徐雨軍,陸春良,崔桂友,劉向農(nóng)

(1.揚(yáng)州大學(xué)旅游烹飪學(xué)院,江蘇揚(yáng)州 225127;2.揚(yáng)州大學(xué)測(cè)試中心,江蘇揚(yáng)州 225009)

?

超聲輔助提取-高效液相色譜法測(cè)定聚乙烯食品包裝袋中5種酚類化合物

徐雨軍1,2,陸春良2,*,崔桂友1,劉向農(nóng)2

(1.揚(yáng)州大學(xué)旅游烹飪學(xué)院,江蘇揚(yáng)州 225127;2.揚(yáng)州大學(xué)測(cè)試中心,江蘇揚(yáng)州 225009)

建立了超聲輔助提取和高效液相色譜法結(jié)合的方法,對(duì)聚乙烯食品包裝袋中的5種酚類化合物進(jìn)行提取、離心濃縮、檢測(cè)。對(duì)超聲輔助提取方法中溶脹劑選擇、溶脹劑與溶劑比例、超聲時(shí)間、超聲后浸泡時(shí)間等進(jìn)行優(yōu)化,最終選擇溶脹劑為環(huán)己烷,溶脹劑環(huán)己烷與溶劑甲醇比例為3∶7(v/v),超聲時(shí)間25 min,超聲后浸泡時(shí)間2 h。樣品分析采用Agilent Eclipse Plus C18色譜柱(2.1 mm×150 mm,5 μm),流動(dòng)相甲醇和水(含0.1%甲酸,v/v)梯度洗脫,流速為0.4 mL/min,紫外檢測(cè)波長(zhǎng)280 nm。結(jié)果顯示:5種酚類化合物在其線性范圍內(nèi)線性關(guān)系良好(R2≥0.9995),方法的定量限(S/N=10)為0.25～0.40 mg/kg。125、250、500 mg/kg添加水平的回收率為81.2%～99.1%,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(n=3)為1.74%～4.87%。該方法前處理簡(jiǎn)單,回收率較高,精密度好,適用于聚乙烯食品包裝袋中5種酚類化合物的檢測(cè)。

高效液相色譜,超聲輔助提取,酚類化合物,聚乙烯,食品包裝

隨著生活水平的提高,食品安全問(wèn)題成為關(guān)注的熱點(diǎn)。環(huán)境雌激素對(duì)人類、環(huán)境和生態(tài)的影響受到世界范圍的關(guān)注,而酚類環(huán)境激素是最為常見(jiàn)的環(huán)境雌激素之一,酚類有害物質(zhì)可以通過(guò)直接接觸或食物鏈進(jìn)入生物體,影響動(dòng)物行為和精神活動(dòng)[1]、損傷DNA并誘導(dǎo)腫瘤[2]、干擾細(xì)胞的有絲分裂和免疫功能[3]、影響生殖發(fā)育[4]等。塑料由于其良好的性能和低廉的價(jià)格已經(jīng)廣泛應(yīng)用于食品包裝,但在塑料包裝與食品長(zhǎng)時(shí)間接觸過(guò)程中,對(duì)人類健康和環(huán)境會(huì)造成一定程度的危害[5]。

雙酚A(BPA)是一種重要的化工原料,添加雙酚A的塑料具有輕巧、耐用和防沖擊性等特點(diǎn)[6]。2,6-二叔丁基對(duì)甲酚(BHT)和特丁基對(duì)苯二酚(TBHQ)是兩種通用的酚類抗氧化劑。已有研究表明,長(zhǎng)期過(guò)量食用含有BHT的食品,會(huì)對(duì)身體有較大的毒副作用,對(duì)人體肝、脾、肺等均有不利的影響[7],TBHQ因具有一定的急性毒性和慢性致癌作用而被限制使用[8]。2,4-二叔丁基酚(24DTBP)和2,6-二叔丁基酚(26DTBP)在制藥、化纖和橡膠行業(yè)中被廣泛地用作中間媒介,用于制備抗氧化劑,抗紫外劑,嚴(yán)重危害人體健康[9]。

因此,很有必要對(duì)市場(chǎng)上塑料包裝的酚類化合物含量進(jìn)行研究并進(jìn)行安全性評(píng)價(jià)。目前測(cè)定酚類化合物的方法主要有分光光度法[10]、氣相色譜[11]、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法[12]、高效液相色譜法[13-15]、液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用[16]等。常用的提取方法有索氏提取法[12]、超聲提取法(UAE)[9]、加速溶劑萃取法(ASE)[17]、超臨界流體萃取法(SFE)[18]等。其中ASE、SFE等提取效果較好,但是儀器昂貴,使用不普及。傳統(tǒng)索氏提取時(shí)間較長(zhǎng),抗氧化劑損失較多。本實(shí)驗(yàn)最終選擇設(shè)備簡(jiǎn)單易得,提取時(shí)間較短的超聲輔助萃取。

本實(shí)驗(yàn)對(duì)5種具有代表性的酚類化合物同時(shí)進(jìn)行測(cè)定,采用超聲輔助法對(duì)樣品進(jìn)行提取,離心濃縮儀對(duì)提取液進(jìn)行低溫濃縮,減少了抗氧化劑等的損失。高效液相色譜法測(cè)定提取液,利用梯度洗脫達(dá)到5種組分的完全分離,利用質(zhì)譜檢測(cè)器信號(hào)排除假陽(yáng)性結(jié)果。前處理簡(jiǎn)單、快速,定性定量準(zhǔn)確,適用于塑料包裝的衛(wèi)生監(jiān)督檢測(cè)工作。

1　材料與方法

1.1材料與儀器

雙酚A、2,6-二叔丁基對(duì)甲酚、特丁基對(duì)苯二酚、2,4-二叔丁基酚、2,6-二叔丁基酚 分析純購(gòu)自ALaddin公司;甲醇、二氯甲烷、正己烷、環(huán)己烷 色譜純購(gòu)自Dikma公司;實(shí)驗(yàn)用水均為三蒸水。

陽(yáng)性聚乙烯模擬保鮮膜定制于某塑料廠,厚度0.1 mm,BPA、TBHQ、BHT、24DTBP、26DTBP添加量均為0.1%(質(zhì)量分?jǐn)?shù))。其中24DTBP、26DTBP添加失敗,制作過(guò)程中高溫導(dǎo)致部分揮發(fā),添加的質(zhì)量分?jǐn)?shù)不準(zhǔn)確,但BHT結(jié)構(gòu)性質(zhì)與其相似,可代表這兩種物質(zhì);實(shí)際檢測(cè)樣品取自各大超市具有代表性的聚乙烯保鮮膜,聚乙烯類食品包裝袋等。

Agilent 6460液質(zhì)聯(lián)用系統(tǒng)、Agilent Eclipse Plus C18色譜柱(2.1 mm×150 mm,5 μm)美國(guó)Agilent公司;CHRIST RVC 2-25 CD plus離心濃縮儀北京五洲東方科技發(fā)展有限公司;Sartorius BSA22S-CW(220 g/0.1 mg)電子天平賽多利斯科學(xué)儀器(北京)有限公司;BRANSON B-321超聲波清洗儀美國(guó)必能信超聲波(亞太)有限公司;優(yōu)普UPH-II-5T超純水機(jī)成都超純有限公司。

1.2標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制及標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

稱取5種標(biāo)準(zhǔn)品各(0.1±0.01) g(準(zhǔn)確到0.0001 g),分別轉(zhuǎn)移至100 mL容量瓶中,加入甲醇溶解并定容至100 mL,制成1000 mg/L的單標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)溶液。再稱取5種標(biāo)準(zhǔn)品各(0.1±0.01) g(準(zhǔn)確到0.0001 g),轉(zhuǎn)移至同一個(gè)100 mL容量瓶中,加入甲醇溶解并定容至100 mL,制成1000 mg/L的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液。標(biāo)準(zhǔn)溶液置于4 ℃冰箱中避光保存,使用時(shí)稀釋成所需的濃度。

取單標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)溶液稀釋至50 mg/L,依次上機(jī),確定保留時(shí)間?；鞓?biāo)標(biāo)準(zhǔn)溶液分別稀釋至100、50.0、25.0、12.5、6.25、3.13、1.00 mg/L,各取1 mL移入進(jìn)樣瓶中準(zhǔn)備上機(jī),每個(gè)標(biāo)樣重復(fù)進(jìn)樣2針。

1.3高效液相色譜條件

Agilent Eclipse Plus C18色譜柱(2.1 mm×150 mm,5 μm);流動(dòng)相A相為水(含0.1%甲酸),B相為甲醇,柱溫30 ℃。梯度洗脫:0.00～5.00 min,40%～90% B;5.00～10.00 min,90% B;10.00～10.10 min,90%～40% B;10.10～15.00 min,40% B。流速為0.4 mL/min,進(jìn)樣量10 μL,紫外檢測(cè)波長(zhǎng)280 nm。

1.4實(shí)驗(yàn)方法

1.4.1提取溶劑的選擇參考姚幫本等[19-20]等實(shí)驗(yàn)中溶劑的選擇,本實(shí)驗(yàn)選取甲醇作為溶劑,同時(shí)選取了水,二氯甲烷,正己烷,環(huán)己烷4種物質(zhì)作為溶脹劑,將4種溶脹劑分別與甲醇以1∶4的體積比混合[19],編號(hào)A、B、C、D。將剪碎后的模擬保鮮膜樣品各稱取四份(1±0.01) g(準(zhǔn)確到0.0001 g)分別加入4個(gè)50 mL碘量瓶中,依次向碘量瓶中加入25 mL提取液A、B、C、D。蓋緊瓶塞,移至避光處,浸泡24 h。用甲醇溶液少量多次蕩洗洗碘量瓶,蕩洗3次,每次3 mL。經(jīng)紗布過(guò)濾倒入50 mL離心管中,合并濾液。將離心管放入離心濃縮儀中25 ℃、15 mbar、1300 r/min條件下離心濃縮至近干,氮?dú)獯蹈?。?zhǔn)確加入1000 μL甲醇溶液復(fù)溶,旋渦振蕩2 min。用針頭式過(guò)濾器過(guò)0.22 μm尼龍濾膜,裝入2 mL進(jìn)樣瓶中,標(biāo)記,4 ℃避光保存,待測(cè)。實(shí)驗(yàn)重復(fù)3個(gè)平行,取平均值。

1.4.2提取液中溶脹劑比例的選擇樣品各稱取(1±0.01) g(準(zhǔn)確到0.0001 g)分別移入1～8號(hào)碘量瓶中,依次加入甲醇環(huán)己烷混合提取液25 mL,參考李浩峰[19]實(shí)驗(yàn)優(yōu)化結(jié)果,環(huán)己烷比例依次為5%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、50%,移至避光處浸泡24 h。重復(fù)實(shí)驗(yàn)1.4.1中蕩洗,合并濾液,濃縮,復(fù)溶,過(guò)濾膜等步驟,裝瓶供高效液相色譜測(cè)定。實(shí)驗(yàn)重復(fù)3個(gè)平行,取平均值。

1.4.3超聲時(shí)間的選擇樣品各稱取(1±0.01) g(準(zhǔn)確到0.0001 g)分別加入1～8號(hào)碘量瓶中,加環(huán)己烷甲醇分散液(v/v=3∶7)25 mL,依次超聲5、10、15、20、25、30、45、60 min,總提取時(shí)間(超聲時(shí)間加靜置浸泡時(shí)間)1 h條件下,將提取液經(jīng)紗布過(guò)濾倒入50 mL離心管中,重復(fù)1.4.1中蕩洗,合并濾液,濃縮,復(fù)溶,過(guò)濾膜,裝瓶供高效液相色譜測(cè)定。實(shí)驗(yàn)重復(fù)3個(gè)平行,取平均值。

1.4.4超聲后浸泡時(shí)間的選擇稱取樣品(1±0.01) g(準(zhǔn)確到0.0001 g)移入50 mL碘量瓶中,加入環(huán)己烷甲醇分散液(V/V=3∶7)25 mL,超聲25 min,移至避光處,取樣時(shí)間為0、0.5、1、2、3、4、24 h,每次取樣0.25 mL,分別裝入離心管中,編號(hào)1～7。將1～7號(hào)離心管重復(fù)1.4.1中蕩洗,合并濾液,濃縮、復(fù)溶、過(guò)濾膜,裝瓶供高效液相色譜測(cè)定(結(jié)果需乘以100倍后計(jì)算回收率)。實(shí)驗(yàn)重復(fù)3個(gè)平行,取平均值。

1.5實(shí)際樣品檢測(cè)

實(shí)際樣品在超純水中蕩洗30秒,放在干凈的燒杯中,放入通風(fēng)櫥中常溫通風(fēng)晾干。剪成碎片大小約為0.2 cm×0.2 cm的碎片,稱取樣品(1±0.01) g(準(zhǔn)確到0.0001 g)移入50 mL碘量瓶中,加環(huán)己烷甲醇分散液(V/V=3∶7)25 mL,超聲25 min,移至避光處,浸泡2 h。重復(fù)1.4.1中蕩洗,合并濾液,濃縮,復(fù)溶,過(guò)濾膜,裝瓶供高效液相色譜測(cè)定。

2　結(jié)果與討論

2.1提取條件的優(yōu)化

2.1.1提取溶劑的選擇聚乙烯保鮮膜是乙烯的結(jié)晶態(tài)聚合物,分子鏈結(jié)合緊密,分子間相互作用力較強(qiáng),溶劑不易滲入聚合物內(nèi)部,所以使用單一溶劑提取添加劑比較困難。因此,在選擇提取溶劑時(shí),不僅要考慮到溶劑對(duì)提取物的溶解能力,還要考慮選擇能溶脹聚合物制品的溶脹劑。溶脹劑負(fù)責(zé)溶脹聚合物分子鏈,打開(kāi)溶劑萃取的通道,溶劑對(duì)目標(biāo)提取物要有較好的溶解性[21]。圖1為不同提取溶劑對(duì)三種酚類化合物提取效果的影響。

圖1　不同提取溶劑對(duì)三種酚類化合物提取效果的影響Fig.1　The effect of different extraction solvents on the extraction effect of 3 phenolic compounds

由圖1可以看出,A提取液的效果遠(yuǎn)低于其他3種混合溶液,可以說(shuō)明水對(duì)聚乙烯的溶脹效果最差,同時(shí)可以證明其他溶脹劑對(duì)聚乙烯結(jié)構(gòu)的打開(kāi)有明顯效果。B提取液對(duì)BHT的提取效果與C、D提取液效果相似,但TBHQ、BPA的提取效果較差。C、D提取效果相似,D略高于C。綜合考慮到價(jià)格、濃縮速度、毒性等因素。最終決定使用環(huán)己烷、甲醇混合溶液作為提取液。

2.1.2提取液中溶脹劑比例的選擇圖2為不同溶脹劑比例對(duì)3種酚類化合物回收率的影響。

圖2　不同溶脹劑比例對(duì)3種酚類化合物回收率的影響Fig.2　The effect of the ratio of swelling agent on the recoveries of 3 phenolic compounds

由圖2可以看出,溶脹劑比例對(duì)添加劑回收率的影響較大。在溶脹劑比例為0～30%之間時(shí),添加劑回收率都隨著溶脹劑比例增加而升高。超過(guò)30%之后,只有BPA略微升高后開(kāi)始下降,TBHQ與BHT均開(kāi)始下降?？赡茉?yàn)楫?dāng)溶脹劑比例小于30%時(shí),聚合物沒(méi)有完全被溶脹,隨著溶脹劑的增加,聚合物分子鏈打開(kāi)程度增加導(dǎo)致回收率快速提升,當(dāng)溶脹劑比例超過(guò)30%,會(huì)造成聚合物被溶解,結(jié)晶結(jié)構(gòu)塌陷,添加劑被包裹在聚合物中不易被提取出來(lái)[22]。綜合溶脹劑比例對(duì)3種酚類物質(zhì)回收率的影響,選擇30%為溶脹劑最佳比例。

2.2超聲提取條件的優(yōu)化

2.2.1超聲時(shí)間的選擇圖3為不同超聲時(shí)間對(duì)3種酚類化合物回收率的影響。

圖3　不同超聲時(shí)間對(duì)3種酚類化合物回收率的影響Fig.3　The effect of ultrasound time on the recoveries of 3 phenolic compounds

由圖3可以看出,超聲時(shí)間對(duì)3種酚類物質(zhì)回收率影響較大。在0～20 min內(nèi),回收率都快速上升,上升幅度達(dá)30%以上?？赡茉谠摱螘r(shí)間內(nèi),聚乙烯聚合物分子鏈在超聲及溶脹劑作用下,分子鏈快速打開(kāi),溶劑更容易萃取添加劑。20 min以后,TBHQ和BPA的回收率繼續(xù)波動(dòng)上升,但上升幅度較小,可能原因?yàn)樘砑觿┮汛蟛糠州腿?僅剩下聚合物內(nèi)部少量的添加劑緩慢釋放。BHT回收率開(kāi)始明顯下降,可能原因?yàn)槌晻r(shí)間過(guò)長(zhǎng)導(dǎo)致該物質(zhì)氧化分解等。綜合以上情況,考慮實(shí)驗(yàn)時(shí)間、回收率等情況下,確定最佳超聲時(shí)間為25 min。

2.2.2超聲后浸泡時(shí)間的選擇圖4為不同浸泡時(shí)間對(duì)3種酚類化合物回收率的影響。

表1　5種酚類化合物的線性方程、檢出限、定量限等

圖4　不同浸泡時(shí)間對(duì)3種酚類化合物回收率的影響Fig.4　The effect of extraction time on the recoveries of 3 phenolic compounds

由圖4可以看出,浸泡時(shí)間對(duì)回收率的影響不是很大,浮動(dòng)在15%以內(nèi)。3種添加劑在0～1 h內(nèi),3種物質(zhì)回收率上升。BHT在1～24 h內(nèi)呈下降趨勢(shì),可能原因?yàn)樵撐镔|(zhì)結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定,易為氧化分解,所以1～2 h為BHT最佳浸泡時(shí)間。BPA在24 h內(nèi)回收率呈上升趨勢(shì),但2 h后上升幅度不大。TBHQ在1～24 h內(nèi)回收率基本穩(wěn)定。綜合3種酚類化合物確定最佳浸泡時(shí)間為2 h。

2.3標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

圖5為25 mg/L混標(biāo)色譜圖。采用峰面積外標(biāo)法定量,以濃度為橫坐標(biāo)軸,峰面積(Area)為縱坐標(biāo)軸,然后根據(jù)最低濃度點(diǎn)1 mg/L的數(shù)據(jù),依據(jù)信噪比(S/N)≥3可以定性,(S/N)≥10可以定量的原則,計(jì)算5種酚類物質(zhì)的檢出限和定量限,結(jié)果見(jiàn)表1。

圖5　5種酚類化合物混標(biāo)色譜圖Fig.5　The chromatogram of 5 phenolic compounds 注：1.TBHQ;2.BPA;3.24DTBP;4.26DTBP;5.BHT。

2.4樣品的加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)和精密度檢驗(yàn)

取1.2中混標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)溶液分別稀釋至125、250、500 mg/L。精確稱取空白樣品各(1±0.01) g(準(zhǔn)確到0.0001 g),取環(huán)己烷甲醇分散液(v/v=3∶7)25 mL,分別移入1～3號(hào)50 mL碘量瓶中,依次加入1000 μL 125、250、500 mg/L標(biāo)準(zhǔn)液,添加水平為125、250、500 mg/kg。將1～3號(hào)瓶超聲25 min,浸泡2 h。每個(gè)添加水平做3次平行實(shí)驗(yàn),高效液相色譜測(cè)定,計(jì)算平均回收率和精密度。

表2　5種酚類化合物的回收率和精密度

由表2可以看出,TBHQ和BPA的回收率較高,TBHQ三次平行實(shí)驗(yàn)平均回收率為92.5%～98.3%,高于熊中強(qiáng)[23]環(huán)己烷超聲萃取高分子食品包裝材料樣品中TBHQ平均回收率(83%～97%),BPA三次平行實(shí)驗(yàn)平均回收率為95.8%～99.1%,結(jié)果略低于張巖[24]用快速溶解萃取法對(duì)電器塑料部件中BPA提取的回收率(95.2%～109.7%),但本實(shí)驗(yàn)中RSD值較小,穩(wěn)定性較高。24DTBP、26DTBP、BHT回收率略低,回收率在81.2%～87.5%之間,5種酚類化合物回收率范圍為81.2%～99.1%,精密度范圍為1.74%～4.87%。

2.5實(shí)際樣品分析

根據(jù)以上實(shí)驗(yàn)建立的酚類化合物的提取及檢測(cè)方法,取樣并檢測(cè)市售食品級(jí)保鮮膜、包裝袋等材料,得到表3中以下數(shù)據(jù),圖6為樣品11的色譜圖。檢出的陽(yáng)性樣品經(jīng)液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法進(jìn)一步確認(rèn),結(jié)果顯示無(wú)假陽(yáng)性樣品。

從表3中可以看出,TBHQ、26DTBP在被抽中檢測(cè)材料中的使用較少,TBHQ檢出率為15%,含量范圍在0.16～0.54 mg/kg之間,遠(yuǎn)低于GB2760-2011中規(guī)定的最大使用量200 mg/kg。26DTBP檢出率為20%,含量范圍在0.47～9.92 mg/kg之間,遠(yuǎn)低于EU No.10/2011中規(guī)定的規(guī)定檢出限60 mg/kg。在被抽中檢測(cè)材料中BPA、24DTBP、BHT的使用較多,BPA檢出率為50%,含量范圍在0.12～0.67 mg/kg之間,有一個(gè)被抽樣品超過(guò)GB 9685-2008中特定遷移量或最大殘留量0.6 mg/kg。24DTBP在所有被抽檢樣品中檢出率最大,高達(dá)75%,范圍在0.11～13.74 mg/kg之間,遠(yuǎn)低于EU No.10/2011中規(guī)定的檢出限60 mg/kg。BHT在被抽檢樣品中檢出率為50%,含量范圍在0.17～46.70 mg/kg,一個(gè)樣品BHT含量高達(dá)46.70 mg/kg,基本接近2007/19/EC中規(guī)定的檢出限60 mg/kg,但所有樣品BHT含量均不超標(biāo)。

綜上所述,僅有一個(gè)被抽檢樣品中BPA含量略高于標(biāo)準(zhǔn),一個(gè)樣品BHT含量接近標(biāo)準(zhǔn)但沒(méi)有超過(guò)。所以,市售塑料包裝、保鮮膜基本合格。此外,雖然含量較低,但檢出率較高,長(zhǎng)期使用依然會(huì)造成人體富集,引起危害。

表3　市售食品包裝材料中的酚類化合物含量(mg/kg)

注：“-”表示包裝材料中不含該酚類添加劑或含量低于檢測(cè)下限。

圖6　樣品11的液相色譜圖Fig.6　HPLC chromatogram of sample 11注：1.TBHQ;2.BPA;3.24DTBP;4.26DTBP;5.BHT。

3　結(jié)論

本文采用超聲輔助提取-高效液相色譜法測(cè)定聚乙烯食品包裝材料中雙酚A、特丁基對(duì)苯二酚、2,6-二叔丁基對(duì)甲酚、2,4-二叔丁基酚、2,6-二叔丁基酚的含量,該方法具有設(shè)備簡(jiǎn)單、樣品處理快速、線性相關(guān)性好、回收率較高、定性定量準(zhǔn)確等優(yōu)點(diǎn),適用于聚乙烯塑料包裝材料中5種酚類化合物的衛(wèi)生監(jiān)督檢測(cè)工作。

[1]曾懷才,陳鋒. 環(huán)境雌激素與健康[J]. 實(shí)用預(yù)防醫(yī)學(xué),2003,10(5):818-820.

[2]Du Mond J W,Singh K P,Roy D. The Biphasic Stimulation of Proliferation of Leydig cells by estrogen exposure[J]. International Journal of Oncology,2001,18(3):623-628.

[3]Sakagaki H,Ufno H,Nakamuro K. Estrogen receptor alpha in Mouse splenic lymphocytes:possible involvement in immunity[J]. Toxicology Letters,2002,133(2-3):221-229.

[4]杜艷,代漢慧,伍飏,等. 雙酚A毒理學(xué)特性及各國(guó)對(duì)其用于食品包裝材料的評(píng)估意見(jiàn)[J]. 食品科技,2007,(10):1-3.

[5]閆楊娟. 長(zhǎng)沙市液態(tài)食品塑料包裝安全性評(píng)價(jià)[D]. 長(zhǎng)沙:中南林業(yè)科技大學(xué),2013.

[6]蔣小良,黃承斌,麥彩煥,等. 食品包裝材料中雙酚A檢測(cè)方法的研究進(jìn)展[J]. 包裝與食品機(jī)械,2012,30(3):55-59.

[7]張淑玲,張志勝,邢曉慧. 氣相色譜法測(cè)定食品中的抗氧化劑BHA、BHT、TBHQ[J]. 現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展,2008,8(12):2483.

[8]陸巖,張潔萍,王俊秋,等. 高效液相色譜法測(cè)定食用油中抗氧化劑特丁基對(duì)苯二酚[J]. 中國(guó)食品衛(wèi)生雜志,2008,20(5):421-423.

[9]楊春瑜,楊春莉,劉海玲,等. 塑料包裝材料中2,4-二叔丁基酚遷移的研究[J]. 包裝與食品機(jī)械,2014,32(2):10-13.

[10]李學(xué)鋒,謝太平,張立科,等. 環(huán)境雌激素雙酚A的化學(xué)發(fā)光法測(cè)定[J],河北化工,2009,32(6):59-61.

[11]Shin H S,Park C H,Park S J,et al. Sensitive determination of bisphenol A in environmental water by gas chromatography with nitrogen-phosphorus detection after cyanomethylation[J]. Journal of Chromatography A,2001,912(1):119-125.

[12]姜曉輝. 塑膠食品與藥品包裝材料中BHT的測(cè)定[J]. 化學(xué)分析計(jì)量,2009,18(3):65-66.

[13]趙鵬,王東凱,楊秀麗,等. HPLC測(cè)定2,6-二叔丁基對(duì)甲酚的含量及有關(guān)物質(zhì)[J]. 華西藥學(xué)雜志,2006,21(3):291-293.

[14]李小梅,宋歡,林勤保,等. UPLC研究塑料食品包裝材料中的抗氧化劑及其遷移[J]. 化學(xué)研究與應(yīng)用,2010,22(8):980-984.[15]施剛剛,程冬冬,朱勇,等. 高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定工業(yè)廢水中的2,4-二叔丁基酚和2,6-二叔丁基酚[J]. 浙江化工,2014,45(1):37-39.

[16]楊紅梅,王浩,劉艷琴,等. 液相色譜-串聯(lián)三重四極桿質(zhì)譜測(cè)定飲料中雙酚A殘留[J]. 食品研究與開(kāi)發(fā),2009,30(12):137-139.

[17]Paepe A D,Erlandsson B,Ostelius J,et al. An alternative Method for Determination of Additives in Polypropylene Using Supercritical Fluid Extraction and Enhanced Solvent Extraction[J]. Journal of Liquid Chromatography & Related Technologies,2006,29(11):1541-1559.

[18]Arias M,Penichet I,Ysambertt F,et al. Fast supercritical fluid extraction of low-and high-density polyethylene additives:Comparison with conventional reflux and automatic Soxhlet extraction[J]. Journal of Supercritical Fluids,2009,50(1):22-28.

[19]李浩峰. 食品和藥品包裝材料中抗氧化劑的檢測(cè)方法研究[D]. 長(zhǎng)沙:中南林業(yè)科技大學(xué),2013

[20]姚幫本,王道俊,儲(chǔ)大勇. 固相萃取-氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定塑料食品包裝材料中3種抗氧化劑的殘留量[J]. 化學(xué)分析計(jì)量,2014,23(6):20-24.

[21]張帆,張瑩杞,黃志強(qiáng),等.在線GPC-GC/MS法測(cè)定蘋果中2,4-D殘留[J].分析實(shí)驗(yàn)室,29(5):36-39.

[22]Marcate B,Vianello M. Microwave-assisted extraction by fast sample preparation for the systematic analysis of additives in polyolefins by high-performance liquid chromatography[J]. Journal of Chromatography A,2000,869(1):285-300.

[23]熊中強(qiáng),王利兵,李寧濤,等. 氣相色譜法測(cè)定高分子食品包裝材料中抗氧化劑的殘留量[J]. 色譜,2011,29(3):273-276.

[24]張巖,馬曉斐,呂品,等. 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定小型家用電器塑料部件中雙酚A[J]. 色譜,2012,30(1):95-98.

Determination of 5 phenolic compounds in PE film for food packaging by ultrasonic-assisted extraction with high performance liquid chromatography

XU Yu-jun1,2,LU Chun-liang2,*,CUI Gui-you1,LIU Xiang-nong2

(1.School of Tourism and Culinary Science,Yangzhou University,Yangzhou 225127,China; 2.Testing Center of Yangzhou University,Yangzhou 225009,China)

A method was established for the detection of 5 phenolic compounds in polyethylene(PE)film for food packaging by high performance liquid chromatography(HPLC)and ultrasonic-assisted extraction. The method of ultrasonic assisted extraction was optimized,such as the choice of the swelling agent,the volume ratio of swelling agent,ultrasonic time,immersion time after ultrasonic,and so on. The conditions were finally chosen was follows,choice cyclohexane as swelling agent,the volume ratio of swelling agent(cyclohexane)and solvent(methanol)was 3∶7(v/v),ultrasonic time was 25 min,immersion time of was 2 h. The samples were analyzed on a column of Agilent Eclipse Plus C18(2.1 mm×150 mm,5 μm),the mobile phase was methanol and water(containing 0.1% formic acid),gradient elution,flow rate was 0.4 mL/min,the variable wavelength detector was set at 280 nm. The results showed that the 5 phenolic compounds had good linear relationship in the linear range(R2>0.9995). The detection limits of the 5 phenolic compounds were 0.25～0.40 mg/kg(S/N=10). The recoveries were 81.2%～99.1% with the relative standard deviations(n=3)of 1.74%～4.87% at spiked levels of 125,250,500 mg/kg. This method is simple and had high recovery rate and good precision. It is suitable for the detection of 5 phenolic compounds in polyethylene food packaging.

high performance liquid chromatography(HPLC);ultrasonic-assisted extraction;phenolic compounds;polyethylene;food packaging

2016-04-01

徐雨軍(1991-)，男，在讀碩士研究生，研究方向：營(yíng)養(yǎng)與食品衛(wèi)生學(xué)，E-mail:18352765146@163.com。

陸春良(1980-)，男，博士，助理研究員，主要從事色質(zhì)譜聯(lián)用檢測(cè)技術(shù)研究，E-mail:luchunliang@163.com。

TS201.2

A

1002-0306(2016)17-0297-06

10.13386/j.issn1002-0306.2016.17.049