水浴鍋（天津市泰斯特儀器有限公司）；3 000 mL溫控型電熱套（山東鄄城華魯電熱儀器有限公司）。

1.2試藥

蒼術(shù)、白術(shù)、砂仁、藿香、佩蘭、白豆蔻、艾葉、小茴香、干姜飲片均購于安徽盛海棠中藥飲片有限公司，批號分別為20140513，20140506，20140420，20140303，20140408，20140303，20140320，20140410，20140418，經(jīng)湖南中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院藥檢室張裕民教授鑒定為正品。

2　方法與結(jié)果

2.1揮發(fā)油提取工藝考察

2.1.1因素水平設(shè)計

本方中藥物健脾祛濕、溫通化積的主要有效成分為揮發(fā)油。根據(jù)相關(guān)資料，揮發(fā)油提取工藝的主要影響因素為浸泡時間（因素A）、加水量（因素B）、提取時間（因素C）［5-8］。為減少試驗次數(shù)，按表1用L9（34）正交試驗表進行試驗。

表1　正交試驗因素水平表

2.1.2正交試驗

按照臨床處方比稱取10倍量藥材，按揮發(fā)油測定甲法［2］203-204，以得油率為考察指標(biāo)，按正交試驗設(shè)計分別計算得率，并進行方差分析。結(jié)果見表2和表3。

表2　L9（34）正交試驗結(jié)果

2.1.3最優(yōu)工藝確定

由正交試驗結(jié)果可見，各因素的主次順序為C＞B＞A，因素C對小兒健脾溫通貼揮發(fā)油提取量有顯著性差異（P＜0.05），因素A和因素B對其提取量無顯著性差異（P＞0.05），從時間、經(jīng)濟、能源等方面綜合考慮，確定共水蒸餾法提取小兒健脾溫通貼揮發(fā)油的最佳工藝為A1B1C3，即浸泡30 min，加6倍量水，蒸餾7 h。

表3　正交試驗方差分析結(jié)果

2.1.4驗證試驗

取小兒健脾溫通貼3份，每份10倍量，按優(yōu)選工藝進行試驗。3次試驗揮發(fā)油得量分別為5.00，4.98，4.98 mL，平均4.99 mL。試驗結(jié)果表明，本工藝重復(fù)性好，合理可行。

2.2殘渣提取次數(shù)考察

取最佳工藝提取揮發(fā)油后的飲片殘渣3份，補充原藥材2倍量水，照熱浸法［2］202，以浸膏得率為考察指標(biāo)，分別提取1，2，3次，每次1 h，結(jié)果見表4?？梢?，當(dāng)提取次數(shù)為2次時，浸膏得率接近90%，從節(jié)約能源和時間的角度考慮，將提取次數(shù)定為2次。

表4　提取次數(shù)考察結(jié)果

3　討論

小兒健脾溫通貼處方中藥物的主要有效成分為揮發(fā)油，其次為非揮發(fā)性成分。揮發(fā)油既是有效成分，也是透皮促進吸收劑的一種［9］，其促進藥物透皮吸收的機理可能是因為其性味芳香，行散走竄，透達經(jīng)絡(luò)，開宣毛竅。本方中藥物的非揮發(fā)性成分有促進胃腸蠕動、增強機體免疫力的作用［10-11］。故如何最大限度地提取處方中的揮發(fā)油，同時保留有效的非揮發(fā)性成分是制劑提取工藝的關(guān)鍵。本研究中以方中君藥蒼術(shù)、白術(shù)和使藥干姜為例，探討揮發(fā)性成分和非揮發(fā)性成分的藥理作用，為產(chǎn)品的提取工藝及開發(fā)研究提供科學(xué)依據(jù)。

蒼術(shù)為菊科植物茅蒼術(shù)或北蒼術(shù)的干燥根莖，主要有效成分為揮發(fā)油，臨床主要用于治療脘腹脹滿、泄瀉、食欲不振等［12］。趙愛梅［13］的研究發(fā)現(xiàn)，蒼術(shù)中的揮發(fā)油具有祛風(fēng)健胃作用。歐陽臻等［14］的研究表明，蒼術(shù)揮發(fā)油對光線敏感，對其中有些成分影響較大，如蒼術(shù)素。2015年版《中國藥典（一部）》［15］規(guī)定，蒼術(shù)素的含量測定應(yīng)避光操作，說明其對光線敏感，故提取或保存蒼術(shù)揮發(fā)油時是否應(yīng)避光保存，從制劑有效性來說值得研究。白術(shù)為菊科蒼術(shù)屬植物白術(shù)的根莖，主要含揮發(fā)油、白術(shù)內(nèi)酯類、多糖等成分，具有健脾益氣、燥濕利水的功效，臨床主要用于補脾氣，治療脾虛食少、腹脹泄瀉等證［9］，李偉等［16］的研究表明，白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ有較強的增強唾液淀粉酶活性、促進腸管吸收、調(diào)節(jié)腸道功能的作用，與白術(shù)健脾運脾的作用相符。干姜為姜科植物姜的干燥根莖，具有溫中散寒的功效，臨床主要用于治療腸炎、腹瀉等疾?。?，8］。其所含芳香性揮發(fā)油對消化道有輕度刺激作用，可使腸節(jié)律、張力及蠕動增強，從而促進胃腸的消化機能。

蒼術(shù)中含有的非揮發(fā)性成分多糖具有腸免疫系統(tǒng)調(diào)節(jié)活性［14，17］，白術(shù)中非揮發(fā)性成分［18-19］也有調(diào)節(jié)免疫功能的作用。焦艷等［20］的研究發(fā)現(xiàn)，小鼠給予白術(shù)多糖（PAM）灌胃可增強其Kupffer細胞對中性紅的吞噬功能，且適量的白術(shù)多糖能激活Kupffer細胞的免疫功能，增強機體抵抗力。白術(shù)多糖可促進小鼠血清中細胞因子如白細胞介素4（IL-4）的表達，緩解免疫應(yīng)激，提高機體免疫功能［21］。朱南山等［22］的研究發(fā)現(xiàn)，白術(shù)多糖能促進干擾素-γ（IFN-γ）的分泌，說明白術(shù)多糖可通過細胞因子調(diào)節(jié)機體的免疫功能。干姜也具有增強免疫功能等作用［8］，但相關(guān)物質(zhì)基礎(chǔ)還需進一步研究。

本研究結(jié)果顯示，本試驗提取工藝方法簡便、可行，適于工業(yè)化生產(chǎn)，為該產(chǎn)品的開發(fā)研究提供了科學(xué)依據(jù)。但針對主要化學(xué)成分的藥理活性作用的研究還不夠深入，有關(guān)藥理活性的作用部位和物質(zhì)基礎(chǔ)不甚明確，如何將本方中揮發(fā)性和非揮發(fā)性成分去粗求精值得更加深入地研究，以為本方的開發(fā)和良好的臨床療效奠定堅實的基礎(chǔ)。

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Extraction Process of Xiaoer Jianpiwentong Plaster

Wen Min1，Xiao Ruifei2，Liu Jinling3，Wang Lu2，Gao Wen3，Zuo Yajie2
（1.Hunan University of Chinese Medicine，Changsha，Hunan，China 410208；2.The First Hospital of Hunan University of Chinese Medicine，Changsha，Hunan，China 410007；3.Changsha Heyang Medical Trading Company Limited，Changsha，Hunan，China 410013）

ObjectiveTo study the extraction process of Xiaoer Jianpiwentong Plaster.M ethodsThe optimum extraction condition of the volatile oil was screened byL9（34）orthogonal design；the optimum extraction times was optimized by univariate analysis.ResultsThe optimal extraction of volatile oil was as follows：soaking for 30 min，adding 6 times of water，extracting for 7 h；optimum extraction for 2 times.ConclusionThe extraction process is simple，feasible，suitable for industrial production.

Xiaoer Jianpiwentong Plaster；volatile oil；orthogonal design；extraction process

湖南省科技計劃重點項目，項目編號：2013SK2026；湖南省長沙市科技計劃重點項目，項目編號：k1307164-31。

R284.1；R286；TQ461

A

1006-4931（2016）12-0022-03

文敏，女，碩士研究生，研究方向為中藥制劑工藝及質(zhì)量標(biāo)準，（電子信箱）542672830@ qq.com；左亞杰，男，主任藥師，教授，研究方向為中藥制劑及新藥開發(fā)，本文通訊作者，（電子信箱）yajiezuo@ 163.com。

（2016-01-06；

2016-02-19）