汪 洋　孔祥華　王士榮　曹振山　王 敏

（山東省動(dòng)物疫病預(yù)防與控制中心　山東 濟(jì)南250022）

濟(jì)南市部分規(guī)?；i場(chǎng)豬瘟抗體監(jiān)測(cè)結(jié)果與分析

汪 洋孔祥華王士榮曹振山王 敏

（山東省動(dòng)物疫病預(yù)防與控制中心山東 濟(jì)南250022）

為了解濟(jì)南市豬瘟免疫效果，本研究抽檢了濟(jì)南市的12個(gè)規(guī)模化豬場(chǎng)的血清樣品370份，采用ELISA方法對(duì)其進(jìn)行豬瘟抗體檢測(cè)，其中283份免疫合格，免疫合格率為74.49%，檢測(cè)結(jié)果表明濟(jì)南市規(guī)?；i場(chǎng)豬瘟免疫效果良好，可以起到免疫預(yù)防的作用。

豬瘟（Classical swine fever， CSF）是一種急性、熱性高度接觸性傳染病，主要危害豬和野豬，主要引起高燒、微血管變性、全身出血、壞死、梗塞［1］；病原為豬瘟病毒（Classical swine fever virus， CSFV），死亡率高，給養(yǎng)豬業(yè)造成極大的經(jīng)濟(jì)損失［2］，是我國(guó)影響?zhàn)B豬業(yè)健康的重大動(dòng)物疫病之一，農(nóng)業(yè)部列為一類動(dòng)物疫病，世界動(dòng)物衛(wèi)生組織（OIE）將其確定為A類傳染病，我國(guó)采取強(qiáng)制免疫的措施預(yù)防該病。（1）豬瘟最早的記載是1830年在美國(guó)的俄亥俄州，但1822年的法國(guó)出現(xiàn)過(guò)類似豬瘟的報(bào)道，直到1903年才確定了豬瘟的病原體是一種病毒［3］。我國(guó)于1935年的調(diào)查中有該病的發(fā)生。豬瘟感染后主要引起母豬流產(chǎn)、死胎、新生仔豬死亡以及其他疫苗的免疫失敗。（2）豬通過(guò)口鼻途徑感染病毒，可以引起嚴(yán)重的白細(xì)胞減少好免疫抑制，造成廣泛的血栓和上皮損傷，表現(xiàn)為器官嚴(yán)重的出血、淤血，根據(jù)病毒毒力的不同以及被感染豬年齡、品種的不同，疫病可變現(xiàn)為溫和性豬瘟和典型豬瘟等多種形式，豬感染病毒后表現(xiàn)為高熱、免疫力低下、免疫抑制、繼發(fā)感染其他病原體，因而造成高死亡率或或混合感染的發(fā)生，病毒可以通過(guò)母豬胎盤或公豬的精液中造成垂直感染，而引起仔豬的流產(chǎn)、死胎等。（3）豬瘟病毒是黃病毒科、瘟病毒屬成員之一，與牛病毒性腹瀉、綿羊邊界病毒同屬，抗原之間存在交叉保護(hù)作用［4］。豬瘟病毒主要有三個(gè)基因群，其中基因1群和基因2群有3個(gè)亞群，基因3群有4個(gè)基因亞群，分別為1.1、1.2、1.3、2.1、2.2、2.3、3.1、3.2、3.3、3.4［4］。我國(guó)豬瘟主要流行毒株多為2個(gè)基因群，4個(gè)基因亞群，即2.1、2.2、2.3和1.1基因亞群，而基因型2是我國(guó)豬瘟的優(yōu)勢(shì)基因群，2.1、2.2是我國(guó)主要流行的毒株［5］。豬瘟病毒是單股正鏈RNA病毒，長(zhǎng)度約12.3kb，病毒粒子呈球形，直徑約40-50nm，外層為脂蛋白的囊膜，內(nèi)部為20面體對(duì)稱的核衣殼。豬瘟病毒對(duì)環(huán)境的抵抗力不強(qiáng)，不耐熱，56℃60min 即可滅活，60℃30min即可使病毒失去傳染性，乙醚、氯仿等脂溶劑可很快使病毒滅活，豬瘟病毒粒子在-70℃可存活數(shù)年而不喪失其感染性，在凍肉中可存活2個(gè)月以上。豬瘟病毒由5'-非編碼區(qū)、一個(gè)開(kāi)放閱讀框和3'-非編碼區(qū)構(gòu)成，編碼的蛋白依次為Npro、C、Erns、E1、E2、P7、NS2-3、NS4A、NS4B、NS5A和NS5B編碼區(qū)，除C、Erns、E1、E2為結(jié)構(gòu)蛋白外，其余均為非結(jié)構(gòu)蛋白［6］。（4）豬瘟的診斷技術(shù)包括病原學(xué)診斷和血清學(xué)診斷，病原學(xué)診斷包括病毒分離、熒光抗體檢測(cè)、免疫過(guò)氧化物酶單層試驗(yàn)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、以及聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)等；血清學(xué)檢測(cè)方法包括中和試驗(yàn)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)等。1956年我國(guó)由中國(guó)獸藥監(jiān)察所方世杰等自主研發(fā)豬瘟兔化弱毒疫苗（C株、HCLV），因其具有免疫力強(qiáng)，保護(hù)率高而且持久，遺傳穩(wěn)定，無(wú)殘余毒力等優(yōu)點(diǎn)，成為國(guó)際上公認(rèn)的免疫效果最好的豬瘟弱毒疫苗，國(guó)際上很多國(guó)家采用該疫苗進(jìn)行了豬瘟的凈化，但在我國(guó)，豬瘟仍是養(yǎng)豬業(yè)面臨的重大為題，主要表現(xiàn)為：流行呈散發(fā)，發(fā)病年齡偏小，發(fā)病表現(xiàn)溫和、持續(xù)性感染，垂直傳播嚴(yán)重，免疫抑制以及混合感染嚴(yán)重病情復(fù)雜，嚴(yán)重限制了我國(guó)養(yǎng)豬業(yè)的健康發(fā)展，造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。

1　材料和方法：

1.1材料

1.1.1試劑豬瘟抗體ELISA檢測(cè)試劑盒，由IDEXX提供。1.1.2血清樣品2015年1-12月份抽檢濟(jì)南市12個(gè)規(guī)?；i場(chǎng)豬瘟疫苗免疫的血清樣品370份。

1.1.3主要儀器設(shè)備酶標(biāo)儀（美國(guó)thermo MK3），洗板機(jī)

（405Touch微孔板洗板機(jī)）、移液器（法國(guó)吉爾森）。

1.2檢測(cè)方法

按照操作說(shuō)明書進(jìn)行，阻斷率≥40%判定為免疫合格。

2　結(jié)果

2.1豬瘟抗體檢測(cè)結(jié)果

2.1.1不同豬場(chǎng)豬瘟免疫抗體檢測(cè)結(jié)果從抽檢的12個(gè)養(yǎng)殖場(chǎng)的監(jiān)測(cè)結(jié)果來(lái)看，采集的12個(gè)豬場(chǎng)中，豬場(chǎng)的免疫效果參差不齊，群體免疫合格率從33.33%到100%不等，其中8個(gè)豬場(chǎng)的免疫抗體合格率在70%以上（農(nóng)業(yè)部群體免疫合格標(biāo)準(zhǔn)），12個(gè)豬場(chǎng)共采集了370份血清樣品，其中283份免疫合格，免疫合格率為74.49%。

2.1.2不同類型疫苗豬瘟免疫效果抽檢的12個(gè)養(yǎng)殖場(chǎng)中，4個(gè)豬場(chǎng)采用的豬瘟脾淋苗，8個(gè)豬場(chǎng)采用的豬瘟細(xì)胞苗，從檢測(cè)結(jié)果來(lái)看，兩種疫苗的抗體滴度不同，存在著一定的差異，脾淋苗稍好于細(xì)胞苗（見(jiàn)表2）。

表1　不同場(chǎng)點(diǎn)豬瘟免疫抗體檢測(cè)結(jié)果

表2　不同疫苗類型豬瘟免疫抗體檢測(cè)結(jié)果

3　討論

（1）共抽檢了12個(gè)小規(guī)模養(yǎng)豬場(chǎng)，12個(gè)豬場(chǎng)都進(jìn)行了豬瘟免疫，說(shuō)明養(yǎng)殖場(chǎng)對(duì)于豬瘟重視程度，也從側(cè)面說(shuō)明了豬瘟對(duì)養(yǎng)殖業(yè)的重要性。（2）抽檢的370份樣品，豬瘟樣品免疫合格率為74.49%，抽檢的樣品大部分為育肥豬，豬瘟抗體免疫效果尚算理想，稍高于農(nóng)業(yè)部要求的70%的群體免疫合格率。（3）抽檢的12個(gè)規(guī)模化豬場(chǎng)，8個(gè)豬場(chǎng)的豬瘟免疫合格率達(dá)到70%以上，還有4個(gè)豬場(chǎng)的免疫合格率不足70%，一旦周邊豬場(chǎng)發(fā)生豬瘟疫情或者豬瘟病毒在該豬群存在，該豬場(chǎng)的豬瘟免疫現(xiàn)狀將不能保護(hù)豬群的健康，因此，這4個(gè)豬場(chǎng)需要進(jìn)一步加強(qiáng)豬瘟的防疫。（4）從豬瘟不同的疫苗類型來(lái)看，豬瘟脾淋苗的免疫效果稍好于豬瘟細(xì)胞苗。

［1］ 王賽賽. 2012年豬瘟E2基因分子流行病學(xué)調(diào)查及重組病毒構(gòu)建［D］.福建.福建農(nóng)林大學(xué). 2013.

［2］ 殷震， 劉晶華. 動(dòng)物病毒學(xué)第2版［M］. 北京∶ 科學(xué)出版社， 1997∶652-664.

［3］ 蔡寶祥. 家畜傳染病學(xué)［M］. 北京∶ 中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社， 1999， 147-151.

［4］ Paton DJ. Classical swine fever virus∶ A ring testto evalutate RT-PCR detection methods. Vet Microbiol 73∶ 159-174.

［5］ Tu C， Lu Z， Phylogenetic comparison of classical swine fever virus in China［J］. Virus Genes， 19∶ 189-195.

［6］ Hanson RP. Origin of hog cholera［J］. J Am Vet Med Assoc1957，131（5）∶ 211-218.

［7］ 王琴， 寧宜寶.豬瘟免疫失敗主要原因的解析［J］. 中國(guó)獸醫(yī)雜志. 2005（41）6∶ 61-63.

S828.28

A

1007-1733（2016）10-0052-02

2016-09-08）