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        黃河三角洲2種菊科植物提取物及其復(fù)配的抑菌活性

        2016-10-14 05:06:48姜翠鳳王書平王淑娟
        安徽農(nóng)業(yè)科學(xué) 2016年24期
        關(guān)鍵詞:植物

        姜翠鳳, 王書平, 趙 永, 王淑娟, 董 杰, 宿 斌

        (濱州學(xué)院生命科學(xué)系,山東濱州 256603)

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        黃河三角洲2種菊科植物提取物及其復(fù)配的抑菌活性

        姜翠鳳, 王書平*, 趙 永, 王淑娟, 董 杰, 宿 斌

        (濱州學(xué)院生命科學(xué)系,山東濱州 256603)

        [目的]明確2種菊科植物的抑菌活性。[方法]以干苦菜、黃花蒿作為供試材料,大腸桿菌、枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌作為供試細菌,采用濾紙片法通過抑菌圈的大小研究干苦菜、黃花蒿及其復(fù)配提取液的抑菌活性。[結(jié)果]在供試濃度為0.1 g/mL時,2種植物的提取液及2種植物的復(fù)配混合液對枯草芽孢桿菌、大腸桿菌、金黃色葡萄球菌均有抑菌作用,并且每1種植物提取液對至少1種菌的抑菌率大于70%,其中黃花蒿提取液對金黃色葡萄球菌的抑菌率大于80%,苦菜提取液對大腸桿菌的抑菌率大于85%,苦菜與黃花蒿提取液的復(fù)配混合液對大腸桿菌的抑菌率約為100%。[結(jié)論]苦菜、黃花蒿有較好的抑菌活性,可進一步研究開發(fā)。

        苦菜;黃花蒿;復(fù)配;抑菌效果

        隨著人類生活水平的提高,人們對周邊食物的健康問題日益關(guān)注,植物農(nóng)藥也逐漸成為被關(guān)注的焦點。中國藥學(xué)專家屠呦呦通過從青蒿中提取的青蒿素真正意義上造福人類。楊順義[1]對14種植物的提取液進行了初步分析[1]。劉利本等[2]對蒲公英的抑菌作用進行了初步比較。近幾年的生物仿制藥逐步踏入高峰,趙自葉[3]對半胱氨酸蛋白酶IdeS進行了提高抗體結(jié)構(gòu)的分辨能力研究。目前,關(guān)于苦菜、黃花蒿活性成分的研究已有報道[4]。筆者采用濾紙片法研究了干苦菜、黃花蒿對大腸桿菌、枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌3種細菌的抑菌活性,旨在為植物源農(nóng)藥研究提供理論依據(jù)。

        1 材料與方法

        1.1材料

        1.1.1供試植物??嗖?、黃花蒿:將采取的植物于烘箱內(nèi)烘干,將所采取的植物粉碎,粉碎后采用水浴煮沸法獲得提取液,粉碎后密封保存?zhèn)溆谩?/p>

        1.1.2供試菌種。大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌菌種均由濱州學(xué)院生命科學(xué)系保藏。

        1.2方法

        1.2.1提取方法。

        1.2.1.1苦菜(黃花蒿)水煮提取液的制備。稱取干苦菜黃花蒿100 g于研缽中研磨至粉末狀,去部分根,加入200 mL蒸餾水,浸泡過夜,微波低火煮沸20~30 min,濾紙過濾,重復(fù)2次,合并濾液,濃縮至100 mL,干苦菜(黃花蒿)含量終濃度為1 g/mL。過濾除菌, 4 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

        1.2.1.2干苦菜(黃花蒿)醇提提取液的制備。稱取干苦菜(黃花蒿)100 g于研缽中研磨至粉末狀,去部分根,用80%乙醇200 mL浸泡過夜,微波低火煮沸20~30 min,濾紙過濾,重復(fù)2次,合并濾液,濃縮至100 mL,干苦菜(黃花蒿)含量終濃度為1 g/mL。過濾除菌,4 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

        1.2.1.3復(fù)配溶液的制備。將抑菌效果較好的水提苦菜提取液和醇提黃花蒿提取液混合,獲取復(fù)配溶液。

        1.2.2最小抑菌濃度的檢測。采用二倍稀釋法。取帶塞的試管,每種提取藥液1列,每列11個試管,除第1個試管外其他試管加入2 mL無菌蒸餾水,第1的24管中藥液加入4 mL,混勻后,吸取2 mL混合液加入第2管中,混勻后,再吸取2 mL混合液加入到第3管中,依次二倍稀釋至第9管,第10管棄去2 mL;第10管作為生長對照,37 ℃培養(yǎng)24~36 h,以無細菌生長的最低濃度為最小抑菌濃度(MIC) 。

        1.2.3抑菌圈測定試驗。采用6 mm濾紙片法進行抑菌試驗。配制普通瓊脂培養(yǎng)基,121 ℃、0.1 kPa條件下滅菌20 min,待其冷卻至80 ℃以下后,倒80個平板,每個濃度的1種提取方法的平板為4份,每份培養(yǎng)基上呈三角狀放6 mm濾紙片若干,用移液槍移取每個濃度的藥液提取液2 mL置上,37 ℃培養(yǎng)24 h左右,觀察其結(jié)果,測定抑菌圈的大小,重復(fù)2~3次。

        2 結(jié)果與分析

        2.1最小抑菌濃度的測定結(jié)果由圖1可知,苦菜、黃花蒿提取液對大腸桿菌、枯草桿菌、金黃色葡萄球菌的最低抑菌濃度均在10%以下,黃花蒿對大腸桿菌的抑菌效果較小,達2.5%,而干苦菜的最小抑菌濃度則為3.9%;干苦菜對金黃色葡萄球菌的最小抑菌濃度較大,達7.8%。說明黃花蒿與干苦菜對大腸桿菌、枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌均有較強的抑菌作用。

        2.2抑菌濃度的測定結(jié)果[5]由表1可知,苦菜與黃花蒿的提取液對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、枯草芽孢桿菌均有抑菌作用。苦菜水提取液對大腸桿菌的作用較強烈,抑菌圈直徑達9.498 mm,黃花蒿醇提液對金黃色葡萄球菌的抑菌作用較強,抑菌圈直徑達10.833 mm,而黃花蒿和苦菜復(fù)配混合液的抑菌作用更強,抑菌圈平均直約10 mm。

        圖1 2種菊科植物的MICFig.1 MIC of two Compositae plants

        3 結(jié)論

        苦菜、黃花蒿的提取液對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和枯草芽孢桿菌均有抑菌效果,并且抑菌率在70%以上??嗖说乃崛∫罕却既√嵋旱囊志饔幂^強,黃花蒿的醇提液比水提液的抑菌作用較強,但是苦菜和黃花蒿的復(fù)配混合液抑菌效果較苦菜、黃花蒿提取液分別抑菌作用更強。該試驗結(jié)果為今后關(guān)于苦菜、黃花蒿的研究奠定了基礎(chǔ)。

        表1 苦菜不同加工方法制備藥液的抑菌效果

        [1] 楊順義.蒼耳、狼毒等植物提取物抑菌活性的初步研究[D].蘭州:甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué),2003.

        [2] 劉利本,平家奇,高海飛,等.蒲公英不同部位提取物體外抑菌作用的比較[J].延邊大學(xué)農(nóng)學(xué)學(xué)報,2010(1):65-68.

        [3] 趙自葉.半胱氨酸蛋白酶IdeS的原核表達、純化、活性鑒定及應(yīng)用[D].聊城:聊城大學(xué),2014.

        [4] 吳靜.黃花蒿的抑菌活性及有效成分的初步分離研究[D].重慶:西南大學(xué),2008.

        [5] 史冬燕.菏澤地區(qū)2種菊科植物的抑菌作用研究[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2009,37(17):7986-7987.

        The Antibacterial Activity of 2 Compositae Extracts and Compound in the Yellow River Delta

        JIANG Cui-feng, WANG Shu-ping*, ZHAO Yong et al

        (Department of Life Science, Binzhou University, Binzhou, Shandong 256603)

        [Objective] The aim was to determine the antibacterial activity of 2 Compositae plants.[Method] With maror, annua as test materials,Escherichiacoli,BacillussubtilisandStaphylococcusaureusas tested bacterias, using filter paper method, the antibacterial activity of maror and annua and their composite liquids were analyzed by observing the size of inhibition zone.[Result] The results showed that: when the concentration was 0.1 g/mL, the intermixtures and composite liquids of both plants inhabited three bacterias above, and the inhibitory rate of each plant’s concentration was more than 70% at least, the rate of annua inhibitingStaphylococcusaureuswas more than 80%, the rate of maror inhibitingEscherichiacoliwas more than 85%, the compound liquid of maror, annua can inhabitEscherichiacolithoroughly, which means the inhibitory rate was 100%.[Conclusion] Maror and annua have good antibacterial activity, which can be further studied and developed.

        Maror; Annua; Compound formulation; Bacteriostat

        國家級大學(xué)生創(chuàng)新項目(201510449033);濱州學(xué)院校內(nèi)青年基金項目(BZXYL1307)。

        姜翠鳳(1995- ),女,山東壽光人,本科生,專業(yè):生物技術(shù)。*通訊作者,碩士,從事微生物學(xué)研究。

        2016-07-01

        S 482

        A

        0517-6611(2016)24-121-02

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