楊曉明　李彩紅　孫冬霞　竇海燕

邯鄲市婦幼保健院1婦一科，2病理科，河北　邯鄲　056001

α-SMA及TIMP在宮頸癌患者中的表達(dá)及臨床意義分析

楊曉明1#李彩紅1孫冬霞2竇海燕1

邯鄲市婦幼保健院1婦一科，2病理科，河北邯鄲056001

目的本研究旨在對(duì)α-平滑肌肌動(dòng)蛋白（α-SMA）及基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑（TIMP）在宮頸癌患者中的表達(dá)及臨床意義分析，為臨床診斷與治療提供參考。方法對(duì)120例宮頸癌患者的臨床資料進(jìn)行回顧性研究，分析α-SMA及TIMP1和TIMP2在不同臨床分期及預(yù)后的患者中表達(dá)情況。以本院100例同期健康體檢者設(shè)為對(duì)照組。結(jié)果隨著宮頸癌患者臨床分級(jí)增高α-SMA及TIMP1和TIMP2表達(dá)逐步增強(qiáng)，且不同分級(jí)之間具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異性（P＜0.05）；在相同臨床分期患者中，α-SMA及TIMP1和TIMP2與患者預(yù)后有關(guān)。結(jié)論α-SMA及TIMP1和TIMP2蛋白表達(dá)與宮頸癌患者臨床分期及預(yù)后密切相關(guān)，可作為臨床診斷宮頸癌和患者預(yù)后判斷的重要標(biāo)志物。

宮頸癌；基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑；α-平滑肌肌動(dòng)蛋白；臨床分期；預(yù)后

Prog，2016，14（7）

宮頸癌是臨床上最常見的婦科惡性腫瘤，嚴(yán)重影響患者生活質(zhì)量，給患者和家庭帶來沉重的經(jīng)濟(jì)和心理負(fù)擔(dān)［1-2］。已有證據(jù)顯示宮頸癌發(fā)病率和病死率有逐年升高趨勢。宮頸癌的發(fā)病原因有多種，但是其確切的分子機(jī)制尚不明確，臨床上也無有效的治療方法［3］。因此，探索其發(fā)病與預(yù)后的相關(guān)分子標(biāo)志物，提高臨床早期診斷水平具有重要意義。α-平滑肌肌動(dòng)蛋白（α-SMA）與細(xì)胞的增殖和分化過程密切相關(guān)，且參與了多種惡性腫瘤的病理過程［4］；基質(zhì)金屬蛋白酶是細(xì)胞外基質(zhì)降解與重構(gòu)生理過程的關(guān)鍵酶，也與多種惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)［5］。本研究旨在對(duì)α-SMA及基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑（TIMP）在宮頸癌患者中的表達(dá)及臨床意義分析，為臨床診斷與治療提供參考。

1　資料與方法

1.1一般資料

對(duì)邯鄲市婦幼保健院2010年1月至2014年12月診治的120例經(jīng)病理切片確診的宮頸癌患者為實(shí)驗(yàn)組，取其刷片細(xì)胞進(jìn)行研究。患者年齡41～64歲，平均年齡（51.4±6.8）歲。所有患者均符合世界衛(wèi)生組織WHO對(duì)宮頸癌的臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)。120例患者中Ⅰ期患者30例，Ⅱ期患者50例，Ⅲ期患者40例。本研究中相同臨床分期的患者所采取的治療方式一致。以本部門同期健康體檢者100例設(shè)為對(duì)照組，年齡41～63歲，平均年齡（51.3±6.9）歲。兩組受試者在一般資料方面差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。所有患者均知情并簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：哺乳期患者；嚴(yán)重的肝腎功能異?；颊撸惶悄虿』颊?；心肺功能異?；颊?。

1.2試劑與方法

光學(xué)顯微鏡購自日本奧林巴斯公司；α-SMA免疫組化試劑盒購自福州邁新生物技術(shù)公司；TIMP1檢測試劑盒購自美國R&D公司；TIMP2檢測試劑盒購自美國Santa Cruz公司。所有操作過程均按照試劑盒說明書進(jìn)行。

1.3評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)

對(duì)每一研究參數(shù)（α-SMA、TIMP1及TIMP2）選擇10個(gè)有代表性的視野，每個(gè)視野計(jì)數(shù)30個(gè)細(xì)胞，統(tǒng)計(jì)陽性細(xì)胞數(shù)及陽性區(qū)域的染色強(qiáng)度。①陽性率計(jì)分標(biāo)準(zhǔn)：陽性細(xì)胞占據(jù)同類細(xì)胞＜5%為0分，＜25%為1分，＜50%為2分，＜75%為3分，＞75%為4分；②染色強(qiáng)度計(jì)分標(biāo)準(zhǔn)：無著色為0分，淡棕色為1分，中等棕色為2分，深棕色為3分。統(tǒng)計(jì)總分，按照如下標(biāo)準(zhǔn)計(jì)分：弱陽性（+）：1～4分，中等陽性（++）：5～8分，強(qiáng)陽性（+++）：9～12分。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)采用SPS-S 19.0軟件進(jìn)行分析，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，組間比較用單因素方差分析，計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，比較采用χ2檢驗(yàn)，對(duì)相同臨床分期、接受類似治療的患者生存分析采用Kaplan-Meier法和Log-rank顯著性檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1α-SMA與宮頸癌患者臨床分期的關(guān)系

本研究發(fā)現(xiàn)α-SMA表達(dá)強(qiáng)度與宮頸癌臨床分期密切相關(guān)，隨宮頸癌患者臨床分期的增高α-SMA蛋白陽性率逐步增強(qiáng)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。（表1）

表1　α-SMA與宮頸癌患者臨床分期的關(guān)系［n（％）］

2.2TIMP1與宮頸癌患者臨床分期的關(guān)系

TIMP1表達(dá)強(qiáng)度與宮頸癌臨床分期密切相關(guān)，隨宮頸癌患者臨床分期的增高TIMP1蛋白陽性率逐步增強(qiáng)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。（表2）

表2　TIMP1 與宮頸癌患者臨床分期的關(guān)系［n（％）］

2.3TIMP2與宮頸癌患者臨床分期的關(guān)系

TIMP2表達(dá)強(qiáng)度與宮頸癌臨床分期密切相關(guān)，隨宮頸癌患者臨床分期的增高TIMP2蛋白陽性率逐步增強(qiáng)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。（表3）

表3　TIMP2 與宮頸癌患者臨床分期的關(guān)系［n（％）］

2.4α-SMA及TIMP1/2與宮頸癌患者預(yù)后的關(guān)系

Kaplan-Meier生存分析顯示α-SMA和TIMP1/2與宮頸癌患者的預(yù)后有關(guān)，Log-Rank檢驗(yàn)（α-SMA：χ2=6.447，P＜0.05；TIMP1：χ2=5.478，P＜0.05；TIMP2：χ2=5.396，P＜0.05），三者陽性程度越高，患者預(yù)后越差，且α-SMA（+++）表達(dá)患者的生存期最長為60個(gè)月，TIMP2（+++）表達(dá)患者的生存期最長為72個(gè)月，TIMP1（+++）表達(dá)患者的72個(gè)月后的生存率為20.0%。（圖1）

圖1　α-SMA及TIMP1/2與宮頸癌患者預(yù)后的關(guān)系

3　討論

宮頸癌是臨床上最常見的婦科惡性腫瘤之一，但是其發(fā)病的確切分子機(jī)制尚存在不明確。因此，探索宮頸癌發(fā)病及預(yù)后相關(guān)的標(biāo)志物，對(duì)臨床相關(guān)的新藥開發(fā)及治療具有重要的意義。

以往研究證實(shí)α-SMA與多種惡性腫瘤的病理過程密切相關(guān)，且SMA高表達(dá)是宮頸癌的基質(zhì)重構(gòu)及腫瘤惡化的重要標(biāo)志物［6］。在研究星形細(xì)胞腫瘤中CD13和α-SMA的表達(dá)及其與CD31陽性微血管相關(guān)性的研究中發(fā)現(xiàn)二者均可作為血管周圍的特異性標(biāo)志物，且與微血管壁缺陷及腫瘤臨床分級(jí)相關(guān)［7］。在研究鼻咽癌間質(zhì)組織中腫瘤相關(guān)纖維母細(xì)胞CD34和α-SMA表達(dá)意義的研究中也發(fā)現(xiàn)α-SMA與鼻咽癌的浸潤和轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，且與患者預(yù)后有一定相關(guān)性［8］。在分析乳腺腫瘤組織間質(zhì)中α-SMA表達(dá)意義的研究中也發(fā)現(xiàn)該蛋白的異常增強(qiáng)表達(dá)在乳腺腫瘤從良性向惡性轉(zhuǎn)化過程中發(fā)揮重要作用［9-10］。本研究發(fā)現(xiàn)α-SMA表達(dá)強(qiáng)度與宮頸癌臨床分期密切相關(guān)，隨宮頸癌患者臨床分期的增高α-SMA蛋白陽性率逐步增強(qiáng)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，且與患者的預(yù)后有關(guān)。

基質(zhì)金屬蛋白酶是膠原蛋白降解的主要酶，也是腫瘤細(xì)胞發(fā)生轉(zhuǎn)移的重要參與蛋白［11］。研究發(fā)現(xiàn)胃癌組織高遷移率族蛋白A2與基質(zhì)金屬蛋白酶-9表達(dá)與腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移及患者的預(yù)后具有密切的相關(guān)性［12］，且基質(zhì)金屬蛋白酶-2、9及其抑制劑的表達(dá)水平也參與了MMI-166對(duì)腫瘤發(fā)展的抑制作用過程［13］?；|(zhì)金屬蛋白酶-9和人抗原蛋白在宮頸癌組織中呈現(xiàn)高表達(dá)［14］，且基質(zhì)金屬蛋白酶-2的表達(dá)與宮頸癌患者的臨床分期與預(yù)后呈明顯的負(fù)相關(guān)［15］。同時(shí)，基質(zhì)金屬蛋白酶及其抑制因子參與宮頸癌的浸潤轉(zhuǎn)移過程［16］，且基質(zhì)金屬蛋白酶及其抑制因子聯(lián)合檢測對(duì)宮頸癌復(fù)發(fā)具有重要的臨床預(yù)測價(jià)值［17］。尹香花等［18］也發(fā)現(xiàn)基質(zhì)金屬蛋白酶-2及其抑制劑TIMP-2在宮頸癌中呈明顯的高表達(dá)，且是患者預(yù)后效果的重要指標(biāo)。本研究發(fā)現(xiàn)TIMP1/2表達(dá)強(qiáng)度與宮頸癌臨床分期密切相關(guān)，隨宮頸癌患者臨床分期的增高TIMP1/2蛋白陽性率逐步增強(qiáng)，且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，表明基質(zhì)金屬蛋白酶也與宮頸癌的臨床分期和患者預(yù)后密切相關(guān)。

因此，α-SMA及TIMP1/2蛋白表達(dá)與宮頸癌患者臨床分期及預(yù)后具有明顯關(guān)系，可作為臨床診斷宮頸癌和患者預(yù)后判斷的重要標(biāo)志物。

［1］呂柏楠，石曉明，吳勝春，等.胃癌組織高遷移率族蛋白A2與基質(zhì)金屬蛋白酶-9表達(dá)與腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移的關(guān)系及預(yù)后意義［J］.河北醫(yī)藥，2014，9（6）:819-822.

［2］宋德坤，鞏本剛.基質(zhì)金屬蛋白酶-2、9及其抑制劑MMI-166在腫瘤發(fā)展中的作用［J］.濱州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2014，11（2）:146-148.

［3］鄧路嬋，周黎明.基質(zhì)金屬蛋白酶與惡性腫瘤轉(zhuǎn)移的關(guān)系［J］.四川生理科學(xué)雜志，2014，8（2）:80-82.

［4］肖光，熊小亮，羅達(dá)亞，等.非小細(xì)胞肺癌中TGF-β1與腫瘤相關(guān)纖維母細(xì)胞α-SMA及CD34表達(dá)的相關(guān)性和意義［J］.廣東醫(yī)學(xué)，2011，23（14）:1866-1869.

［5］王虹，蔣鑫，孫冬霞.非小細(xì)胞肺癌組織中腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因蛋白和基質(zhì)金屬蛋白酶-2的表達(dá)與微血管密度相關(guān)性研究［J］.山西醫(yī)藥雜志（下半月刊），2013，12（8）:857-859.

［6］Horn LC，Schreiter C，Canzler A，et al.CD34（low）and SMA（high）represent stromal signature in uterine cervical cancer and are markers for peritumoral stromal remodeling［J］.Ann Diagn Pathol，2013，17（6）:531-535.

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［8］黨陽，莫立根，羅元，等.鼻咽癌間質(zhì)組織中腫瘤相關(guān)纖維母細(xì)胞CD34和α-SMA的表達(dá)及其意義［J］.中國癌癥防治雜志，2014，7（2）:143-147.

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［11］鄧路嬋，周黎明.基質(zhì)金屬蛋白酶與惡性腫瘤轉(zhuǎn)移的關(guān)系［J］.四川生理科學(xué)雜志，2014，10（2）:80-82.

［12］呂柏楠，石曉明，吳勝春，等.胃癌組織高遷移率族蛋白A2與基質(zhì)金屬蛋白酶-9表達(dá)與腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移的關(guān)系及預(yù)后意義［J］.河北醫(yī)藥，2014，14（6）:819-822.

［13］宋德坤，鞏本剛.基質(zhì)金屬蛋白酶-2、9及其抑制劑MMI-166在腫瘤發(fā)展中的作用［J］.濱州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2014，15（2）:146-148.

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［15］胡東昊，王喬新，牛海燕，等.基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1、人絨毛膜促性腺激素β亞基及基質(zhì)金屬蛋白酶2的表達(dá)與宮頸癌分期與預(yù)后的相關(guān)性研究［J］.中國性科學(xué)，2016，9（2）:48-50.

［16］游泳，杜瑩瑩，曹媛，等.基質(zhì)金屬蛋白酶及其抑制因子與宮頸癌浸潤轉(zhuǎn)移的關(guān)系分析［J］.河南醫(yī)學(xué)研究，2014，3（6）:5-8.

［17］游泳，杜瑩瑩，曹媛，等.分析基質(zhì)金屬蛋白酶及其抑制因子聯(lián)合檢測對(duì)宮頸癌復(fù)發(fā)的預(yù)測價(jià)值［J］.中外醫(yī)療，2014，14（21）:21-22.

［18］尹香花，隋玉梅，成艷，等.基質(zhì)金屬蛋白酶MMP-2及其抑制物TIMP-2在宮頸癌中的表達(dá)［J］.中國現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志，2012，4（15）:15-18.

The expression and clinical significance of α-SMAand TIMP1/2 in cervical cancer patients

YANG Xiao-ming1#LI Cai-hong1SUN Dong-xia2DOU Hai-yan1
1Department of Obstetrics，2Department of Pathology，Maternal and Child Health Care Center，Handan 056001，Hebei，China

ObjectiveTo investigate the expression level and clinical significance of α-SMA，TIMP1 and TIMP2 in cervical cancer patients，and discuss the role of them in diagnosis and treatment.Method120 cases of cervical cancer patients were retrospectively analyzed，and the expression of α-smooth muscle action（α-SMA）and tissue inhibitor of metalloproteinase（TIMP1）and TIMP2 in patients with different clinical stage and prognosis were compared.In the same period，another 100 normal healthy adults were included as control.ResultThe expression of α-SMA and TIMP1 as well as TIMP2 were increased as the clinical stage escalated，with significant differences observed between different clinical stages（P＜0.05）；For patients with same clinical stage，the expression of α-SMA and TIMP1/2 were negatively associated with patients'prognosis.ConclusionThe expression of α-SMA and TIMP1，TIMP2 are markedly associated with the clinical stage and prognosis of cervical cancer，and may be utilized as predictors for diagnosis and prognosis of cervical cancer patients.

cervical cancer；tissue inhibitors of metalloproteinase；α-SMA；clinical stages；prognosis Oncol

R737.33

A

10.11877/j.issn.1672-1535.2016.14.07.13

2016-03-03）

（corresponding author），郵箱：yangmr23@163.com