杜景華，張宇，郝祎卓

慢性乙型肝炎患者血清乙型肝炎病毒表面大蛋白水平檢測(cè)意義探討

杜景華，張宇，郝祎卓

目的探討慢性乙型肝炎、乙型肝炎肝硬化和原發(fā)性肝癌患者血清乙型肝炎病毒表面大蛋白（HBV-LP）水平差異及意義。方法選取2014年8月～2015年12月我院診治的慢性乙型肝炎患者508例，乙型肝炎肝硬化患者74例，原發(fā)性肝癌患者29例，采用ELISA法檢測(cè)血清HBV-LP水平，采用FQ-PCR法檢測(cè)血清HBV DNA水平。結(jié)果慢性乙型肝炎、乙型肝炎肝硬化和原發(fā)性肝癌患者血清HBV-LP陽性率分別為77.2%、82.4%和89.7%，血清HBV DNA陽性率分別為78.9%、83.8%和93.1%；3組血清HBV-LP水平分別為（9.78±4.25）μg/L、（17.24±8.63）μg/L和（38.65±19.38）μg/L，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論HBV-LP是乙型肝炎病毒感染者血清重要的標(biāo)記物，與血清HBV DNA存在某種相關(guān)性，其檢測(cè)的意義值得探討。

乙型肝炎；乙型肝炎病毒表面大蛋白；HBV DNA；診斷

臨床上，主要將HBeAg、肝功能和HBV DNA作為監(jiān)測(cè)患者體內(nèi)病毒復(fù)制程度以及治療效果的主要指標(biāo)，但仍有一定的局限性［1，2］。乙型肝炎病毒表面大蛋白（hepatitis B viruslarge surface protein，HBV-LP）作為主要存在于感染性顆粒及其亞病毒管狀顆粒上的重要蛋白，被證實(shí)與HBV復(fù)制、顆粒組裝以及細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)釋放調(diào)節(jié)有著密不可分的關(guān)系。多數(shù)研究表明［3］，HBV-LP能夠很好地反映乙型肝炎患者體內(nèi)病毒復(fù)制狀態(tài)，可作為HBV感染者病毒復(fù)制、疾病進(jìn)展以及療效觀察的重要血清學(xué)指標(biāo)。本研究檢測(cè)了慢性乙型肝炎、乙型肝炎肝硬化和原發(fā)性肝癌患者血清HBV-LP水平，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1　資料與方法

1.1研究對(duì)象2014年8月～2015年12月我院門診和住院的乙型肝炎病毒感染患者，診斷依據(jù)中華醫(yī)學(xué)會(huì)修訂的慢性乙型肝炎防治指南（2010年版），肝癌患者經(jīng)血清AFP檢測(cè)和影像學(xué)檢查診斷，排除重疊感染、自身免疫性疾病和酒精性肝病患者。本研究經(jīng)我院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審批同意，所有研究對(duì)象簽署知情同意書。

1.2檢測(cè)方法采用ELISA法檢測(cè)血清HBV-LP（試劑盒來自北京貝爾生物工程有限公司）；采用FQ-PCR法檢測(cè)血清HBV DNA水平（測(cè)量?jī)x器為PE5700全自動(dòng)熒光定量PCR擴(kuò)增儀，美國PE公司）。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法應(yīng)用SPSS 21.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計(jì)量資料以（±s）表示，兩組間各指標(biāo)的比較采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料用百比率表示，采用卡方檢驗(yàn)，P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1三組患者血清HBV-LP和HBV DNA陽性率比較見表1。

表1　3組患者血清HBV-LP和HBV DNA陽性率（%）比較

2.2三組患者血清HBV-LP水平比較見表2。

表2　3組患者血清HBV-LP水平（±s）比較

表2　3組患者血清HBV-LP水平（±s）比較

與乙型肝炎比，①P＜0.05；與肝硬化比，②P＜0.01

例數(shù)血清HBV-LP（μg/L）乙型肝炎5089.78±4.25肝硬化7417.24±8.63①原發(fā)性肝癌2938.65±19.38②

3　討論

我國每年都會(huì)有大量的HBV感染者因病情惡化而轉(zhuǎn)化為肝炎、肝硬化或原發(fā)性肝癌。HBeAg作為臨床上使用的血清標(biāo)志物之一，經(jīng)常用來判定HBV復(fù)制程度及傳染性的強(qiáng)弱，但是由于受長(zhǎng)期治療及持續(xù)的免疫壓力等因素的影響常使乙型肝炎患者HBeAg轉(zhuǎn)陰［4］。當(dāng)前醫(yī)學(xué)界普遍認(rèn)為乙型肝炎患者外周血HBV DNA是反映患者體內(nèi)HBV復(fù)制情況的最直接和最可靠的指標(biāo)，但也有研究發(fā)現(xiàn)亞病毒顆粒在HBV感染過程中能夠增強(qiáng)其病毒復(fù)制，以pre-S蛋白的增強(qiáng)作用更為突出，HBV顆粒的形成與各種大蛋白存在著密不可分的聯(lián)系［5］。有關(guān)研究在對(duì)HBV感染者血清進(jìn)行檢驗(yàn)時(shí)發(fā)現(xiàn)，HBV-LP能夠比較準(zhǔn)確地反映乙型肝炎患者體內(nèi)HBV復(fù)制的情況，且血清HBV-LP水平與HBV DNA拷貝數(shù)具有明顯的相關(guān)性。因此，后者可作為反映病毒復(fù)制的有效指標(biāo)［6］。

有關(guān)研究表明，HBV對(duì)人體的侵犯并不是直接損傷肝細(xì)胞，而是通過機(jī)體對(duì)HBV的免疫應(yīng)答反應(yīng)引起機(jī)體的免疫損傷，造成肝細(xì)胞炎性變性，甚至壞死［7］。人體的這種免疫應(yīng)答反應(yīng)通常表現(xiàn)為宿主血清IgG和IgA等有關(guān)抗體的水平升高，但也有研究發(fā)現(xiàn)［8，9］，患者血清抗體并不是一直持續(xù)陽性，因此對(duì)于乙型肝炎者的診斷以及患者對(duì)藥物治療后的評(píng)估，檢測(cè)血清HBV-LP水平就顯得尤為重要。

HBV-LP是HBV分泌的3種外膜蛋白中的一種，可以與眾多小蛋白及中蛋白聯(lián)合組成Dane顆粒，而HBV-LP蛋白則被證實(shí)與Dane顆粒聯(lián)系最為緊密，可準(zhǔn)確地反映HBV復(fù)制情況［10，11］。有研究報(bào)道了在HBsAg、HBeAg、HBcAb陽性患者，HBV-LP陽性率顯著高于HBeAg陰性患者，提示其與HBeAg具有很強(qiáng)的相關(guān)性，而在HBeAg陰性患者則沒有顯著相關(guān)［12，13］。HBV-LP作為一種存在于Dane顆粒和亞病毒管顆粒上的外膜蛋白，具有雙重外膜拓?fù)錉罱Y(jié)構(gòu)，HBV-LP蛋白可依賴這種結(jié)構(gòu)在肝細(xì)胞毒性甚至肝癌發(fā)病中發(fā)揮多重作用［14，15］。因此，檢測(cè)乙型肝炎患者體內(nèi)HBV-LP水平能夠判斷患者體內(nèi)的Dane顆粒狀態(tài)，進(jìn)而判定其體內(nèi)是否存在病毒的復(fù)制及傳染性等情況［16，17］。

本研究納入慢性乙型肝炎508例，乙型肝炎肝硬化74例，原發(fā)性肝癌29例，檢測(cè)發(fā)現(xiàn)慢性乙型肝炎組、乙型肝炎肝硬化組和原發(fā)性肝癌患者血清HBV-LP陽性率以原發(fā)性肝癌患者最高，說明不同疾病類型患者體內(nèi)HBV復(fù)制情況不同。有研究證實(shí)HBV-LP與HBV DNA之間存在著明顯的量效關(guān)系，即HBV-LP水平與HBV DNA拷貝數(shù)之間存在關(guān)聯(lián)［18，19］。HBV-LP作為能夠直接損傷肝細(xì)胞的外膜蛋白，其在不同肝臟疾病之間含量存在明顯差異已在多項(xiàng)研究中得到證實(shí)［20］。同時(shí)，HBV-LP也是導(dǎo)致肝細(xì)胞凋亡和肝細(xì)胞損傷的重要因素。

綜上所述，HBV-LP能夠比較準(zhǔn)確地反映乙型肝炎患者體內(nèi)HBV復(fù)制狀況，其在慢性乙型肝炎組、乙型肝炎肝硬化組和原發(fā)性肝癌組陽性率和血清水平不同是肝細(xì)胞損傷程度差異的反映。檢測(cè)HBV-LP相對(duì)于其他血清學(xué)指標(biāo)來說，操作簡(jiǎn)單、準(zhǔn)確可靠，適合于乙型肝炎的診斷及治療后病情的評(píng)估。

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（收稿：2016-03-05）

（本文編輯：陳宗炳）

Serum hepatitis B virus large surface protein in patients with hepatitis B viral infection

Du Jinghua，Zhang Yu，Hao Yizhuo.
Department of Liver Disease，Sixth People's Hospital，Dalian 116034，Liaoning Province

Hepatitis B；Hepatitis B virus large surface protein；HBV DNA；Diagnosis

10.3969/j.issn.1672-5069.2016.05.022

116034遼寧省大連市第六人民醫(yī)院肝病三科

杜景華，女，33歲，醫(yī)學(xué)碩士。E-mail：dujingshengdd @163.com