賴永坤，呂偉標(biāo)，李錦榮

（廣東省佛山市順德區(qū)第一人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣東佛山528300）

血清S100B，MCP-1，COX-2及hs-CRP與急性冠脈綜合征的相關(guān)性分析

賴永坤，呂偉標(biāo)，李錦榮

（廣東省佛山市順德區(qū)第一人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣東佛山528300）

目的 觀察不同類型急性冠狀動(dòng)脈綜合征患者血清S100B、MCP-1、COX2和高敏C反應(yīng)蛋白（hs-CRP）等因子的表達(dá)水平，探討其與不同類型冠脈綜合征的相關(guān)性以及診斷意義。方法 選擇急性冠狀動(dòng)脈綜合征患者134例，根據(jù)診斷分為急性心肌梗死（AMI）組55例，不穩(wěn)定性心絞痛（UAP）組69例，另選取61例穩(wěn)定性心絞痛患者作為SAP組，及健康體檢者45名為健康對(duì)照組。運(yùn)用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA法）測(cè)定血清S100B、MCP-1、COX-2及hs-CRP水平。結(jié)果AMI組和UAP組S100B、MCP-1、COX2和hs-CRP等因子的表達(dá)水平明顯高于健康對(duì)照組；SAP組MCP-1，hs-CRP明顯高于健康對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），COX2水平與健康對(duì)照組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。AMI組和UAP組S100B、MCP-1、COX2和hs-CRP水平明顯高于SAP組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論 S100B、COX2可作為急性冠狀動(dòng)脈綜合征斑塊穩(wěn)定性病變嚴(yán)重程度的預(yù)測(cè)因子，調(diào)節(jié)S100B及COX2可能成為治療冠脈綜合癥的潛在靶點(diǎn)。

急性冠脈綜合征； 冠狀動(dòng)脈粥樣硬化； S100B蛋白； 單核細(xì)胞趨化因子-1； 環(huán)氧合酶-2； 超敏C反應(yīng)蛋白

冠狀動(dòng)脈綜合征（acute coronary syndrome，ACS）是一組致死率非常高的冠狀動(dòng)脈疾病。ACS包括急性心肌梗死（acute myocardial infarction，AMI），不穩(wěn)定性心絞痛（unstable angina pectoris，UAP）。ACS的發(fā)病機(jī)制被認(rèn)為和冠狀動(dòng)脈粥樣硬化有關(guān)。冠狀動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的破裂、阻塞和血小板血栓的形成能夠部分或者完全的阻塞冠狀動(dòng)脈的管腔，因此導(dǎo)致心肌缺血甚至心肌梗死［1］。關(guān)于冠狀動(dòng)脈粥樣硬化的病理生理機(jī)制目前還未完全清楚，但是眾多的實(shí)驗(yàn)室及臨床證據(jù)都支持動(dòng)脈粥樣硬化是脂質(zhì)在血管內(nèi)膜的沉積以及由此誘發(fā)的一系列的炎癥反應(yīng)而形成的。炎癥機(jī)制是冠狀動(dòng)脈粥樣硬化的核心機(jī)制，它參與到了動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生、發(fā)展的所有環(huán)節(jié)［2］。更顯著的是炎癥機(jī)制調(diào)節(jié)著動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的穩(wěn)定性和斑塊形成血栓的潛力［3］。想要完全明白ACS形成中的炎癥機(jī)制是非常困難的，而目前一些炎癥因子被發(fā)現(xiàn)參與到動(dòng)脈粥樣硬化的形成，并在血清中表達(dá)水平上調(diào)，因此眾多的炎癥因子已經(jīng)被確認(rèn)為是ACS斑塊易損性的生物標(biāo)志，如MMPs、CRP、IL-1、IL-6、IL-17、TNF-α等［4］。S100B蛋白是屬于S100蛋白家族成員之一，研究發(fā)現(xiàn)該家族與動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生機(jī)發(fā)展有著密切的關(guān)系。在動(dòng)脈粥樣硬化斑塊中Sl00A8和 S100A9表達(dá)增強(qiáng)，體外研究也發(fā)現(xiàn)S100A8、9可誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞炎性反應(yīng)，而后者正是動(dòng)脈粥樣硬化形成的條件之一，因此提示它們參與動(dòng)脈粥樣硬化的病理生理過(guò)程［5-6］。有研究利用RT-PCR方法發(fā)現(xiàn)S100A11 mRNA、S100A 6的表達(dá)水平也與冠狀動(dòng)脈硬化相關(guān)［7］。此外，因?yàn)镾100B與 MCP-1，COX-2的表達(dá)相關(guān)，而后兩者均與動(dòng)脈粥樣硬化關(guān)系密切，hs-CRP又是冠狀動(dòng)脈粥樣硬化的公認(rèn)的生物標(biāo)志，因此我們?cè)噲D通過(guò)測(cè)定S100B，MCP-1，COX-2及hs-CRP水平，探討其與急性冠脈綜合征的關(guān)系，以及將這些炎癥因子用于預(yù)測(cè)冠狀動(dòng)脈粥樣硬化斑塊穩(wěn)定性以及ACS風(fēng)險(xiǎn)的可行性。

對(duì)象及方法

1 研究對(duì)象

選擇2013年9月至2014年6月在我院住院治療的急性冠脈綜合征患者共134例，其中男67例，女57例，平均年齡62.7±11.3歲。根據(jù)診斷結(jié)果將患者分為急性心肌梗死（AMI）組55例，不穩(wěn)定性心絞（UAP）組69例。另選取61例穩(wěn)定性心絞痛患者作為SAP組（平均年齡62.3±8.7歲），年齡和性別與實(shí)驗(yàn)組相匹配的健康體檢者45例為健康對(duì)照組。各組的性別構(gòu)成、年齡及相關(guān)危險(xiǎn)因素見(jiàn)表1。各組患者本人和家屬均簽署了知情同意書(shū)。

2 研究方法

ELESA法檢測(cè)S100B、MCP-1、COX-2及hs-CRP水平血清水平。取清晨空腹肘靜脈血3～5 mL于無(wú)菌的無(wú)抗凝的管中，自然凝固30 min后常溫3000r/min離心15min，分離血清，-70℃低溫冰箱保存，待標(biāo)本收集完畢后在本院中心實(shí)驗(yàn)室統(tǒng)一由專業(yè)檢驗(yàn)員嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的步驟具體操作，采用酶聯(lián)免疫雙抗體夾心法成批檢測(cè)血清S100B和hs-CRP濃度，應(yīng)用Muhiskan ex酶標(biāo)儀492nm處讀取OD值。試劑盒購(gòu)自武漢博士德公司。靈敏度：最小可測(cè)人S100B、MCP-1、COX-2及hs-CRP水平達(dá)8ng/mL。

3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

結(jié) 果

1 患者一般臨床資料

各組患者在年齡、性別構(gòu)成方面差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。AMI、UAP、SAP組中冠狀動(dòng)脈動(dòng)脈危險(xiǎn)因素高血壓、糖尿病、高脂血癥、吸煙、飲酒等均顯著高于健康對(duì)照組（P＜0.05）。

表1 各組患者的一般臨床資料

2 各組炎癥因子的表達(dá)情況

AMI組與UAP組S100B、MCP-1、hs-CRP水平均明顯高于健康對(duì)照組（P＜0.05）。在SAP組中，S100B、COX-2水平與健康對(duì)照組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），MCP-1和 hs-CRP高于健康對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。AMI、USP組 S100B、MCP-1、COX-2、hs-CRP水平均要高于 SAP組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

表2 各組間S1 0 0B、MCP1、COX-2和h s-CRP表達(dá)水平比較

討 論

據(jù)報(bào)道，急性冠脈綜合征（ACS）的臨床發(fā)病率約占冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟?。–HD）的30%～40%，是冠心病發(fā)生心血管事件的主要病因［9］。ACS的發(fā)生多由于冠狀動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的破潰所致。而在動(dòng)脈粥樣硬化斑塊中，易損斑塊由于其不穩(wěn)定及已破裂性，尤其引起學(xué)者們的關(guān)注［10］。易損斑塊含有大量的炎癥細(xì)胞。炎癥細(xì)胞一方面可以促進(jìn)脂質(zhì)在AS斑塊部位的沉積，另一方面促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)的降解和影響斑塊部位細(xì)胞外基質(zhì)的合成，從而影響易損斑塊的穩(wěn)定性。因臨床工作中不能進(jìn)行直接病理檢查，傳統(tǒng)研究認(rèn)為，檢測(cè)炎性反應(yīng)標(biāo)志物可有效地預(yù)測(cè)斑塊的穩(wěn)定狀態(tài)。既往的研究發(fā)現(xiàn)，包括CRP、MCP-1、基質(zhì)金屬蛋白酶（MMPS）、血清淀粉蛋白（SAA）、纖維蛋白原等炎癥因子對(duì)冠狀動(dòng)脈斑塊的易損性及病情的嚴(yán)重程度預(yù)測(cè)有著重要的意義［11］。

S100B屬于S100蛋白家族25個(gè)成員中的一員，是高級(jí)聚糖化終產(chǎn)物（advanced glycation end products，RAGE）的配體之一，在炎癥調(diào)節(jié)、細(xì)胞分化等方面起著重要的作用。研究發(fā)現(xiàn)RAGE與動(dòng)脈粥樣硬化有著密切的聯(lián)系。在平滑肌細(xì)胞中，S100B與RAGE結(jié)合使得超氧化物產(chǎn)生增加，促進(jìn)平滑肌的遷移。而平滑肌遷移正是動(dòng)脈粥樣硬化中的關(guān)鍵一步。Tsoporis［12］等研究發(fā)現(xiàn)，在心肌梗死的小鼠模型中，RAGE在心肌中表達(dá)，S100B釋放增加。一方面S100B/RAGE通過(guò)激活 p38/ERK/NF-kB從而使單核細(xì)胞中的環(huán)氧合酶-2（COX-2）mRNA表達(dá)升高，另一方面還能讓COX-2增加，從而促進(jìn)單核細(xì)胞核平滑肌細(xì)胞的粘附效果［13］。Burleigh等［14］的研究發(fā)現(xiàn)，在敲除LDL受體的動(dòng)脈粥樣硬化轉(zhuǎn)基因小鼠模型中，在動(dòng)脈粥樣硬化病灶發(fā)現(xiàn)COX-2的高表達(dá)，抑制COX-2可以明顯減少動(dòng)脈粥樣硬化病變的嚴(yán)重程度。Linton等［15］在另一個(gè)轉(zhuǎn)基因動(dòng)脈粥樣硬化小鼠模型中（敲除ApoE）發(fā)現(xiàn)，小鼠的動(dòng)脈粥樣硬化病變處同樣有有COX-2的高表達(dá)。在人的頸總動(dòng)脈、主動(dòng)脈及冠狀動(dòng)脈的動(dòng)脈粥樣硬化病變處均有COX-2的高表達(dá)。這些研究結(jié)果提示COX-2在動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生發(fā)展中具有重要的作用。另外，S100B還能通過(guò)誘導(dǎo)Src激酶、STAT3、NF-kB和ERK信號(hào)通路從而導(dǎo)致MCP-1的表達(dá)上調(diào)［16］。MCP-1在冠脈粥樣硬化形成、發(fā)展中的作用是促進(jìn)單核細(xì)胞黏附浸潤(rùn)于血管內(nèi)皮細(xì)胞轉(zhuǎn)變成巨噬細(xì)胞，吞噬脂質(zhì)后轉(zhuǎn)變?yōu)榕菽?xì)胞參與促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化的形 成［17］。因此S100B可 能 通過(guò)S100B/ RAGE途徑促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化的形成。此外，血清hs-CRP水平與冠狀動(dòng)脈動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生、發(fā)展、斑塊的穩(wěn)定性及預(yù)后密切相關(guān)［18］。動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的炎癥反應(yīng)是斑塊破裂和不穩(wěn)定的重要原因。在斑塊的形成過(guò)程中，CRP、補(bǔ)體復(fù)合物和泡沫細(xì)胞等沉積在動(dòng)脈壁內(nèi)，CRP可與脂蛋白結(jié)合，激活補(bǔ)體系統(tǒng)，產(chǎn)生大量炎癥介質(zhì)，釋放氧自由基，造成血管內(nèi)膜損傷、血管痙攣及不穩(wěn)定斑塊脫落。國(guó)內(nèi)的一項(xiàng)研究探討ACS臨界病變斑塊血管內(nèi)超聲影像學(xué)特征與hs-CRP的關(guān)系，認(rèn)為其可望作為冠脈斑塊易損性預(yù)測(cè)的參考指標(biāo)［19］。

我們的研究發(fā)現(xiàn)，在AMI組、UAP組，S100B、MCP1、hs-CRP、COX-2水平均明顯高于健康對(duì)照組，也均要高于SAP組，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。而在SAP組，MCP-1和hs-CRP高于健康對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；S100B、COX-2水平與健康對(duì)照組比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。推測(cè)其原因可能是AMI和UAP主要是由易損斑塊而導(dǎo)致，而易損斑塊中脂質(zhì)含量較高，平滑肌細(xì)胞和膠原含量少，纖維帽薄，支撐力差，尤其在偏心性纖維帽的周邊最為薄弱，斑塊容易破裂［20］，因此局部的炎癥物質(zhì)易釋放到血液中，從而在AMI組和UAP組的患者血清中發(fā)現(xiàn)S100B、MCP-1、COX-2、hs-CRP水平的升高。SAP主要由穩(wěn)定斑塊導(dǎo)致，而在穩(wěn)定斑塊中，動(dòng)脈粥樣硬化斑塊纖維帽厚，炎癥物質(zhì)不易破裂釋放到血中，因此炎癥因子的水平相對(duì)較低。

S100B、MCP-1、COX-2、hs-CRP水平與ACS有著明顯的相關(guān)性，尤其是S100B及COX-2可能與冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性斑塊的穩(wěn)定性有著密切的聯(lián)系。檢測(cè)S100B及COX-2可用于冠狀動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的穩(wěn)定性及疾病嚴(yán)重程度的預(yù)測(cè)，調(diào)節(jié)S100B及COX-2可能成為治療冠脈綜合癥的潛在靶點(diǎn)。

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Association of S100B，MCP-1，COX-2 and hs-CRP with Acute Coronary Syndrome

LAIYong-kun，LYU Wei-biao，LIJin-rong
（Department of Clinical Laboratory，The First People’s Hospital of Shunde District，F(xiàn)oshan528300，China）

Objective To detection the serum level of S100B，MCP-1，COX-2 and high-sensitivity C-reactive protein（hs-CRP）in patientswith different types of acute coronary syndrome，and to explore the correlation of these inflammatory cytokines with different types of coronary syndrome.M ethods total of 134 patients with acute coronary syndrome were divided into two groups：acute myocardial infarction（AM I）group，55 cases，unstable angina pectoris（UAP）group，69 cases.We also selected 61 cases of stable angina pectoris as SAP group，and enrolled 45 age and gender marched healthy cases as healthy control group.Enzyme-linked immunosorbent assay（ELISA）was used to determine the expression of S100B，MCP-1，COX-2 and hs-CRP level.Results The expression level of S100B，MCP-1，COX-2 and hs-CRP is higher in the AMI and UAP groups than that in control group（P＜0.05）.The serum level of MCP-1 and hs-CRP in SAP group is higher than that in control group.S100B and COX-2 in SAP group had no difference with control group.The level of S100B MCP1，COX-2 and hs-CRP in the UAP group was higher than that in SAP group，the difference was statistically significant（P＜0.05）.Conclusion S100B，MCP-1，COX-2 and hs-CRP have a close relationship to ACS and S100B and COX-2 can be used as predictors of stability of the plaques and severity of ACS.

Acute coronary syndrome； Coronary atherosclerosis； S100B； Monocyte chemoattractant protein-1； COX-2； hs-CRP

10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2016.06.022

2015-12-23；

2016-01-29

賴永坤（1981—），男，大學(xué)本科，主管檢驗(yàn)師。主要負(fù)責(zé)檢驗(yàn)科急診組檢驗(yàn)工作。Tel：15018774003