何靜　何麗　張穎　王蕊

2012年至2015年呼吸道感染病原菌分布及耐藥性分析

何靜何麗張穎王蕊

目的：分析呼吸道感染患者痰標(biāo)本中病原菌分布及藥物敏感試驗(yàn)結(jié)果。方法：選擇2012年3月至2015年3月在本院就診及住院的呼吸道感染患者為研究對(duì)象，分離出病原菌標(biāo)本650株，進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)、鑒定和藥物敏感試驗(yàn)，分析結(jié)果。結(jié)果：檢出650株病原菌中，革蘭氏陰性菌325株，占50%，以銅綠假單胞菌、克雷伯氏菌及鮑氏不動(dòng)桿菌為主要致病菌。青霉素、頭孢哌酮及紅霉素耐藥率分別為98.6%、52.7%及87.2%，對(duì)萬古霉素及亞胺培南西司他丁鈉敏感，耐藥率分別為0和3.0%。結(jié)論：呼吸道感染以革蘭陰性桿菌為主，細(xì)菌對(duì)青霉素、頭孢哌酮及紅霉素等傳統(tǒng)抗生素耐藥率很高，臨床醫(yī)生不可再經(jīng)驗(yàn)性用藥，而要根據(jù)藥敏試驗(yàn)合理選用抗生素，減少細(xì)菌耐藥性的產(chǎn)生。

呼吸道感染；病原菌；耐藥性

近年來，由臨床分離的病原菌鮑曼不動(dòng)桿菌、銅綠假單胞菌和金黃色葡萄球菌所致的醫(yī)院呼吸道感染呈上升趨勢［1］，臨床上廣譜抗生素的使用率高、療程長、更換頻繁導(dǎo)致細(xì)菌耐藥性的發(fā)生率迅速上升。我國是抗生素濫用和細(xì)菌耐藥最嚴(yán)重的國家之一［2］，但細(xì)菌耐藥性具有時(shí)間性和地域特點(diǎn)，不同地區(qū)、不同時(shí)期醫(yī)院抗生素的使用及其細(xì)菌耐藥性存在差異［3］。

鑒于此，現(xiàn)對(duì)我院2012年至2015年度門診和住院呼吸系統(tǒng)感染患者病原菌菌群分布及其對(duì)抗生素的耐藥性進(jìn)行監(jiān)測和分析，指導(dǎo)臨床合理使用抗生素。

1　材料和方法

1.1標(biāo)本收集收集2012年3月至2015年3月本院門診及住院部送檢的痰標(biāo)本、咽拭子標(biāo)本分離出病原菌標(biāo)本650株。

1.2細(xì)菌培養(yǎng)及鑒定標(biāo)本采集及細(xì)菌培養(yǎng)按照《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》進(jìn)行。采用法國生物梅里埃公司VITEK-32全自動(dòng)細(xì)菌鑒定、藥敏分析儀及配套試劑，革蘭陰性桿菌和革蘭陽性球菌分別使用GNI、GPI鑒定卡，真菌使用YBC鑒定卡。

1.3藥敏試驗(yàn)采用K-B紙片擴(kuò)散法。藥敏操作與結(jié)果按照美國臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化研究所（CLSI）2005年出版的標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行。

1.4質(zhì)量控制定期用質(zhì)控菌監(jiān)測藥敏試驗(yàn)，結(jié)果均符合美國臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)（NationalCommittee forClinical Laboratory Standards，NCCLS）的規(guī)定范圍。

1.5數(shù)據(jù)分析全部藥敏結(jié)果采用世界衛(wèi)生組織（WHO）推薦的細(xì)菌耐藥性監(jiān)測軟件WHONET5.4進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理。

2　結(jié)果

2.1病原體構(gòu)成在650株病原菌中，革蘭氏陽性菌（G+）208株，占32%，其中最常見菌株為表皮葡萄球菌，其次為金黃色葡萄球菌和腸球菌。革蘭氏陰性菌（G-）325株，占50%，最常見的菌株為鮑曼不動(dòng)桿菌、銅綠假單胞菌、克雷伯氏菌。真菌52株（8%）。支原體65株（10%）。

2.2細(xì)菌耐藥性本次研究中青霉素對(duì)表皮葡萄球菌、金黃色葡萄球菌耐藥性＞98%，但對(duì)腸球菌效果好。萬古霉素對(duì)革蘭氏陽性球菌均敏感，耐藥率分別為0.0%。頭孢哌酮/舒巴坦、阿米卡星、亞胺培南對(duì)表皮葡萄球菌、金黃色葡萄球菌較敏感。見表1。革蘭氏陰性桿菌對(duì)亞胺培南/西司他丁、美羅培南的耐藥率最低，其次為頭孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦、阿米卡星，以往對(duì)G-療效較好的三代頭孢敏感率下降，青霉素類耐藥率＞82%，見表2。真菌的檢出率以白色念珠菌為主，對(duì)氟康唑和兩性霉素的敏感性較高，見表3。

表1　主要革蘭氏陽性桿菌對(duì)抗生素的耐藥率（%）

表2　主要革蘭氏陰性桿菌對(duì)抗生素的耐藥率（%）

表3　真菌對(duì)抗菌藥物耐藥率［株（%）］

3　討論

本研究結(jié)果顯示，呼吸道感染的病原菌以G-占優(yōu)勢，分離率為50%，病原菌排序前3位的為鮑曼不動(dòng)桿菌、銅綠假單胞菌和肺炎克雷伯菌。革蘭氏陽性菌以表皮葡萄球菌最多，這與近年來國內(nèi)外其他醫(yī)院報(bào)道基本一致［4］。細(xì)菌對(duì)抗生素產(chǎn)生耐藥性主要是通過滅活酶、膜通透性改變以及靶位改變等耐藥機(jī)理，造成對(duì)大多數(shù)抗生素耐藥。在本研究分離的菌株中占第一位的鮑曼不動(dòng)桿菌極易經(jīng)結(jié)合方式獲得耐藥性，對(duì)β-內(nèi)酰胺酶類抗生素產(chǎn)生β-內(nèi)酰胺酶，具有較高耐藥性，常常引起下呼吸道感染。銅綠假單胞菌和克雷伯氏菌也是臨床上最常見的呼吸道感染病原菌，且耐藥率較高，其耐藥機(jī)理除了能產(chǎn)生β-內(nèi)酰胺酶外，還與菌體外膜通透性降低以及菌體蛋白結(jié)構(gòu)和功能變化有關(guān)［5］。這三種常見革蘭陰性菌對(duì)三代頭孢類抗生素和β-內(nèi)酰胺酶類抗生素不敏感，而對(duì)亞胺培南/西司他丁、美羅培南的耐藥率很低，其次對(duì)頭孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦和阿米卡星的耐藥率較低，它們的耐藥機(jī)制主要是細(xì)菌表面形成物理屏障降低了抗生素的滲透性和產(chǎn)生超廣譜β-內(nèi)酰胺酶。

本次調(diào)查的革蘭氏陽性菌中主要以表皮葡萄球菌為主，其次為金黃色葡萄球菌和腸球菌，葡萄球菌對(duì)萬古霉素耐藥率是0，因此萬古霉素可作為表皮葡萄球菌和金黃色葡萄球菌感染的首選藥物。對(duì)頭孢哌酮/舒巴坦、亞胺培南和阿米卡星耐藥率較低。青霉素類和大環(huán)內(nèi)酯類抗菌藥物呈高度耐藥。葡萄球菌的耐藥性是因?yàn)閙ecA基因編碼的青霉素結(jié)合蛋白PBP2a產(chǎn)生［6］。分析耐藥菌株產(chǎn)生的原因可能與廣譜抗生素的濫用導(dǎo)致細(xì)菌變形有關(guān)，也可能與激素的不規(guī)范應(yīng)用有很大關(guān)系。真菌的檢出率以白色念珠菌為主，主要原因可能是菌群失調(diào)，導(dǎo)致真菌的二重感染，對(duì)氟康唑和兩性霉素保持較高的敏感性。支原體引起的呼吸道感染未做藥敏試驗(yàn)。

本研究結(jié)果與國內(nèi)其他地區(qū)細(xì)菌感染分布及耐藥結(jié)果相近［7］，可見呼吸道感染以革蘭陰性桿菌為主。通過本研究發(fā)現(xiàn)引起呼吸道感染的細(xì)菌對(duì)傳統(tǒng)抗生素耐藥率很高，這提示臨床醫(yī)生不可再經(jīng)驗(yàn)性用藥，而是要根據(jù)藥敏試驗(yàn)合理選用抗生素，減少細(xì)菌耐藥性的產(chǎn)生。同時(shí)要求細(xì)菌工作者加強(qiáng)與臨床醫(yī)生的溝通和合作，充分發(fā)揮細(xì)菌學(xué)在醫(yī)學(xué)診斷和治療中的重要作用。

［1］丁雅萍.呼吸道標(biāo)本鮑曼不動(dòng)桿菌和嗜麥芽窄食單胞菌的檢出及耐藥分析［J］.中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2012，22（1）:185-186.

［2］牛小萍.當(dāng)前細(xì)菌抗藥性分析［J］.河南外科學(xué)雜志，2012，18（2）:73-75.

［3］陳風(fēng)軍.近2年本院臨床分離常見耐藥菌的耐藥監(jiān)測分析［J］.國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2010，31（8）:877-879.

［4］王德，曹玉妍，江嬋娣，等.2004-2009年醫(yī)院感染細(xì)菌分布及耐藥性變遷［J］.中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2011，21（14）:3056-3058.

［5］夏云，曹何，張曉恒，等.革蘭陰性桿菌對(duì)碳青霉烯類抗生素耐藥率的變化及用量的關(guān)系［J］.臨床檢驗(yàn)雜志，2010，28（3）:237-238.

［6］劉蔡植.微生物學(xué)和微生物學(xué)檢驗(yàn)［M］.北京:人民衛(wèi)生出版社，1996:264.

［7］李婧，郭月玲，魏海靜.老年患者下呼吸道感染病原菌分布及耐藥性分析［J］.中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2011，21（8）:2063-2064.

Distribution and drug resistancemonitoring of pathogen in patientsw ith respiratory tract infections from 2015 to 2012

He Jing1，He Li2，Zhang Ying2，Wang Rui2.1.Department of Laboratory Medicine，Traditional Chinese Medicine Hospital of Lanzhou City，Lanzhou 730050，China；2.Department ofNeurological Rehabilitation，Gansu provincial Corps Hospital ofChinese People's Armed Police Force，Lanhou 730050，China

He Li，E-mail:1295055381@qq.com

Objective:We analyze the distribution and drug sensitivity test resultsof pathogen in sputum samples from patientswith espiratory tract infections.Methods:Patientswith respiratory tract infectionswere selected outpatients and inpatients in the hospital from March 2012 to March 2015，and 650 strains ofpathogen were isolated and entered into bacterial culture dentification and drug sensitive test，esultswasanalysed.Results:65 strainsofpathogen were detected，325 strainswere negative gram bacteria，accounting for 50%.Pseudomonasaeruginosa，klebsiella and baumanniiacinetobacter were themain pathogen.Resistance rate of penicillin，cefoperazone and erythromycin were 98.6%，52.7%and 87.2%respectively.Detected negativegram bacteriawassensitive to vancomycin and imipenem-cilastation sodium. The resistance ratewas 0 and 3.0%，respectively.Conclusions:Themain pathogen in patientswith respiratory tract infection are gram negaive bacteria，and resistance rate of these bacteria to penicillin，cefoperazone，erythromycin and other traditionalantibiotic are high.Clinicians hould notbeempiric，butselectantibiotics reasonablybased on thedrugsensitivity test to reducebacterial resistance.

respiratory tractinfection；pathogen；drug resistance

A

1004-2725（2016）06-0409-03

730050甘肅 蘭州，蘭州市中醫(yī)醫(yī)院檢驗(yàn)科（何靜）；730050甘肅 蘭州，武警甘肅總隊(duì)醫(yī)院內(nèi)一科（何麗、張穎、王蕊）

何麗，E-mail:1295055381@qq.com