梁紫甄，趙瑩，陳順儀，黃艷佳，羅穎(.廣州市番禺區(qū)中心醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣東廣州5400；.廣東醫(yī)學(xué)院臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)專業(yè)，廣東東莞53808)

·論著·

三臺(tái)不同生化分析儀間部分生化項(xiàng)目結(jié)果比對(duì)和偏倚評(píng)估

梁紫甄1，趙瑩1，陳順儀1，黃艷佳1，羅穎2
(1.廣州市番禺區(qū)中心醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣東廣州511400；2.廣東醫(yī)學(xué)院臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)專業(yè)，廣東東莞523808)

目的分析日本Olympus AU5400型全自動(dòng)生化分析儀（簡(jiǎn)稱AU5400）與美國(guó)Beckman Coulter AU5800型全自動(dòng)生化分析儀（簡(jiǎn)稱AU5800）、美國(guó)強(qiáng)生Vitros FS 5，1全自動(dòng)干生化分析儀（簡(jiǎn)稱FS 5,1）的葡萄糖(Glu)、鉀(K+)、鈣(Ca)、肌酐(Cr)四個(gè)項(xiàng)目檢測(cè)結(jié)果的可比性。方法按美國(guó)國(guó)家臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)(NCCLS)EP9-A2文件，以AU5400為參考系統(tǒng)，AU5800和FS 5，1為試驗(yàn)系統(tǒng)，同時(shí)檢測(cè)新鮮血清標(biāo)本的Glu、K+、Ca、Cr，計(jì)算相關(guān)系數(shù)(r)和回歸方程，并以1/2CLIA'88允許偏差范圍為標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)臨床可接受性進(jìn)行分析。結(jié)果所有檢測(cè)項(xiàng)目在試驗(yàn)系統(tǒng)與參考系統(tǒng)間的檢測(cè)結(jié)果的相關(guān)系數(shù)均大于0.975；除Cr外，其他三項(xiàng)在醫(yī)學(xué)決定水平處的預(yù)期偏倚都在臨床可接受范圍內(nèi)。結(jié)論三套分析系統(tǒng)具有良好的相關(guān)性，Glu、K+、Ca三個(gè)項(xiàng)目的檢測(cè)結(jié)果具有可比性，可相互認(rèn)可并被臨床所接受；Cr則對(duì)其在系統(tǒng)間的不可比性進(jìn)行原因分析，并在校正后重新分析偏移評(píng)估和相關(guān)性，也在臨床可接受范圍內(nèi)。

全自動(dòng)生化分析儀；比對(duì)分析；偏倚評(píng)估；相關(guān)性

伴隨著醫(yī)院的發(fā)展，為了滿足不斷增長(zhǎng)的檢驗(yàn)需求，本科室同時(shí)采用日本Olympus AU5400型全自動(dòng)生化分析儀(簡(jiǎn)稱AU5400)、美國(guó)Beckman Coulter AU5800型全自動(dòng)生化分析儀(簡(jiǎn)稱AU5800)和美國(guó)強(qiáng)生Vitros FS 5,1全自動(dòng)干化學(xué)生化分析儀(簡(jiǎn)稱FS5，1)，于是就有不同分析系統(tǒng)檢測(cè)同一項(xiàng)目的現(xiàn)象出現(xiàn)。由于不同分析系統(tǒng)間的系統(tǒng)配置存在差異，如檢測(cè)光路、反應(yīng)介質(zhì)、檢測(cè)方法、校準(zhǔn)品、質(zhì)控品和試劑等都有差別，故常導(dǎo)致檢驗(yàn)結(jié)果的不一致。國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)《醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力的專用要求》(ISO15189)對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果提出明確要求，強(qiáng)調(diào)方法學(xué)比對(duì)是實(shí)現(xiàn)準(zhǔn)確度溯源和患者標(biāo)本結(jié)果可比性的重要途徑[1]。故按ISO15189的要求，為確保檢測(cè)結(jié)果的一致性和準(zhǔn)確性，對(duì)三套分析系統(tǒng)按美國(guó)臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)(CLSI)頒布的《用患者標(biāo)本進(jìn)行方法學(xué)比對(duì)及偏倚評(píng)估-批準(zhǔn)指南》(EP9-A2)[7]進(jìn)行方法學(xué)比對(duì)。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本采集每天從本院門診或病房患者的新鮮生化檢測(cè)標(biāo)本中收集8個(gè)無(wú)溶血、無(wú)脂血、無(wú)黃疸的新鮮血清，連續(xù)收集5 d，共40個(gè)標(biāo)本。其中50%的標(biāo)本的分析物濃度位于參考區(qū)間以外，所有的標(biāo)本的分析物濃度都在檢測(cè)線性范圍內(nèi)，并覆蓋參考區(qū)間和醫(yī)學(xué)決定水平。每天標(biāo)本收集后及時(shí)分離血清，并在2 h內(nèi)在每臺(tái)儀器上完成兩次平行測(cè)定，第一次測(cè)定順序?yàn)榈?個(gè)血清到第8個(gè)血清，第二次測(cè)定順序?yàn)榈?個(gè)血清到第1個(gè)血清。

1.2 儀器與試劑

1.2.1 儀器日本Olympus AU5400型全自動(dòng)生化分析儀、美國(guó)Beckman Coulter AU5800型全自動(dòng)生化分析儀、美國(guó)強(qiáng)生Vitros FS 5,1全自動(dòng)干生化分析儀。

1.2.2 試劑AU5400與AU5800的試劑相同，Glu購(gòu)自中生北控生物科技股份有限公司(葡萄糖氧化酶法)，K+為Beckman Coulter配套試劑(離子選擇電極法)，Ca購(gòu)自北京利德曼生化股份有限公司(偶氮砷Ⅲ法)，Cr購(gòu)自上海復(fù)星長(zhǎng)征醫(yī)學(xué)科學(xué)有限公司(苦味酸法)；FS5,1使用的試劑為該儀器配套干化學(xué)試劑。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 參考系統(tǒng)的確定由于AU5400參加衛(wèi)生部室間質(zhì)評(píng)成績(jī)優(yōu)秀，其檢測(cè)結(jié)果具有溯源性[2]，且其余兩個(gè)系統(tǒng)相對(duì)于AU5400均為新系統(tǒng)，故以AU5400為參考系統(tǒng)，AU5800和FS 5,1為試驗(yàn)系統(tǒng)。

1.3.2 儀器準(zhǔn)備和質(zhì)量控制按照科室內(nèi)制定的SOP文件對(duì)3臺(tái)儀器進(jìn)行定期的維護(hù)保養(yǎng)，每次檢測(cè)標(biāo)本前保證質(zhì)量控制結(jié)果在控，保證實(shí)驗(yàn)處于一個(gè)良好的狀態(tài)。

1.3.3 離群值的判斷與處理計(jì)算每個(gè)標(biāo)本在每個(gè)分析系統(tǒng)平行檢測(cè)結(jié)果的絕對(duì)差值，然后計(jì)算該分析系統(tǒng)檢測(cè)的所有標(biāo)本的絕對(duì)差值的均值，取絕對(duì)差值平均值的4倍為“可接受”限(取舍到報(bào)告值前一位)，如果有絕對(duì)差值超過(guò)上述“可接受”限，則為方法內(nèi)離群值。計(jì)算同一標(biāo)本在不同系統(tǒng)間平行測(cè)定結(jié)果的均值的絕對(duì)差值及絕對(duì)差值平均值，取絕對(duì)差值平均值的4倍為“可接受”限(取舍到報(bào)告值前一位)，如果有絕對(duì)差值超過(guò)上述“可接受”限，則為方法間離群值。若離群值數(shù)量未超過(guò)標(biāo)本總數(shù)2.5%，可直接將其刪除并檢測(cè)新的標(biāo)本取代；若超過(guò)2.5%，則需分析原因并重新收集標(biāo)本檢測(cè)。

1.3.4 相關(guān)性分析分別將AU5800和FS 5,1的結(jié)果與AU5400結(jié)果進(jìn)行相關(guān)性分析。以參考系統(tǒng)AU5400結(jié)果為X，試驗(yàn)系統(tǒng)AU5800和FS5,1的結(jié)果分別為Y1、Y2。用SPSS 19.0軟件進(jìn)行線性回歸分析處理，運(yùn)用相關(guān)系數(shù)(r)進(jìn)行相關(guān)性分析的初步判斷。若r≥0.975，則認(rèn)為直線回歸方程的斜率和截距可靠，兩套分析系統(tǒng)的相關(guān)性良好；若r＜0.975，應(yīng)測(cè)定更加寬的濃度范圍的標(biāo)本至r≥0.975[3]，并分析相關(guān)性差的原因。

1.3.5 臨床可接受性評(píng)價(jià)按臨床需求，將各項(xiàng)目的醫(yī)學(xué)決定水平濃度(Xc)代入回歸方程得到其實(shí)驗(yàn)濃度值(Yc)，計(jì)算分析系統(tǒng)之間的系統(tǒng)誤差(SE)和相對(duì)偏差(SE%)。以SE%≤1/2 CLIA'88允許偏差范圍屬臨床可接受水平為標(biāo)準(zhǔn)，判斷參考系統(tǒng)與試驗(yàn)系統(tǒng)的檢測(cè)結(jié)果是否具有可比性，公式如下：

SE=|Yc-Xc|

SE%=(SE/Xc)×100%

2 結(jié)果

2.1 離群值檢測(cè)結(jié)果本次實(shí)驗(yàn)FS 5,1與AU5400的比對(duì)中項(xiàng)目Cr出現(xiàn)一組方法間離群值數(shù)，未超過(guò)標(biāo)本總數(shù)2.5%，將該標(biāo)本所有結(jié)果剔除并檢測(cè)新的標(biāo)本取代。檢測(cè)新標(biāo)本后未出現(xiàn)離群值，所有數(shù)據(jù)可用于統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。

2.2 線性回歸分析結(jié)果對(duì)X和Y1、Y2分別進(jìn)行線性回歸分析后結(jié)果見表1，所檢測(cè)的項(xiàng)目Glu、K+、Ca、Cr的r≥0.975。

表1 分析系統(tǒng)間的線性回歸分析結(jié)果

2.3 臨床可接受性評(píng)價(jià)在醫(yī)學(xué)決定水平處計(jì)算分析系統(tǒng)間的SE和SE%，結(jié)果見表2和表3。檢測(cè)項(xiàng)目Glu、K+、Ca的SE%≤1/2CLIA'88允許偏差范圍。但項(xiàng)目Cr的SE%超出了1/2CLIA'88允許偏差范圍。

表2 AU5400與AU5800醫(yī)學(xué)決定水平處的預(yù)期偏倚的臨床可接受性

表3 AU5400與FS5,1醫(yī)學(xué)決定水平處的預(yù)期偏倚的臨床可接受性

根據(jù)表2和表3顯示的結(jié)果看，實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)與參考系統(tǒng)間項(xiàng)目Cr在醫(yī)學(xué)決定水平處的預(yù)期偏倚不在臨床可接受范圍內(nèi)，但相關(guān)性好(r＞0.975)，所以回歸方程是可靠的。根據(jù)直線回歸方程對(duì)實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)的Cr進(jìn)行校正處理，從而使不同分析系統(tǒng)間的結(jié)果一致[5]。Cr校正后所得線性回歸分析，AU5400與AU5800回歸方程為Y=X+0.168，r=0.999，相關(guān)性好，AU5400與FS5.1回歸方程為Y=0.997X+1.085，r=0.998，相關(guān)性好。

2.4 Cr經(jīng)校正后醫(yī)學(xué)決定水平處的預(yù)期偏倚的臨床可接受性對(duì)于Cr經(jīng)校正后醫(yī)學(xué)決定水平處的預(yù)期偏倚的臨床可接受性結(jié)果見表4。AU5800與FS5,1項(xiàng)目Cr經(jīng)校正后的結(jié)果分別與AU5400的結(jié)果均具有可比性，相互認(rèn)可，并能夠被臨床接受。

表4 Cr經(jīng)校正后醫(yī)學(xué)決定水平處的預(yù)期偏倚的臨床可接受性

3 討論

本次實(shí)驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn)的離群值在未超過(guò)測(cè)量總數(shù)的2.5%，說(shuō)明儀器的精密度良好，性能穩(wěn)定。離群值進(jìn)行剔除和補(bǔ)充后進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，所有檢測(cè)項(xiàng)目在實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)與參考系統(tǒng)間的檢測(cè)結(jié)果的相關(guān)系數(shù)均大于0.975，證明直線回歸方程的斜率和截距可靠，儀器間的相關(guān)性良好。本組檢測(cè)項(xiàng)目Glu、K+、Ca的SE%≤1/2 CLIA'88允許偏差范圍，說(shuō)明實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)與參考系統(tǒng)之間的Glu、K+、Ca檢測(cè)結(jié)果具有可比性，相互認(rèn)可，并能夠被臨床接受。項(xiàng)目Cr在醫(yī)學(xué)決定水平的低值處的SE%超出了1/2CLIA'88允許偏差范圍，但在醫(yī)學(xué)決定水平的高值處卻顯示為可接受。原因分析：(1)從線性回歸方程可以觀察到方程截距較大，而Cr的檢測(cè)范圍較寬，在高值處截距對(duì)SE%的計(jì)算干擾較小，而在低值處的影響較大，導(dǎo)致在高值處可接受，低值處不可接受的情況出現(xiàn)；(2)干生化分析儀每個(gè)不同批號(hào)的試劑間有批間差；(3)兩套分析系統(tǒng)分別代表了濕化學(xué)法與干化學(xué)法，現(xiàn)在臨床生化檢測(cè)Cr濕化學(xué)法主要是用苦味酸法，苦味酸法因容易受黃疸、乳糜血、維生素C以及體內(nèi)代謝物質(zhì)，如尿酸、丙酮酸等眾多因素的干擾使肌酐測(cè)定出現(xiàn)假性升高或降低[4]。干生化分析儀采用多層薄膜技術(shù)不僅能掩蓋待測(cè)物的有色物質(zhì)并提供背景，選擇性地阻留或去除干擾物質(zhì)，還可將等同于濕化學(xué)法反應(yīng)原理的各種物質(zhì)分層中進(jìn)行[5]。兩套分析系統(tǒng)的工作原理和組成結(jié)構(gòu)都不同，但根據(jù)相關(guān)系數(shù)和直線回歸方程可以看出兩者相關(guān)性良好，認(rèn)兩者間檢測(cè)結(jié)果的差距為系統(tǒng)誤差，需要對(duì)系統(tǒng)進(jìn)行校正才能給臨床提供正確的檢測(cè)結(jié)果，因此比對(duì)實(shí)驗(yàn)對(duì)于保證兩套系統(tǒng)的檢測(cè)結(jié)果的一致性和準(zhǔn)確性有重要意義。

不同分析系統(tǒng)間對(duì)相同項(xiàng)目檢測(cè)的可比性和一致性是保證臨床結(jié)果準(zhǔn)確一致的重要條件，ISO15189對(duì)此提出了明確要求，并強(qiáng)調(diào)方法學(xué)比對(duì)是實(shí)現(xiàn)準(zhǔn)確度溯源和患者標(biāo)本結(jié)果可比性的重要途徑。另外試劑批號(hào)的更新，導(dǎo)致批間差的存在，為減低批間差，必須對(duì)新批號(hào)試劑進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)校正。因此實(shí)驗(yàn)室不同分析系統(tǒng)間需適時(shí)進(jìn)行對(duì)比實(shí)驗(yàn)，對(duì)于醫(yī)學(xué)水平處偏倚不可被臨床接受的項(xiàng)目必須找出原因并校正，以保證臨床結(jié)果的準(zhǔn)確性和一致性。測(cè)量同樣的分析物，采用不同的方法，不同的儀器或不同的檢測(cè)系統(tǒng)，均需要采取必要的測(cè)試程序，來(lái)驗(yàn)證由于方法、儀器或檢測(cè)系統(tǒng)的差異能否讓檢測(cè)結(jié)果具有可比性。如果檢測(cè)系統(tǒng)經(jīng)驗(yàn)證不能夠提供可比性的結(jié)果，那么就應(yīng)該建立不同方法、不同儀器、不同檢測(cè)系統(tǒng)的參考區(qū)間，具有重要臨床意義。

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Comparison analysisbetween different biochem icalanalysis systems.

LIANGZi-zhen1,ZHAO Ying1,CHEN Shun-yi1, HUANG Yan-jia1,LUO Ying2.1.Department of Clinical Laboratory,Guangzhou Panyu Central Hospital,Guangzhou 511400,Guangdong,CHINA;2.Guangdong MedicalCollege,Guangzhou 523808,Guangdong,CHINA

Objective To investigate the comparability of Glu,K+,Ca and Crmeasurementbetween Olympus AU5400 analyzer,Beckman Coulter AU5800 and Vitros FS 5,1 analyzer.M ethods According to the Ep9-A2 document of the Clinical and Laboratory Standards Institute,AU5400 analyzer was used as the reference system,and AU5800 and FS 5,1 analyzerwere selected as the experimental system.Meanwhile,the levels of Glu,K+,Ca and Cr of serum were tested.The correlation coefficientand regression equation were calculated and the clinical acceptability was calculated according to the range of the half of the allowed total error of CLIA'88.Results Therewere significant correlation between the reference system and the experimental system in all the tested projects(r＞0.975);the expected bias of the other three could be accepted in clinical acceptable range except Cr.Conclusion Three sets of analysis system hasgood correlation,and theexam ination of levelGlu,K+and Cahave the commensurability,which can bemutually recognized and accepted by clinicalapplication.After analyzing the non-comparability of Cr between the three systemsand re-evaluating thebiasassessmentand correlation,the resultalso can beaccepted by clinicalapplication.

Automatic biochemistry analyzer;Comparativeanalysis;Biasestimation;Correlation

R446.1

A

1003—6350（2016）16—2658—03

2016-02-16)

doi∶10.3969/j.issn.1003-6350.2016.16.027

梁紫甄。E-mail：544890563@qq.com