別振英張洪非陳玉松付立偉朱　友龐永強紀(jì)立順*

（1.中國煙草總公司山東省公司山東濟南250098；2.國家煙草質(zhì)量監(jiān)督檢驗中心；3.山東中煙工業(yè)有限責(zé)任公司濟南卷煙廠）

涉煙案件物品屬性判定試驗方法應(yīng)用與探討

別振英1張洪非2陳玉松1付立偉3朱友1龐永強2紀(jì)立順1*

（1.中國煙草總公司山東省公司山東濟南250098；2.國家煙草質(zhì)量監(jiān)督檢驗中心；3.山東中煙工業(yè)有限責(zé)任公司濟南卷煙廠）

為建立一種科學(xué)、準(zhǔn)確、權(quán)威的涉煙案件物品屬性判定方法，選取42種不同類型的試驗樣品，采用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法測定樣品中煙堿、降煙堿、新煙堿、麥斯明和假木賊堿的含量。結(jié)果分析顯示：如果樣品中煙堿、降煙堿、新煙堿、麥斯明和假木賊堿等5項指標(biāo)均有檢出，則應(yīng)判定為煙草物質(zhì)；如果全部未檢出或僅有煙堿檢出，則應(yīng)判定為非煙草物質(zhì)。本研究為涉煙案件物品屬性判定提供了一種更為科學(xué)、準(zhǔn)確的方法，能夠有效防止僅靠總植物堿含量指標(biāo)產(chǎn)生的判斷失誤，為省級煙草質(zhì)檢機構(gòu)開展卷煙真?zhèn)舞b別消除了可能存在的法律風(fēng)險。

涉煙案件物品；屬性判定；氣相色譜-質(zhì)譜法；生物堿

1　前言

卷煙真?zhèn)舞b別是煙草專賣管理工作的重要環(huán)節(jié)。目前，各省級煙草質(zhì)檢機構(gòu)主要依據(jù)國家煙草專賣局發(fā)布的《煙草專賣品鑒別檢驗管理辦法》（國煙科〔2014〕285號）和《卷煙產(chǎn)品鑒別檢驗規(guī)程》（國煙科〔2006〕894號），采用感觀鑒別法對各級行政執(zhí)法部門罰沒、查扣的煙草制品進行鑒別檢驗。但上述辦法和規(guī)程有一個重要前提，即必須完全確定待檢樣品為煙草物質(zhì)，如為非煙草物質(zhì)，則失去了真?zhèn)舞b別檢驗的法律基礎(chǔ)。

近年來，一些卷煙制假分子為對抗煙草專賣打私打假高壓態(tài)勢，開發(fā)出“藥物煙”“保健煙”“戒煙靈”等眾多“卷煙”產(chǎn)品，這些產(chǎn)品的煙支填充物中摻兌有各種植物葉或植物花蕾，而煙葉、植物葉或植物花蕾經(jīng)過制絲后嚴(yán)重毀形，難以通過感觀判定是否屬于煙草物質(zhì)。如果在不確定涉煙物品是否為煙草物質(zhì)的情況下，煙草質(zhì)檢機構(gòu)就出具檢驗報告，將會引起嚴(yán)重的法律后果。因此，本研究旨在尋找一種能夠用于涉煙案件物品屬性判定的科學(xué)、準(zhǔn)確、權(quán)威的鑒別方法。

為確定涉煙案件物品是否屬于煙草物質(zhì)，煙草質(zhì)檢機構(gòu)一般采用連續(xù)流動法測定送檢樣品的總植物堿含量［1］。這種方法的測定結(jié)果實際為包括煙堿、降煙堿、新煙堿、麥斯明和假木賊堿等生物堿的總量，不夠嚴(yán)謹、科學(xué)，且存在嚴(yán)重的法律漏洞。因為某些涉案物品存在人為添加使用煙堿的情況（人為添加煙堿的制品為非煙草制品），這將影響該方法給出正確的鑒定結(jié)果。因此該方法不適宜作為涉煙案件物品屬性判定方法。

近年來，現(xiàn)代儀器分析技術(shù)的快速發(fā)展，特別是現(xiàn)代色譜、質(zhì)譜技術(shù)在中藥材、固體廢物等領(lǐng)域的廣泛研究與應(yīng)用［2-8］，為涉煙案件物品屬性判定研究提供了較為理想的研究思路。煙草中特有的N-亞硝胺是區(qū)別于其他植物的根本特性。因此，測定涉煙案件物品中的煙草特有N-亞硝胺含量是一種判定其屬性的較好方法。目前煙草行業(yè)已發(fā)布了氣相色譜-熱能分析儀聯(lián)用法和高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法兩種標(biāo)準(zhǔn)方法［9，10］，但由于煙草特有N-亞硝胺含量極低（一般在ng級），儀器設(shè)備經(jīng)費投入較大，操作復(fù)雜程度高，因此不利于以上兩種方法的推廣應(yīng)用。

眾所周知，煙草中存在一定比例的煙堿。煙草植株在田間生長過程中，部分煙堿會經(jīng)代謝、降解等途徑，轉(zhuǎn)化形成降煙堿、新煙堿、麥斯明和假木賊堿等生物降解物。對這些成分含量進行定性分析和定量檢測，將有助于煙草物質(zhì)的屬性判定。目前煙草行業(yè)已發(fā)布了多種測定煙草和煙草制品中生物堿含量的方法標(biāo)準(zhǔn)［1，11，12］。但前兩種方法只能獲得煙堿或總植物堿的含量信息，無法對煙堿及其生物降解物分別進行定性、定量分析，而氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)因其較高靈敏度和選擇性，能夠較好地滿足定性分析和定量檢測的目的。因此，本研究選擇氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法檢測試驗樣品中的煙堿、降煙堿、新煙堿、麥斯明和假木賊堿含量，通過對實驗結(jié)果進行分析研究，以期實現(xiàn)對樣品的煙草屬性判定。

2　材料與方法

2.1材料

2.1.1樣品

樣品收集范圍除煙草和煙草制品、涉煙案件物品（來自山東省煙草質(zhì)量監(jiān)督檢測站樣品庫）外，還包括一些植物葉子、植物花蕾、蔬菜以及中藥材等（自行采集或市購），共計42個樣品，并按YP01-YP42順序進行編號。上述樣品經(jīng)烘干、粉碎過80目篩后，測定其含水率，分別放入磨口瓶中密封保存，備用。

2.1.2儀器

7890A/5975C型氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀：美國Agilent公司；彈性毛細管柱DB-35MS（30m×0.25 mm×0.25μm）：美國Agilent公司；MS204S電子天平：感量0.1mg，瑞士Mettler-Toledo公司；KQ-500DV超聲波清洗儀：昆山市超聲儀器有限公司。

2.1.3試劑

甲基叔丁基醚：色譜純，上海安普；氫氧化鈉、無水硫酸鈉：均為分析純，國藥集團；三乙胺：99.5%，百靈威公司；2-甲基喹啉、2，4’-二聯(lián)吡啶、煙堿、降煙堿、新煙堿、麥斯明、假木賊堿等標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)：均購自百靈威公司，純度不低于98%；氦氣：純度大于99.999%，濟南德陽特種氣體有限公司提供。

2.2方法

2.2.1樣品處理

稱取約0.3 g（精確至0.0001 g）樣品粉末于50 mL三角錐形瓶內(nèi)，加入2.0mL 5%的氫氧化鈉溶液于錐形瓶中，輕搖錐形瓶，濕潤試樣，靜置不超過25min；然后加入20.0mL一級內(nèi)標(biāo)溶液，加蓋密封后置于超聲波清洗機內(nèi)，超聲提取15min，靜置使試樣和萃取劑分離；取2mL上層溶液經(jīng)無水硫酸鈉（550℃干燥至少2 h，干燥器內(nèi)冷卻至室溫使用）過濾后，轉(zhuǎn)移到色譜分析瓶中待進樣分析。

2.2.2儀器分析條件

載氣：氦氣，載氣流速1.0mL/min；進樣口溫度：250℃；煙堿的檢測：進樣量1μL，分流進樣，分流比為40∶1；降煙堿、新煙堿、麥斯明和假木賊堿的檢測：進樣量2μL，分流進樣，分流比為10∶1；程序升溫：初溫100℃保持3min，以8℃/min速率由100℃升至260℃，保持10min，總運行時間33min；檢測器：質(zhì)譜檢測器；溶劑延遲：8min；電離電壓：70 ev；離子源溫度：230℃；四級桿溫度：150℃；傳輸線溫度：280℃；掃描離子范圍：30-400 amu；質(zhì)譜掃描方式：SIM掃描。

3　結(jié)果與討論

3.1氣相色譜-質(zhì)譜圖

典型樣品中煙堿、降煙堿、新煙堿、麥斯明和假木賊堿分析的氣相色譜-質(zhì)譜圖分別見圖1-圖6。

圖1　煙草樣品煙堿分析氣相色譜-質(zhì)譜圖

圖2　煙草樣品降煙堿、新煙堿、麥斯明和假木賊堿分析氣相色譜-質(zhì)譜圖

圖3　非煙草樣品煙堿分析氣相色譜-質(zhì)譜圖

圖4　非煙草樣品降煙堿、新煙堿、麥斯明和假木賊堿分析氣相色譜-質(zhì)譜圖

圖5　非煙草樣品（外加煙堿）煙堿分析氣相色譜-質(zhì)譜圖

3.2檢測結(jié)果及分析

試驗樣品中煙堿、降煙堿、新煙堿、麥斯明和假木賊堿的檢測結(jié)果見表1。

圖6　非煙草樣品（外加煙堿）降煙堿、新煙堿、麥斯明和假木賊堿分析氣相色譜-質(zhì)譜圖

表1　試驗樣品檢測結(jié)果匯總表

對表1中數(shù)據(jù)進行分析，可以初步得出如下結(jié)論：

（1）各種類型的煙葉、煙絲、煙梗、復(fù)烤片煙和再造煙葉等樣品中的煙堿、降煙堿、新煙堿、麥斯明和假木賊堿等5項指標(biāo)均有檢出（如圖1和圖2所示），符合煙草物質(zhì)的生理生化特性。

（2）番茄、土豆等與煙草同屬茄科植物，有文獻報道也含有少量煙堿，它們可能存在類似煙草植株的生長代謝途徑，但由于煙堿含量極低，其他生物降解物相應(yīng)更少，因而均未檢出（如圖3和圖4所示）。

銀杏葉、玫瑰花和茶葉等經(jīng)常被卷煙制假分子用于制造藥物煙、戒煙產(chǎn)品等，前期文獻調(diào)研證實它們也含有一些生物堿，但與煙堿及其生物降解物相比，這些生物堿的化學(xué)結(jié)構(gòu)較復(fù)雜，分子量較大，不會對本方法產(chǎn)生干擾。實驗結(jié)果表明，各項指標(biāo)均未檢出。

法國梧桐葉作為空白樣品，各項指標(biāo)均未檢出。而外加純煙堿的法國梧桐葉樣品，只檢出煙堿，說明人為添加煙堿不會對其他指標(biāo)產(chǎn)生影響。因此，如涉煙案件物品摻兌使用植物葉和/或花蕾，并存在人為添加合成煙堿的情形，其色譜質(zhì)譜圖最多只會出現(xiàn)一個煙堿峰（如圖5和6所示）。

（3）真品卷煙A（烤煙型）和真品卷煙B（混合型）各項指標(biāo)均有檢出，與煙葉原料的檢測結(jié)果相吻合。而經(jīng)感觀鑒別法鑒定為假冒注冊商標(biāo)卷煙的假冒卷煙C和假冒卷煙D樣品的各項指標(biāo)均有檢出，證明屬于煙草制品范疇，鑒定結(jié)論符合相關(guān)法律法規(guī)要求。

某些涉煙案件物品外觀與卷煙煙支類似，但如果配方中摻兌有煙葉、植物葉和/或花朵等，僅憑感觀難以進行準(zhǔn)確判斷，因此是本方法研究的重點。某戒煙王、土匪煙（雪茄）2個樣品各項指標(biāo)均有檢出，證明它們屬于煙草制品范疇。結(jié)合感觀鑒別法進行鑒別檢驗，應(yīng)分別判定為偽劣卷煙、偽劣雪茄煙。而戒煙克、花噱甲（迷迭香）、花噱甲（玫瑰香）3個樣品各項指標(biāo)均未檢出，證明它們不屬于煙草制品范疇，因而不適用于卷煙產(chǎn)品鑒別檢驗規(guī)程。

4　結(jié)論

應(yīng)用氣相色譜-質(zhì)譜法對涉煙案件送檢樣品中煙堿、降煙堿、新煙堿、麥斯明和假木賊堿5項指標(biāo)進行檢測，如涉煙案件送檢樣品中以上5項指標(biāo)均有檢出，則應(yīng)判定為煙草物質(zhì)；如全部未檢出或僅有煙堿檢出，則應(yīng)判定為非煙草物質(zhì)。該方法可以有效防止僅靠總植物堿含量指標(biāo)產(chǎn)生的判斷失誤，為煙草質(zhì)檢機構(gòu)開展卷煙真?zhèn)舞b別消除了可能存在的法律風(fēng)險。為證實該判定方法的可行性，本研究下一步將擴大樣品收集范圍和種類，對該方法進行進一步驗證。

［1］YC/T 468-2013煙草及煙草制品總植物堿的測定連續(xù)流動（硫氰酸鉀）法［S］.

［2］魏鋒，程顯隆，石巖，等.UPLC-QTOF-MS技術(shù)用于膠類藥材的專屬性檢測方法研究及應(yīng)用［C］.2011年中國藥學(xué)大會暨第11屆中國藥師周論文集，2011：8.

［3］程雪寧，張宏武，楊立偉，等.藥用廣藿香揮發(fā)油提取物專屬性鑒別方法研究［J］.中國中藥雜志，2010，35（17）：2270-2272.

［4］李俊松，張彤，浦益瓊，等.中國藥典中3種不同基源百部鑒別方法研究［J］.中藥材，2011，34（02）：209-210.

［5］周炳炎.制定固體廢物鑒別標(biāo)準(zhǔn)的方法探討［J］.再生資源與循環(huán)經(jīng)濟，2013，6（9）：18-22.

［6］周炳炎，于泓錦.探討進口物品的固體廢物屬性鑒別［J］.中國檢驗檢疫，2012，（6）：23-24.

［7］郝雅瓊，于泓錦，周炳炎，等.固體廢物屬性鑒別現(xiàn)狀、問題和對策分析［J］.環(huán)境污染與防治，2013，35（01）：106-110.

［8］薛慶波，韋鋒，江祖新，等.進口物品固體廢物屬性鑒別探究［J］.檢驗檢疫學(xué)刊，2009，19（3）：35-38.

［9］YC/T184-2004煙草及煙草制品煙草特有N-亞硝胺的測定［S］.

［10］YQ/T294-2013煙草及煙草制品煙草特有N-亞硝胺的測定高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用法［S］.

［11］YC/T246-2008煙草及煙草制品煙堿的測定氣相色譜法［S］.

［12］YC/T383-2010煙草及煙草制品煙堿、降煙堿、新煙堿、麥斯明和假木賊堿的測定氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法［S］.

Application and Discussion about an Experimental Method of Property Determ ination for Sam ples in Illicit Tobacco Cases

BIE Zhenying1，ZHANG Hongfei2，CHEN Yusong1，F(xiàn)U Liwei3，ZHU You1，PANG Yongqiang2，JI Lishun1*
（1.China National Tobacco Corporation Shandong Branch，Jinan，Shandong，250098；2.China National Tobacco Quality Supervision&Test Center；3.Jinan Cigarette Factory，China Tobacco Shandong Industrial Co.Ltd）

In order to establish a scientific，accurate and authoritative method of property determination for samples in illicit tobacco cases，the content of alkaloids，including nicotine，nor-nicotine，anatabine，myosmine，and anabasine，was analyzed by Gas Chromatography Mass Spectrometry（GC-MS）.42 representative samples were analyzed to cover different types of articles from tobacco-related cases.According to data analysis，it is concluded initially that identification for tobacco materials requires detection of five alkaloids，whereas for non-tobacco materials requiring no detection of five alkaloids or unique detection of nicotine.This paper provided a more scientific and accurate method of property determ ination for samples in illicit tobacco cases.Results showed that the proposed method can avoid m istakes caused by identification only through detecting the content of total alkaloids.It is beneficial to prevent tobacco quality inspection agencies from potential legal risks in the process of carrying out cigarette identification.

Samples in Illicit Tobacco Cases；Property Determination；GC-MS；Alkaloides

O657.63

E-mail：15106972565i@163.com；*通訊作者E-mail：jls1280@163.com

中國煙草總公司山東省公司科技項目（KR203）

2015-11-18