王娓辰　林　宇　王　禹　王金成　魏亞東　張海濱

（天津出入境檢驗檢疫局天津300461）

澳大利亞啤酒大麥品種鑒定

王娓辰林宇王禹王金成魏亞東張海濱*

（天津出入境檢驗檢疫局天津300461）

根據(jù)我國進口啤酒大麥實際情況和需求，建立適用于檢驗進口澳大利亞啤酒大麥感官鑒定圖譜和檢驗方法，以實際樣品進行了方法驗證。結(jié)果表明，該方法能夠有效鑒別15個官方發(fā)布品種，3個純品種，1份加拿大、7份法國和1份丹麥大麥樣品，具有良好的特異性；進口大麥樣品組別檢驗與品種純度差異較大，提示在啤酒大麥進口中應(yīng)重視品種純度對啤酒加工品質(zhì)的影響。本研究建立的方法能夠在進口啤酒大麥檢驗中應(yīng)用，也適用于在啤酒加工企業(yè)中推廣。

澳大利亞；啤酒大麥；品種

1　前言

我國作為啤酒消費大國，2013年啤酒產(chǎn)量5061.5萬t［1］。隨著我國啤酒消費的增長，啤酒大麥的進口貿(mào)易量迅猛增長，位列進口谷物前3位，2013-2014年度進口量達到歷史最高的489.1萬t［2］。我國大麥進口量最大的為澳大利亞，僅2014年就進口了364.43萬t，占當年大麥出口比例的78.7%［3］。大麥品種及其純度決定著啤酒的品質(zhì)和加工工藝，盡管制定了大麥的質(zhì)量標準，但應(yīng)以充分準確鑒定啤酒大麥的品種和純度為前提和基礎(chǔ)［4］。澳大利亞種植和生產(chǎn)的80余種大麥中，啤酒大麥占1/5，每年還會針對市場變化和品種更新狀況做出相應(yīng)調(diào)整。澳大利亞谷物貿(mào)易協(xié)會2015年頒布的標準中，注冊的澳大利亞啤酒大麥品種多達25種［5］，而國內(nèi)尚未公布可用于澳大利亞進口大麥品種鑒定的相關(guān)標準。各類研究中對于澳大利亞大麥品種的調(diào)查很少，對于口岸進口品質(zhì)鑒定以及企業(yè)生產(chǎn)加工常用的感官鑒定方法的缺位急需解決。本研究主要針對澳大利亞啤酒大麥主要品種及其進口感官鑒定方法進行研究。

2　材料與方法

2.1材料

2.1.1試驗樣品

大麥樣品：澳大利亞43份，加拿大、法國、丹麥共9份，均為2013-2015進口檢驗樣品；純品種樣品由中國歐麥（保定）麥芽有限公司提供。

2.1.2儀器

C-FLED2型解剖鏡：Nikon公司。

2.2方法

2.2.1感官圖譜的建立

總之，我們認為：子宮平滑肌瘤是多因素、多種生長因子共同作用的結(jié)果，降低性激素水平，阻斷WT-1基因位點，均能達到阻止肌瘤生長或使其萎縮甚至消失的目的。

天津出入境檢驗檢疫局動植物與食品檢測中心品質(zhì)實驗室自澳大利亞大麥局購入《澳大利亞大麥手冊》［6］，該手冊中共計79種澳大利亞大麥，其中注冊啤酒大麥15種。以《澳大利亞大麥手冊》為基礎(chǔ)，結(jié)合國際種子檢驗協(xié)會發(fā)布的國際種子檢驗規(guī)則［7］和國家標準［8］，建立澳大利亞啤酒大麥感官檢驗圖譜，按照國際通用方法對原澳大利亞大麥圖譜劃分為8個特征進行描述，使其適合口岸啤酒大麥感官檢驗。這8項特征為：籽粒色澤、籽粒外形、外稃基部形狀、小穗軸、小穗軸茸毛、側(cè)背脈紋齒狀物、外稃及內(nèi)稃褶皺、腹溝展開程度。

2.2.2實物樣品的感官檢驗

每份樣品按照SN/T0800.1進行樣品縮分和制備10 g樣品，從中抽取100粒樣品，按照2.2.1建立的圖譜特征逐粒進行鑒別，在檢驗中應(yīng)用解剖鏡進行細部特征辨別和拍照。

2.2.3各特性鑒定方法

（1）籽粒色澤。在漫射光下，先觀察工作樣品總體色澤，然后將樣品充分混勻后平鋪于單色背景平面上，在無反光條件下檢查顏色。

（2）籽粒外形。分別從籽粒背面和腹面垂直觀察籽粒形狀，關(guān)注籽粒長寬比以及橫向中線位置。

（3）外稃基部形狀。指大麥籽粒背面在連接小穗軸的基部形成的壓痕，以放大鏡或解剖鏡從籽粒背面觀察辨別。馬蹄鐵狀和橫溝狀詳見圖1。

圖1　基部形狀圖例（A：馬蹄鐵狀；B：橫溝狀）

（5）小穗軸茸毛。在解剖鏡下觀察小穗軸茸毛長度、疏密和集中情況。小穗軸茸毛長度呈短茬狀為“短”，呈茸毛狀為“長”，詳見圖2。結(jié)合（4）進行檢查。

圖2　小穗軸茸毛（A：長；B：短）

（6）側(cè)背脈紋齒狀物。在解剖鏡或放大鏡下觀察，辨別籽粒背部正中和兩側(cè)是否有對稱縱向延伸的兩條脈紋，多數(shù)情況下沿脈紋有齒狀波紋排列。

（7）外稃及內(nèi)稃褶皺。在解剖鏡或放大鏡下觀察，背面外稃及腹面內(nèi)稃表面褶皺的疏密、分布位置和集中情況。

（8）腹溝展開程度。以放大鏡或解剖鏡從腹面觀察籽粒，兩頰中央從胚端一直延伸到頂端的一條凹溝，觀察其寬窄、展開程度和展開位置。

3　結(jié)果及分析

3.1感官圖譜整理與建立

根據(jù)本研究建立的方法，將澳大利亞大麥手冊中列出的15個品種進行整理，并按照2.2.1描述的8項特征分別進行鑒別和說明，詳見圖3和表1。

圖3　澳大利亞啤酒大麥感官圖譜

表1　澳大利亞啤酒大麥感官特征

建立的圖譜結(jié)果表明，以8項特征可以有效區(qū)分本文所涉及的15個品種。從實際檢測過程體現(xiàn)出的表征顯著性從高到低可大致排列為：小穗軸茸毛、小穗軸、外稃基部形狀、側(cè)背脈紋齒狀物、外稃及內(nèi)稃褶皺、腹溝展開程度、籽粒外形、籽粒色澤。其中，以小穗軸茸毛、小穗軸、外稃基部形狀特征最為穩(wěn)定，也是入境大麥品種鑒定常用的特征。

3.2樣品感官鑒定

3.2.1純品種樣品鑒定

根據(jù)本研究建立的方法對3個純品種樣品Bass、Scope和Hindmarsh按3.1中所列的8項特性進行感官鑒定，結(jié)果見圖4和表2。結(jié)果表明，根據(jù)這8項特性不僅可有效區(qū)分開每個品種樣品與圖譜中的15個品種，還能彼此之間進行有效鑒別，且特征明顯，方法具有適宜的特異性。

圖4　純品種啤酒大麥樣品鑒定結(jié)果

表2　純品種啤酒大麥樣品鑒定結(jié)果

3.2.2多樣品擴大鑒定

在純品種和特異性檢驗基礎(chǔ)上，按照本研究的方法對全部樣品進行檢驗鑒定，并對傳統(tǒng)純度鑒定中廣泛采用的組別檢驗與本研究實施的品種純度進行對比。結(jié)果詳見表3。結(jié)果顯示，40份澳大利亞組別純度達到96%-98%的樣品，品種純度檢驗為多品種混合，為非純種大麥；3份純品種大麥組別純度為98%-99%，品種純度為97%-99%。加拿大、法國、丹麥共計9份樣品根據(jù)本研究的方法也能夠進行區(qū)分，進一步驗證了8項特征組合鑒定的特異性和可行性。

表3　樣品擴大感官鑒定結(jié)果

4　討論

根據(jù)本研究建立的方法和8項特征，綜合考慮了國際種子檢驗協(xié)會標準、澳大利亞官方標準和我國國家標準的要求。我國的國家標準為1995年頒布，盡管2015年跟進了第20號修改單，但并未具體描述大麥感官檢驗方法，針對性不強。此外，農(nóng)業(yè)部、國家質(zhì)檢總局頒布的行業(yè)標準在分子生物學(xué)方法上豐富了品種鑒定的方法［9，10］，但方法復(fù)雜，專業(yè)和硬件要求高，檢驗周期長。上述方法均不能很好地適應(yīng)口岸快速驗放要求，對于一線企業(yè)操作性也不強。澳大利亞官方2010年發(fā)布了大麥手冊，指導(dǎo)國內(nèi)種植和麥芽生產(chǎn)以及出口貿(mào)易，該標準圖譜清晰、具有代表性，但所描述的均為田間生長特性和植株特性，并不適合實驗室進口糧谷檢驗。因此，本研究的方法針對上述各方法標準的優(yōu)缺點，結(jié)合口岸檢驗檢疫的實際情況，開發(fā)建立了進境澳大利亞大麥感官鑒定方法，實際驗證結(jié)果表明該方法具有良好的特異性和實用價值。

8項特征的組合在實驗室驗證中，繁簡適度，保證在經(jīng)過適當培訓(xùn)后，檢驗員能夠快速完成檢驗，不至于造成視覺疲勞。借助現(xiàn)代化設(shè)備如帶電子攝錄功能的解剖鏡，更可以先拍后檢，并可進行結(jié)果長期保存以便仲裁。在今后的檢驗自動化發(fā)展中，也可以研究計算機及數(shù)碼技術(shù)的應(yīng)用［11］。本方法中的每各單項特征，可根據(jù)需要進行適當調(diào)整。例如，在檢驗小穗軸茸毛中，可將其疏密、分布等細節(jié)加以鑒定；檢驗籽粒形態(tài)時，可進一步對籽粒長寬比進行測量和鑒定。

擴大樣品檢測結(jié)果進一步顯示本方法具有良好的鑒別特性，并對本文15種以外的品種也能夠建立特異性的圖譜，提示了按照該方法路線，今后還可以擴充圖譜范圍，適用性強。

值得注意的是，本文對進境糧谷檢驗中常見的兩種純度檢驗進行了對比，實際進境樣品組別和品種這兩種純度的檢驗結(jié)果存在較大差異。也就是說符合了等級標準的樣品不一定能夠符合品種純度要求。大麥品種純度對于大麥從倉儲、運輸、麥芽生產(chǎn)到啤酒加工整個鏈條的各個環(huán)節(jié)有很大的影響［4，12-14］，澳大利亞GTA標準規(guī)定了啤酒大麥品種純度應(yīng)滿足不低于95%的界限指標要求，即使樣品中95%以上都是啤酒大麥，但如為多品種的混合，則其加工品質(zhì)會遠低于純品種的大麥。純品種大麥和混合的均質(zhì)大麥在價格上也存在較大差異。因此，在進境大麥檢驗中，貿(mào)易相關(guān)方及官方檢驗機構(gòu)應(yīng)關(guān)注品質(zhì)項目，以保護我國企業(yè)利益，避免遭受不必要的損失。

5　結(jié)論

本研究根據(jù)國際標準和我國國家標準建立的澳大利亞啤酒大麥感官鑒定方法，具有較好的特異性和適用性，能夠應(yīng)用于進口澳大利亞啤酒大麥品種鑒定檢驗和推廣。

［1］國家統(tǒng)計局.http：//data.stats.gov.cn.2015.

［2］李先德，孫志勝，張京.2014年世界和中國大麥生產(chǎn)與貿(mào)易形勢及2015年展望［J］.農(nóng)業(yè)生產(chǎn)展望，2015，2：43-47.

［3］吳朝陽.糧食外部供給的不確定性及其對策研究［J］.中國經(jīng)貿(mào)，2015，3：33-36.

［4］林艷，梅成芳，董建軍.利用蛋白質(zhì)指紋技術(shù)鑒定澳大利亞、法國啤酒大麥的品種和純度［J］.技術(shù)研究，2006，1：10-14.

［5］Grain Trade Australia.Grain Tade Australia section 2-barley trade standards 2014/15 season［S］.2015.

［6］Barley Australia.Australian barley varieties-A reference guide. 2010.

［7］Inernational Seed Testing Association.Inernational rules for seed testing［S］.2015.

［8］GB/T3543.5-1995農(nóng)作物種子檢驗規(guī)程真實性和品種純度鑒定［S］.

［9］NY/T 2466-2013大麥品種鑒定技術(shù)規(guī)程SSR分子標記法［S］.

［10］SN/T 1048-2002進出口糧食、飼料大麥品種鑒定蛋白質(zhì)電泳分析法［S］.

［11］Piotr M，Szczypinski，Artur Klepaczko，et al.Identifying barley varieties by computer vision［J］.Computers and electronics in agruculture，2015，110：1-8.

［12］谷方紅，張五九，馮景章，等.釀造大麥品種鑒定技術(shù)的研究［J］.啤酒科技，2003，11：27-29.

［13］張麗莎，董國清，扎桑，等.基于EST-SSR和SNP標記的大麥麥芽純度檢測［J］.作物學(xué)報，2015，6：1-10.

［14］程燕，李先德.中國啤酒消費趨勢及其對啤酒大麥需求的影響［J］.農(nóng)業(yè)消費展望，2014，3：71-78.

The Research and Identification of Austrian Barley Varieties

WANG Weichen，LIN Yu，WANG Yu，WANG Jincheng，WEI Yadong，ZHANG Haibin*
（Tianjin Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau，Tianjin，300461）

In accordance w ith the factual situation and demand of national import malt barley，a visual reference and inspection method applied to import Australian malt barley was established and verified w ith factual samples.The results indicates that 15 officially accredited varieties，3 pure，1 Canadian，7 France and 1 Danish barley samples can be identified effectively，which shows good specificity of the protocal in this article.The differences between the class and variety purity identification is profound，which suggests that the influences of the variety purity should be recognitized of the importance of it in malt barley import.The protocal established in this article can be applied to the inspection of import malt barley，as well as in the beer production enterprises.

Australian；Malt Barley；Variety

TS262.5

E-mail：wangwc@tjciq.gov.cn；*通訊作者E-mail：Zhanghb@tjciq.gov.cn

天津出入境檢驗檢疫局自立項項目（TK085-2013）

2016-03-09