沈利民

(江蘇省鹽城市大豐人民醫(yī)院檢驗(yàn)科　224100)

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·臨床研究·

出血熱抗體聯(lián)合外周血異型淋巴細(xì)胞檢測(cè)診斷流行性出血熱

沈利民

(江蘇省鹽城市大豐人民醫(yī)院檢驗(yàn)科224100)

目的探討出血熱抗體聯(lián)合外周血異型淋巴細(xì)胞檢測(cè)在流行性出血熱診斷中的應(yīng)用。方法選取該院出血熱患者155例，采用金標(biāo)法檢測(cè)出血熱抗體免疫球蛋白M(IgM)和免疫球蛋白G(IgG)，同時(shí)使用外周血涂片染色鏡檢分類異型淋巴細(xì)胞。 結(jié)果出血熱抗體陽(yáng)性患者153例，陽(yáng)性率98.7%。異型淋巴細(xì)胞患者152例，檢出率98.1%。結(jié)論出血熱抗體聯(lián)合外周血異型淋巴細(xì)胞檢測(cè)可明顯提高流行性出血熱診斷的準(zhǔn)確性和及時(shí)性，尤其對(duì)輕型和非典型更有診斷價(jià)值，為臨床診治提供可靠依據(jù)。

流行性出血熱；出血熱抗體；異型淋巴細(xì)胞

流行性出血熱(EHF)又稱腎綜合征出血熱(HFRS)，其病變可累及全身臟器，臨床癥狀復(fù)雜，合并癥較多，以高熱、休克、出血、急性腎衰竭為主要癥狀，延誤治療可導(dǎo)致生命危險(xiǎn)，因此對(duì)該病的及時(shí)、準(zhǔn)確診斷非常重要[1]。實(shí)驗(yàn)室檢查該病可見(jiàn)白細(xì)胞總數(shù)升高，出現(xiàn)異型淋巴細(xì)胞，血小板減少，尿蛋白陽(yáng)性，腎功能損害，血清特異性抗體陽(yáng)性等[2]。其中外周血涂片見(jiàn)異型淋巴細(xì)胞及血清出血熱抗體檢測(cè)在診斷中具有重要的指導(dǎo)作用?，F(xiàn)探討外周血涂片分類異型淋巴細(xì)胞及血清出血熱抗體聯(lián)合檢測(cè)的結(jié)果，報(bào)道如下。

1　資料與方法

1.1一般資料選取該院2012年4月至2016年3月收治的流行性出血熱患者155例，男102例，女53例。

1.2試劑漢坦病毒抗體檢測(cè)試劑盒(膠體金法)，廈門(mén)波生生物技術(shù)有限公司提供，瑞氏-姬姆薩復(fù)合染液，珠海貝索生物技術(shù)有限公司提供。

1.3方法(1)EDTA抗凝全血涂片干燥后，瑞氏-姬姆薩復(fù)合染液染色15 min，晾干后油鏡下分類200個(gè)白細(xì)胞，計(jì)算異型淋巴細(xì)胞百分比。(2)出血熱抗體檢測(cè)嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)操作。血清標(biāo)本采用標(biāo)本稀釋液1∶50稀釋，在反應(yīng)板加樣孔中加入稀釋好的標(biāo)本70 μL，20 min后觀察結(jié)果。結(jié)果判定：對(duì)照線出現(xiàn)紫紅色線，免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白G(IgG)處出現(xiàn)紫紅色線為陽(yáng)性；無(wú)紫紅色線為陰性。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)數(shù)資料以率表示，兩兩比較使用χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)　　果

2.1155例患者出血抗體檢測(cè)結(jié)果比較見(jiàn)表1。

表1　　155例出血熱抗體檢測(cè)結(jié)果比較

2.2外周血涂片異型淋巴細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果155例患者出血熱檢出異型淋巴細(xì)胞152例(98.1%)。異型淋巴細(xì)胞占10.0%以上在各型出血熱：輕型28例(93.3%)，中型65例(100.0%)，重型35例(100.0%)，危重型6例(100.0%)，非典型15例(93.8%)。另外輕型和非典型共有3例異型淋巴細(xì)胞比例，占5%～10%。各型間比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

3　討　　論

異型淋巴細(xì)胞是在病毒感染、藥物反應(yīng)、結(jié)締組織病、免疫系統(tǒng)強(qiáng)應(yīng)激狀態(tài)或過(guò)敏原等因素刺激下，淋巴細(xì)胞增生并發(fā)生形態(tài)變化，表現(xiàn)為胞體增大，胞質(zhì)量增多，嗜堿性增強(qiáng)，細(xì)胞核母細(xì)胞化[3]。異型淋巴細(xì)胞已被證實(shí)主要為多克隆T淋巴細(xì)胞，少數(shù)為B 淋巴細(xì)胞，EHF致病過(guò)程存在細(xì)胞免疫反應(yīng)，CD8+T細(xì)胞為主要參與細(xì)胞，因而異型淋巴細(xì)胞可為其診斷提供依據(jù)[4]。異型淋巴細(xì)胞常分為3個(gè)型別：Ⅰ型(空泡型)，Ⅱ型(不規(guī)則型)，Ⅲ型(幼稚型)[5]。本研究155例中98.1%的患者可見(jiàn)異型淋巴細(xì)胞，以Ⅱ型為最多，Ⅰ型次之，Ⅲ型最少，多數(shù)患者各型同時(shí)存在。本組有2例患者在發(fā)熱初期外周血分類以中性粒細(xì)胞增多為主，未見(jiàn)異型淋巴細(xì)胞，第2天復(fù)查時(shí)可見(jiàn)。有研究表明異型淋巴細(xì)胞大于10%有臨床意義[6]。本研究雖有3例，但比例不到10%,還有2例未見(jiàn)，但是結(jié)合其他檢查仍能為臨床診斷提供參考。本組結(jié)果顯示，異型淋巴細(xì)胞的比例和形態(tài)與病情輕重?zé)o相關(guān)性，與有關(guān)報(bào)道不一致[7]。異型淋巴細(xì)胞的出現(xiàn)與多種病毒感染有關(guān)，所以外周血涂片提示異型淋巴細(xì)胞增多時(shí)，必須鑒別診斷，以防誤診[4]。

出血熱抗體檢測(cè)方法有多種，金標(biāo)法是成熟的實(shí)驗(yàn)診斷技術(shù)，現(xiàn)已被廣泛應(yīng)用于臨床診斷和免疫抗體監(jiān)測(cè)，該方法簡(jiǎn)便、快速、不受條件限制，適合基層單位使用。與免疫熒光法比較，膠體金法檢測(cè)EHF抗體的靈敏性和特異性分別為96.71%和98.72%，符合率為97.66%[8]。本組患者有2例EHF抗體檢測(cè)始終為陰性，可能引起感染的出血熱病毒主要有漢坦病毒和漢城病毒等[9]。由于本組試劑盒只檢測(cè)漢坦病毒抗體，患者可能感染了其他病毒，還可能與免疫應(yīng)答機(jī)制有關(guān)[10]。本組2例外周血涂片均見(jiàn)異型淋巴細(xì)胞，有2 例發(fā)熱初期檢測(cè)EHF抗體陰性，第3天檢測(cè)EHF抗體IgM弱陽(yáng)性，所以對(duì)疑似患者要?jiǎng)討B(tài)復(fù)查EHF抗體。對(duì)臨床癥狀不典型患者，異型淋巴細(xì)胞和出血熱抗體也有較高的檢出率[11]。

綜上所述，異型淋巴細(xì)胞雖然不是EHF所特有，但有極高的陽(yáng)性率，金標(biāo)法檢測(cè)EHF抗體具有較高的靈敏性和特異性，所以兩者結(jié)合可提高HFRS準(zhǔn)確性和及時(shí)性，尤其對(duì)輕型和非典型出血熱更有臨床診斷價(jià)值。

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10.3969/j.issn.1673-4130.2016.19.048

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