方希修 畢可波 方圓

摘要 濱海白首烏是一種傳統(tǒng)中藥材，為蘿藦科鵝絨藤屬植物耳葉牛皮消的塊根，具有對(duì)癌細(xì)胞的直接殺傷作用、調(diào)節(jié)免疫、誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡等多種免疫活性。分析了其活性成分及其免疫活性，提出了其研究與開(kāi)發(fā)利用方向。

關(guān)鍵詞 濱海白首烏；活性成分；C21甾體；免疫活性

中圖分類(lèi)號(hào) R285 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 1007-5739（2016）09-0080-02

Abstract Cynanchum bungei is a famous traditional tonic in the oriental system of medicine as Cynanchum auriculatum Royle ex Wight roots. It have killing cancer cells，immunomodulatory，induction apoptosis of tumor cells and other activities. The active ingredient and immune activity of Cynanchum auriculatum Royle ex Wight was analyzed，research and development direction of Cynanchum auriculatum Royle ex Wight in the future were summarized.

Key words Binhai Cynanchum bungei；active ingredients；C21 steroidal glycosides；pharmacological activities；Binhai Jiangsu

首烏分為赤、白2個(gè)品種，赤首烏國(guó)內(nèi)外都有生長(zhǎng)，濱海白首烏又名耳葉牛皮消（Cynanchum auriculatum Royle ex Wight），是僅生長(zhǎng)在中國(guó)的首烏物種，是中國(guó)傳統(tǒng)的食、藥、美容兼用植物。全國(guó)耳葉牛皮消95%出產(chǎn)在江蘇省濱?？h，當(dāng)?shù)剞r(nóng)民種植白首烏的歷史悠久，是我國(guó)著名的首烏之鄉(xiāng)。耳葉牛皮消味甘、苦，性微溫，含有C21甾苷等生物活性物質(zhì)，并含有多種營(yíng)養(yǎng)成分及生物活性物質(zhì)，具有補(bǔ)肝腎、強(qiáng)筋骨、益精血、健脾消食、解毒療瘡等功效。

研究表明，濱海白首烏（耳葉牛皮消）有效部分和生理成分具有多種保健功效，如提高特異以及非特異性免疫效果、降低膽固醇含量、清除人體內(nèi)自由基、抑制腫瘤生長(zhǎng)擴(kuò)散，有效降低心肌耗氧量等作用。近年來(lái)，隨著對(duì)耳葉牛皮消開(kāi)發(fā)利用的不斷深入，耳葉牛皮消和耳葉牛皮消制品的需求量呈猛增趨勢(shì)。

1 濱海白首烏的活性成分

1.1 多糖類(lèi)

濱海白首烏（耳葉牛皮消）中含有雙糖Methylgaucobioside 和Wilforibiose。并含3種雜多糖AC-A，AC-B，AC-C，該3種雜多糖均由葡萄糖、木糖、鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖、甘露糖6種單糖構(gòu)成[1]。

1.2 苯酮類(lèi)

濱海白首烏（耳葉牛皮消）存在苯酮類(lèi)物質(zhì)，主要為白首烏二苯酮。苯酮類(lèi)物質(zhì)主要存在于戟葉牛皮消、隔山消和耳葉牛皮消根中，前者中存在Bunge-isideA、B、C、D，4﹣羥基苯乙酮、2，4-二羥基苯乙酮[2]，后兩者均存在白首烏二苯酮[3-4]，而隔山消中還存在Cynanchone A、Cynandione A。

1.3 C21甾體酯苷化合物

研究表明，C21甾體苷類(lèi)化合物具備抗多種腫瘤功效，治療腫瘤有效，該化合物制劑已成為用于治療多種腫瘤的臨床藥物。研究C21甾體苷類(lèi)化合物的藥理作用、分離及作用機(jī)制成為熱點(diǎn)。

C21甾體酯苷是目前從濱海白首烏中發(fā)現(xiàn)的量最多、最主要的活性成分。印 敏等分別從新鮮藥材、塊根、黑鰻藤藤莖中分離出C21甾體苷類(lèi)化合物。從白首烏新鮮藥材中分離并鑒定化合物7類(lèi)，其中C21甾體苷類(lèi)化合物3類(lèi)，占42.86%，從塊根中分離出新C21甾體苷類(lèi)化合物4個(gè)，從黑鰻藤藤莖中分離C21甾體苷類(lèi)化合物3個(gè)[5-7]。

白首烏分子內(nèi)含孕甾烯衍生物，主要存在于 C21甾體類(lèi)骨架內(nèi)，而目前未發(fā)現(xiàn)變型孕甾烷骨架，可推測(cè)白首烏分子結(jié)構(gòu)中不含有與之相關(guān)的衍生物。在白首烏分子內(nèi)，C3位β-羥基易結(jié)合4類(lèi)糖合成苷，糖之間以1→4相連[8]，如2-去氧洋地黃糖、2，6-去氧糖、夾竹桃糖、葡萄糖、磁麻糖。C12、C20位β-羥基可結(jié)合有機(jī)酸生成C21羥基成酯。

1.4 磷脂類(lèi)

濱海白首烏（耳葉牛皮消）含有磷脂類(lèi)物質(zhì)，采用鉬藍(lán)比色法測(cè)定耳葉牛皮消中的磷脂類(lèi)成分，含量為0.030%[9]。從耳葉牛皮消中提取總磷脂，通過(guò)鑒定，證明有5種磷脂：磷脂酰甘油（PG）、磷脂酰乙醇胺（PE）、磷脂酰膽堿（PC）、磷脂酸（PA）、磷脂酰乙醇胺（PE）、雙磷脂酰甘油（DPG）[10]。

2 濱海白首烏藥理活性

2.1 抗腫瘤

研究表明，濱海白首烏中含有的獨(dú)特的白首烏甾體總苷，具有廣泛的抗腫瘤效果，對(duì)常見(jiàn)的4種實(shí)體瘤細(xì)胞如大腸癌細(xì)胞、前列腺癌細(xì)胞、宮頸癌細(xì)胞、肺癌細(xì)胞均有明顯的抑制作用，且與單位時(shí)間內(nèi)的高濃度有關(guān)，呈現(xiàn)出濃度依賴(lài)性。研究表明，濱海白首烏（耳葉牛皮消）含有白首烏總苷，可明顯抑制S180瘤株在體內(nèi)的發(fā)，抑制作用效果與給藥途徑和藥物劑量密切相關(guān)[11]。濱海白首烏（耳葉牛皮消）中的白首烏總苷抗腫瘤作用機(jī)制主要是2種，一是直接殺傷癌細(xì)胞的，二是誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡。

2.1.1 直接殺傷癌細(xì)胞。濱海白首烏（耳葉牛皮消）中含有的甾體酯苷，其分子結(jié)構(gòu)較為特殊，既含有甾核，具有親脂性；又含有基團(tuán)，具有親水性。將甾體酯苷藥物作用于癌細(xì)胞膜表面，競(jìng)爭(zhēng)K+的結(jié)合部位，抑制Na+/K+泵，引起癌細(xì)胞膜表性質(zhì)變，可初步判定與白首烏甾體酯苷親脂基團(tuán)和親水基團(tuán)有關(guān)[12]。經(jīng)FCM快速測(cè)定細(xì)胞DNA的相對(duì)含量，部分癌細(xì)胞膜存在破裂現(xiàn)象[13]，說(shuō)明甾體酯苷對(duì)癌細(xì)胞S期有阻滯作用，在形態(tài)學(xué)上支持白首烏甾體酯苷的直接殺傷作用。

2.1.2 誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡。研究結(jié)果表明，應(yīng)用MTT法可證實(shí)白首烏苷（AK）對(duì)KB細(xì)胞（口腔表皮樣癌細(xì)胞）有殺傷作用，其機(jī)理可能與誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡有關(guān)。白首烏苷（AK）是從白首烏總苷（CA）分離純化獲得的單體，MTT法主要是將白首烏苷（AK）作用于KB細(xì)胞（口腔表皮樣癌細(xì)胞），使用50 μg/mL濃度的白首烏苷（AK）作用于KB細(xì)胞（口腔表皮樣癌細(xì)胞）72 h，可誘導(dǎo)核縮等早期調(diào)亡。經(jīng)流式細(xì)胞儀測(cè)定，白首烏苷（AK）作用72 h可出現(xiàn)核縮調(diào)亡高峰，達(dá)41.9%，還可將KB細(xì)胞（口腔表皮樣癌細(xì)胞）周期阻滯于G0/G1期[14]。

研究表明，白首烏C21甾體苷類(lèi)化合物抗癌作用熱點(diǎn)明顯，一是對(duì)肝癌細(xì)胞有誘導(dǎo)凋亡作用；二是化合物的濃度與抑制率相關(guān)，即可能具有量—效關(guān)系；三是C21甾體類(lèi)化合物對(duì)腫瘤細(xì)胞抑制具有選擇性。

王冬艷等[14]研究發(fā)現(xiàn)，不同濃度的C21甾體苷類(lèi)化合物對(duì)小鼠移植性Heps具有抑制作用，10 mg/kg劑量組的抑制腫瘤率為34.79%，20 mg/kg劑量組的抑制腫瘤率為47.08%，40 mg/kg劑量組的抑制腫瘤率為50.23%。

林紅梅等[15]通過(guò)9種C21甾體苷類(lèi)化合物作用，對(duì)SMMC-7721人肝癌細(xì)胞系和A549肺腺癌細(xì)胞株的抑制作用有程度上的差異，單株細(xì)胞增殖的抑制率伴隨與化合物濃度呈正相關(guān)。鄭 威等[16]發(fā)現(xiàn)，通過(guò)丫啶橙染色法染色熒光顯微鏡，白首烏中甾體苷誘導(dǎo)PC-3（前列腺癌細(xì)胞）產(chǎn)生的提取物，可誘發(fā)顯著的核斷裂和核固縮，形成凋亡小體。同時(shí)，還發(fā)現(xiàn)PC-3（前列腺癌細(xì)胞）凋亡進(jìn)程與C21甾體苷類(lèi)化合物存在量—效關(guān)系，可提高細(xì)胞阻滯在 G2/M期比例，呈顯著濃度依賴(lài)性。

另外，純化C21甾體類(lèi)化合物作用于BGC-823、BEL-7402、KB和PC-3、SGC-7901細(xì)胞株，發(fā)現(xiàn)純化C21甾體類(lèi)化合物對(duì)三者未表現(xiàn)明顯抗腫瘤作用，而對(duì)后二者抗腫瘤作用明顯，這表明C21甾體苷類(lèi)化合物對(duì)于腫瘤細(xì)胞抑制作用具有選擇性[16]。

2.2 免疫調(diào)節(jié)

曾郁敏等[17]研究表明，白首烏總苷對(duì)機(jī)體具有顯著的調(diào)節(jié)免疫功能。顧立剛等[18]認(rèn)為，白首烏總甙的不同濃度對(duì)于某些細(xì)胞的作用不同。高濃度白首烏總甙對(duì)小鼠脾臟Ti淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)有抑制作用，對(duì)于白細(xì)胞介素-2（IL-2）的活性也產(chǎn)生抑制效應(yīng)，而在低濃度白首烏總甙對(duì)于上述試驗(yàn)對(duì)象促進(jìn)效應(yīng)明顯。宋俊梅等[19]認(rèn)為，白首烏總甙能激活小鼠腹腔M5，提高M(jìn)5抗原的能力，增強(qiáng)吞噬消化，從而提升小鼠機(jī)體的特異性免疫功能[19]。

研究表明，C21甾苷可降低移植性肝癌實(shí)體瘤后異常增高的脾指數(shù)，提升胸腺指數(shù)，巨噬細(xì)胞吞噬能力增強(qiáng)，T、B淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)明顯增強(qiáng)。脾細(xì)胞顯著提高分泌白細(xì)胞介素-2（IL-2），腹腔巨噬細(xì)胞分泌TNF-α能力明顯提高[20]。高麗君用家兔、小鼠做樣本，采用白首烏中的白首烏多糖類(lèi)進(jìn)行靶擊，發(fā)現(xiàn)后者能增強(qiáng)小鼠遲發(fā)型超敏反應(yīng)，顯著提高家兔T 淋巴細(xì)胞的增殖能力，從而提高機(jī)體的免疫效應(yīng)[21]。

白首烏還可通過(guò)影響淋巴細(xì)胞在形態(tài)和數(shù)量上提升機(jī)體免疫。在形態(tài)上，白首烏提取物促進(jìn)動(dòng)物T淋巴細(xì)胞的依賴(lài)區(qū)大范圍增生，促使B淋巴細(xì)胞依賴(lài)區(qū)增大[22]。在數(shù)量上，白首烏總磷脂可顯著提高外周血ANAE（+）淋巴細(xì)胞比值和絕對(duì)數(shù)，防止倒置現(xiàn)象，為T(mén)細(xì)胞比值保持正常打下基礎(chǔ)[23]。

3 結(jié)語(yǔ)

今后以及相當(dāng)長(zhǎng)的一段時(shí)間，科研工作者應(yīng)加強(qiáng)對(duì)濱海白首烏（耳葉牛皮消）的系統(tǒng)研究以及商業(yè)開(kāi)發(fā)。一方面，積極開(kāi)展其藥理活性研究；另一方面，利用白首烏的獨(dú)特的區(qū)域資源優(yōu)勢(shì)，運(yùn)用現(xiàn)代制備技術(shù)，生產(chǎn)提取物單味藥劑或中藥復(fù)方藥物。從濱海白首烏（耳葉牛皮消）的分子結(jié)構(gòu)及現(xiàn)有的理論研究結(jié)果來(lái)看，其含有的甾體酯苷可開(kāi)發(fā)成為新的抗腫瘤藥物，如苯酮類(lèi)、磷脂類(lèi)可分別開(kāi)發(fā)為保肝類(lèi)藥物和生發(fā)產(chǎn)品，實(shí)現(xiàn)其廣闊的醫(yī)藥價(jià)值[24]。

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