江雁瓊　張艷玲　賀端明　伍慧妍

(廣州醫(yī)科大學(xué)附屬第五醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣東 廣州 510700)

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·臨床研究·

肝素結(jié)合蛋白與1,25-(OH)2D3在慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者血清中的表達(dá)水平及臨床意義

江雁瓊*張艷玲賀端明伍慧妍

(廣州醫(yī)科大學(xué)附屬第五醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣東 廣州 510700)

目的:探討肝素結(jié)合蛋白(HBP)與1,25-(OH)2D3在慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)患者血清中的表達(dá)水平及臨床意義。 方法：選擇2012年7月至2015年7月廣州醫(yī)科大學(xué)附屬第五醫(yī)院收治的82例慢性阻塞性肺疾病患者作為研究對(duì)象，其中AECOPD 組48例、COPD穩(wěn)定期組34例。酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)測(cè)定1,25-(OH)2D3、HBP水平，同時(shí)檢測(cè)血清降鈣素原(PCT)、超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)及WBC水平，同步行肺功能及相關(guān)檢查。 結(jié)果：AECOPD患者HBP水平為(74.15±13.24) ng/mL，明顯高于COPD穩(wěn)定期患者的(51.57±10.22) ng/mL(P<0.05)；AECOPD患者1,25-(OH)2D3水平為(14.85±5.32)ng/mL，明顯低于COPD穩(wěn)定期患者的(19.46±6.52) ng/mL(P<0.05)。AECOPD患者PCT、hs-CRP及WBC水平均高于COPD穩(wěn)定期患者(P<0.05)，肺功能各項(xiàng)指標(biāo)均明顯低于COPD穩(wěn)定患者(P<0.05)。血清1,25-(OH)2D3與肺功能指標(biāo)呈正相關(guān)，HBP水平與肺功能指標(biāo)呈負(fù)相關(guān)(P<0.05)。 結(jié)論：血清1,25-(OH)2D3、HBP可作為AECOPD的輔助診斷指標(biāo)，二者在COPD氣道炎癥及重塑中可能具有重要作用。

慢性阻塞性肺疾??；急性加重期；1,25-(OH)2D3;肝素結(jié)合蛋白

慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease，COPD)是呼吸系統(tǒng)的常見(jiàn)病和多發(fā)病，頻繁的急性加重會(huì)導(dǎo)致肺功能迅速惡化，其患病率和病死率高，嚴(yán)重影響患者的生命質(zhì)量。防治COPD的急性加重是治療目標(biāo)之一[1]。研究表明，COPD急性加重期(cute exacerbation COPD，AECOPD)常存在血清鈣、25-(OH)2D3水平降低，影響疾病的發(fā)展和預(yù)后[2]。肝素結(jié)合蛋白(heparin-binding protein，HBP)常被用于膿毒血癥早期輔助診斷[3]。本研究觀(guān)察AECOPD患者HBP 和1,25-(OH)2D3的表達(dá)水平，并對(duì)其與肺功能的相關(guān)性進(jìn)行研究，探討各指標(biāo)的變化與COPD的關(guān)系，為臨床治療提供新的思路和方法。

1　資料與方法

1.1一般資料

納入標(biāo)準(zhǔn)：AECOPD及COPD穩(wěn)定期的診斷依據(jù)美國(guó)胸科學(xué)會(huì)歐洲呼吸學(xué)會(huì)聯(lián)合發(fā)布的慢性阻塞性肺疾病診斷處理和預(yù)防全球策略2011年修訂版指南[4]。AECOPD診斷：近期內(nèi)患者的呼吸系統(tǒng)癥狀?lèi)夯鋈粘Ｗ儺?，需要調(diào)整治療方案，入院后痰細(xì)菌培養(yǎng)為陽(yáng)性且予以抗感染治療后癥狀明顯緩解[5]。

排除標(biāo)準(zhǔn)：急性加重期病程超過(guò)3 d者；半個(gè)月內(nèi)有抗菌藥物使用史；呼吸系統(tǒng)以外部位細(xì)菌感染者；高血壓冠心病、糖尿病、自身免疫病等嚴(yán)重疾患者。

選擇2012年7月至2015年7月我院收治的82例COPD患者作為研究對(duì)象，其中AECOPD組48例，男30例，女18例；年齡38～83歲，平均年齡(68±11)歲；COPD穩(wěn)定期組34例，男21例，女13例；年齡40～79歲，平均年齡(71±10)歲。兩組年齡、性別等一般資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2　研究方法

1.2.1基本步驟患者入院后第2天清晨空腹采肘靜脈血5 mL，檢測(cè)HBP、1,25-(OH)2D3，并行肺功能檢查血?dú)夥治黾把Ｒ?guī)等有關(guān)檢查，予常規(guī)抗感染祛痰解痙平喘等治療，10～15 d病情緩解后重復(fù)上述檢查。

1.2.2實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法血清HBP、1,25-(OH)2D3檢測(cè)采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)進(jìn)行；降鈣素原(procalcitonin，PCT)檢測(cè)采用德國(guó)LIAISON全自動(dòng)熒光免疫分析儀進(jìn)行免疫熒光檢測(cè)；血常規(guī)檢測(cè)采用日本生產(chǎn)SYSMEX SF-3000全自動(dòng)血液分析儀進(jìn)行；hs-CRP水平采用免疫透射比濁法檢測(cè)，試劑由珠海金瑞希亞克公司提供。

1.2.3肺功能檢測(cè)肺功能采用德國(guó)JAEGER公司生產(chǎn)的masterscreen儀測(cè)定指標(biāo)，選用第一秒用力呼氣容積占預(yù)計(jì)值百分比(FEV1% Pred)，第一秒用力呼氣容積占用力肺活量(FEV1 Fvc%)，最大呼氣中期流速占預(yù)計(jì)值百分比(MMEF% Pred)，肺容積為50%時(shí)的最大呼氣流速占預(yù)計(jì)值百分比(V50% Pred)，肺容積為25%時(shí)的最大呼氣流速占預(yù)計(jì)值百分比(V25% Pred)[6]。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2　結(jié)　果

2.1兩組患者實(shí)驗(yàn)室相關(guān)指標(biāo)比較

AECOPD組患者HBP、PCT、hs-CRP、WBC水平均高于COPD穩(wěn)定期組(P<0.05)；而1,25-(OH)2D3水平低于COPD穩(wěn)定期組(P<0.05)，見(jiàn)表1。

2.2兩組肺功能比較

AECOPD組與COPD穩(wěn)定期組患者肺功能情況見(jiàn)表2，AECOPD組FEV1% Pred 、FEV1 Fvc%、 MMEF% Pred 、V50% Pred及 V25% Pred均高于COPD穩(wěn)定期組(P<0.05)。

2.3AECOPD患者血清HBP、1,25(OH)2D3水平與肺功能的相關(guān)性

AECOPD患者血清HBP水平與FEV1% Pred、FEV1 Fvc% 、MMEF% Pred呈負(fù)相關(guān)(均P<0.05)，而血清1,25(OH)2D3水平與上述指標(biāo)呈正相關(guān)(均P<0.05)，見(jiàn)表3。

表1　兩組實(shí)驗(yàn)室相關(guān)指標(biāo)的比較±s)

注：COPD：慢性阻塞性肺疾?。?AECOPD：慢性阻塞性肺疾病急性加重期；HBP：肝素結(jié)合蛋白；PCT：血清降鈣素原；hs-CRP：超敏C反應(yīng)蛋白；WBC：白細(xì)胞

表2　兩組肺功能比較±s)

注：COPD：慢性阻塞性肺疾?。?AECOPD：慢性阻塞性肺疾病急性加重期；FEV1% Pred：第一秒用力呼氣容積占預(yù)計(jì)值百分比；FEV1 Fvc%：第一秒用力呼氣容積占用力肺活量；MMEF% Pred：最大呼氣中期流速占預(yù)計(jì)值百分比；V50% Pred：肺容積為50%時(shí)的最大呼氣流速占預(yù)計(jì)值百分比；V25% Pred肺容積為25%時(shí)的最大呼氣流速占預(yù)計(jì)值百分比

表3　AECOPD患者血清HBP、1,25(OH)2D3水平與肺功能的相關(guān)性

注：COPD：慢性阻塞性肺疾??； AECOPD：慢性阻塞性肺疾病急性加重期；HBP：肝素結(jié)合蛋白；FEV1% Pred：第一秒用力呼氣容積占預(yù)計(jì)值百分比；FEV1 Fvc%：第一秒用力呼氣容積占用力肺活量；MMEF% Pred：最大呼氣中期流速占預(yù)計(jì)值百分比；V50% Pred：肺容積為50%時(shí)的最大呼氣流速占預(yù)計(jì)值百分比；V25% Pred:肺容積為25%時(shí)的最大呼氣流速占預(yù)計(jì)值百分比

3　討　論

AECOPD可由多種原因引起，其中以細(xì)菌感染為主?？股刂委熓茿ECOPD治療中一個(gè)重要環(huán)節(jié)，臨床醫(yī)生大多數(shù)憑經(jīng)驗(yàn)使用抗生素，而抗生素使用是否合理是影響患者預(yù)后的重要因素[7]。近年來(lái)，很多學(xué)者在探索能夠反映COPD的生物學(xué)標(biāo)志物，特別是能準(zhǔn)確反映COPD嚴(yán)重程度的標(biāo)志物，從而預(yù)防COPD的進(jìn)展及惡化[8,9]。以往臨床上常用的實(shí)驗(yàn)室檢查包括細(xì)菌培養(yǎng)、WBC計(jì)數(shù)以及CRP檢查[10-12]，細(xì)菌學(xué)培養(yǎng)是診斷細(xì)菌感染的金標(biāo)準(zhǔn)，但病原學(xué)的分離需要時(shí)間較長(zhǎng)，無(wú)法在感染早期做出快速診斷，且容易使結(jié)果出現(xiàn)假陰性。WBC計(jì)數(shù)方法簡(jiǎn)便、快捷，但診斷準(zhǔn)確性很低，不能準(zhǔn)確反映COPD嚴(yán)重程度等。CRP是機(jī)體受到微生物入侵或組織損傷等應(yīng)激時(shí)肝臟合成的急性反應(yīng)蛋白，是一種非特異性炎癥指標(biāo)，但由于CRP除在細(xì)菌感染時(shí)升高，而且在急性心肌梗死、心腦血管意外等情況時(shí)也升高，診斷特異性不高；而對(duì)于AECOPD患者而言，其起病急、進(jìn)展快，臨床上需具有早期診斷及鑒別診斷價(jià)值的化驗(yàn)指標(biāo)，合理使用抗生素，因而以上指標(biāo)均不能較好的進(jìn)行檢測(cè)診斷。

人體中HBP主要是由多形核中性粒細(xì)胞受外界刺激后合成釋放，健康人血中HBP水平均很低當(dāng)出現(xiàn)感染時(shí)部分細(xì)菌遷移至血管內(nèi)[3]。有研究表明HBP助于感染性休克的早期診斷，呼吸系統(tǒng)感染、泌尿系統(tǒng)感染等局部感染伴隨休克，患者HBP水平明顯高于沒(méi)有合并休克的患者可見(jiàn)HBP與急性感染關(guān)系更為密切。1,25(OH)2D3是一種體內(nèi)維生素D的表現(xiàn)形式，其與其類(lèi)似物的免疫調(diào)控作用，己在多種自身免疫性疾病的動(dòng)物模型中得到證實(shí)[13]。不僅能預(yù)防自身免疫性疾病的發(fā)生，還可促進(jìn)外周單核細(xì)胞向吞噬細(xì)胞誘導(dǎo)分化，誘導(dǎo)單核細(xì)胞對(duì)微生物的殺傷功能，還能夠誘導(dǎo)抗微生物肽的基因表達(dá)而發(fā)揮其調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能[14]。此外維生素D還可抑制氣道的炎癥免疫反應(yīng)，提高機(jī)體對(duì)微生物的防御反應(yīng)，從而起到抗感染作用[15]。本研究結(jié)果表明，AECOPD組患者血清HBP、1,25(OH)2D3水平與COPD穩(wěn)定期患者血清中表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，COPD加重患者HBP水平顯著較高，1,25(OH)2D3水平顯著較低。其中HBP水平變化與實(shí)驗(yàn)室其他常見(jiàn)的指標(biāo)如PCT、hs-CRP、WBC等一致，可見(jiàn)血清HBP、1,25(OH)2D3水平與AECOPD患者的病情有一定的聯(lián)系。

在評(píng)價(jià)AECOPD患者病情中，肺功能是很重要的指標(biāo)之一，其中FEV1% Pred 是中重度氣流受限的良好指標(biāo)[16]。氣流受限是以FEV1% Pred、FEV1/FVC%值的降低來(lái)確定的，另外MMEF、V25、V50到目前為止一直被認(rèn)為是判斷小氣道阻塞的敏感和實(shí)用的指標(biāo)，其中檢測(cè)MMEF尤其能較早發(fā)現(xiàn)小氣道病變[17]，本研究結(jié)果顯示，AECOPD組患者肺功能各項(xiàng)指標(biāo)均低于COPD穩(wěn)定期組，表明AECOPD患者同時(shí)存在大小氣道功能異常，以及HBP水平與FEV1% Pred、FE V1/FVC%、MMEF%Pred呈負(fù)相關(guān)，而1,25(OH)2D3水平與FEV1% Pred等各項(xiàng)指標(biāo)呈嚴(yán)重正相關(guān)，提示血清HBP、1,25(OH)2D3水平與氣流阻塞程度有關(guān)。

本研究初步證實(shí)血清HBP、1,25(OH)2D3濃度可能是評(píng)價(jià)AECOPD細(xì)菌感染和炎癥嚴(yán)重程度的重要參考指標(biāo)，有助于早期識(shí)別AECOPD，并評(píng)估治療效果。進(jìn)一步深入研究血清HBP、1,25(OH)2D3水平在AECOPD中及COPD治療過(guò)程中的變化特點(diǎn)，對(duì)指導(dǎo)臨床準(zhǔn)確判斷病情具有理論指導(dǎo)意義。

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(本文編輯:張輝)

Serum expression levels and clinical significance of heparin binding protein and 1,25- (OH)2D3in patients with acute exacerbation of chronic obstructive pulmonary disease

JiangYanqiong*,ZhangYanling,HeDuanming,WuHuiyan

(Clinicallaboratory,FifthAffiliatedHospitalofGuangzhouMedicalUniversity,Guangzhou510700,China)

*Correspondingauthor:Email:407766977@qq.com

Objective:To investigate serum expression levels and clinical significance of heparin binding protein (HBP) and 1,25-(OH)2D3in patients with acute exacerbation of chronic obstructive pulmonary disease (AECOPD). Methods:Included in this study were 82 COPD patients treated in the Fifth Affiliated Hospital of Guangzhou Medical University between July 2012 and July 2015. These subjects comprised AECOPD group (n=48) and stable COPD group (n=34). Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) was used to measure the serum levels of 1,25-(OH)2D3and HBP. Meanwhile,the patients were examined for serum procalcitonin (PCT),high-sensitivity C-reactive protein (hs-CRP),WBC and pulmonary function. Results:The HBP level in AECOPD patients was(74.15±13.24) ng/mL,significantly higher than (51.57±10.22) ng/mL in the stable COPD patients (P<0.05). The 1,25-(OH)2D3level was (14.85±5.32) ng/mL in AECOPD patients,significantly lower than (19.46±6.52) ng/mL in the stable COPD patients (P<0.05). AECOPD patients had higher PCT,hs-CRP and WBC,and significantly lowered pulmonary function indexes,compared with stable COPD patients. Serum 1,25- (OH)2D3level was positively correlated,while the HBP level was negatively correlated,with lung function indexes (P<0.05). Conclusion:The serum 1,25-(OH)2D3and HBP levels can be used as diagnostic markers for AECOPD. The both may be playing an important role in airway inflammation and remodeling in patients with COPD.

Chronic obstructive pulmonary disease; acute exacerbation; 1,25- dihydroxyvitamin D3; HBP

10.3969/j.issn.1008-1836.2016.02.005

廣東省醫(yī)學(xué)科學(xué)技術(shù)研究基金項(xiàng)目(A2015359)

Email：407766977@qq.com

R563

A

2095-9664(2016)02-0018-04

2016-02-03)