姜翠鳳， 王書平， 趙 永， 王淑娟， 董 杰， 宿 斌

(濱州學(xué)院生命科學(xué)系，山東濱州 256603)

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黃河三角洲2種菊科植物提取物及其復(fù)配的抑菌活性

姜翠鳳， 王書平*， 趙 永， 王淑娟， 董 杰， 宿 斌

(濱州學(xué)院生命科學(xué)系，山東濱州 256603)

[目的]明確2種菊科植物的抑菌活性。[方法]以干苦菜、黃花蒿作為供試材料，大腸桿菌、枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌作為供試細菌，采用濾紙片法通過抑菌圈的大小研究干苦菜、黃花蒿及其復(fù)配提取液的抑菌活性。[結(jié)果]在供試濃度為0.1 g/mL時，2種植物的提取液及2種植物的復(fù)配混合液對枯草芽孢桿菌、大腸桿菌、金黃色葡萄球菌均有抑菌作用，并且每1種植物提取液對至少1種菌的抑菌率大于70%，其中黃花蒿提取液對金黃色葡萄球菌的抑菌率大于80%，苦菜提取液對大腸桿菌的抑菌率大于85%，苦菜與黃花蒿提取液的復(fù)配混合液對大腸桿菌的抑菌率約為100%。[結(jié)論]苦菜、黃花蒿有較好的抑菌活性，可進一步研究開發(fā)。

苦菜；黃花蒿；復(fù)配；抑菌效果

隨著人類生活水平的提高，人們對周邊食物的健康問題日益關(guān)注，植物農(nóng)藥也逐漸成為被關(guān)注的焦點。中國藥學(xué)專家屠呦呦通過從青蒿中提取的青蒿素真正意義上造福人類。楊順義[1]對14種植物的提取液進行了初步分析[1]。劉利本等[2]對蒲公英的抑菌作用進行了初步比較。近幾年的生物仿制藥逐步踏入高峰，趙自葉[3]對半胱氨酸蛋白酶IdeS進行了提高抗體結(jié)構(gòu)的分辨能力研究。目前，關(guān)于苦菜、黃花蒿活性成分的研究已有報道[4]。筆者采用濾紙片法研究了干苦菜、黃花蒿對大腸桿菌、枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌3種細菌的抑菌活性，旨在為植物源農(nóng)藥研究提供理論依據(jù)。

1　材料與方法

1.1材料

1.1.1供試植物?？嗖?、黃花蒿：將采取的植物于烘箱內(nèi)烘干，將所采取的植物粉碎，粉碎后采用水浴煮沸法獲得提取液，粉碎后密封保存?zhèn)溆谩?/p>

1.1.2供試菌種。大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌菌種均由濱州學(xué)院生命科學(xué)系保藏。

1.2方法

1.2.1提取方法。

1.2.1.1苦菜(黃花蒿)水煮提取液的制備。稱取干苦菜黃花蒿100 g于研缽中研磨至粉末狀，去部分根，加入200 mL蒸餾水，浸泡過夜，微波低火煮沸20～30 min，濾紙過濾，重復(fù)2次，合并濾液，濃縮至100 mL，干苦菜(黃花蒿)含量終濃度為1 g/mL。過濾除菌， 4 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.1.2干苦菜(黃花蒿)醇提提取液的制備。稱取干苦菜(黃花蒿)100 g于研缽中研磨至粉末狀，去部分根，用80%乙醇200 mL浸泡過夜，微波低火煮沸20～30 min，濾紙過濾，重復(fù)2次，合并濾液，濃縮至100 mL，干苦菜(黃花蒿)含量終濃度為1 g/mL。過濾除菌，4 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.1.3復(fù)配溶液的制備。將抑菌效果較好的水提苦菜提取液和醇提黃花蒿提取液混合，獲取復(fù)配溶液。

1.2.2最小抑菌濃度的檢測。采用二倍稀釋法。取帶塞的試管，每種提取藥液1列，每列11個試管，除第1個試管外其他試管加入2 mL無菌蒸餾水，第1的24管中藥液加入4 mL，混勻后，吸取2 mL混合液加入第2管中，混勻后，再吸取2 mL混合液加入到第3管中，依次二倍稀釋至第9管，第10管棄去2 mL；第10管作為生長對照，37 ℃培養(yǎng)24～36 h，以無細菌生長的最低濃度為最小抑菌濃度(MIC) 。

1.2.3抑菌圈測定試驗。采用6 mm濾紙片法進行抑菌試驗。配制普通瓊脂培養(yǎng)基，121 ℃、0.1 kPa條件下滅菌20 min，待其冷卻至80 ℃以下后，倒80個平板，每個濃度的1種提取方法的平板為4份，每份培養(yǎng)基上呈三角狀放6 mm濾紙片若干，用移液槍移取每個濃度的藥液提取液2 mL置上，37 ℃培養(yǎng)24 h左右，觀察其結(jié)果，測定抑菌圈的大小，重復(fù)2～3次。

2　結(jié)果與分析

2.1最小抑菌濃度的測定結(jié)果由圖1可知，苦菜、黃花蒿提取液對大腸桿菌、枯草桿菌、金黃色葡萄球菌的最低抑菌濃度均在10%以下，黃花蒿對大腸桿菌的抑菌效果較小，達2.5%，而干苦菜的最小抑菌濃度則為3.9%；干苦菜對金黃色葡萄球菌的最小抑菌濃度較大，達7.8%。說明黃花蒿與干苦菜對大腸桿菌、枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌均有較強的抑菌作用。

2.2抑菌濃度的測定結(jié)果[5]由表1可知，苦菜與黃花蒿的提取液對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、枯草芽孢桿菌均有抑菌作用。苦菜水提取液對大腸桿菌的作用較強烈，抑菌圈直徑達9.498 mm，黃花蒿醇提液對金黃色葡萄球菌的抑菌作用較強，抑菌圈直徑達10.833 mm，而黃花蒿和苦菜復(fù)配混合液的抑菌作用更強，抑菌圈平均直約10 mm。

圖1　2種菊科植物的MICFig.1　MIC of two Compositae plants

3　結(jié)論

苦菜、黃花蒿的提取液對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和枯草芽孢桿菌均有抑菌效果，并且抑菌率在70%以上?？嗖说乃崛∫罕却既√嵋旱囊志饔幂^強，黃花蒿的醇提液比水提液的抑菌作用較強，但是苦菜和黃花蒿的復(fù)配混合液抑菌效果較苦菜、黃花蒿提取液分別抑菌作用更強。該試驗結(jié)果為今后關(guān)于苦菜、黃花蒿的研究奠定了基礎(chǔ)。

表1　苦菜不同加工方法制備藥液的抑菌效果

[1] 楊順義.蒼耳、狼毒等植物提取物抑菌活性的初步研究[D].蘭州：甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)，2003.

[2] 劉利本,平家奇,高海飛,等.蒲公英不同部位提取物體外抑菌作用的比較[J].延邊大學(xué)農(nóng)學(xué)學(xué)報,2010(1):65-68.

[3] 趙自葉.半胱氨酸蛋白酶IdeS的原核表達、純化、活性鑒定及應(yīng)用[D].聊城：聊城大學(xué)，2014.

[4] 吳靜.黃花蒿的抑菌活性及有效成分的初步分離研究[D].重慶：西南大學(xué)，2008.

[5] 史冬燕.菏澤地區(qū)2種菊科植物的抑菌作用研究[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2009,37(17):7986-7987.

The Antibacterial Activity of 2 Compositae Extracts and Compound in the Yellow River Delta

JIANG Cui-feng, WANG Shu-ping*, ZHAO Yong et al

(Department of Life Science, Binzhou University, Binzhou, Shandong 256603)

[Objective] The aim was to determine the antibacterial activity of 2 Compositae plants.[Method] With maror, annua as test materials,Escherichiacoli,BacillussubtilisandStaphylococcusaureusas tested bacterias, using filter paper method, the antibacterial activity of maror and annua and their composite liquids were analyzed by observing the size of inhibition zone.[Result] The results showed that: when the concentration was 0.1 g/mL, the intermixtures and composite liquids of both plants inhabited three bacterias above, and the inhibitory rate of each plant’s concentration was more than 70% at least, the rate of annua inhibitingStaphylococcusaureuswas more than 80%, the rate of maror inhibitingEscherichiacoliwas more than 85%, the compound liquid of maror, annua can inhabitEscherichiacolithoroughly, which means the inhibitory rate was 100%.[Conclusion] Maror and annua have good antibacterial activity, which can be further studied and developed.

Maror; Annua; Compound formulation; Bacteriostat

國家級大學(xué)生創(chuàng)新項目(201510449033)；濱州學(xué)院校內(nèi)青年基金項目(BZXYL1307)。

姜翠鳳(1995- )，女，山東壽光人，本科生，專業(yè)：生物技術(shù)。*通訊作者，碩士，從事微生物學(xué)研究。

2016-07-01

S 482

A

0517-6611(2016)24-121-02