朱克清

(安徽省宿州市醫(yī)學(xué)檢驗中心　234000)

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·臨床研究·

STAR Evolution檢測纖維蛋白原的方法學(xué)性能評價

朱克清

(安徽省宿州市醫(yī)學(xué)檢驗中心234000)

目的評估STAR Evolution全自動血凝分析儀檢測全血纖維蛋白原(FIB)濃度的臨床性能。方法參照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)檢測FIB的準(zhǔn)確度、精密度、交叉污染率、線性范圍及參考區(qū)間。結(jié)果水平1、水平2批內(nèi)精密度(CV)分別為1.9%和3.17%；批間精密度(CV)分別為3.27%和2.89%；5 份室間質(zhì)控品檢測結(jié)果與靶值偏倚為 1.18%～4.30%；線性范圍為1.95～9.81，r>0.975；SE%<8%，線性范圍與廠家說明相近；FIB驗證的參考區(qū)間為2.502～2.904g/L，比率R(%)=96.7%；交叉污染率為0.11%。結(jié)論STAGOEvolution全自動血凝分析儀檢測FIB 的方法學(xué)性能良好，檢驗結(jié)果可靠、準(zhǔn)確，可滿足臨床需要。

STAR Evolution；性能評價；纖維蛋白原

檢測纖維蛋白原(FIB)含量是凝血試驗篩檢的最常用項目之一，STAR Evolution全自動凝血分析儀，是集免疫比濁法、凝固法及發(fā)色底物法等檢測方法融于一體的全自動凝血分析系統(tǒng)[1]。臨床診斷許多疾病的出凝血機(jī)制異常、抗凝、止血和溶栓藥物的應(yīng)用，都離不開凝血功能的檢測[2]。依據(jù)醫(yī)學(xué)實驗室質(zhì)量和能力認(rèn)可準(zhǔn)則(ISO15189文件)及美國病理家協(xié)會(CAP)實驗室質(zhì)量的要求，為保證儀器檢測系統(tǒng)的有效性和完整性?，F(xiàn)對該儀器檢測FIB進(jìn)行系統(tǒng)性評價，包括準(zhǔn)確度、精密度、變異系數(shù)(CV)、攜帶交叉污染率、線性范圍及參考區(qū)間等相關(guān)指標(biāo)，驗證結(jié)果是否準(zhǔn)確可靠，能否滿足臨床需要。

1　資料與方法

1.1一般資料2015年10月1日至12月31日宿州市醫(yī)學(xué)檢驗中心的就診患者，采集抗凝血(3.8%枸櫞酸鈉抗凝劑，抗凝劑與血量1∶9 混合)標(biāo)本，3 000 r/min離心10 min；當(dāng)紅細(xì)胞壓積(HCT)<20%時，抗凝劑和血液比例按照公式調(diào)整：抗凝劑用量(L)=0.001 85(L)×(100-HCT)。全血標(biāo)本混勻后采用STAR Evolutio 全自動凝血分析儀進(jìn)行檢測。

1.2儀器與試劑法國STAR Evolution全自動血凝分析儀，試劑盒由北京利德曼生物工程有限公司提供(批號015263K)。

1.3檢測方法STAR Evolutio全自動凝血分析儀質(zhì)控在控后，進(jìn)行標(biāo)本檢測。

1.4評價方法

1.4.2準(zhǔn)確度以參加2015年10月安徽省臨床檢驗中心組織的室間質(zhì)評(EQA)活動進(jìn)行評價，對5份凝血室間質(zhì)控品進(jìn)行檢測，靶值標(biāo)準(zhǔn)以臨檢中心回報的FIB靶值，相對偏倚計算采用本實驗室上報結(jié)果與靶值比較，驗證本實驗室檢測結(jié)果是否在質(zhì)控允許范圍之內(nèi)。

1.4.3線性范圍參照CLSI EP6-A文件[4]，選取1份接近預(yù)期下限(L)和1份接近預(yù)期上限(H)血漿濃度，并按照5L、4L+1H、3L+2H、2L+3H、1L+4H、5H配制混合血漿，組成一系列評價標(biāo)本，每個標(biāo)本重復(fù)檢測3次后計算其均值，并將實測值與理論值進(jìn)行比較，計算SE%；以理論值為X軸，實測值為Y軸，回歸方程Y=aX+b；線性范圍判定標(biāo)準(zhǔn)是相關(guān)系數(shù)(r)>0.975或R2>0.95。

1.4.4攜帶交叉污染率取高值標(biāo)本和低值標(biāo)本1份，分別檢測3次，獲得 H1、H2、H3 和 L1、L2、L3，攜帶交叉污染率為(L1-L3)/(H3-L3)×100%，攜帶污染率小于或等于3%。

1.4.5參考范圍參照CLSI C28-A2文件[5]，選取60例體檢標(biāo)本(男、女各30例)，同批分別檢測各項目，計算均值、SD及結(jié)果落在正常參考范圍的例數(shù)與總標(biāo)本例數(shù)的比例，即R值，R>0.900則驗證結(jié)果適用。

1.5統(tǒng)計學(xué)處理運用Excel2003統(tǒng)計軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。

2　結(jié)　　果

2.1精密度驗證結(jié)果批內(nèi)、批間CV<8%，檢測結(jié)果均小于廠家提供的標(biāo)準(zhǔn)，提示該儀器具有較高的批內(nèi)和批間精密度。見表1。

表1　　FIB批內(nèi)、批間檢測不精密度檢測結(jié)果

2.2準(zhǔn)確度評價結(jié)果安徽省臨床檢驗中心回饋的FIB室間質(zhì)評結(jié)果顯示，5份FIB室間質(zhì)控品的檢測結(jié)果與靶值偏倚為1.18%～4.30%，結(jié)果均為“符合”。采用廠家提供的正常及病理值質(zhì)控血漿FIB，每個項目分別檢測3次，均值分別為2.87、1.12 g/L，結(jié)果均在廠家提供的質(zhì)控范圍之內(nèi)。見表2。

表2　　FIB準(zhǔn)確度評價結(jié)果

2.3線性范圍評價結(jié)果以理論值為X軸，實測值為Y軸進(jìn)行比較，結(jié)果偏差均在±8%之間，回歸方程Y=1.029 8X+0.040 8，r=0.997 0，r2≥0.975，斜率a為0.97～1.03，線性范圍為1.95～9.81 g/L。見表3和圖1。

2.4交叉污染率評價結(jié)果3次連續(xù)檢測的低濃度標(biāo)本結(jié)果分別是L1為1.68 g/L，L2 為 1.7g/L，L3為1.67 g/L，3次連續(xù)檢測的高濃度標(biāo)本結(jié)果分別是H1為9.84 g/L，H2 為 9.86 g/L，H3為9.85 g/L，交叉污染率為 0.11%。

表3　　FIB的線性范圍評價結(jié)果

注：a=1.029 8;r=0.997 0。

圖1　　　　　STAR Evolutio檢測FIB的實測值與理論值相關(guān)線性關(guān)系

2.5參考區(qū)間范圍20例健康體檢者FIB檢測結(jié)果，χ2=3.33，S=0.41 g/L，比率R(%)=92.0%，95%CI為(2.30～3.82)g/L，其結(jié)果在廠家推薦的參考區(qū)間(2.0～4.0)g/L范圍內(nèi)。

3　討　　論

FIB是血栓性疾病的一個獨立危險因子，也是反映血液高凝狀態(tài)的指標(biāo)之一，在診斷和評估糖尿病具有非常重要的臨床價值[6]。由于各地區(qū)各實驗室之間存在差異，應(yīng)定期對檢測儀器進(jìn)行性能評價，保證檢驗質(zhì)量的可靠性，也是開展實驗室認(rèn)可的重要措施。STAR Evolution全自動凝血分析儀可實現(xiàn)自動標(biāo)本加樣、自動稀釋樣品、自動攪拌試劑、重復(fù)測定、定標(biāo)、控溫、感應(yīng)試劑和樣品液面的自動化[7]。

本實驗室通過檢測FIB，對該儀器的性能進(jìn)行評價，結(jié)果顯示，STAR Evolution檢測FIB批內(nèi)精密度水平1、2的CV分別為1.95%和0.17%，批間精密度濃度的CV分別為3.27%和2.89%，均小于說明書要求的8%，提示STAR Evolution檢測FIB精密度良好。EQA是由外部獨立實驗機(jī)構(gòu)收集和反饋各實驗室上報結(jié)果，是評價實驗室檢測結(jié)果準(zhǔn)確性的重要依據(jù)[8]。本實驗室檢測的5份質(zhì)控品FIB結(jié)果與靶值偏倚介于1.18%～4.30%，評價結(jié)果均為“符合”，通過室間質(zhì)量評價，說明STAR Evolution有較高的準(zhǔn)確度。本組系列稀釋血漿標(biāo)本結(jié)果表明，該儀器檢測FIB的線性范圍為(1.95～9.8)g/L，r=0.997 0，證實線性較好，實際工作中遇到高于檢測范圍的標(biāo)本，儀器可自動對標(biāo)本稀釋倍數(shù)增加，獲得較寬的檢測范圍，滿足臨床需求[9]。交叉污染率評價驗證結(jié)果表明，交叉污染率僅為0.11%，結(jié)果準(zhǔn)確可靠。隨機(jī)抽取60例健康體檢者，獲得95%CI為(2.502～2.904)g/L，與說明書提供的參考區(qū)間基本一致。由于生活方式、習(xí)慣、飲食和儀器、方法、試劑、檢測條件等各種原因，應(yīng)當(dāng)建立本實驗室的參考區(qū)間，這將是下一步工作；同時也要重視檢驗前質(zhì)量控制。

綜上所述，STAR Evolution檢測FIB具有良好的方法學(xué)性能，可為臨床提供可靠、準(zhǔn)確的檢驗結(jié)果，很好地滿足臨床需要。

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10.3969/j.issn.1673-4130.2016.19.051

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