夏凌志，彭杰雄，連麗琴，徐萌

（深圳武警醫(yī)院：1.檢驗(yàn)科；2.婦產(chǎn)科，廣東深圳518029）

女性宮頸HPV多重感染與宮頸病變臨床分析

夏凌志1，彭杰雄1，連麗琴1，徐萌2

（深圳武警醫(yī)院：1.檢驗(yàn)科；2.婦產(chǎn)科，廣東深圳518029）

目的分析人乳頭瘤病毒（HPV）多重感染與女性宮頸病變的臨床關(guān)系。方法對(duì)2013年1月至2015年1月該院婦科門診收治的485例宮頸液基細(xì)胞學(xué)篩查患者進(jìn)行脫落細(xì)胞采集，并對(duì)標(biāo)本進(jìn)行HPV快速基因診斷和分型，分析HPV多重感染與宮頸病變的相關(guān)性。另選取70例液基細(xì)胞學(xué)篩查無(wú)異常者作為對(duì)照組。結(jié)果485例患者中HPV感染324例（66.80%），其中單一感染236例（48.66%），多重感染88例（18.14%）。485例患者HPV總感染率、多重感染率均高于對(duì)照組［分別為21.43%（15/70）、7.14%（5/70）］，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。隨病理診斷病變級(jí)別的增加，HPV總感染率、單一感染率呈上升趨勢(shì)，多重感染率呈下降趨勢(shì)，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。結(jié)論宮頸病變程度與HPV總感染率上升有關(guān)。宮頸癌的發(fā)生與HPV亞型感染總數(shù)多少無(wú)關(guān)，可能與高危亞型感染的致病力或協(xié)同力有關(guān)。

乳頭狀瘤病毒科；重疊感染；基因型；宮頸疾病

近年來(lái)，女性宮頸癌（squamous cell carcinoma，SCC）發(fā)生率具有明顯上升和年輕化趨勢(shì)，主要與高危型人乳頭瘤病毒（human papilloma virus，HPV）的持續(xù)性感染有關(guān)。HPV不同亞型編碼不同外膜蛋白，不同亞型間無(wú)交叉抗體，很容易造成高危型HPV多重感染，而HPV多重感染是否會(huì)加速宮頸病變的發(fā)生，臨床研究結(jié)果并不一致。本研究選取在本院就診的女性患者485例進(jìn)行液基細(xì)胞學(xué)檢查和HPV基因快速分型檢測(cè)，分析多重感染在不同宮頸病變中的分布情況，旨在初步探討二者的關(guān)系，現(xiàn)報(bào)道如下。

1　資料與方法

1.1研究對(duì)象選取2013年1月至2015年1月本院婦科門診就診的宮頸液基細(xì)胞學(xué)篩查患者485例（宮頸病變組），年齡22～60歲，平均（31.13±6.18）歲。另選取70例液基細(xì)胞學(xué)篩查無(wú)異常者作為對(duì)照組，年齡20～61歲，平均（30.57±6.72）歲。兩組研究對(duì)象年齡比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

1.2方法

1.2.1檢測(cè)方法

1.2.1.1宮頸液基細(xì)胞學(xué)檢查對(duì)485例患者進(jìn)行宮頸液基薄層細(xì)胞檢查，所選標(biāo)準(zhǔn)采用2001年國(guó)際癌癥協(xié)會(huì)描述性診斷標(biāo)準(zhǔn)。

1.2.1.2HPV基因分型檢查選擇亞能生物技術(shù)（深圳）有限公司提供的試劑盒，采用聚合酶鏈反應(yīng)-反向點(diǎn)雜交法，可快速檢測(cè)HPV的23個(gè)亞型。試劑盒可檢測(cè)HPV低危亞型6種（HPV6、11、42、43、81、83）和高危亞型17種（HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、73、82）。定義2種及以上亞型感染為多重感染。具體操作按儀器和試劑說(shuō)明書標(biāo)準(zhǔn)操作程序進(jìn)行。

1.2.2宮頸組織病理診斷采用陰道內(nèi)窺鏡對(duì)485例患者中的異?；颊?15例進(jìn)行可疑區(qū)組織取樣，并送病理科請(qǐng)專家診斷。按世界衛(wèi)生組織《女性生殖器官和乳腺腫瘤的病理學(xué)和遺傳學(xué)》標(biāo)準(zhǔn)診斷分為5個(gè)級(jí)別，依次為慢性炎癥（negative for intraepithelial lesion ormalignancy，NILM），宮頸上皮內(nèi)瘤變（cervical intraepithelial neoplasia，CIN）Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ級(jí)及SCC。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理應(yīng)用SPSS15.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)數(shù)資料以率或構(gòu)成比表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)；計(jì)量資料以±s表示，組間比較采用t檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1各組患者HPV總感染率比較485例患者HPV感染324例（66.80%）。對(duì)照組HPV總感染率為21.43%，宮頸病變組HPV總感染率與對(duì)照組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=52.98，P＜0.05）；且隨病理診斷病變級(jí)別的增加，HPV總感染率呈上升趨勢(shì)，見表1。

表1　各組患者HPV總感染率比較

2.2HPV單一感染和多重感染與宮頸病變的關(guān)系

2.2.1各組HPV陽(yáng)性患者HPV單一感染率與多重感染比較324例HPV感染患者中宮頸病變組單一感染236例（72.84%），多重感染88例（27.16%）。不同宮頸病變組均以單一感染為主，多重感染所占比例較小，且隨病理診斷病變級(jí)別的增加，HPV單一感染率呈上升趨勢(shì)，多重感染率呈下降趨勢(shì)，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見表2。

表3　各組患者HPV單一感染率與多重感染率比較［n（%）］

表2　各組HPV陽(yáng)性患者HPV單一感染率與多重感染率比較［n（%）］

2.2.2各組患者HPV單一感染率與多重感染率比較

485例患者中宮頸病變組HPV單一感染236例（48.66%），多重感染88例（18.14%）。不同病理診斷組HPV單一感染率不同，且隨病理診斷病變級(jí)別的增加，HPV單一感染率呈上升趨勢(shì)。宮頸病變組HPV多重感染率與對(duì)照組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=5.31，P＜0.05），但不同病理診斷組HPV多重感染比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見表3。

2.3HPV亞型與宮頸病變的關(guān)系NILM組及CINⅠ、Ⅱ級(jí)組均以HPV6、52、58多見，CINⅢ級(jí)組以高危型HPV16、52、58最為常見，SCC組檢出11種高危型，HPV16最多，占76.19%（16/21）。單一感染中低危型占21.61%（51/236），高危型占78.39%（185/236）。多重感染中以雙重感染為主，占67.05%（59/88），常見亞型為HPV16［17.05%（15/88）］、HPV52［12.50%（11/88）］、HPV6［10.23%（9/88）］。

3　討論

3.1HPV感染率與宮頸病變的關(guān)系HPV有130多種亞型，與女性宮頸感染有關(guān)的就有40多種。有研究表明，全球女性HPV感染率為32.10%，發(fā)展中國(guó)家為42.20%，高于發(fā)達(dá)國(guó)家（22.60%），亞洲特別是亞洲東部（主要包括中國(guó)和韓國(guó)）HPV感染率最高（57.70%）［1］。且82.40%SCC的癌前病變和92.00%宮頸浸潤(rùn)癌均存在HPV感染［2］。本研究中HPV總感染率為66.80%，宮頸病變組HPV總感染率高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=

52.98，P＜0.05）。本研究還發(fā)現(xiàn)，隨病理診斷病變級(jí)別的增加，HPV總感染率呈上升趨勢(shì)，SCC組達(dá)100.00%，與文獻(xiàn)報(bào)道相似［3］。說(shuō)明隨HPV感染率上升，女性患SCC的概率相對(duì)增大，HPV感染是女性宮頸病變過(guò)程中很重要的一環(huán)。

3.2HPV單一感染與宮頸病變的關(guān)系本研究結(jié)果顯示，NILM，CINⅠ、Ⅱ、Ⅲ級(jí)，SCC組HPV單一感染率分別為39.74%、51.87%、61.19%、71.43%、80.95%，呈逐漸上升趨勢(shì)。有研究表明，隨著宮頸病變級(jí)別的上升，HPV單一感染率也會(huì)上升，SCC患者HPV感染更傾向于單一感染［4］。本研究中SCC組患者中單一感染17例（80.95%），遠(yuǎn)高于其他組，表明隨著單一高危型感染率的增高宮頸病變程度加重，不需要多種亞型感染，可能一種高危亞型感染就能致癌變。

3.3HPV多重感染與宮頸病變的關(guān)系多重感染是否會(huì)增加SCC發(fā)生率還存在爭(zhēng)議。有學(xué)者認(rèn)為，多重感染是宮頸癌變的一個(gè)重要危險(xiǎn)因子［5-6］。但也有學(xué)者認(rèn)為，HPV多重感染并不增加SCC發(fā)生率［7-8］。還有學(xué)者認(rèn)為，女性HPV多重感染和單一感染的病毒清除率一致，某些亞型難被機(jī)體完全識(shí)別和排除，可能引發(fā)持續(xù)性感染，從而成為導(dǎo)致宮頸病變及SCC的主要病因［9］。本研究結(jié)果顯示，宮頸病變組HPV多重感染與對(duì)照組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=5.31，P＜0.05），但不同病理診斷組HPV多重感染率比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。從表2可見，NILM，CINⅠ、Ⅱ、Ⅲ級(jí)，SCC組HPV多重感染率分別為31.11%、28.39%、26.79%、21.87%、19.05%，多重感染率沒(méi)有隨病變加重而升高，反而越來(lái)越小，SCC組最低。Bosch等［10］認(rèn)為，多重感染不增加SCC及癌前病變的危險(xiǎn)性，只會(huì)引起病變持續(xù)的風(fēng)險(xiǎn)。本研究結(jié)果顯示，HPV多重感染可導(dǎo)致宮頸病變，是相對(duì)于對(duì)照組而言，并不增加SCC發(fā)生率，但有研究表明，HPV多重感染可降低SCC患者的放療效果和存活率［11］。

3.4HPV型別與宮頸病變的關(guān)系HPV亞型不同致癌力也不同。隨著病變程度的增加各亞型分布有所變化。NILM組及CINⅠ、Ⅱ級(jí)組均以HPV6、52、58多見，CINⅢ級(jí)組以高危型HPV16、52、58最為常見，21例SCC組患者中檢出11種高危型。雖然各組亞型存在差異，但高危型HPV16、52檢出率占優(yōu)，尤其在SCC組中HPV16占76.19%，說(shuō)明HPV16致癌性更強(qiáng)，與陳岳青等［12］研究結(jié)果相似。Trottier等［13］認(rèn)為，混合感染時(shí)不同HPV亞型在SCC發(fā)生過(guò)程中可能存在協(xié)同作用。

綜上所述，HPV持續(xù)感染才是SCC發(fā)生過(guò)程的首要因素，HPV多重感染并不增加SCC發(fā)生率，癌變程度與感染的亞型總數(shù)關(guān)系不大，而與感染的HPV亞型致病力或協(xié)同力有關(guān)，但其關(guān)系尚有待于進(jìn)一步研究。

［1］王婷婷，周瑾，黃百靈，等.HPV感染與宮頸癌預(yù)防的研究進(jìn)展［J］.現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2014，14（20）：3988-3990.

［2］Fernandes JV，Meissner RV，Carvalho MG，et al.Prevalence of human papillomavirus in archival samples obtained from patients with cervical premalignant and malignant lesions from Northeast Brazil［J］.BMC Res Notes，2010，3（1）：96.

［3］李燕坤，劉炯，王川來(lái)，等.HPV多重感染與宮頸病變關(guān)系研究［J］.中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)藥雜志，2011，13（9）：41-42.

［4］張佳立，郜紅藝，張江宇，等.HPV多重感染與宮頸癌及癌前病變發(fā)生、發(fā)展的關(guān)系研究［J］.中國(guó)婦幼保健，2010，25（23）：3270-3274.

［5］劉金風(fēng).宮頸癌及高危型癌前病變HPV型別分布與多重感染［J］.中國(guó)婦幼保健，2010，25（16）：2208-2209.

［6］Das D，Rai AK，Kataki AC，et al.Nested multiplex PCR based detection of human papillomavirus in cervical carcinoma patients of North-East India［J］.Asian Pac J Cancer Prev，2013，14（2）：785-790.

［7］Mu觡oz N，Bosch FX，de Sanjosé S，et al.Epidemiologic classification of human papillomavirus types associated with cervical cancer［J］.N Engl J Med，2003，348（6）：518-527.

［8］王曉玫，胡錦濤，單軍，等.HPV多重感染在宮頸病變中的流行分布及意義［J］.山東醫(yī)藥，2009，49（3）：29-30.

［9］畢惠，趙健，陳銳，等.人乳頭瘤病毒感染亞型與宮頸上皮內(nèi)瘤變的相關(guān)性［J］.中國(guó)實(shí)用婦科與產(chǎn)科雜志，2005，21（5）：362-364.

［10］Bosch FX，Lorincz A，Munoz N，et al.The causal relation between human papillomavirus and cervical cancer［J］.J Clin Pathol，2002，55（4）：244-246.

［11］趙芹，吳建成，李忠信，等.219例宮頸病變患者HPV分型檢測(cè)結(jié)果分析［J］.中國(guó)婦幼衛(wèi)生雜志，2013，4（6）：35-36.

［12］陳岳青，王一鳳，陳文學(xué).人乳頭瘤病毒感染亞型與宮頸病變的關(guān)系［J］.實(shí)用癌癥雜志，2014，29（12）：1540-1543.

［13］Trottier H，Mahmud S，Costa MC，et al.Human papillomavirus infections with multiple types and risk of cervical neoplasia［J］.Cancer Epidemiol Biomarkers Prev，2006，15（7）：1274-1280.

10.3969/j.issn.1009-5519.2016.12.052

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1009-5519（2016）12-1909-03

（2016-01-27）