姜成英， 史艷虎， 吳文俊， 朱振家

( 1. 甘肅省林業(yè)科學研究院/甘肅省油橄欖工程技術研究中心， 蘭州 730030; 2. 甘肅農業(yè)大學 資源與環(huán)境學院， 蘭州 730070 )

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油橄欖授粉受精和胚胎發(fā)育過程觀察

姜成英1， 史艷虎1， 吳文俊1， 朱振家2

( 1. 甘肅省林業(yè)科學研究院/甘肅省油橄欖工程技術研究中心， 蘭州 730030; 2. 甘肅農業(yè)大學 資源與環(huán)境學院， 蘭州 730070 )

該研究以油橄欖“鄂植-8”為材料，應用壓片熒光觀察花粉在柱頭和花柱中的萌發(fā)及生長情況，采用石蠟制片法觀察油橄欖的胚珠結構特點和授粉受精過程。結果表明：油橄欖為1子房2心室4胚珠，珠心較發(fā)達，由多層細胞構成，屬于厚珠心橢圓型胚珠，胚珠直生；花開時花粉粒落到柱頭上立刻萌發(fā)，隨后花粉管在花粉通道中生長，再后進入子房經子房內表面，大部分花粉管不能到達胚珠，僅少數(shù)沿胎座生長經珠柄進入珠孔，釋放2個精子，2個精核分別進入卵細胞和極核，并與卵核及極核相互融合；觀察到合子中雌、雄性核仁融合的過程。授粉受精各階段經歷的時間為花粉落到柱頭上立刻萌發(fā); 授粉后6 d左右，花粉管長入胚珠的珠孔，隨后釋放精子; 10 d左右完成授粉受精，30 d左右形成心型胚，40 d左右胚發(fā)育幾乎成熟。在進行子房石蠟切片中，共觀察到612個完整子房切片，發(fā)育完整的子房為97.53%，完成授粉受精的胚珠為15.52%。油橄欖在自然授粉下，約85%的胚珠授粉受精過程不能完成，在一定程度上影響其坐果。 該研究結果為油橄欖授粉受精、高效生產等提供了理論依據(jù)。

油橄欖， 授粉， 受精， 時間， 胚胎發(fā)育

油橄欖(Oleaeuropaea)為木犀科(Oleaceae)木犀欖屬(Olea)的常綠小喬木，是一種高產、耐旱、耐高溫的木本油料樹種，原產于西亞(0°～30° E，30°～45° N)和地中海(26°～72°E，21°～43° N)區(qū)域(Faisal et al, 2012)。我國于1964年開始引進油橄欖，以甘肅省武都為中心的白龍江低山河谷區(qū)，目前已成為中國最大的油橄欖種植基地之一，截止2013年底，種植面積達2.2萬hm2(張正武，2014)。目前該區(qū)大部分油橄欖樹齡已度過童期，進入盛果期，但和原產地同齡樹相比，存在坐果率低等嚴重問題(Saleh et al，2006)。

油橄欖坐果率與其授粉受精過程密不可分，其生殖生物學方面已展開了研究。Cuevas & Polito(2004)描述了油橄欖主要是異花授粉，且是風媒傳粉，但也存在少量蟲媒傳粉；Choi et al(2010)對油橄欖花粉活力進行了研究；彭建國等(2006)發(fā)現(xiàn)不同品種油橄欖相互授粉時因花粉親和力不同而坐果率有明顯差異；Elizabeth et al(2012)發(fā)現(xiàn)油橄欖會發(fā)生授粉不親和的現(xiàn)象；Connor & Fereres(2005)研究了油橄欖胚囊形成過程；Qian et al(2009)研究了雌雄配子的形成；Cevriye et al(2013)、Boussadia(2010)和Shevchenko(2001)研究了胚乳的發(fā)育過程；Martins et al(2006)研究了一些異常發(fā)育的花，特別是部分發(fā)育不完整雌蕊的形成。而關于油橄欖授粉受精過程的觀察研究較少。本研究以甘肅隴南地區(qū)主栽品種“鄂植-8”(O.europaea“EZhi-8”)為材料，研究了授粉受精過程及時間，為我國油橄欖的生殖生物學研究積累基礎知識資料，同時為油橄欖授粉受精和高效生產等提供理論依據(jù)。

1　材料與方法

1.1 材料

油橄欖“鄂植-8”品種，樹高約4.5 m，樹齡15 a，果較大，產量高，豐產穩(wěn)產性能好，授粉類型為自然授粉，是甘肅省審定的良種。材料均采集于甘肅省武都區(qū)大灣溝油橄欖科技示范園(104°53′ E，33°24′ N)。該園海拔1 079 m，年均氣溫14.9 ℃，年均相對濕度61%，最冷月(1月)平均氣溫4.1 ℃，年均降水105 d，年均降水量483 mm，集中在6-8月(約占全年的50%)，年日照時數(shù)1 923 h，無霜期在280 d以上，屬亞熱帶濕潤氣候。試驗園環(huán)境因素良好，水肥管理和立地條件基本一致，以消除環(huán)境因素對試驗的影響。

1.2 方法

2013年5月8日至6月18日連續(xù)固定開花后授粉的雌蕊。田間平均氣溫為15～23 ℃，當油橄欖花瓣完全打開成180°，柱頭分泌粘液，花藥開裂，即為開花，此時已授粉。開花后于1 h、2 h、4 h、8 h、12 h、24 h、36 h、48 h、60 h、72 h、96 h、5 d、6 d、7 d、8 d、15 d、20 d、25 d、30 d、40 d各采集100朵。材料經卡諾固定液(無水乙醇∶冰醋酸=3∶1)固定2 h，轉至FAA中，于4 ℃冰箱保存(楊虹等，2009)。對授粉后1～144 h 的花柱，以8 mol·L-1NaOH軟化約4 h 后，蒸餾水沖洗干凈，用0. 05% 水溶性苯胺藍溶液染色4～5 h后，常規(guī)壓片，觀察花粉在柱頭和花柱中的萌發(fā)生長情況(廖婷，2014)；常規(guī)石蠟制片法制片，以番紅及愛氏蘇木精整體染色，切片厚度為10 μm。用Olympus正置萬能攝像生物熒光顯微鏡下觀察并拍照。

2　結果與分析

2.1 油橄欖胚珠的結構特點

經石蠟切片觀察，發(fā)現(xiàn)油橄欖自小花原基一群細胞發(fā)育后，基部逐漸膨大，最后形成子房 (圖版Ⅰ:A)，其特征為1子房2心室4胚珠(圖版Ⅰ:B)，頂端的柱頭成v字型，花柱為連接柱頭和子房的部分(圖版Ⅰ:A)；在雌蕊發(fā)育過程中，子房內胎座表皮中間的部分細胞進行平周分裂，產生一團分生組織， 即胚珠原基 (圖版Ⅰ:C)。當胚珠組織生長時，兩層珠被開始自基部產生細胞分裂。外珠被首先開始產生分裂，接著孢原細胞平周分裂，產生珠心，隨后內珠被開始形成， 其最內一層細胞往往轉化為柵欄組織，具有向內輸送營養(yǎng)的功能，生長較快外珠被細胞開始包圍珠心細胞，隨著外珠被的繼續(xù)分裂及生長，珠心頂端出現(xiàn)珠孔(圖版Ⅰ:D)。油橄欖的珠心較發(fā)達，由多層細胞構成，屬于厚珠心橢球型胚珠，胚珠直生(圖版Ⅰ:D)?；ㄖ鶠閳A柱狀，且為空心；花柱兩側區(qū)域存在細胞群組成的花粉管通道(圖版Ⅰ:E)，細胞間隙較大，排列松散。

圖版 Ⅰ　油橄欖子房結構圖　OV. 胚珠； OW. 子房壁； STY. 花柱； AN. 花藥，STI. 柱頭； OI. 外珠被；II. 內珠被； AC. 孢原細胞； MI. 珠孔； PT. 花粉管； MC. 乳突細胞。 A. 雌蕊及子房的結構 (×40)； B. 子房的橫切面 (×100)； C. 孢原細胞 (箭頭) (×400)； D. 胚珠的結構 (×200)； E. 花柱的橫切 (箭頭指向花粉管通道)(×200)。Plate Ⅰ　Ovary structure of Olea europaea　OV. Ovule； OW. Ovary wall； STY. Style； AN. Anther， STI. Stigma； OI. Outer integument； II. Inter integument； AC. Archesportial cell； MI. Micropyle； PT. Pollen tube； MC. Mastoid cell. A. Pistils and ovary of structure (×40); B. Cross-section of the ovary (×100); C. Archesporial cell (shown by arrow) (×400); D. The ovule of structure (×400); E. Style crosscutting, the pollen tube channel (shown by arrow) (×200).

圖版 Ⅱ　油橄欖授粉過程　A. 柱頭及花粉粒 (×200)； B. 花粉管(箭頭)在花柱中生長 (×400)； C. 授粉后1 h，大量花粉在柱頭上萌發(fā)生長 (×200); D. 授粉后24 h，花粉管(箭頭)在花柱中生長 (×200); E. 授粉后48 h，花粉管(箭頭)到達花柱1/3 位置 (×200); F. G. 授粉后72 h，花粉管(箭頭)到達花柱2/3 位置 (×200); H. 花粉管(箭頭)在引導組織中生長 (×40); I. 授粉后96 h，花粉管(箭頭)進入胚珠 (×100); J. 授粉后144 h，花粉管(箭頭)到達珠孔 (×100)。Plate Ⅱ　Pollination process of Olea europaea　A. Stigma and pollen grains (×200); B. Pollen tube (shown by arrow) growth in the style (×400); C. Many of pollens germination on the stigma after pollination 1 h (×200); D. Pollen tube (shown by arrow) grows in the pollen channel after pollination 24 h (×200); E. Pollen tube (shown by arrow) grows to about 1/3 of the style after pollination 48 h (×200); F，G. Pollen tube (shown by arrow) grows to about 2/3 of the style after pollination 72 h (×200); H. Pollen tube (shown by arrow) passes through the transmitting tissue (×40); I. Pollen tube (shown by arrow) enters into the ovule after pollination 96 h(×100); J. Pollen tube (shown by arrow) enters into the micropyle after pollination 144 h (×100).

圖版 Ⅲ　雌雄配子的結合　A. 一精子(黑色箭頭)靠近卵細胞 (白色箭頭) (×400)； B. 精子(黑色箭頭)開始進入卵細胞(白色箭頭) (×400)； C. 精子在卵細胞里 (×400)； D. 雌雄核融合形成一個大核 (×400)； E. 一精子(黑色箭頭)靠近兩極核(窄箭頭) (×400)； F. 精子(黑色箭頭)與兩極核(窄箭頭)融合 (×400)； G. 三核融合 (×400)； H.初生胚乳核內一個大核仁 (×400)； I. 分化的胚 (×40)； J. 幾乎成熟的胚 (×40)。Plate Ⅲ　Combined male and female gametes　A. A sperm (shown by black arrow) close to the egg (shown by white arrow) (×400); B. A sperm (shown by black arrow) entered the egg (shown by white arrow) (×400); C. Sperm inside the egg cell (×400); D. Male and female nuclei fuse to form a big nucleolus (×400); E. A sperm nucleus (shown by black arrow) near the two-polar nucleus (shown by narrow arrow) (×400); F. Fusion of a sperm (shown by black arrow) and two-polar nuclei (shown by narrow arrow) (×400); G. Fusion of three nuclear (×400); H. A big nucleolus in primary endosperm nucleus (×400); I. Embryo is differentiation (×40); J. Almost mature embryos (×40).

2.2 花粉在柱頭上萌發(fā)及花粉管的生長

成熟花粉為橄欖球型；柱頭表面具發(fā)達的乳突細胞(圖版Ⅱ:A)，以便粘住花粉；花藥開裂后，散出大量花粉且隨風飄落到柱頭上，花粉釋放出親脂性物質與柱頭上的親脂性物質相互接觸，并從柱頭表面的乳突細胞中吸收水分，隨后花粉管自萌發(fā)孔長出，經花粉管通道后，向子房方向延伸(圖版Ⅱ:B)。

經水溶性苯胺藍染色后，能正常萌發(fā)的花粉管呈現(xiàn)強烈的藍色熒光反應。授粉后1 h，大量花粉開始在柱頭上萌發(fā)，從萌發(fā)孔中長出的花粉管朝中空花粉通道生長(圖版Ⅱ:C) ; 授粉后24 h，部分花粉管到達花柱上部位置(圖版Ⅱ:D) ; 授粉后48 h，部分花粉管到達花柱1 /3位置(圖版Ⅱ:E) ;授粉后72 h，花粉管到達花柱2 /3 位置(圖版Ⅱ:F、G) ; 授粉后96 h，少量花粉管到達花柱基部并沿引導組織生長(圖版Ⅱ:H)，隨后進入胚珠(圖版Ⅱ:I)；授粉后144 h，萌發(fā)的花粉管經花柱進入子房，經珠孔進入胚囊中(圖版Ⅱ:J)。

2.3 受精過程

開花后6 d左右的切片中發(fā)現(xiàn)一個精子靠近卵細胞 (圖版Ⅲ:A)，彼此相互靠近的精核核膜與卵細胞的核膜開始融合(圖版Ⅲ:B)，緊接著精核更靠近卵核，進而出現(xiàn)雌雄性核仁(圖版Ⅲ:C)，隨后精核開始破裂，其染色質逐漸分散于卵細胞里，此時精卵相互融合形成合子。合子要經過約2 d的整修期，其間最主要的變化特征為合子內的核仁體積逐漸增大(圖版Ⅲ:D)。授粉后約8 d，合子仍以1個大核仁為主。

開花后6 d左右為精核與次生核的融合期。一個精核靠近次生核(圖版Ⅲ:E)。精核進入極核融合后先出現(xiàn)三核仁(圖版Ⅲ:F)，形成的三核仁不斷相互融合形成初生胚乳核的兩核仁(圖版Ⅲ:G)。剛形成的兩初生核又相互不斷融合，初生胚乳核中其核仁相互融合的同時、體積逐漸增大，接著初生胚乳核移向胚囊中部，很快二核仁融合為一個大核仁(圖版Ⅲ:H)。胚形成后，胚柄開始退化，胚的表皮細胞吸收胚乳的營養(yǎng)物質而使胚繼續(xù)發(fā)育(圖版Ⅲ:I)；油橄欖幾乎成熟的胚，呈橄欖球型 (圖版Ⅲ:J)。

2.4 授粉受精全歷程

對612枚雌蕊組織制片，并對約2 400個胚珠的觀察表明，油橄欖在田間平均氣溫約20 ℃的條件下，花開后花粉粒落到柱頭上立刻萌發(fā)，花粉管穿過花粉管通道進入子房，經胎座表面長進珠孔，繼而花粉管釋放兩精子，1精子與卵細胞相互融合，同期另一精核與兩極核相互融合，合子休眠一段時間，此后合子開始分裂。30 d左右胚核發(fā)育成心型，40 d左右，胚分化形狀如橄欖球型，此時接近發(fā)育成熟。

由表1可知，子房發(fā)育過程基本完整，有卵細胞和極核的子房在95%以上，但授粉受精的胚珠僅為15.52%，在30 d左右觀察到92.35%的胚發(fā)育正常，40 d左右觀察到所有胚接近成熟。

3　討論與結論

油橄欖的授粉受精過程與大多被子植物的雙受精過程基本一致，經歷精卵的相互融合及精核與兩極核相互融合。經歷的過程為花粉管通過花柱中的通道，進入子房，直達胚珠，進而穿過珠孔，伸向胚囊。進入胚囊釋放精細胞是在授粉后6 d左右，可能與其本身的雌蕊組織結構有關，也可能與植物類別有關?；ǚ哿Ｃ劝l(fā)和花粉管生長速度與植物種類的關系較密切，因而從授粉到受精的時間相差較大。植物的受精時間各不相同，如七葉樹(Aesculuschinensis)授粉受精時間為1～4 d(李鶯等，2012)，蘋果(MaluspumilaMill)由授粉到受精的時間為5 d，連翹(Forsythiasuspensa)的授精時間約18 d，櫟屬(QuercusL.)植物則需長達一年或一年多；而一般農作物的花粉萌發(fā)較快，如棉(Gossypiumhirsutum)需15～32 h，而水稻(Oryzasativa)只需1.5 h，小麥(Triticumaestivum)僅需1 h，這些差異主要由遺傳性所決定(劉紅霞，2010)。油橄欖從傳粉到受精的時間較長，約為10 d。

表 1　油橄欖子房切片觀察結果

本研究發(fā)現(xiàn)，有兩極核和卵細胞的胚珠比率較高(95.63%)，但成熟的八細胞胚囊?guī)缀跤^察不到，其原因可能是反足細胞存在的時間較短、退化得較早，也可能是八細胞不在一個平面上，較難觀察到，其原因需進一步研究；本研究還發(fā)現(xiàn)授精的胚珠很低(15.52%)，其原因可能是其余3個配囊發(fā)育較遲緩或退化，此結果與Petka et al(2011)研究結論基本一致。

本研究中，子房的發(fā)育過程基本完整，有卵細胞及極核的子房在95%以上，但授粉受精的胚珠只有15.52%，這表明卵細胞與精子及極核與精子結合過程中受阻。果樹授粉受精不良的原因各不相同，如用熒光顯微鏡觀察無核世紀梨(CenturySeedless)的自花授粉花粉管不能進入胚囊(朱玉玲等，2013)；荔枝(Litchichinensis)中的妃子笑與南島無核胚胎發(fā)育過程中存在胚胎發(fā)育敗育現(xiàn)象(馮蔚等，2010)；蘋果樹授粉不親和，是因為他們含有完全相同的S基因型，導致受精過程不能完成(張曉明等，2005)；桂花(Osmanthusfragrans)的胚、胚乳發(fā)育過程中存在大量敗育現(xiàn)象，這是桂花座果率低的一個重要原因(楊琴軍等，2003)。開花后30 d左右是油橄欖的生理落果期，此時期出現(xiàn)大量落果，且授粉受精的胚珠為15.52%，說明授粉受精不良，在一定程度上會影響其坐果。

BOUSSADIA O, STEPPE K, ZGALLAI H, et al， 2010. Effects of nitrogen deficiency on leaf photosynthesis, carbohydrate status and biomass production in two olive cultivars ‘Meski’and ‘Koroneiki’ [J]. Sci Hortic, 123(3): 336-342.

CHOI ST, SONG WD, PARK DS, et al, 2010. Effect of different girdling dates on tree growth, fruit characteristics and reserve accumulation in a late-maturing persimmon [J]. Sci Hortic, 126(2): 152-155.CONNOR DJ, FERERES E, 2005. The physiology of adaptation and yield expression in olive [J]. Hortic Rev, 31(2): 155-229.

CUEVAS J, POLITO VS, 2004. The role of staminate flowers in the breeding system ofOleaeuropaea(Oleaceae): an andromonoecious, wind-pollinated taxon [J]. Ann Bot, 93: 547-553.

ELIZABETH, FICHTNER, FARM ADVISOR, 2012. Tulare County. Olive Bloom and Pollination [J]. Agric Nat Res, 9(2):7-11.

FAISAL KHALIL, KHALID MAHMOOD QURESHI, AMMAZ KHAN, et al, 2012. Effect of girdling and plant growth regulators on productivity in olive (OleaeuropaeaL.) [J]. Pak J Agric Res, 25(2) :120-128.

FENG W，ZHANG L，LI SG，et al, 2010. Comparison on embryonic development process of three cultivars ofLitchichinensis[J]. Chin J Trop Crops, 31(5): 736-139. [馮蔚，張蕾，李松剛，等，2010. 3個荔枝品種胚胎發(fā)育過程的比較) [J]. 熱帶作物學報,31(5): 736-139.]LI Y，CHEN PT，F(xiàn)AN JJ，2012. Pollen viability and stigma receptivity ofAesculuschinensis[J]. Guihaia, 2012, 32(6): 816- 821. [李鶯，陳鵬濤，樊靜靜. 2012. 七葉樹花粉活力和柱頭可授性變化的研究 [J]. 廣西植物,2012,32(6):816-821.]

LIAO T，YUAND Y，GAO CH,，et al, 2014. Pollination，fertilization and early embryonic development ofCamelliaoleifera[J]. Scientia Silvae Sinicae,50(2):50-55. [廖婷，袁德義，高超，等， 2014. 油茶授粉受精及早期胚胎發(fā)育) [J]. 林業(yè)科學,50(2):

(Continueonpage1106)50-55.]

(Continuefrompage1031)

LIU HX，REN SF，LIU M， 2010. Observation of pollination and fertilization process inForsythiasuspense[J]. Sci Silv Sin,46(9):545-549. [劉紅霞，任士福，劉銘，2010. 連翹授粉受精過程的觀察 [J]. 林業(yè)科學,46(9):545-549.]

MARTINS PC, CORDEIRO AM, RAPOPORT HF, 2006. Flower quality in orchards of olive,OleaeuropaeaL [J]. Morisca Adv Hortic Sci, 20:262-266.

PENG JG，LI J，HUSH Y， et al， 2006. Olive artificial pollination experiments to explore [J]. J Sichuan For Sci Technol, 27(1):66-67. [彭建國，李俊,，胡世英，等， 2006. 油橄欖人工授粉試驗探索J]. 四川林業(yè)科技,27(1):66-67.]

PETKA YG, PENKA D, ELINA J, et al, 2011. On the gametogenesis and early embryogenesis in some olive tree cultivars [J]. Flora, 206:47-51.QIAN WX, LI Z, LANYING Z, et al, 2009. Study on olive development in China [J]. Am-Eur J Agric Environ Sci, 5(3): 414-419.

SALEH,SHDIEFAT,QRUNFLEH, 2006. Effect of fruit thinning on endogenous plant hormones and bearing of the olive(OleaeuropaeaL.) [J]. Jordan J Agric Sci, 4(2): 348-358.

SHEVCHENKO SV, 2001. The reproductive biology of some valuable subtropical fruit cultures and ornamental plants of the Crimea [J]. Nat Sci Centr Ukr,30:91-97.

YANG H，SHEN JH，LI W，et al， 2009. Fertilization process in flax and its performance time for each stage [J]. Acta Agron Sin,35(5):892-898. [楊虹，申家恒，李偉， 等. 2009. 亞麻受精過程及其經歷的時間 [J]. 作物學報,35(5):892-898.]

YANG QJ，HUANG YW，LI HP， 2003. Studies on formation and development of embryo and endosperm of osmanthus fragrans [J]. J Huazhong Agric Univ, (2): 67-71. [楊琴軍，黃燕文，李和平， 2003. 桂花胚和胚乳發(fā)育過程的研究 [J]. 華中農業(yè)大學學報,(2):67-71.]

ZHANG XM，ZHU M，JIANG LJ， et al， 2005. A review on the research on the pollen S genes of fruit trees [J]. J Fmit Sci, 22(3):261-264. [張曉明，朱墨，姜立杰，等， 2005. 果樹自交不親和花粉S基因研究進展 [J]. 果樹學報,22(3):261-264.]

ZHANG ZW， 2014. Since different altitudes olive growing Longjiang river survey and development of ideas [J]. Northern Hortic,23:188-190. [張正武， 2014. 自龍江流域不同海拔高度油橄欖生長調查與發(fā)展思路 [J]. 北方園藝,23:188-190.]

ZHU YL，PENG JY，ZHANG YX， 2013. The observation of pollination，fertilization and seed abortion of ‘Century Seedless Pear’ [J]. Acta Hortic Sin,40(7): 1244-1 250. [朱玉玲，彭建營，張玉星， 2013. ‘無核世紀梨’授粉受精過程及種子敗育的觀察 [J]. 園藝學報,40(7): 1 244-1 250.]

Observation on pollination, fertilization and embryo development process inOleaeuropaea

JIANG Cheng-Ying1， SHI Yan-Hu1， WU Wen-Jun1， ZHU Zhen-Jia2

( 1.GansuAcademyofForestry/OliveEngineeringTechnologyResearchCenterofGansuProvince, Lanzhou 730030, China;2.CollegeofResourceandEnvironmentalSciences,GansuAgricultureUniversity, Lanzhou 730070, China )

The present research was undertaken to better understand the reason of the low fruit setting and gather the basic knowledge of reproductive biology ofOleaeuropaea, the structural characteristics of ovules, pollination and fertilization process of ovules to master the various stages of time and the completed percentage of ovary pollination and fertilization. Fluorescence microscopy was used to observe pollen tube growth, and the paraffin slice technique was used to observe the ovary pollination and fertilization in olive of ‘EZhi-8’. The results showed that the ‘EZhi-8’ is one ovary two ovules four ventricles with developed nucellus, orthotropous and crassinucellate ovule. Pollen grains germinated immediately when they were fallen on stigma, then pollen tubes grew in the transmitting tissue of style, entering ovary and growing on the surface of endocuticle of ovary wall, and passing micropore through placenta and funicle. Pollen tube was released two sperms, one entered egg and another in the secondary nucleus, which was a fusion process of male and female. The performance time of pollination and fertilization was as follows: pollen grains germinated very soon on stigma, and the pollen tube grew into the ovule micropyle and released sperm for 60 d after flowering. After flowering, within 10 d fertilization was finished , 30 d developed omphalos-embryo and within 40 d maturation occurred. A tatol of 612 ovary slices were observed by treating with a series of paraffin treatments, the highly developed ovaries of ‘EZhi-8’ accounted for 97.53%, the finishment of pollination and fertilization process of ovules accounted for 15.52%. Our results showed that there were about 85% of ovules were not fertilized in the natural conditions, which affected the fruit setting to a certain extent.

Oleaeuropaea, pollination, fertilization, time, embryonic development

10.11931/guihaia.gxzw201504018

2015-04-09

2016-01-27

國家自然科學基金 [Supported by the National Natural Science Foundation of China (31160170)]。

姜成英(1973-)，女, 甘肅隴南人, 研究員, 主要從事經濟林方面的研究, (E-mail)253464579@qq.com。

文獻標識碼： A文章編號： 1000-3142(2016)09-1026-06

姜成英， 史艷虎， 吳文俊， 等. 油橄欖授粉受精和胚胎發(fā)育過程觀察 [J]. 廣西植物， 2016， 36(9):1026-1031

JIANG CY， SHI YH， WU WJ， et al. Observation on pollination, fertilization and embryo development process inOleaeuropaea[J]. Guihaia， 2016， 36(9):1026-1031