鄧林玉+楊登林+楊莉+黃麗+李盛瓊+王文禮

摘要：隨機(jī)選擇從未接種過小反芻獸疫（PPR）、口蹄疫（FMD）O-A-亞Ⅰ型三價(jià)滅活疫苗且經(jīng)檢測(cè)體內(nèi)未含相關(guān)抗體的健康山羊40只，隨機(jī)分成4組：第1組接種小反芻獸疫活疫苗，第2組接種口蹄疫O-A-亞Ⅰ型三價(jià)滅活疫苗，第3組同時(shí)接種小反芻獸疫活苗、口蹄疫O-A-亞Ⅰ型三價(jià)滅活疫苗，第4組不接種任何疫苗作為對(duì)照組，觀察各組免疫副反應(yīng)。在接種后7、14、21、28 d采血，用ELISA抗體檢測(cè)試劑盒檢測(cè)抗體動(dòng)態(tài)。結(jié)果顯示，接種后7 d時(shí)PPR單獨(dú)免疫組和聯(lián)合免疫組中PPR抗體陽(yáng)性率均能達(dá)到80%；14～28 d時(shí)PPR抗體陽(yáng)性率均能達(dá)到100%，PPR組和聯(lián)合免疫組中同期PPR抗體OD450nm值之間比較差異均不顯著；接種后第7天時(shí)FMD O-A-亞Ⅰ型三價(jià)滅活疫苗單獨(dú)免疫組和聯(lián)合免疫組中FMD O型抗體陽(yáng)性率均能達(dá)到60%，14 d時(shí)FMD O型抗體陽(yáng)性率均能達(dá)到100%；接種后14 d時(shí)FMD O-A-亞Ⅰ型三價(jià)滅活疫苗單獨(dú)免疫組和聯(lián)合免疫組中亞FMD亞Ⅰ型和A型抗體陽(yáng)性率均能達(dá)到國(guó)家規(guī)定的70%的標(biāo)準(zhǔn)。

關(guān)鍵詞：小反芻獸疫（PPR）；口蹄疫O-A-亞Ⅰ型；聯(lián)合免疫；抗體效價(jià)

中圖分類號(hào)：S858.27 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B 文章編號(hào)：1007-273X（2016）07-0026-02

小反芻獸疫（PPR）俗稱羊瘟，是由小反芻獸疫病毒引起的一種急性病毒性傳染病，主要感染小反芻動(dòng)物，以發(fā)熱、口炎、腹瀉、肺炎為特征?？谔阋撸‵MD）（屬一類傳染?。┧酌翱诏彙薄ⅰ氨亳ァ?，是由口蹄疫病毒所引起的偶蹄動(dòng)物的一種急性、熱性、高度接觸性傳染病。主要侵害偶蹄獸，偶見于人和其他動(dòng)物。其臨診特征為口腔黏膜、蹄部和乳房皮膚發(fā)生水皰。小反芻獸疫和口蹄疫是危害山羊的兩種主要的傳染病，生產(chǎn)實(shí)踐中一般采用疫苗預(yù)防為主。本試驗(yàn)比較了單獨(dú)接種口蹄疫O-A-亞Ⅰ型三價(jià)滅活疫苗和小反芻獸疫（PPR）活疫苗及同時(shí)接種兩種疫苗后山羊體內(nèi)抗體情況，旨在為實(shí)際生產(chǎn)中預(yù)防小反芻獸疫和口蹄疫提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料

小反芻獸疫活疫苗：每頭份疫苗含有的小反芻獸疫弱毒病毒至少為103TCID50，性狀為乳白色或淡黃色海綿狀疏松團(tuán)塊，易與瓶壁脫落，加稀釋液后迅速溶解，新疆天康畜牧生物技術(shù)股份有限公司生產(chǎn)，批號(hào)為2015023-2。

牛羊口蹄疫O型-A型-亞洲Ⅰ型三價(jià)滅活疫苗（O/HB/HK/99株+AF/72+Asia-1/XJ/KLMY/04株）：含滅活的口蹄疫O型病毒O/HB/HK/99株、A型（AF/72）株和亞型Ⅰ（Asia-1/XJ/KLMY/04株）病毒株，滅活前病毒含量分別至少為107.0TCID50/mL或107.0LD50/mL，性狀為乳白色或淡紅色粘滯性均勻乳狀液，中牧實(shí)業(yè)股份有限公司蘭州生物制藥廠生產(chǎn)，批號(hào)為1506001。

試驗(yàn)用抗體檢測(cè)試劑盒：小反芻獸疫抗體檢測(cè)試劑盒（貨號(hào)EPPPR-1002）Kernel.Inc制造。8150 Derry Street，Suite B，Harrisburg，PA 17111，USA ?？谔阋逴（貨號(hào)7610420）、A（貨號(hào)7610850）、亞Ⅰ型（貨號(hào)7610870）抗體檢測(cè)試劑盒均由荷蘭萊利斯塔德農(nóng)業(yè)公司生產(chǎn)。

1.2 試驗(yàn)山羊分組和檢測(cè)方法

在某養(yǎng)羊場(chǎng)隨機(jī)選擇已斷奶的且未經(jīng)過任何疫苗免疫過的健康山羊40只，由專人飼養(yǎng)和管理，飼喂相同的草料和相同適量精料，自由飲水。試驗(yàn)前對(duì)所選的山羊進(jìn)行全面健康檢查，體重15 kg/只左右，呼吸為12～20次/min，脈搏為70～80次/min，體溫在38.5～39.7 ℃，食欲正常，精神狀態(tài)良好；經(jīng)頸靜脈采血檢測(cè)，PPR抗體、FMD O型、A型、亞洲Ⅰ型抗體均呈陰性。40只山羊隨機(jī)分成4組，第1組接種小反芻獸疫活疫苗，第2組接種口蹄疫O-A-亞Ⅰ型三價(jià)滅活疫苗，第3組同時(shí)接種小反芻獸疫活苗、口蹄疫O-A-亞Ⅰ型三價(jià)滅活疫苗，第4組不接種任何疫苗作為對(duì)照組，觀察各組免疫副反應(yīng)。在接種后7、14、21、28 d采血，用相應(yīng)的抗體檢測(cè)試劑盒檢測(cè)抗體動(dòng)態(tài)。

1.3 結(jié)果判定

使用小反芻獸疫抗體檢測(cè)試劑盒和口蹄疫O-A-亞Ⅰ型抗體檢測(cè)試劑盒分別檢測(cè)各組山羊的抗體動(dòng)態(tài)，具體方法及結(jié)果判定參照試劑盒說明書。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)和分析

將所得樣品OD450nm值用SPSS10.0軟件的One-Way ANVOA方法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 臨床接種副反應(yīng)

接種疫苗后72 h內(nèi)觀察山羊，沒有出現(xiàn)不良反應(yīng)，其體溫、呼吸、脈搏、飲食情況均在正常范圍內(nèi)。

2.2 各組山羊血清抗體動(dòng)態(tài)

經(jīng)檢測(cè)，試驗(yàn)開始前所有被選擇試驗(yàn)用山羊和試驗(yàn)開始后對(duì)照組山羊血清中均未檢出PPR和FMD O、A和亞Ⅰ型抗體，說明整個(gè)試驗(yàn)期間，試驗(yàn)組山羊所產(chǎn)生的PPR和FMD O、A、亞Ⅰ型抗體均源自接種相應(yīng)疫苗后而產(chǎn)生，山羊均不存在自然感染PPR和FMD O、A、亞Ⅰ型病毒后產(chǎn)生相應(yīng)抗體的可能性。

從PPR抗體陽(yáng)性率變化方面來看，PPR活疫苗無論是單獨(dú)免疫還是與FMD O、A、亞Ⅰ型三價(jià)滅活疫苗同時(shí)免疫，F(xiàn)MD O、A、亞Ⅰ型三價(jià)滅活疫苗在接種后28 d內(nèi)對(duì)PPR抗體的產(chǎn)生沒有任何負(fù)面影響，PPR單獨(dú)免疫組和聯(lián)合免疫組中PPR抗體陽(yáng)性率均能達(dá)到80%；14～28 d時(shí)PPR抗體陽(yáng)性率均能達(dá)到100%，兩個(gè)試驗(yàn)組之間各期PPR抗體OD450nm值差異均不顯著（P>0.05）。

從FMD O型抗體陽(yáng)性率變化看，無論FMD O、A、亞Ⅰ型三價(jià)滅活疫苗單獨(dú)接種還是和PPR活疫苗同時(shí)接種山羊，在接種后14～28 d內(nèi)FMD O型抗體陽(yáng)性率均能達(dá)到100%，兩試驗(yàn)組之間FMD O型抗體OD450nm均值差異不顯著（P>0.05），兩試驗(yàn)組與對(duì)照組相比較，其OD450nm均值均差異顯著（P<0.05），說明PPR活疫苗和FMD O、A、亞Ⅰ型三價(jià)滅活疫苗同時(shí)接種，PPR疫苗在接種后7～28 d內(nèi)對(duì)FMD O型抗體的產(chǎn)生沒有任何負(fù)面影響。

從FMD A型及亞洲Ⅰ型抗體陽(yáng)性率變化看，F(xiàn)MD O、A、亞Ⅰ型三價(jià)滅活疫苗和PPR活疫苗同時(shí)接種山羊，PPR疫苗對(duì)FMD A型及亞洲Ⅰ型抗體的產(chǎn)生沒有影響，F(xiàn)MD O、A、亞Ⅰ型三價(jià)滅活疫苗無論單獨(dú)還是和PPR活疫苗同時(shí)接種，兩試驗(yàn)組之間A型及亞洲Ⅰ型抗體OD450nm均值差異均不顯著（P>0.05），而兩試驗(yàn)組與對(duì)照組之間A型及亞洲Ⅰ型抗體OD450nm值比較均差異顯著（P<0.05）。在接種后14 d時(shí)A型和亞Ⅰ型抗體陽(yáng)性率均能達(dá)到70%；在接種后21d可達(dá)到100%的抗體陽(yáng)性率。