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        豬、禽采血及血清制備操作方法

        2016-10-31 02:32:58張偉
        湖北畜牧獸醫(yī) 2016年7期
        關(guān)鍵詞:血清

        張偉

        摘要:主要介紹了豬禽采血及血清制備的操作方法,供參考。

        關(guān)鍵詞:豬;禽;采血;血清

        中圖分類號(hào):S851.33 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:B 文章編號(hào):1007-273X(2016)07-0011-02

        血清學(xué)檢測(cè)是診斷動(dòng)物疫病、評(píng)價(jià)重大動(dòng)物疫病強(qiáng)制免疫效果的重要手段之一[1],血液樣品的采集及制備是保證血清學(xué)檢測(cè)成功的前提條件。畜禽采血及血清制備是畜牧獸醫(yī)部門一項(xiàng)常規(guī)的業(yè)務(wù)工作,也是基層畜牧獸醫(yī)人員必須熟練掌握的技術(shù)。下面簡單介紹豬禽采血及血清制備的操作方法,以供參考。

        1 采血前調(diào)查摸底

        為了檢驗(yàn)動(dòng)物疫病免疫抗體水平,需要對(duì)已進(jìn)行免疫接種的畜禽進(jìn)行采血[2]。采血前,認(rèn)真查閱養(yǎng)殖檔案,摸清防疫等相關(guān)情況,對(duì)免疫注射情況不詳?shù)?,免疫注射時(shí)限未達(dá)到規(guī)定要求的不納入采樣范圍。同時(shí),要檢查畜禽個(gè)體健康狀況,健康狀況不好的,正在患病治療或尚未治愈的,以及生長發(fā)育不良的也不納入采樣范圍,以免引發(fā)應(yīng)激反應(yīng)和意外事故。

        2 采血方法

        2.1 采血的部位

        豬采血的部位可選擇前腔靜脈和耳靜脈。但大批量采血時(shí)宜選擇前腔靜脈。禽采血的部位可選擇禽翅靜脈和心臟,最常用的是禽翅靜脈采血法。

        2.2 采血具體方法

        2.2.1 豬前腔靜脈采血 采血前將同群豬只隔離,采取適當(dāng)?shù)谋6ǚ椒?。?duì)25kg以下的小豬,采取人工仰臥保定方法,雙后肢與身體平行向后輕輕拉直,雙前肢朝上拉直與體中線垂直并左右微微張開。在雙前肢與胸骨連線的前側(cè)左右凹窩內(nèi),采血人員用酒精或碘酊棉球消毒后,選用9#針頭進(jìn)針2~3cm,針刺方向?yàn)橄蚝髢?nèi)方與地面呈60°角,輕輕抽出前腔靜脈血液即可。采血完畢,用消毒棉球緊壓采血部位針孔處,迅速拔出針頭,壓迫止血片刻后,解除保定。

        對(duì)體型較大的豬只,采用站立式保定方法,用金屬保定器套住豬的上頜骨,收緊金屬保定器圈環(huán),向前方用力牽引,將豬的上頜骨稍稍吊起偏向右側(cè),使豬的頭頸與水平面呈30°角,這時(shí)豬的注意力集中在鼻部,豬多呈后退姿勢(shì)。采血人員用酒精或碘酊棉在豬的右側(cè)胸前凹窩處消毒,用采血針對(duì)準(zhǔn)凹窩最低處,垂直刺入,感覺有負(fù)壓感且有回血,則標(biāo)志已刺入血管,然后輕輕回抽針管內(nèi)芯,即可采取前腔靜脈血液。采血完畢,拔出針頭,采血部位用消毒棉球壓迫止血片刻后,解除保定。對(duì)100 kg以上的豬采血一般宜選用14#針頭采血,50~100 kg的育肥豬選用12#針頭,25~50 kg的小豬也選用12#針頭。

        2.2.2 禽翅靜脈采血 輔助人員將家禽個(gè)體側(cè)臥保定,展開翅膀,拔掉腋窩部羽毛,可見由翼根進(jìn)入腋窩的翼根靜脈,對(duì)其用酒精或碘酊棉球進(jìn)行消毒。采血人員等待消毒液干燥后,左手拇指壓迫血管近心端,使靜脈血管怒張、明顯,右手用裝有7#針頭的采血針或注射器沿翼根向翅方向,于血管0.3~0.5 cm一旁傾斜刺入皮膚,再與血管平行進(jìn)針0.2~0.4 cm后刺入血管,然后逐步放松按壓,緩慢抽取血液。進(jìn)針不宜過深,針頭的切口面應(yīng)向上[3]。采血完畢后,用棉球壓迫采血部位1~2 min止血,同時(shí)可起到消毒作用。

        2.3 采血時(shí)間

        一般為豬、禽進(jìn)行免疫接種后抗體的高峰期進(jìn)行血樣采集。提前通知被采血單位或養(yǎng)殖戶在采血當(dāng)天采血前不要飼喂畜禽,被采樣畜禽禁食8h(空腹)后進(jìn)行采血,一天中多選擇在早上或午后采血。

        3 血清制備

        3.1 血樣靜置

        豬樣品每份采集全血不少于3 mL,禽樣品每份采集全血不少于2 mL。用一次性無菌注射器采血后把注射器活塞往后拉,直接去掉內(nèi)芯,可形成封閉的離心管,再加針頭帽,最后針頭朝上傾斜30~45°擺放,在室溫(20~25 ℃)下放置2~3 h,待血清自然析出。

        使用一次性采血針連接真空采血管采集血液樣品后,把采血針取下,直接將采血管與地面成30~45°斜放,在室溫下放置2~3 h,待血清自然析出。

        3.2 血樣運(yùn)輸

        采血后室溫靜置10~15 min,待血液凝固后才能運(yùn)送。運(yùn)送血樣樣品時(shí)一定要輕拿輕放,防止劇烈震動(dòng)。使用血液樣品專用運(yùn)輸箱運(yùn)送更好。能在4 h內(nèi)運(yùn)輸?shù)竭_(dá)實(shí)驗(yàn)室的,只需冷藏后運(yùn)輸;不能在4 h內(nèi)送達(dá)的,則要做冷凍處理后,再冷藏運(yùn)輸,必須在24 h內(nèi)送到。

        3.3 實(shí)驗(yàn)室血清制備

        血樣運(yùn)輸?shù)綄?shí)驗(yàn)室后,接收的樣品若血清析出良好,可直接將血清轉(zhuǎn)入塑料離心管,按實(shí)驗(yàn)室規(guī)定程序編號(hào)檢測(cè);接收的樣品若血清析出較差或室外氣溫過低,可放入37 ℃恒溫箱中1 h或25~37 ℃水浴鍋中1 h作預(yù)處理,再用離心機(jī)1 500~2 000 r/min離心5 min分離血清。在實(shí)驗(yàn)室的保存,若短時(shí)間保存,4 ℃冷藏即可,時(shí)間最多不能超過1個(gè)月;若長時(shí)間保存,可在-20 ℃冷凍保存。血清由室溫轉(zhuǎn)入

        -20 ℃或由-20 ℃轉(zhuǎn)入室溫時(shí),須經(jīng)過冷藏并搖勻處理,切忌反復(fù)凍融[4]。

        參考文獻(xiàn):

        [1] 王榮華.血清制備的影響因素[J].中國畜牧業(yè),2016(5):50.

        [2] 李書儒.動(dòng)物免疫監(jiān)測(cè)的重大意義[J].當(dāng)代畜牧,2016(5):46.

        [3] 陳 靜,陳德明,徐玉玲.動(dòng)物血液樣品采集制備與保存的方法[J].獸醫(yī)導(dǎo)刊,2015(8):72-73.

        [4] 李 娟,黃仁樹.血清學(xué)診斷的運(yùn)用[J].四川畜牧獸醫(yī),2015(1):58-59.

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