郭元晟，靳 鵬

（1.錫林郭勒職業(yè)學(xué)院，內(nèi)蒙古 錫林浩特 026000；2.河北省灤平縣農(nóng)牧局，河北 灤平 068250）

酵母硒對烏珠穆沁羊免疫球蛋白及細胞因子的影響

郭元晟1，靳 鵬2

（1.錫林郭勒職業(yè)學(xué)院，內(nèi)蒙古 錫林浩特 026000；2.河北省灤平縣農(nóng)牧局，河北 灤平 068250）

［目的］通過飼養(yǎng)試驗研究日糧中添加酵母硒對烏珠穆沁羊免疫球蛋白及關(guān)鍵細胞因子的影響，為合理確定內(nèi)蒙古錫林郭勒地區(qū)烏珠穆沁羊日糧中酵母硒的適宜添加量以及酵母硒在該地區(qū)肉羊養(yǎng)殖中的推廣使用提供理論依據(jù)。［方法］采用單因子隨機試驗設(shè)計，將240只健康烏珠穆沁羯羊隨機分成4組（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組）。其中，Ⅰ組為對照組，日糧中添加無機硒（亞硒酸鈉）0.3 mg/kg（DM基礎(chǔ)），其他3組為酵母硒組，日糧中分別添加0.3、0.6、0.9 mg/kg（DM基礎(chǔ)）的酵母硒。預(yù)飼期15 d，正飼期60 d。［結(jié)果］在日糧中添加酵母硒能夠顯著提高烏珠穆沁羊血清中免疫球蛋白IgM、IgG、IgA以及細胞因子IL-1、IL-2及IL-6的含量。［結(jié)論］在烏珠穆沁羊日糧中添加酵母硒能顯著提高烏珠穆沁羊的免疫水平，綜合飼養(yǎng)成本及免疫增強效果，以添加0.6 mg/kg（DM基礎(chǔ)）效果最佳。

酵母硒；烏珠穆沁羊；免疫功能；細胞因子

牲畜的各種疾病給畜牧業(yè)生產(chǎn)帶來巨大的經(jīng)濟損失。多年以來，人們通過在飼料中添加一定量的抗生素來減少牲畜疾病的發(fā)生。但是，隨著使用抗生素添加劑的弊端逐漸被人們所認識，研究人員開始致力于開發(fā)安全可靠的飼料添加劑以提升動物的健康水平，從而提高動物生產(chǎn)性能。免疫球蛋白普遍存在于血液、組織液、外分泌液中，具有抗菌、抗病毒、激活補體等生物學(xué)功能，可以體現(xiàn)動物免疫功能的強弱。其中IgG、IgM、IgA是動物血清中重要的免疫球蛋白，具有抗菌、抗病毒、抗腫瘤及中和毒素等作用［1］。 白細胞介素（interleukin，IL）是由免疫系統(tǒng)、造血系統(tǒng)或炎癥反應(yīng)中的活化細胞產(chǎn)生的細胞因子，對機體免疫應(yīng)答、炎癥反應(yīng)、神經(jīng)—內(nèi)分泌效應(yīng)等有重要的影響。白介素1（IL-1）來自激活的單核巨噬細胞、上皮細胞與內(nèi)皮細胞，能促進T細胞的激活，是造血生長因子的輔助因子。白介素2（IL-2）由T細胞產(chǎn)生，可以引起T細胞增殖并維持T細胞在體外的持續(xù)生長，故稱為T細胞生長因子。白介素6（IL-6）是機體為保持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定而分泌的一種多功能細胞因子，在B細胞生長分化時起關(guān)鍵作用，故稱為B細胞生長因子。因此，血清免疫球蛋白及細胞因子水平是評價機體免疫功能的重要指標，可以反映機體的免疫功能狀態(tài)［2］。大量研究證實，膳食或動物飼料中添加礦物質(zhì)元素硒，對人或動物機體具有營養(yǎng)及免疫調(diào)節(jié)作用［3］。該研究旨在通過飼養(yǎng)試驗研究日糧中添加酵母硒對烏珠穆沁羊免疫球蛋白及關(guān)鍵細胞因子的影響，為合理確定內(nèi)蒙古錫林郭勒地區(qū)烏珠穆沁羊日糧中酵母硒的適宜添加量以及酵母硒在該地區(qū)肉羊養(yǎng)殖中的推廣使用提供依據(jù)。

表1 基礎(chǔ)日糧配方及營養(yǎng)水平

表2 烏珠穆沁羊血清中IgG含量測定結(jié)果 g/L

表3 烏珠穆沁羊血清中IgM含量測定結(jié)果 g/L

表4 烏珠穆沁羊血清中IgA含量測定結(jié)果 g/L

1 材料與方法

1.1 實驗動物 5～6月齡的健康烏珠穆沁羊240只，體重相近。

1.2 試驗設(shè)計 采用單因子隨機試驗設(shè)計，將240只健康烏珠穆沁羯羊隨機分成4組（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組），每組6個重復(fù)，每個重復(fù)10只。其中Ⅰ組為對照組，日糧中添加無機硒（亞硒酸鈉）0.3 mg/kg（DM基礎(chǔ)），其他3組為酵母硒組，日糧中分別添加0.3、0.6、0.9 mg/kg（DM 基礎(chǔ)）的酵母硒。 預(yù)飼期 15 d，正飼期60 d。

1.3 飼養(yǎng)管理及試驗日糧 實驗羊只進欄前對羊舍進行全面消毒，預(yù)飼期間對羊只進行健康檢查、驅(qū)蟲、疫苗接種等。每天清掃圈舍，以保持圈內(nèi)清潔，整個圈舍采取自然通風(fēng)，所有圈舍進行不定期消毒。實驗羊只由專人管理，試驗期肉羊自由采食，自由飲水。試驗日糧組成參照國內(nèi)肉羊飼養(yǎng)標準NY/T 816-2004，并做適當(dāng)調(diào)整，其配方及營養(yǎng)水平見表1。

1.4 樣品采集 在正式試驗第1、30、60天清晨，每組每個重復(fù)隨機選取2只羊，每個處理組共12只，進行靜脈采血，離心制備血清，置于-70℃超低溫冰箱中凍存?zhèn)溆谩?/p>

1.5 測定指標及方法 血清中IgG、IgM、IgA含量采用試劑盒法測定，試劑盒購自南京建成生物有限公司，具體操作按照說明書進行。血清中IL-1、IL-2及IL-6含量利用放免法測定。

1.6 數(shù)據(jù)處理 試驗數(shù)據(jù)利用SAS 9.0軟件中的One-way ANOVA統(tǒng)計程序進行統(tǒng)計分析。P＜0.05表示各處理間差異顯著。

表5 烏珠穆沁羊血清中IL-1含量測定結(jié)果 ng/mL

表6 烏珠穆沁羊血清中IL-2含量測定結(jié)果 ng/mL

2 結(jié)果與分析

2.1 酵母硒對烏珠穆沁羊血清中IgG含量的影響由表2可知，添加無機硒和酵母硒對烏珠穆沁羊血清中IgG的含量均有不同程度的提高作用。在試驗第30天和第60天時，Ⅲ組、Ⅳ組羊只血清中的IgG含量均顯著高于Ⅰ組（P＜0.05），Ⅱ組、Ⅲ組和Ⅳ組之間差異不顯著（P＞0.05），以添加劑量為0.6 mg/kg（DM基礎(chǔ)）的Ⅲ組效果最好。

2.2 酵母硒對烏珠穆沁羊血清中IgM含量的影響由表3可知，添加無機硒和酵母硒對烏珠穆沁羊血清中IgM的含量均有不同程度的提高作用。在試驗第30天時，Ⅲ組、Ⅳ組羊只血清中的IgM含量均顯著高于Ⅰ組（P＜0.05），Ⅱ組、Ⅲ組和Ⅳ組之間差異不顯著（P＞0.05）；在試驗第60天時，3個酵母硒添加組羊只血清中的IgM含量均顯著高于Ⅰ組 （P<0.05），Ⅱ組、Ⅲ組和Ⅳ組之間差異不顯著（P＞0.05），以添加劑量為0.6 mg/kg（DM基礎(chǔ)）的Ⅲ組效果最好。

2.3 酵母硒對烏珠穆沁羊血清中IgA含量的影響由表4可知，添加無機硒和酵母硒對烏珠穆沁羊血清中IgA的含量均有不同程度的提高作用。在試驗第30天時，Ⅲ組羊只血清中的IgA含量顯著高于Ⅰ組（P<0.05）；在試驗第60天時，Ⅲ組、Ⅳ組羊只血清中的IgA含量均顯著高于Ⅰ組 （P＜0.05），Ⅱ組、Ⅲ組和Ⅳ組之間差異不顯著（P＞0.05），以添加劑量為0.6 mg/kg（DM基礎(chǔ)）的Ⅲ組效果最好。

2.4 酵母硒對烏珠穆沁羊血清中IL-1含量的影響 由表5可知，添加無機硒和酵母硒對烏珠穆沁羊血清IL-1的含量均有不同程度的提高作用。在試驗第30天和第60天時，Ⅲ組和Ⅳ組羊只血清中的IL-1含量均顯著高于Ⅰ組（P＜0.05），Ⅱ組、Ⅲ組和Ⅳ組差異不顯著（P＞0.05），以添加劑量為0.9 mg/kg（DM基礎(chǔ)）的Ⅳ組效果最好。

2.5 酵母硒對烏珠穆沁羊血清中IL-2含量的影響 由表6可知，添加無機硒和酵母硒對烏珠穆沁羊血清IL-2的含量均有不同程度的提高作用。在試驗第30天時，Ⅱ組、Ⅲ組和Ⅳ組羊只血清中的IL-2 含量均顯著高于Ⅰ組（P＜0.05），Ⅱ組、Ⅲ組和Ⅳ組差異不顯著（P＞0.05）；在試驗第60天時，Ⅲ組和Ⅳ組羊只血清中的IL-2含量均顯著高于Ⅰ組（P＜0.05），Ⅲ組和Ⅳ組差異不顯著（P＞0.05），以添加劑量為0.6 mg/kg（DM基礎(chǔ)）的Ⅲ組效果最好。

2.6 酵母硒對烏珠穆沁羊血清中IL-6含量的影響 由表7可知，添加無機硒和酵母硒對烏珠穆沁羊血清IL-6的含量均有不同程度的提高作用。在試驗第30天和第60天時，3個酵母硒添加組羊只血清中的IL-6含量均顯著高于Ⅰ組 （P＜0.05），Ⅱ組、Ⅲ組和Ⅳ組差異不顯著（P＞0.05），以添加劑量為0.9 mg/kg（DM基礎(chǔ)）的Ⅳ組效果最好。

表7 烏珠穆沁羊血清中IL-6含量測定結(jié)果 ng/mL

3 討論

硒對動物機體的免疫調(diào)節(jié)有重要作用，其參與調(diào)節(jié)T淋巴細胞、B淋巴細胞及非特異性免疫效應(yīng)細胞的功能。關(guān)于硒對反芻動物免疫機能的影響報道并不一致。黃志堅等［4］在奶牛飼料中添加富硒酵母，隨著補硒天數(shù)的增加，補硒各組奶牛血液中淋巴細胞的轉(zhuǎn)化能力和T淋巴細胞百分率顯著增多。汪傳松等［5］研究表明，引用人工硒茶5周后，外周血淋巴細胞轉(zhuǎn)化率及IgM水平都有明顯提高。雒國彬等［6］報道，隨著酵母硒添加量的提高，奶牛血清IgM、IgG和IgA的含量呈先升高后降低的趨勢。Swecker等［7］研究發(fā)現(xiàn)，奶牛補硒后可增加初乳及犢牛血清中的IgG水平，但對IgM無顯著影響。王傳蓉等［8］報道，補硒可使母牛分娩后12 h血清中的IgM、IgG含量顯著提高，且IgA的含量也有所增加。He等［9］報道，補硒可以提高慢性肝炎病人外周血單核細胞分泌IL-2的能力。Safir等［10］研究表明，補硒可以促進巨噬細胞分泌IL-1和IL-6。倪麗麗［11］研究發(fā)現(xiàn)，在奶牛日糧中添加有機硒，可使其血清中的IgM、IgG、IgA、IL-1及IL-2含量顯著提高。該研究結(jié)果顯示，日糧中添加一定量的酵母硒能夠顯著提高烏珠穆沁羊血清中 IgM、IgG、IgA、IL-1、IL-2及IL-6的含量，這與前人大多數(shù)的研究結(jié)果是一致的。

4 結(jié)論

在烏珠穆沁羊日糧中添加酵母硒能顯著提高烏珠穆沁羊的免疫水平，綜合飼養(yǎng)成本及免疫增強效果，以添加量為0.6 mg/kg（DM基礎(chǔ)）效果最佳。

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Effect of Dietary Supplementation of Selenium-enriched Yeast on Immunoglobulin and Cytokine of Ujumqin Sheep

GUO Yuan-sheng1，JIN Peng2
（1.Xilingol Vocational College，Xilinhot 026000，China；2.Agricultural and Animal Husbandry Bureau of Luanping County of Hebei Province，Luanping 068250，China）

［Objective］ In order to rationally determine the optimal supplementation level of Selenium-enriched Yeast in diet of Ujumqin Sheep in Xilingol region of Inner Mongolia and to provide theoretical basis for the promotion and application of Selenium-enriched Yeast in local mutton sheep industry,the effect of dietary supplementation of Selenium-enriched yeast on immunoglobulin and key cytokine of Ujumqin Sheep was evaluated in this study. ［Methods］ The experiment was conducted by randomized design with a single factor.A total of 240 healthy wether of Ujumqin Sheep were included in this study and were randomly divided into 4 groups （Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ group）.The groupⅠwas served as control group,of which the diet was supplemented with 0.3 mg/kg of inorganic selenium （sodium selenite，DM basis）.The Ⅱ,Ⅲ and Ⅳ groups were served as experimental groups,of which the diet were supplemented with 0.3,0.6,0.9 mg/kg of Selenium-enriched Yeast （DM basis）.The pre-feeding period lasted for 15 d and the formal-feeding period lasted for 60 d. ［Results］ The serum content of IgM,IgG,IgA and IL-1,IL-2,IL-6 of Ujumqin Sheep were significantly increased when their diet was supplemented with Selenium-enriched yeast. ［Conclusion］ The dietary supplementation of Selenium-enriched yeast was able to enhance the immunity function of Ujumqin Sheep.In view of the feeding cost and immunopotentiation effect,supplementation level of 0.6 mg/kg Selenium-enriched yeast（DM basis） in diet was optimal and recommended.

Selenium-enriched yeast；Ujumqin Sheep；immunity function；cytokine

S816.72；S826.5

A文章順序編號1672-5190（2016）03-0039-03

2016－01－24

郭元晟（1982—），男，講師，博士，主要研究方向為動物營養(yǎng)與飼料科學(xué)。

（責(zé)任編輯：趙俊利）