張麗麗，姚　蓓，粟　偉，游科輝

(重慶市第十三人民醫(yī)院檢驗科　400053)

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·臨床研究·

黏液型與非黏液型銅綠假單胞菌耐藥性分析

張麗麗，姚蓓，粟偉，游科輝

(重慶市第十三人民醫(yī)院檢驗科400053)

目的探討?zhàn)ひ盒团c非黏液型銅綠假單胞菌的耐藥性，指導(dǎo)臨床合理用藥。方法對該院2014～2015年分離的326株銅綠假單胞菌進(jìn)行藥敏試驗。結(jié)果326株銅綠假單胞菌中，黏液型銅綠假單胞菌114株(35%)，非黏液型銅綠假單胞菌212株(65%)；藥敏結(jié)果顯示，黏液型與非黏液型銅綠假單胞菌對美羅培南、亞胺培南、阿米卡星、哌拉西林、哌拉西林/舒巴坦較敏感，對頭孢噻肟、頭孢曲松耐藥。結(jié)論該院銅綠假單胞菌以非黏液型銅綠假單胞菌為主，與黏液型銅綠假單胞菌比較，非黏液型銅綠假單胞菌體外耐藥性較強(qiáng)。

黏液型銅綠假單胞菌；非黏液型銅綠假單胞菌；藥敏試驗

銅綠假單胞菌是一種常見的臨床條件致病菌，屬于非發(fā)酵革蘭陰性桿菌，根據(jù)菌落形態(tài)可分為黏液型與非黏液型[1-2]。黏液型銅綠假單胞菌可產(chǎn)生大量藻酸鹽，容易形成生物被膜，影響藥物的敏感性，導(dǎo)致藥敏結(jié)果與臨床療效不一致[3-4]?，F(xiàn)將該院分離的銅綠假單胞菌進(jìn)行耐藥分析，為臨床提供治療依據(jù)。

1　資料與方法

1.1一般資料326株銅綠假單胞菌從該院2014～2015年各臨床科室送檢的培養(yǎng)標(biāo)本中分離所得，其中黏液型銅綠假單胞菌114株，非黏液型銅綠假單胞菌212株。黏液型銅綠假單胞菌經(jīng)35 ℃培養(yǎng)18～24 h，血平板上生長為無色、露滴樣、邊緣不規(guī)則菌落，48 h后長大而融合、黏稠、成膠凍樣菌落。

1.2儀器與試劑西門子全自動微生物鑒定系統(tǒng)，BACTEC9050血培養(yǎng)儀，英國OXOID公司的藥敏紙片及杭州天和水解酪蛋白(M-H)瓊脂培養(yǎng)基。藥敏紙片包括美羅培南、亞胺培南、阿米卡星、妥布霉素、頭孢他啶、頭孢噻肟、哌拉西林、哌拉西林/舒巴坦、左氧氟沙星、環(huán)丙沙星、頭孢曲松、慶大霉素、氨曲南。

1.3標(biāo)準(zhǔn)菌株質(zhì)控菌株為大腸埃希菌ATCC25922、銅綠假單胞菌ATCC27853、金黃色葡萄球菌ATCC25923。

1.4藥敏試驗按照美國臨床和實驗室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(CLSI)2010年相關(guān)規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)判斷結(jié)果。

1.5統(tǒng)計學(xué)處理采用WHONET5.3統(tǒng)計軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計數(shù)資料使用百分率表示，組間比較應(yīng)用t檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2　結(jié)　　果

2.1菌株分離情況326株銅綠假單胞菌中，黏液型銅綠假單胞菌114株(35%)，非黏液型銅綠假單胞菌212株(65%)。114株黏液型銅綠假單胞菌中，有83株(72.81%)來源于痰培養(yǎng)標(biāo)本，21株(18.41%)來源于尿標(biāo)本，5株(4.39%)來源于血標(biāo)本，5株(4.39%)來源于膿液標(biāo)本；212株非黏液型銅綠假單胞菌中，有138株(65.10%)來源于痰標(biāo)本，56株(26.42%)來源于尿標(biāo)本，8株(3.76%)來源于血標(biāo)本，10株(4.72%)來源于膿液標(biāo)本。

2.2藥物敏感試驗326株銅綠假單胞菌對13種抗菌藥物進(jìn)行藥物敏感試驗。見表1。

表1　　326株銅綠假單胞菌對13種抗菌藥物的藥敏結(jié)果(%)

注：S表示敏感；R表示耐藥；中介未統(tǒng)計。

3　討　　論

銅綠假單胞菌是引起菌血癥、泌尿系統(tǒng)感染及多種慢性呼吸道疾病的重要病原菌，也是醫(yī)院感染的主要病原菌之一[5]。黏液型和非黏液型菌株表現(xiàn)出不同的致病性和抗菌藥物耐藥性，是目前細(xì)菌學(xué)中非常活躍的研究領(lǐng)域。

本研究分離的326株銅綠假單胞菌中，黏液型銅綠假單胞菌114株，占35%，明顯高于文獻(xiàn)[6]報道，其中有83株來源于痰標(biāo)本；非黏液型銅綠假單胞菌212株，有138株來源于痰標(biāo)本。提示該院以下呼吸道感染銅綠假單胞菌最為常見，與相關(guān)研究報道較一致[7]。

銅綠假單胞菌的耐藥機(jī)制復(fù)雜，主要與以下因素有關(guān)：(1)細(xì)菌產(chǎn)生抗菌活性酶，如金屬β-內(nèi)酰胺酶、氨基糖苷鈍化酶。(2)細(xì)菌改變藥物作用的靶位，如青霉素結(jié)合蛋白使DNA旋轉(zhuǎn)酶結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，從而逃避抗菌藥物的抗菌作用。(3)外膜通透性降低。(4)生物膜形成。(5)主動泵出系統(tǒng)等，其在銅綠假單胞菌多耐藥機(jī)制中起主導(dǎo)作用。

本研究結(jié)果顯示，黏液型銅綠假單胞菌對美羅培南、亞胺培南、阿米卡星、哌拉西林、哌拉西林/舒巴坦較敏感，敏感率分別為92.13%、91.24%、91.61%、90.22%、91.31%；非黏液型銅綠假單胞菌對美羅培南、亞胺培南、阿米卡星、哌拉西林、哌拉西林/舒巴坦較敏感，分別為88.41%、87.22%、80.13%、85.13%、87.92%，高于文獻(xiàn)[8]報道。妥布霉素、左氧氟沙星、環(huán)丙沙星的敏感率均在76.0%以上，而對頭孢噻肟、頭孢曲松耐藥。表1結(jié)果顯示，黏液型銅綠假單胞菌的體外敏感抗菌藥物較多，耐藥性較弱，相比之下，非黏液型銅綠假單胞菌耐藥性要強(qiáng)一些，與有關(guān)研究報道較一致[9]。由于藻酸鹽是黏液型銅綠假單胞菌形成生物被膜的主要成分，可使其免于被藥物清除，造成慢性反復(fù)性感染，導(dǎo)致體外藥物敏感試驗結(jié)果與臨床治療效果不一致，給臨床用藥帶來困難。近年來由于廣譜抗菌藥物、激素及免疫抑制劑的廣泛使用，銅綠假單胞菌對多種抗菌藥物快速產(chǎn)生耐藥性[10]。臨床經(jīng)驗證明，單一抗菌藥物對銅綠假單胞菌的治療不理想，很快出現(xiàn)耐藥株，致使治療失敗，說明臨床應(yīng)聯(lián)合用藥 。

本研究通過對黏液型及非黏液型銅綠假單胞菌的耐藥分析，為該院臨床醫(yī)師提供銅綠假單胞菌感染的治療依據(jù)，減少該菌對抗菌藥物的廣泛耐藥性。

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10.3969/j.issn.1673-4130.2016.19.049

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1673-4130(2016)19-2768-02

2016-03-14

2016-05-19)