楊溢爍，曾德永，劉　艷，張麗香，張　智

(東北林業(yè)大學(xué)林學(xué)院，哈爾濱　150040)

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香菇多糖體內(nèi)抗氧化活性研究

楊溢爍，曾德永，劉艷，張麗香，張智

(東北林業(yè)大學(xué)林學(xué)院，哈爾濱150040)

目的：探究香菇多糖的體內(nèi)抗氧化活性。方法：以灌胃生理鹽水的小鼠為正常對(duì)照組，將香菇多糖藥物組分為低、中、高3種劑量組。小鼠在灌胃3w后，由眼眶取血，按照試劑盒要求測(cè)定小鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)活力以及丙二醛(MDA)含量。結(jié)果：香菇多糖可顯著提高小鼠血清中SOD和GSH-Px的活力，同時(shí)減少血清中MDA含量。結(jié)論：香菇多糖對(duì)小鼠體內(nèi)抗氧化活性的提高具有顯著作用。

香菇多糖；體內(nèi)；抗氧化活性

香菇(Lentinula edodes)屬口蘑科微香菇屬的真菌，內(nèi)含豐富的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，既可作食用菌，也可作藥用菌[1,2]?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)和藥理學(xué)研究表明，香菇多糖具有提高人體免疫力[3,4]、抗腫瘤[5-7]、降血壓、降血脂[8-10]等作用，在醫(yī)藥和食品領(lǐng)域都有很好的應(yīng)用價(jià)值。目前與香菇多糖相關(guān)的研究多是關(guān)于香菇多糖的免疫功能，對(duì)香菇多糖體內(nèi)抗氧化活性的研究較少。本試驗(yàn)通過(guò)比較香菇多糖藥物組和正常對(duì)照組小鼠血清中的多種抗氧化酶活性及含量，對(duì)香菇多糖的體內(nèi)抗氧化能力進(jìn)行探討，為香菇多糖的進(jìn)一步開(kāi)發(fā)提供科學(xué)依據(jù)。

1　材料與方法

1.1原料

香菇：森王東北香菇，黑龍江省北珍綠色食品有限公司。

香菇多糖的制備方法：干香菇粉碎，加入適量水及復(fù)合酶(纖維素酶與木瓜蛋白酶等比例)，在55℃下提取1.5h后離心(3 000r/min，10min)取上清液，Sevag試劑脫蛋白，得到香菇粗多糖提取液，將粗提液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮至原體積的1/3，醇沉、離心、沉淀、干燥后得到香菇粗多糖，按照劑量要求配置相應(yīng)劑量的香菇多糖溶液[11-13]。

1.2試劑

無(wú)水乙醇、葡萄糖、苯酚、濃硫酸、三氯甲烷、正丁醇等(均為分析純)；超氧化物歧化酶(SOD)試劑盒、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)試劑盒、丙二醛(MDA)試劑盒，南京建成生物工程研究所。

1.3實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

小白鼠，雄性，體重(20±2)g，購(gòu)于黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)。

1.4儀器與設(shè)備

DHG-9030A電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱，上海一恒科技有限公司；JH-722s可見(jiàn)分光光度計(jì)，上海精密科學(xué)儀器有限公司；RE-85Z旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器，上海青浦滬西儀器廠(chǎng)；AL204電子天平，梅特勒-托利多儀器(上海)有限公司；HWSY21-K4型電熱恒溫水浴鍋，北京市長(zhǎng)風(fēng)儀器儀表公司。

1.5香菇多糖(Len)體內(nèi)抗氧化活性試驗(yàn)

1.5.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物灌胃及取樣將適應(yīng)喂養(yǎng)后的小鼠隨機(jī)分成4組：(1)普通對(duì)照組NG(0.9%生理鹽水，0.2mL/d)；(2)Len低劑量組(1 000mg/kg，0.2mL/d)；(3)Len中劑量組(1 800mg/kg，0.2mL/d)；(4)Len高劑量組(2500mg/kg，0.2mL/d)。每組10只，灌胃3w，最后1d空腹過(guò)夜，第2d稱(chēng)重，眼眶采血，低溫離心分離血清(3 000r/min，10min)[14-16]。

1.5.2檢測(cè)方法在小鼠灌胃過(guò)程中，每7d對(duì)小鼠體質(zhì)量進(jìn)行一次測(cè)定，在最后一次灌胃空腹過(guò)夜后，對(duì)各組小鼠進(jìn)行眼眶采血并低溫分離血清，按各試劑盒的測(cè)定要求測(cè)定小鼠血清中MDA含量、SOD及GSH-Px活力。

2　結(jié)果與分析

2.1不同劑量香菇多糖對(duì)小鼠體質(zhì)量的影響

小鼠的體質(zhì)量變化在一定程度上反映了小鼠的生長(zhǎng)發(fā)育情況。由表1可以發(fā)現(xiàn)，隨著灌胃天數(shù)的增加，各組小鼠的體質(zhì)量都在不斷增加。將香菇多糖組的小鼠體質(zhì)量與普通對(duì)照組比較，并無(wú)顯著差異(P>0.05)，這說(shuō)明香菇多糖并不影響小鼠的體質(zhì)量，即不影響小鼠的正常生長(zhǎng)發(fā)育。

2.2不同劑量香菇多糖對(duì)小鼠血清SOD、GSH-Px、MDA的影響

將不同劑量的香菇多糖組與普通對(duì)照組相比較可以發(fā)現(xiàn)，小鼠在連續(xù)灌胃香菇多糖3w后，血清中的SOD和GSH-Px活力均有顯著的提高，MDA含量顯著減少。MDA是脂質(zhì)過(guò)氧化過(guò)程中的代謝產(chǎn)物，其含量間接反映了自由基對(duì)機(jī)體造成的損傷程度，MDA含量高則表明機(jī)體清除自由基的能力較弱，易受到較為嚴(yán)重的自由基攻擊[17，18]。由表2數(shù)據(jù)可得，灌胃不同劑量的香菇多糖都可以顯著或極顯著降低小鼠血清中的MDA含量，表明Len能夠顯著或極顯著地抑制小鼠體內(nèi)的脂質(zhì)過(guò)氧化過(guò)程，降低自由基對(duì)機(jī)體的損傷程度。

表1　不同劑量香菇多糖對(duì)小鼠體質(zhì)量的影響

表2　不同劑量香菇多糖對(duì)小鼠血清MDA、SOD活力、GSH-Px活力的影響

注：*與普通對(duì)照組比較，有顯著差異(P<0.05)；**與普通對(duì)照組比較，有極顯著差異(P<0.01)。

SOD能夠調(diào)節(jié)機(jī)體的氧化與抗氧化平衡，SOD活性高則機(jī)體清除氧自由基的能力高[19-21]。由表2數(shù)據(jù)可得，灌胃不同劑量的香菇多糖后，小鼠血清中的SOD活性都有極顯著的提高，表明香菇多糖可以有效降低體內(nèi)氧自由基，調(diào)節(jié)氧化與抗氧化的平衡。

GSH-Px屬于過(guò)氧化物分解酶，可以分解機(jī)體內(nèi)的過(guò)氧化物以及脂質(zhì)氧化過(guò)程中產(chǎn)生的氫過(guò)氧化物，降低自由基以及脂質(zhì)過(guò)氧化對(duì)機(jī)體的傷害。由表2數(shù)據(jù)得，不同劑量的香菇多糖均能極顯著地提高小鼠血清中的GSH-Px活性，這表明香菇多糖可以有效分解過(guò)氧化物，降低自由基對(duì)機(jī)體組織的傷害。

隨著香菇多糖劑量的增加，SOD和GSH-Px活力的提高幅度與MDA含量的降低幅度均增加。Len高劑量組較其他香菇多糖組小鼠血清中MDA含量降幅更大，SOD與GSH-Px活力提高幅度更大，能使小鼠血清MDA含量降低26.7%、SOD活力增加21.8%、GSH-Px活力增加41.4%，這表明高劑量的香菇多糖具有更好的體內(nèi)抗氧化活性。

3　結(jié)論

由香菇多糖體內(nèi)抗氧化活性研究結(jié)果可知，香菇多糖能夠顯著提高血清中SOD和GSH-Px的活力，同時(shí)降低MDA含量，表明香菇多糖具有很好的清除體內(nèi)自由基的作用，能夠有效降低自由基氧化對(duì)機(jī)體的損傷，起到抗氧化的功能。因此，香菇多糖具有良好的體內(nèi)抗氧化作用，并隨著香菇多糖劑量的增加，抗氧化能力越好，這為今后香菇多糖相關(guān)產(chǎn)品的的開(kāi)發(fā)利用提供了一定的科學(xué)依據(jù)。◇

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(責(zé)任編輯李婷婷)

Study on Antioxidation Effect of Lentinan in Vivo

YANG Yi-shuo，ZENG De-yong，LIU Yan，ZHANG Li-xiang，ZHANG Zhi(College of Forestry，Northeast Forestry University，Harbin 150040，China)

lentinan；vivo；antioxidanteffect

東北林業(yè)大學(xué)本科生創(chuàng)新性實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目(2014年國(guó)家級(jí)201410225053)。

楊溢爍(1994—)，女，本科生，研究方向：食品科學(xué)與工程。

FoodandNutritioninChina