何鳳屏，徐　新,張社兵,陳寶峰,馬占忠,袁書國,黃秀顏,劉鳳蓮,范世平,肖　政,吳東南

(汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬粵北人民醫(yī)院：1.心血管研究所；2.中醫(yī)科　512026)

?

·論著·

血漿miR-21和TGF-β1水平在心肌梗死后與心室重構(gòu)的關(guān)系*

何鳳屏1，徐新1,張社兵1,陳寶峰1,馬占忠1,袁書國1,黃秀顏1,劉鳳蓮1,范世平2,肖政2,吳東南2

(汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬粵北人民醫(yī)院：1.心血管研究所；2.中醫(yī)科512026)

目的探討心肌梗死患者 microRNA-21(miR-21)和轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子(TGF)-β1的表達(dá)水平，以及調(diào)控心肌梗死后心室重構(gòu)發(fā)生的作用機(jī)制。方法選取200例臨床和心電圖確診為心肌梗死患者血漿和100例健康體檢人群血漿，分別采用熒光定量PCR檢測(cè)各組血漿miR-21和TGF-β1的表達(dá)水平。結(jié)果與健康對(duì)照組比較，心肌梗死患者血漿miR-21的表達(dá)在心肌梗死后第3天、第7天、第14天，分別為0.74±0.21vs. 2.62±0.23,vs. 3.67±0.25,vs. 4.13±0.27，P<0.05；心肌梗死患者血漿TGF-β1的表達(dá)在心肌梗死后第3天、第7天、第14天，分別為0.98±0.18vs.2.35±0.24，vs. 3.67±0.25，vs. 4.13±0.27,P<0.05。心肌梗死患者血漿miR-21和TGF-β1隨著心肌梗死后心功能變化表達(dá)上調(diào)。血漿miR-21和TGF-β1mRNA與左心室舒張末內(nèi)徑呈正相關(guān)(r=0.757、0.701，P<0.05)。結(jié)論心肌梗死患者血漿miR-21和TGF-β1表達(dá)上調(diào)，miR-21和TGF-β參與調(diào)控心肌梗死后的心室重構(gòu)。

心肌梗死；心室重構(gòu)；microRNA-21；轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1

心力衰竭是急性心肌梗死(AMI)最嚴(yán)重的并發(fā)癥之一，發(fā)病兇險(xiǎn)，致殘率和致死率均高，目前認(rèn)為心肌梗死后發(fā)生心室重構(gòu)是具有一定臨床意義的。miRNA(miR)是一類非編碼的小分子RNA，通過抑制靶基因的翻譯過程，參與許多重要的生物學(xué)過程[1]。miR具有組織特異性，并在循環(huán)血中穩(wěn)定表達(dá)，越來越多的miR已成為疾病早期診斷、監(jiān)測(cè)復(fù)發(fā)的標(biāo)志物和治療靶點(diǎn)。有研究表明，在miR心肌梗死后的病理過程中起著重要的調(diào)節(jié)作用[2]。過表達(dá)miR-21通過調(diào)節(jié)信號(hào)傳導(dǎo)通路誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞凋亡，促進(jìn)心室重構(gòu)[3]。本研究以本院患心肌梗死的住院患者為研究基礎(chǔ)，觀察心肌梗死過后心室重構(gòu)過程中血漿miR-21和TGF-β1表達(dá)水平，并探討其發(fā)病機(jī)制。

1　資料與方法

1.1一般資料選取2013年5月至2015年9月在本院心血管內(nèi)科住院患者200例，其中，男130例，女70例，年齡48～68歲。根據(jù)心肌梗死全球統(tǒng)一定義的第1條診斷標(biāo)準(zhǔn)[4]：心臟生化標(biāo)志物(最好是肌鈣蛋白)增高或增高后降低，至少有1次數(shù)值超過參考值上限的99百分位值，并有以下至少1項(xiàng)心肌缺血證據(jù)：缺血癥狀；提示新的心肌缺血的心電圖變化，即新的ST段改變或左束支傳導(dǎo)阻滯；心電圖出現(xiàn)病理性Q波；影像學(xué)證據(jù)提示，新的活力心肌喪失或新的區(qū)域性心壁運(yùn)動(dòng)異常。對(duì)照組選擇100例本院健康體檢人群，其中，男50例，女50例，年齡45～65歲。

1.2儀器與試劑RNA反轉(zhuǎn)錄試劑盒和SYBR試劑(日本TAKARA公司)；化學(xué)修飾的miR-21 mimic(上海吉瑪生物有限公司)；實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qRT-PCR)儀(美國BIO公司)；蛋白提取試劑盒(碧云天)；TGF-β1檢測(cè)試劑盒(上海生工生物科技有限公司)。

1.3方法

1.3.1血漿中miR的提取和檢測(cè)心肌梗死患者在發(fā)病入院后第3天、第7天、第14天采血3 mL(EDTA抗凝)離心后，應(yīng)用mircute miR提取分離試劑盒(北京天根公司)提取血漿中miR。應(yīng)用美國BIO公司的實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀檢測(cè)血漿中miR-21的表達(dá)量，用TAKARA反轉(zhuǎn)錄試劑盒，利用莖環(huán)結(jié)構(gòu)引物特異性反轉(zhuǎn)miR-21和U6。第一步引物退火，去2 g RNA與1 L miR-21(100 mg/L)和1 L U6(100 mg/L)特異性莖環(huán)結(jié)構(gòu)引物混合，反應(yīng)條件為70 ℃ 10 min，4 ℃ 10 min。第二步合成cDNA第1鏈，在混合物中分別加入10×buffer、2 L MgCl2(20.8 mol/L)、1 L反轉(zhuǎn)錄酶，補(bǔ)水至20 L，充分混勻，反應(yīng)條件為37 ℃ 1 h，4 ℃ 10 min。生成的cDNA取1 L，與10 L×SYBR混合，再加入7 L水和1 L上、下游引物，混勻?yàn)?0 L反應(yīng)體系，反應(yīng)條件為95 ℃ 5 min，95 ℃ 15 s，60 ℃ 60 s，40個(gè)循環(huán)。miR-21的表達(dá)水平用Cq值(熒光信號(hào)達(dá)到設(shè)定閾值所經(jīng)的循環(huán)數(shù))表示，U6作為內(nèi)參。引物序列，見表1。

表1　　目的基因莖環(huán)引物及PCR引物序列

1.3.2實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)外周血中TGF-β1mRNA心肌梗死患者在發(fā)病入院后第3天、第7天、第14天采血3 mL(EDTA抗凝)離心后，應(yīng)用RNA提取分離試劑盒(北京天根公司)提取血漿中TGF-β1mRNA。實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。引物設(shè)計(jì)：根據(jù)GeneBank提供的TGF-β1mRNA序列(GeneBank號(hào)：AF277993)和GAPDH 序列(GeneBank號(hào)：AY399813)由上海生工生物科技有限公司設(shè)計(jì)并提供。目的基因TGF-β1引物：上游(5′～3′)F：GACGCTGAAT GGCTCTCAGA，下游(5′～3′)R：GGACCTGC TAACCAGGCT，擴(kuò)增片段長(zhǎng)度為176 bp；內(nèi)參基因GAPDH引物：上游(5′～3′)F：ACCACCATGG AGAAGGCCGG，下游(5′～3′)R：ACAACTTTGG CATTGTG，擴(kuò)增片段長(zhǎng)度為205 bp。

1.3.3總RNA的提取取3 mL(EDTA抗凝)離心后放置于1.5 mL離心管(RNase-Free)中，然后加入1 mL Trizol，顛倒混勻后，室溫放置5 min，使其充分裂解，最后放入-80 ℃冰箱保存?zhèn)溆?；將所有冰箱里的?biāo)本取出室溫解凍后，12 000 r/min離心5 min，棄沉淀；加入200 μL氯仿(4 ℃預(yù)冷)，顛倒混勻后室溫放置15 min，4 ℃ 12 000 r/min離心15 min；吸取上層水相至另一離心管(RNase-Free)中，加入0.5 mL異丙醇(-20 ℃預(yù)冷)顛倒混勻數(shù)次，室溫放置5～10 min，4 ℃ 12 000 r/min離心10 min，棄上清，RNA沉于管底；加入75%乙醇(-20 ℃預(yù)冷)，溫和振蕩離心管，懸浮沉淀，4 ℃ 8 000 r/min離心5 min，盡量棄上清；室溫晾干或真空干燥5～10 min，最后加入50 μL DEPC處理的H2O，適當(dāng)混勻，離心備用。

1.4心肌梗死患者左心室功能的臨床資料采用心臟超聲心動(dòng)圖檢查各組的左心室射血分?jǐn)?shù)、左心室舒張末內(nèi)徑、左心室舒張末容積、左心室后壁厚度、舒張末室間隔厚度、左心室質(zhì)量指數(shù)的變化以及與心肌梗死后不同時(shí)間段變化的相關(guān)性，證實(shí)在不同時(shí)期MI后重構(gòu)演變的表達(dá)及影響心功能異常變化，筆者采用心臟超聲心動(dòng)圖檢查各組左心室功能變化，見表2。

表2　　各組心肌梗死后左心室功能變化±s)

注：與健康對(duì)照組比較，*△#P<0.05。

表2顯示，在心肌梗死后發(fā)生的第3天心肌嚴(yán)重缺血，發(fā)生左心室射血分?jǐn)?shù)減少，左心室舒張末內(nèi)徑擴(kuò)大，左心室舒張末容積升高；在心肌梗死后第7天心肌嚴(yán)重缺血略有改善，左心室射血分?jǐn)?shù)仍顯示減少，左心室舒張末內(nèi)徑仍擴(kuò)大，左心室舒張末容積升高，左心室后壁厚度和舒張末室間隔厚度顯示增厚;在心肌梗死后發(fā)生的第14天，心肌缺血有明顯改善，左心室射血分?jǐn)?shù)有所升高，左心室舒張末內(nèi)徑仍顯示擴(kuò)大，左心室舒張末容積升高，左心室后壁厚度和舒張末室間隔厚度顯示明顯增厚，左心室質(zhì)量指數(shù)明顯增加。

2　結(jié)　　果

2.1心肌梗死患者左心室功能的變化入選心肌梗死患者左心室功能的臨床資料見表2。心肌梗死后在不同的時(shí)間段心功能發(fā)生變化。在心肌梗死后發(fā)生的第3天心肌嚴(yán)重缺血，發(fā)生左心室射血分?jǐn)?shù)明顯減少、左心室舒張末內(nèi)徑擴(kuò)大、左心室舒張末容積升高，與健康對(duì)照組比較，心肌梗死后第3天的心功能變化差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；在心肌梗死后發(fā)生的第7天心肌嚴(yán)重缺血略有改善，但是左心室射血分?jǐn)?shù)減少、左心室舒張末內(nèi)徑擴(kuò)大、左心室舒張末容積升高、左心室后壁厚度和舒張末室間隔厚度與第3天比較顯示增厚(P<0.05)，與健康對(duì)照組比較，心肌梗死后第7天的心功能變化差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；在心肌梗死后發(fā)生的第14天心肌缺血有明顯改善，左心室射血分?jǐn)?shù)仍未達(dá)到正常水平、左心室舒張末內(nèi)徑擴(kuò)大、左心室舒張末容積升高，左心室后壁厚度和舒張末室間隔厚度分別與第3天和第7天比較顯示明顯增厚(P<0.05)，與健康對(duì)照組比較，心肌梗死后第14天的心功能變化差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

2.2心肌梗死后第3天、第7天和第14天血漿miR-21和TGF-β1mRNA表達(dá)miR-21和TGF-β1mRNA在心肌梗死后發(fā)生的第3天、第7天、第14天表達(dá)上調(diào)(詳見表3)，各組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。與健康對(duì)照組比較，心肌梗死后發(fā)生的第3天miR-21表達(dá)上調(diào)(0.74±0.21vs. 2.62±0.23，P<0.05)、心肌梗死后發(fā)生的第7天miR-21表達(dá)上調(diào)(0.74±0.21vs. 3.67±0.25，P<0.05)、心肌梗死后發(fā)生的第14天miR-21表達(dá)上調(diào)(0.74±0.21vs. 4.13±0.27，P<0.05)。TGF-β1mRNA在心肌梗死后發(fā)生的第3天、第7天、第14天表達(dá)與健康對(duì)照組比較，心肌梗死后發(fā)生的第3天TGF-β1mRNA表達(dá)上調(diào)(0.98±0.18vs. 2.35±0.24，P<0.05)、心肌梗死后發(fā)生的第7天TGF-β1mRNA表達(dá)上調(diào)(0.98±0.18vs. 3.12±0.28，P<0.05)、心肌梗死后發(fā)生的第14天TGF-β1mRNA表達(dá)上調(diào)(0.98±0.18vs. 3.96±0.31，P<0.05)。

表3　　兩組心肌梗死患者血清miR-21、TGF-β1 mRNA表達(dá)水平比較

注：與健康對(duì)照組比較，*P<0.05；與急性心肌梗死后第3天組比較，#△P<0.05。

2.3心肌梗死患者左心室舒張末內(nèi)徑與血漿miR-21表達(dá)的相關(guān)性血漿miR-21表達(dá)水平與左心室舒張末內(nèi)徑呈正相關(guān)(r=0.757，P<0.05)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，見圖1。

圖1　血漿miR-21表達(dá)水平與左心室舒張末內(nèi)徑關(guān)系散點(diǎn)圖

2.4心肌梗死患者左心室舒張末內(nèi)徑與血漿TGF-β1mRNA表達(dá)的相關(guān)性血漿TGF-β1mRNA表達(dá)水平與左心室舒張末內(nèi)徑呈正相關(guān)(r=0.701，P<0.05)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，見圖2。

圖2　血漿TGF-β1 mRNA表達(dá)水平與左心室舒張末內(nèi)徑關(guān)系的散點(diǎn)圖

3　討　　論

miRNAs是一類長(zhǎng)度約22個(gè)核苷酸的非編碼小RNA，作為基因轉(zhuǎn)錄和表達(dá)的調(diào)節(jié)者，參與眾多疾病的發(fā)病過程。microRNA是近幾年研究的熱點(diǎn)，已有大量研究表明，miRNAs在不同疾病及病理進(jìn)程中具有特定的表達(dá)譜，并可穩(wěn)定表達(dá)于外周循環(huán)血液中，這些特點(diǎn)使miRNAs可作為腫瘤、自身免疫性疾病、炎性反應(yīng)等多種疾病診斷及預(yù)后判斷的重要生物指標(biāo)[5]。miRNAs在心血管疾病診療中的作用也逐漸受到人們的重視，血漿/血清中miRNA在心血管疾病有望成為早期診斷的重要標(biāo)志物[6]。在心血管領(lǐng)域miR-21與心肌細(xì)胞肥厚、血管平滑肌細(xì)胞增殖及心肌梗死后重構(gòu)相關(guān)[7-8]。有研究發(fā)現(xiàn)，在健康成年人中miR-21的表達(dá)與年齡呈負(fù)相關(guān)，未成年人及嬰兒心臟中miR-21的表達(dá)水平要高于成年人[9]。本文觀察到miR-21在心肌梗死后的第3天、第7天、第14天的表達(dá)均顯著增高，明顯高于健康對(duì)照組(P<0.05)，提示與心肌梗死后發(fā)生心室重構(gòu)可能存在相關(guān)關(guān)系[8-9]。Roy等[10]心肌缺血再灌注的研究發(fā)現(xiàn)，miR-21的靶基因是人類第10號(hào)染色體缺失的磷酸酶及張力蛋白同源基因(PTEN)miR-21在心肌成纖維細(xì)胞內(nèi)通過轉(zhuǎn)錄后下調(diào)PTEN表達(dá)水平，進(jìn)而通過TEN-Akt途徑，介導(dǎo)TGF和金屬基質(zhì)蛋白酶的表達(dá)上調(diào)，參與心肌梗死后梗死區(qū)域膠原代謝及心室重構(gòu)。Yin等[11]發(fā)現(xiàn)小鼠心肌梗死24 h后，心肌梗死區(qū)miR-21表達(dá)顯著上調(diào)。Cheng等[12]在心肌梗死的小鼠模型中證實(shí)miR-21也參與調(diào)控心肌細(xì)胞肥大，促進(jìn)心室重構(gòu)。

TGF-β是一類多功能的細(xì)胞因子，包括3種不同亞型(TGF-β1、β2和β3)，其中TGF-β1生物學(xué)功能最重要。TGF-β1在心肌梗死后的不同時(shí)相的作用是不同的。心肌梗死后，非梗死區(qū)的TGF-β1、TβRⅠ、TβRⅡ和TAK1表達(dá)水平顯著升高，可能是心肌梗死后心肌細(xì)胞肥大的刺激作用，導(dǎo)致心肌肥厚和心室重構(gòu)的發(fā)生。新的研究表明，miR-21在心室重構(gòu)的病理生理過程中可能起著十分重要的作用，miR-21可通過調(diào)節(jié)TGF-β受體Ⅲ(TGF-βRⅢ)的表達(dá)調(diào)控心臟結(jié)構(gòu)重構(gòu)[9]。本文中TGF-β1表達(dá)在心肌梗死后的不同時(shí)期均高于健康對(duì)照組(P<0.05)，提示TGF-β1在心肌梗死后的心肌代償性肥厚和心室重構(gòu)中起到重要作用。

本研究發(fā)現(xiàn)，miR-21、TGF-β1在心肌梗死后發(fā)生的第3天、第7天、第14天表達(dá)上調(diào)，分別高于健康對(duì)照組(P<0.05)；隨著心肌梗死發(fā)病后的時(shí)間延長(zhǎng)，各組的心功能也發(fā)生變化。在心肌梗死后發(fā)生的第3天心肌嚴(yán)重缺血，以左心室射血分?jǐn)?shù)明顯減少為主、在心肌梗死后第7天是以左心室舒張末內(nèi)徑擴(kuò)大等變化為主；在心肌梗死后第14天左心室舒張末內(nèi)徑擴(kuò)大、左心室后壁和舒張末室間隔增厚為主。提示miR-21、TGF-β1在心肌梗死后表達(dá)上調(diào)，與心肌梗死后發(fā)生心功能變化，包括與NYHA心功能分級(jí)和超聲心動(dòng)圖指標(biāo)之間存在著明顯的相關(guān)性。其病理生理機(jī)制十分復(fù)雜，存在著神經(jīng)內(nèi)分泌的激活和心室重構(gòu)，心室容量和壓力負(fù)荷增加，血液動(dòng)力學(xué)異常，心室壁張力增加。由于交感神經(jīng)系統(tǒng)、腎素、血管緊張素系統(tǒng)及循環(huán)內(nèi)分泌激活，水鈉潴留，心肌受損和心室肌細(xì)胞數(shù)量和心肌間質(zhì)組織細(xì)胞數(shù)量、質(zhì)量和排列方式的改變，肌漿網(wǎng)Ca2+通道活性及數(shù)目減少，心肌收縮耦聯(lián)過程發(fā)生變化，心肌收縮性和順應(yīng)性下降，心腔擴(kuò)大，導(dǎo)致心肌梗死后患者存在著心室重構(gòu)[13]。本文對(duì)miR-21、TGF-β1在心肌梗死后發(fā)生的心功能變化進(jìn)行相關(guān)分析，miR-21、TGF-β1分別與左心室舒張末內(nèi)徑呈正相關(guān)(相關(guān)系數(shù)分別為r=0.757、0.701，P<0.05)，且調(diào)整了心肌梗死相關(guān)危險(xiǎn)因素(如性別、年齡、高血壓、糖尿病等因素)后，血漿miR-21、TGF-β1水平分別與左心室舒張末內(nèi)徑呈正相關(guān)，提示血漿miR-21、TGF-β1參與心肌梗死后患者心室重構(gòu)，可作為心肌梗死后患者心室結(jié)構(gòu)重構(gòu)標(biāo)志物，與現(xiàn)有miR-21、TGF-β1可調(diào)控心室重構(gòu)進(jìn)展等研究結(jié)果具有一致性。以上結(jié)果還體現(xiàn)miR-21和TGF-β1參與心肌梗死后心臟損傷和修復(fù)過程，TGF-β信號(hào)通路是調(diào)控成纖維細(xì)胞的增殖與分化的主要信號(hào)通路，提示成纖維細(xì)胞的增殖與分化在心肌梗死后的心臟重構(gòu)過程中扮演重要角色[14]。

綜上所述，筆者的試驗(yàn)結(jié)果證實(shí)，miR-21和TGF-β1mRNA在不同時(shí)期心肌梗死后重構(gòu)演變的表達(dá)及影響心功能異常變化，可作為監(jiān)測(cè)心室重構(gòu)進(jìn)展的一種新的危險(xiǎn)生物標(biāo)志物，為有效預(yù)防心肌梗死后心室重構(gòu)提供了新的思路和治療新靶點(diǎn)[15-16]。

[1]Vogel B,Keller A.Refining diagnostic microRNA signatures by whole-miRNome kinetic analysis in acute myocardial infarction[J].Clin Chem,2013,59(2):410-418.

[2]Small EM,Frost RJ,Olson EN.MicroRNAs add a new dimension to cardiovascular disease[J].Circulation,2010,121(8):1030-1032.

[3]唐艷，王夢(mèng)洪．微小RNA-21對(duì)乳鼠心肌細(xì)胞凋亡及磷酸脂酶-張力蛋白同源物/絲氨酸/蘇氨酸激酶/叉頭蛋白3a信號(hào)傳導(dǎo)通路的影響[J].中華心血管病雜志，2013，41(2)：135-142．

[4]中華心血管病雜志編輯委員會(huì)．推薦在我國采用心肌梗死全球統(tǒng)一定義[J]．中華心血管病雜志，2008，36(10)：867-869．

[5]Mc Manus DD,Tanriverdi K,Lin H,et al.Plasma microRNAs are associated with atrial fibrillation and change after catheter ablation(the miRhythm study) [J].Heart Rhythm,2015,12(1):3-10.

[6]Liang J,Bai S,Su L,et al.A subset of circulating microRNAs is expressed differently in patients with myocardial infarction[J].Mol Med Rep,2015,12(1):243-247.

[7]Toldo S,Das A,Mezzaroma E,et al.Induction of microRNA-21 with exogenous hydrogen sulfide attenuates myocardial ischemic and inflammatory injury in mice[J].Circ Cardiovasc Genet,2014,7(3):311-320.

[8]Liu X,Dong Y,Chen S,et al.Circulating MicroRNA-146a and MicroRNA-21 predict left ventricular remodeling after ST-Elevation myocardial infarction[J].Cardiolog,2015,132(4):233-241.

[9]Liang H,Zhang C,Ban T,et al.A novel reciprocal loop between microRNA-21 and TGFβRⅢ is involved in cardiac fibrosis[J].Int J Biochem Cell Biol,2012,44(12):2152-2160.

[10]Roy S,Khanna S,Hussain SR,et al.MicroRNA expression in response to murine myocardial infarction:microRNA-21 regulates fibroblast metalloprotease-2 via phosphatase and tensin homologue[J].Cardiovasc Res,2009,82(1):21-29.

[11]Yin C,Salloum FN,Kukreja RC.A novel role of microRNA in late preconditioning:upregulation of endothelial nitric oxide synthase and heat shock protein 70[J].Circ Res,2009,104(5):572-575.

[12]Cheng Y,Zhu P,Yang J,et al.Ischaemic preconditioning-regulated miR-21 protects heart against ischaemia/reperfusion injury via anti-apoptosis through its target PDCD4[J].Cardiovasc Res,2010,87(3):431-439.

[13]Dong S,Ma W,Hao B,et al.microRNA-21 promotes cardiac fibrosis and development of heart failure with preserved left ventricular ejection fraction by up-regulating Bcl-2[J].Int J Clin Exp Pathol,2014,7(2):565-574.

[14]Dobaczewski M,Chen W,Frangogiannis NG.Transforming growth factor (TGF)-β signaling in cardiac remodeling[J].J Mol Cell Cardiol,2011,51(4):600-606.

[15]Li S,Fan Q,He S,et al.MicroRNA-21 negatively regulates Treg cells through a TGF-β1/Smad-independent pathway in patients with coronary heart disease[J].Cell Physiol Biochem,2015,37(3):866-878.

[16]Yang Q,Yang K,Li A.MicroRNA-21 protects against ischemia-reperfusion and hypoxia-reperfusion-induced cardiocyte apoptosis via the phosphatase and tensin homolog/akt-dependent mechanism[J].Mol Med Rep,2014,9(6):2213-2220.

The expression levels of miR-21 and TGF-β1in cardiac remodelin affer myocardial infarction*

HEFengping1,XUXin1,ZHANGShebing1,CHENBaofeng1,MAZhanzhong1,YUANShuguo1,HUANGXiuyan1,LIUFenglian1,FANShiping2,XIAOZheng2,WUDongnan2

(1.TheCardiovascularResearchInstitute，AffiliatedYuebeiPeople′sHospitaloftheShantouUniversity,Guangdong512026,China;2.DepartmentofTraditionalChineseMedicine,AffiliatedYuebeiPeople′sHospitaloftheShantouUniversity,Shaoguan，Guangdong512026,China)

ObjectiveTo detect the change of exoression level of plasma microRNA-21(miR-21) and TGF-β1in cardiac remodelin affer acute myocardial infarction(AMI) of the pateins.Methods200 pateints with AMI and 100 normal controls(age,sex matched) were enrolled.Blood samples were obtained from the normal controls and patients with AMI on the 3 days,7 days and 14 days.Real-time PCR was developed to detect the expression of miR-21 and TGF-β1in plasma.ResultsThe expression of miR-21 was significantly up-regulation in the 3 days,7 days and 14 days in MI group than that cntrol group,0.74±0.21vs. 2.62±0.23,vs. 3.67±0.25,vs. 4.13±0.27 up-regulation in the 3 days,7 days and 14 days in MI group than that cntrol group,0.98±0.18vs. 2.35±0.24,vs. 3.67±0.25,vs.4.13±0.27,P<0.05,respectively.The expression of miR-21 and TGF-β1were up-regulation with the change of cardiac function.Positive relationship between miRNA-21 expression and LVDd (r=0.757,P<0.05);Positive relationship between TGF-β1mRNA expression and LVDd(r=0.701,P<0.05).ConclusionThe expression of miR-21 and TGF-β1were up-regulation in cardiac remodelin affer AMI of the pateins,which involved in regulation in cardiac remodelin affer AMI.

myocardial infarction;cardiac remodeling;microRNA-21;TGF-β1

廣東省自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(S2013010014642)；廣東省中醫(yī)藥局科研課題(20151106)。

何鳳屏，女，教授，主要從事分子生物學(xué)方面的研究。

10.3969/j.issn.1673-4130.2016.18.004

A

1673-4130(2016)18-2513-04

2016-03-16

2016-05-24)